《2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGFβ1和NFκB的表達(dá)》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGFβ1和NFκB的表達(dá)（3頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGF1和NFB的表達(dá) 目的觀察2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1 (TGF1）和核轉(zhuǎn)錄因子B（NFB）的表達(dá)情況.方法選擇2型糖尿病患者92例和正常人70例，任意選取一眼進(jìn)行淚膜破裂時(shí)間（BUT）、基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)及角膜熒光染色試驗(yàn)，并應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGF1及NFB的表達(dá).結(jié)果糖尿病組患者BUT值小于10s和基礎(chǔ)淚液分泌值小于5mm者所占比例較對(duì)照組明顯升高，角膜熒光染色程度較對(duì)照組明顯增強(qiáng).結(jié)膜上皮細(xì)胞TGF1和NFB的染色程度均較對(duì)照組明顯增強(qiáng);糖尿病組患者結(jié)膜上皮細(xì)胞TGF1與NFB的染色程度呈正相關(guān).結(jié)論2型糖尿病患者BUT
2、值和基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)值降低，角膜熒光染色程度增強(qiáng)，是干眼癥易患人群.糖尿病 2型 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 干眼癥ABSTRACT:OBJECTIVETo study the expression of transforming growth factor1(TGF1) and nuclear factorB (NFB) on conjunctiva endepidermis cells in patients with diabetes mellitus (DM).METHODS92 patients of DM and 70 cases of health adult were randomly se
3、lected. One eye in patients was selected to do the tear film breakup time (BUT),Schirmertest and cornea fluorescein staining,and the expression of NFB and TGF1 on bulbar conjunctiva endepidermis was detected by immunohistochemistry.RESULTSThe ratios of BUT value (10s) and Schirmer value (5mm) in DM
4、increased significantly as compared with the control group, and the degree of cornea fluorescein staining in DM was higher than that in control group. The staining level of NFB and TGF1 of bulbar conjunctiva endepidermis in DM was higher than that in control group and was positive correlation. CONCL
5、USIONIn type 2 DM,the value of BUT and Schirmer decrease and the degree of cornea fluorescein staining increase is incident to the xeroma.Key words: diabetes mellitus, type 2; transforming growth factor beta ;xerophthalmia干眼癥患者結(jié)膜上皮細(xì)胞內(nèi)各種炎性因子的表達(dá)水平明顯高于正常人，如表皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1 (transforming growth factor1，TG
6、F1）及核轉(zhuǎn)錄因子B（nuclear factorB，NFB）等1,2.TGF1是多功能細(xì)胞因子，對(duì)上皮細(xì)胞具有較明顯的抑制作用，對(duì)成纖維細(xì)胞及其他間葉組織來(lái)源的細(xì)胞均具有明顯的刺激作用，表現(xiàn)為膠原合成增加，有利于組織修復(fù)及傷口愈合3，4.NFB是具有轉(zhuǎn)錄激活功能的蛋白質(zhì)，幾乎存在于所有細(xì)胞中,它可調(diào)節(jié)多種參與炎癥反應(yīng)的細(xì)胞因子、黏附分子和蛋白酶類的基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程，與炎癥的發(fā)生密切相關(guān)5.本研究采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGF1和NFB的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測(cè)，并比較分析了正常人群和2型糖尿病患者的眼表狀態(tài).1材料與方法1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)對(duì)象本研究對(duì)象2型糖尿病患者和正
7、常健康人共為162人，其中正常對(duì)照組為70人（70眼）、2型糖尿病組為92例（92眼），兩組研究對(duì)象年齡及性別構(gòu)成比間無(wú)顯著性差異,具有可比性.1.1.2試劑TGF1多克隆抗體，經(jīng)親和層析純化的兔抗人IgG多克隆抗體，稀釋度為1200；NFBp65多克隆抗體，經(jīng)親和層析純化的兔抗人IgG多克隆抗體，稀釋度為1200.SP試劑盒(通用型SP kit)及DAB顯色劑均為北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；PBS及Mayer蘇木素均為福建邁新公司產(chǎn)品.1.1.3儀器CMIAS系列真彩色病理圖像分析系統(tǒng)為北京航空航天大學(xué)產(chǎn)品，RM2135型石蠟切片機(jī)為德國(guó)產(chǎn)品，CD1型快速生物醫(yī)學(xué)微波爐為上海創(chuàng)大科技有
8、限公司產(chǎn)品.1.2方法1.2.1臨床檢查BUT重復(fù)測(cè)定3次，取平均值，BUT值小于10s判定為異常，基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)以濕潤(rùn)長(zhǎng)度小于5mm時(shí)判定為異常.角膜熒光素染色評(píng)分方法將角膜分為4個(gè)象限：0級(jí)為無(wú)染色（-），1級(jí)為散狀點(diǎn)狀染色（+），2級(jí)為密集型點(diǎn)狀染色（），3級(jí)為片狀染色（）.1.2.2免疫組織化學(xué)染色將乙酸纖維素薄膜剪成3mm3mm大小紙條，用培養(yǎng)皿包裝進(jìn)行消毒，預(yù)備貼有5mm5mm大小雙面膠的載玻片.取材時(shí)，囑患者注視鼻側(cè)，用眼科無(wú)齒鑷夾住乙酸纖維素薄膜一角輕輕置于患者顳側(cè)球結(jié)膜表面，用玻璃棒輕壓少許后取出，貼于載玻片上，每個(gè)對(duì)象至少取2次標(biāo)本，待薄膜稍干后，用950mL/L乙醇固定
9、5min，置于-80超低溫冰箱保存?zhèn)溆?進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，檢測(cè)TGF1及NFB的表達(dá)情況.采用過(guò)氧化物酶標(biāo)記的鏈霉菌抗生物素蛋白行免疫組織化學(xué)染色，陰性對(duì)照以PBS代替一抗進(jìn)行，陽(yáng)性對(duì)照為乳腺癌標(biāo)本.染色結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：用光學(xué)顯微鏡觀察，見細(xì)胞膜邊界清晰，無(wú)特異性細(xì)胞膜或胞漿染色者為陰性(-)；細(xì)胞膜或胞漿有特異性著色，呈淺棕黃色、棕色及深棕色者分別為弱陽(yáng)性(+)、中度陽(yáng)性()及強(qiáng)陽(yáng)性().將表達(dá)陰性和弱陽(yáng)性者納入陰性組，中度陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性者納入陽(yáng)性組.1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩組間BUT 檢查、基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)、角膜熒光素染色比較及糖尿病組TGF和NFB表達(dá)相關(guān)性分析采用2檢驗(yàn)進(jìn)行.TGF1和NFB表達(dá)與各項(xiàng)臨床檢查之間的相關(guān)性分析采用Spearmans檢驗(yàn)進(jìn)行.2結(jié)果2.1BUT值測(cè)定和基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)糖尿病組患者BUT值異常者為56眼（60.89%），基礎(chǔ)淚液分泌試驗(yàn)異常者為52眼（56.52%），均明顯多于對(duì)照組，相比較均具有顯著性差異（P0.01）.
2型糖尿病患者結(jié)膜上皮細(xì)胞中TGFβ1和NFκB的表達(dá)
