2021版高考生物一輪復(fù)習(xí) 課后限時(shí)集訓(xùn)41 細(xì)胞工程 蘇教版

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1、 課后限時(shí)集訓(xùn)41 細(xì)胞工程1(2019哈三中高三二模)紫草素是紫草細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,可作為生產(chǎn)治療燙傷藥物的原料。研究人員通過培養(yǎng)紫草細(xì)胞生產(chǎn)紫草素。為了獲取紫草素,某制藥公司利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),從培養(yǎng)的愈傷組織中提取這種有效成分。請(qǐng)回答下列問題:(1)培養(yǎng)時(shí),通常選擇新生的芽作為外植體,這是因?yàn)開。將離體的芽培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其依次產(chǎn)生_、_,最終形成完整的植株。(2)假設(shè)紫草與另一種植物A均為二倍體藥用植物(紫草細(xì)胞中有2n條染色體,A植物細(xì)胞中有2m條染色體)。某藥物研究所擬利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育同時(shí)含有兩種有效成分的新型藥用植物。為了得到原生質(zhì)體需

2、用_酶和_酶去除兩植物的細(xì)胞壁,然后誘導(dǎo)其融合形成雜種細(xì)胞。(3)融合形成的雜種細(xì)胞在有絲分裂后期含有_條染色體。雜種細(xì)胞培育成的新型藥用植物為_倍體,在這個(gè)過程中所利用的生物學(xué)原理是_。解析(1)由于新生芽的細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)脫分化,因此組織培養(yǎng)時(shí)常以此作為外植體。將離體的芽培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其依次產(chǎn)生愈傷組織和叢芽,最終形成完整的植株。(2)去掉植物的細(xì)胞壁,常用纖維素酶和果膠酶處理。(3)因?yàn)樽喜莺椭参顰均為二倍體,因此融合的雜種細(xì)胞中含染色體2(nm)條,后期的染色體數(shù)目為4(nm)條。新型藥用植物為四倍體。依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。答案(1

3、)細(xì)胞分化程度低,容易誘導(dǎo)脫分化愈傷組織叢芽(2)纖維素果膠(3)4(nm)四植物細(xì)胞具有全能性2(2019淄博市高三一模)馬鈴薯是重要的經(jīng)濟(jì)作物,植物細(xì)胞工程在馬鈴薯的脫毒及育種等方面有重要應(yīng)用。請(qǐng)回答下列問題:(1)培育脫毒馬鈴薯時(shí),外植體宜選用_(填“莖尖”或“葉片”),不選另一個(gè)的理由是_。(2)植物組織培養(yǎng)常用到愈傷組織培養(yǎng)基、生芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。在愈傷組織培養(yǎng)基上,外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織,愈傷組織是一團(tuán)_。在再分化階段,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素參與了細(xì)胞分化方向的調(diào)節(jié),與生根培養(yǎng)基相比,一般情況下生芽培養(yǎng)基中_。(3)馬鈴薯栽培種的抗病性和抗逆性較差,野生馬鈴薯種的抗病性和抗逆性

4、較好,但二者存在雜交不親和性。利用野生馬鈴薯種,通過細(xì)胞工程改進(jìn)馬鈴薯栽培種種質(zhì)的思路是_。(4)避免微生物污染、優(yōu)化培養(yǎng)條件可提高植物組織培養(yǎng)的成功率。在植物組織培養(yǎng)時(shí),應(yīng)從_(至少答出2點(diǎn))等方面制定措施,減少污染;在培養(yǎng)室中培養(yǎng)時(shí),注意優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境,控制_(至少答出3點(diǎn))等培養(yǎng)條件。解析(1)培育脫毒馬鈴薯時(shí),一般選擇莖尖作為外植體,而葉肉細(xì)胞帶病毒(病毒載量大)、細(xì)胞的全能性低,一般不能作為外植體。(2)植物組織培養(yǎng)過程,外植體經(jīng)過脫分化形成的愈傷組織是一團(tuán)具有分生能力(高度液泡化的)薄壁細(xì)胞。再分化形成芽和根的過程中,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例是有一定的要求的,與生根培養(yǎng)基相比,一般情

5、況下生芽培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素含量低、細(xì)胞分裂素含量高。(3)由題意可知,兩種馬鈴薯之間存在生殖隔離,但是各有其優(yōu)點(diǎn),則可以通過體細(xì)胞雜交技術(shù)將兩者的優(yōu)點(diǎn)在同一后代中得以體現(xiàn),即將野生馬鈴薯種細(xì)胞與馬鈴薯栽培種細(xì)胞融合,經(jīng)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)成植株。(4)在植物組織培養(yǎng)時(shí),為了減少污染,應(yīng)該從外植體消毒、培養(yǎng)基及器械滅菌、實(shí)驗(yàn)人員無菌操作等方面制定措施;在培養(yǎng)室中培養(yǎng)時(shí),注意優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境,控制溫度、光照、濕度、氣體環(huán)境(O2、CO2)等培養(yǎng)條件。答案(1)莖尖葉肉細(xì)胞帶病毒(病毒載量大)、細(xì)胞的全能性低(2)具有分生能力(高度液泡化的)薄壁細(xì)胞生長(zhǎng)素含量低、細(xì)胞分裂素含量高(3)將野生馬鈴薯種細(xì)胞與馬鈴薯

6、栽培種細(xì)胞融合,經(jīng)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)成植株(4)外植體消毒、培養(yǎng)基及器械滅菌、實(shí)驗(yàn)人員無菌操作溫度、光照、濕度、氣體環(huán)境(O2、CO2)3(2019全國(guó)卷)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如圖所示。 回答下列問題。(1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有_。(2)步驟切取的組織塊中要帶有形成層,原因是_。(3)從步驟到步驟需要更換新的培養(yǎng)基,其原因是_。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細(xì)胞的_過程,最終可形成試管苗。(4)步驟要進(jìn)行照光培養(yǎng),其作用是_。(5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的_,這種繁殖方式屬于_繁

7、殖。解析(1)分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有全能性。(2)在本實(shí)驗(yàn)中,切取胡蘿卜塊時(shí)要切取含有形成層的部分,原因是形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織。(3)決定植物細(xì)胞脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例,步驟(誘導(dǎo)愈傷組織形成)和步驟(誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗)所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同,故步驟到步驟需更換培養(yǎng)基。愈傷組織通過細(xì)胞的再分化過程形成試管苗。(4)步驟需要光照培養(yǎng),其作用是誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用。(5)組織培養(yǎng)沒有經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合,因此屬于無性繁殖,組織培養(yǎng)得到的植株保持了原品種的遺傳特性。答案(1)全能性(或形成完

8、整植株所需的全部基因)(2)形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織(3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同分化(或再分化)(4)誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用(5)遺傳特性無性420世紀(jì)70年代以后,以基因工程為代表的一大批生物技術(shù)成果進(jìn)入人類的生產(chǎn)和生活,發(fā)揮了極大的作用。但是,與其他高新技術(shù)一樣,生物技術(shù)既可以造福人類,也可能在使用不當(dāng)時(shí)給人類帶來負(fù)面影響甚至災(zāi)難。根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答下列有關(guān)問題:(1)1996年7月5日誕生的克隆羊大大促進(jìn)了克隆技術(shù)的發(fā)展,但是多利也陸續(xù)表現(xiàn)出一些“早衰”跡象。對(duì)于克隆動(dòng)物的“早衰”原因,目前大體有如下的兩種觀點(diǎn):

9、A克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)和普通動(dòng)物有本質(zhì)上的差異(如端粒過短、基因異常等),因此其早衰是一種本質(zhì)現(xiàn)象,不可避免。B克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)是正常的,目前的早衰跡象是一些技術(shù)問題造成的,或者是發(fā)育中由于變異而出現(xiàn)的偶然現(xiàn)象,是可以避免的。請(qǐng)?jiān)谝韵卵芯拷Y(jié)果后的橫線上,寫出其支持的上述觀點(diǎn)的標(biāo)號(hào):美國(guó)科學(xué)家采用細(xì)胞核移植技術(shù),連續(xù)培育出6代克隆鼠,每一代的端粒長(zhǎng)度都比上一代略長(zhǎng)。支持_。在上述連續(xù)克隆實(shí)驗(yàn)中,每一代克隆都比上一代更加困難,總體成功率低于一般水平。支持_。美國(guó)哈佛醫(yī)學(xué)院一個(gè)研究團(tuán)隊(duì)通過多種手段修復(fù)染色體組蛋白上的某些異常,可以將小鼠克隆的成功率從不到1%提高到8%左右。支持_。(2)多個(gè)克隆動(dòng)物

10、研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn),利用胚胎干細(xì)胞作為細(xì)胞核供體進(jìn)行克隆的成功率大大高于利用體細(xì)胞作為核供體進(jìn)行克隆。該實(shí)驗(yàn)中所用的胚胎干細(xì)胞通常來源于_,你認(rèn)為這個(gè)結(jié)果所支持的觀點(diǎn)和理由是_。解析(1)美國(guó)科學(xué)家采用細(xì)胞核移植技術(shù)連續(xù)培育出6代克隆鼠,每一代的端粒長(zhǎng)度都比上一代略長(zhǎng),說明克隆過程并不一定會(huì)導(dǎo)致端??s短,因此支持B觀點(diǎn)。在上述連續(xù)克隆實(shí)驗(yàn)中,每一代克隆都比上一代更加困難,總體成功率低于一般水平,此現(xiàn)象不排除存在的一種可能性,即克隆成功的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,都來自那些染色體端粒本身就特別長(zhǎng)的細(xì)胞,但隨著克隆代數(shù)的增加,染色體端粒逐漸變短,說明克隆動(dòng)物的“早衰”,是因其遺傳物質(zhì)和普通動(dòng)物有本質(zhì)上的差異,所以支持A

11、觀點(diǎn)。美國(guó)哈佛醫(yī)學(xué)院一個(gè)研究團(tuán)隊(duì)通過多種手段修復(fù)染色體組蛋白上的某些異常,可以將小鼠克隆的成功率從不到1%提高到8%左右,說明克隆動(dòng)物的成功率與采用的技術(shù)手段有關(guān),因此支持B觀點(diǎn)。(2)由于胚胎干細(xì)胞的染色體端粒長(zhǎng)度高于體細(xì)胞,所以利用胚胎干細(xì)胞作為細(xì)胞核供體進(jìn)行克隆的成功率大大高于利用體細(xì)胞作為核供體進(jìn)行克隆,此結(jié)果支持A觀點(diǎn)(或由于體細(xì)胞是胚胎干細(xì)胞分化而來,其基因與胚胎干細(xì)胞沒有差別,所以利用胚胎干細(xì)胞作為細(xì)胞核供體進(jìn)行克隆的成功率大大高于利用體細(xì)胞作為核供體進(jìn)行克隆,此結(jié)果支持B觀點(diǎn))。答案(1)BAB(2)早期胚胎或原始性腺支持A觀點(diǎn),理由是:胚胎干細(xì)胞的染色體端粒長(zhǎng)度高于體細(xì)胞(其

12、他對(duì)DNA改變作出的合理猜測(cè)也可)或支持B觀點(diǎn),理由是:體細(xì)胞是胚胎干細(xì)胞分化而來,其基因與胚胎干細(xì)胞沒有差別(答案中指明兩者DNA一致即可)5(2019江西臨川一中高三模擬)研究人員成功地獲得了一種野生型瀕危生物東方盤羊的克隆后代,他們?cè)趯?shí)驗(yàn)中將2只死后的雌性野生盤羊的細(xì)胞核注入到去核的家羊卵母細(xì)胞中構(gòu)建了重組細(xì)胞,并最終獲得了健康的克隆子代,該研究可應(yīng)用到瀕危動(dòng)物和珍稀動(dòng)物的保護(hù)領(lǐng)域。回答下列問題:(1)核移植的理論基礎(chǔ)是_,該試驗(yàn)獲得的健康的子代的性狀更加接近于_(填“東方盤羊”或“家羊”),理由是_。(2)體外培養(yǎng)的重組細(xì)胞需要培養(yǎng)到_期時(shí)才可以移植到代孕母羊中,這是動(dòng)物克隆技術(shù)的最后

13、一道“工序”,這道“工序”稱為_。(3)為了降低克隆難度,核移植的供體細(xì)胞最好取自東方盤羊的_(填“胚胎干細(xì)胞”或“體細(xì)胞”),原因是_。解析(1)核移植的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞核的全能性,由于重組細(xì)胞的主要遺傳物質(zhì)來自細(xì)胞核,而細(xì)胞核是東方盤羊提供的,故試驗(yàn)獲得的健康的子代的性狀更加接近于東方盤羊。(2)體外培養(yǎng)的重組細(xì)胞需要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚期時(shí)才可以移植到代孕母羊中,這是動(dòng)物克隆技術(shù)的最后一道“工序”,這道“工序”稱為胚胎移植。(3)為了降低克隆難度,核移植的供體細(xì)胞最好取自東方盤羊的胚胎干細(xì)胞,原因是胚胎干細(xì)胞的分化程度低,全能性高。答案(1)細(xì)胞核的全能性東方盤羊重組細(xì)胞的主要遺傳物質(zhì)來自細(xì)

14、胞核,而細(xì)胞核是東方盤羊提供的(2)桑椹胚或囊胚胚胎移植(3)胚胎干細(xì)胞胚胎干細(xì)胞的分化程度低,全能性高6(2019晉冀魯豫名校高三模擬)我國(guó)科學(xué)家利用添加RNA酶抑制劑的提取液,從舞蹈癥(人類單基因遺傳病)患者的某細(xì)胞中提取出mRNA,利用mRNA合成致病基因(cDNA),然后將cDNA整合到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體上,再通過細(xì)胞核移植等技術(shù)成功培育出全球首例“舞蹈癥”轉(zhuǎn)基因模型豬?;卮鹣铝袉栴}:(1)在提取液中添加RNA酶抑制劑的目的是_。利用mRNA合成cDNA的原理是_。(2)在進(jìn)行核移植過程之前,卵母細(xì)胞要進(jìn)行去核處理的原因是_。去核時(shí),需進(jìn)行顯微操作,用微型吸管一并吸出_。(3)構(gòu)

15、建的重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件一般是_(答3點(diǎn))和無菌、無毒的環(huán)境。為保證體外培養(yǎng)重組細(xì)胞的無菌、無毒環(huán)境,除對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理外,通常還要進(jìn)行的操作是_和_。(4)培養(yǎng)舞蹈癥轉(zhuǎn)基因模型豬的應(yīng)用前景是_。解析(1)根據(jù)題意,科學(xué)家通過提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA,因此在提取液中添加RNA酶抑制劑的目的是防止RNA被降解。利用mRNA合成cDNA的原理是在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成cDNA。(2)在進(jìn)行核移植過程之前,卵母細(xì)胞要進(jìn)行去核處理,以保證轉(zhuǎn)基因模型豬的核遺傳物質(zhì)全部來自含有目的基因的成纖維細(xì)胞。核移植的受體細(xì)胞一般選用M中期卵母細(xì)

16、胞,通過顯微操作技術(shù)去除次級(jí)卵母細(xì)胞的細(xì)胞核,由于減數(shù)第二次分裂的次級(jí)卵母細(xì)胞的細(xì)胞核的位置靠近第一極體,用微型吸管可一并吸出細(xì)胞核和第一極體。(3)細(xì)胞體外培養(yǎng)除需要提供一定的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度和pH、無菌無毒的環(huán)境外,還需要一定的氣體環(huán)境,因此構(gòu)建的重組細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件需要滿足一定的營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH、氣體環(huán)境和無菌、無毒的環(huán)境。為保證體外培養(yǎng)重組細(xì)胞的無菌、無毒環(huán)境,除對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理外,通常還要進(jìn)行的操作是在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素,以防止培養(yǎng)過程中的感染,以及定期更換培養(yǎng)液。(4)培養(yǎng)舞蹈癥轉(zhuǎn)基因模型豬可用于追蹤研究舞蹈癥的發(fā)病過程和尋找治療疾病的方案,研究相關(guān)發(fā)

17、病機(jī)制。答案(1)防止RNA被降解在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以mRNA為模板按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成cDNA(2)保證轉(zhuǎn)基因模型豬的核遺傳物質(zhì)全部來自含有目的基因的成纖維細(xì)胞細(xì)胞核和第一極體(3)(適宜的)營(yíng)養(yǎng)、溫度和pH、氣體環(huán)境(答3點(diǎn)即可)在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素定期更換培養(yǎng)液(4)能追蹤研究舞蹈癥的發(fā)病過程和尋找治療疾病的方案7(2019遼陽市高三模擬)如圖表示通過現(xiàn)代生物技術(shù)制備單克隆抗體的兩種途徑,其中表示相關(guān)過程。請(qǐng)分析并回答下列問題:注:V1基因是無限增殖的調(diào)控基因。(1)細(xì)胞A的名稱是_。與通過傳統(tǒng)方法獲得的抗體相比,通過上述兩種途徑得到的單克隆抗體具有的顯著優(yōu)點(diǎn)是_。(2)通

18、過過程_可獲得V1基因。用_技術(shù)可以獲得更多的V1基因。(3)抗體1與抗體2的氨基酸排列順序相同,兩者的生物活性_(填“相同”或“不相同”),原因是_。(4)除通過上述途徑獲得的單克隆抗體外,請(qǐng)?jiān)賹懗鲆环N目前應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)生產(chǎn)的生物制品:_。解析(1)依題意并分析圖示可知:從免疫的小鼠體內(nèi)分離出的細(xì)胞A是漿細(xì)胞。單克隆抗體具有的顯著優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。(2)過程是以mRNA為模板獲得V1基因的逆轉(zhuǎn)錄過程。欲獲得更多的V1基因,可采用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(3)大腸桿菌為原核生物,其細(xì)胞中沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,因此大腸桿菌產(chǎn)生的抗體2,其形成過程中沒有經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的

19、加工;雜交瘤細(xì)胞中有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,所以雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體1,其形成過程經(jīng)過了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工。可見抗體1與抗體2的氨基酸排列順序相同,但兩者的生物活性不同。(4)疫苗、干擾素、生長(zhǎng)因子、酶、激素等許多有重要價(jià)值的生物制品,都可以應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)來生產(chǎn)。答案(1)漿細(xì)胞特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備(2)逆轉(zhuǎn)錄PCR(3)不相同抗體2是大腸桿菌產(chǎn)生的,其形成過程沒有經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工,抗體1是雜交癌細(xì)胞產(chǎn)生的,其形成過程經(jīng)過了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工(4)疫苗、干擾素、生長(zhǎng)因子、酶、激素等8(2020山東省等級(jí)考模擬)基因定點(diǎn)整合可替換特定基因,該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治

20、療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的,將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上,替換突變基因,可用來研究該病的基因治療過程。定點(diǎn)整合的過程是:從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2,根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2,再將兩者分別與基因HSVtk1、HSVtk2連接,中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因neor,構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換,導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換,如圖所示。(1)構(gòu)建重組載體時(shí),常用的工具酶有_。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠,除

21、了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外,還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞_。(2)為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞,可將小鼠囊胚中的_取出,并用_處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長(zhǎng),這種現(xiàn)象稱為_。(3)用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí),會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí),載體的兩個(gè)HSVtk中至少會(huì)有一個(gè)與neor一起整合到染色體DNA上。已知含有neor的細(xì)胞具有G418的抗性。HSVtk1、HSVtk2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),在雙重選擇下存活下來的是_的胚胎干細(xì)胞,理由是_。(4

22、)將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,從個(gè)體生物學(xué)水平檢測(cè),若小鼠_,說明PKU基因成功表達(dá)。解析(1)構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),需要使用的工具酶為限制酶和DNA連接酶;胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,且能大量增殖,常被用作受體細(xì)胞。(2)胚胎干細(xì)胞可來自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞間相互黏連,可用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)。(3)由題意可知,含有neor的細(xì)胞具有G418的抗性,故在含G418的培養(yǎng)液存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor;HSVtk1、HSVtk2的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡,故能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含HSVtk。 (4)苯丙酮尿癥患者體內(nèi)缺乏一種酶,導(dǎo)致體內(nèi)苯丙氨酸不能轉(zhuǎn)化為酪氨酸,而大量轉(zhuǎn)化為苯丙酮酸,在體內(nèi)積累,隨尿液排出,若轉(zhuǎn)基因小鼠的尿液中不含大量苯丙酮酸,說明PKU基因正常表達(dá)。答案(1)限制酶、DNA連接酶具有發(fā)育的全能性(2)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)胰蛋白酶或膠原蛋白酶貼壁生長(zhǎng)(3)正確整合(含neor而不含HSVtk) 能在含有G418的培養(yǎng)液存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中含neor,能在含DHPG的培養(yǎng)液中存活說明轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞中不含HSVtk(4)尿液中不含大量苯丙酮酸8

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