《普通植物病理學(xué)》實驗指導(dǎo)

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1、文檔供參考,可復(fù)制、編制,期待您的好評與關(guān)注! 實驗一 植物病害癥狀觀察植物得病后在生理和形態(tài)上均可以發(fā)生改變,患病植物外部形態(tài)的反?,F(xiàn)象就是癥狀。癥狀是診斷植物病害的重要依據(jù)之一,可分為病狀和病癥兩種類型,通常把植物體本身的反常表現(xiàn)稱為病狀,而把病原生物在植物受害部位所形成的特征性結(jié)構(gòu)稱為病癥。由于病害種類、環(huán)境條件,發(fā)病部位和植物被害時期不同,病狀也有各種各樣的類型,歸納起來包括五種類型:變色、壞死、腐爛、萎蔫和畸形。病癥則直接暴露了病原物在質(zhì)上的特點,如真菌子實體在寄主表面形成的霉層、黑點、粉狀物等,細(xì)菌表現(xiàn)出來的菌膿和菌痂;而植物病毒、植原體、等無病癥表現(xiàn)。病狀作為病變過程的表現(xiàn),其特

2、征也是較穩(wěn)定和具特異性的,這是利用病狀診斷植物病害的基礎(chǔ);病癥出現(xiàn)的明顯程度,雖受環(huán)境條件的影響很大,但一經(jīng)表現(xiàn)出來卻相當(dāng)穩(wěn)定,所以根據(jù)病癥能夠正確判斷植物病害。一、目的要求 本次實驗?zāi)康脑谟诹私庵参锊『Φ姆N類及多樣性,認(rèn)識病害對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的危害性,并掌握病癥和病狀的一般類型,以便在病害診斷中加以利用。 二、材料、試劑與儀器 按照植物病害的病狀類型(變色、壞死、腐爛、萎蔫和畸形)和病癥(粉狀物、霉?fàn)钗铩⑿『邳c、白瓷狀物、菌膿等)準(zhǔn)備植物病害的盒裝標(biāo)本、瓶裝液浸標(biāo)本及新鮮標(biāo)本。各種癥狀掛圖、模型、多媒體課件等。用肉眼或放大鏡觀察下列各種病害標(biāo)本,按上述癥狀劃分方法,注意觀察病狀和病癥特點及其癥狀類

3、型。煙草花葉病 黃瓜花葉病甜菜黃化病毒病 蘋果綠緣褐斑病馬鈴薯晚疫病 桃細(xì)菌性穿孔病蔬菜幼苗猝倒病 白菜軟腐病甘薯線蟲病 棉花枯黃萎病水稻惡苗病 棗瘋病桃縮葉病 馬鈴薯瘡痂病玉米絲黑穗病 小麥白粉病小麥稈銹病 葡萄霜霉病茄子褐紋病 油菜菌核病麥類麥角病 蘋果發(fā)根病棉花角斑病 莧菜白銹病大豆菟絲子 黃瓜根結(jié)線蟲病 三、實驗操作病狀類型:(一)變色Discolour:由于葉綠素發(fā)育受到破壞,而使葉片的顏色發(fā)生改變,這種變色可以是普遍的也可以是局部的,變色的細(xì)胞本身并不死亡。1褪綠:葉片普遍變?yōu)榈G色或淡黃色。2黃化:葉片普遍變?yōu)辄S色。3花葉:葉片局部褪綠,使之呈黃綠色或黃白色相間的花葉狀。(二)壞

4、死Necrosis:植物細(xì)胞和組織的死亡引起壞死。植物的根、莖、葉、花、果實都能發(fā)生壞死,1斑點:局部組織變色,然后壞死而形成斑點。2枯死:植物組織連片壞死而呈現(xiàn)黃白色,褐色的或黑色,形成葉斑,葉枯、環(huán)斑、條斑或輪紋斑。 3穿孔:葉片的局部組織壞死后脫落。4瘡痂:植物體表先呈現(xiàn)皮包狀隆起,然后表皮細(xì)胞破裂。5潰瘍:樹木枝干的局部組織腐爛。6猝倒或立枯:幼苗的莖基部或根部組織壞死而使幼苗枯死,死苗倒下者為猝倒,死苗直立者為立枯。(三)腐爛Rot:但多汁而幼嫩的植物組織受害后植物細(xì)胞和組織易發(fā)生腐爛。根據(jù)腐爛的部位,可分為根腐、莖腐、果腐、花腐等。伴隨各種顏色的變化特點,可分為褐腐、白腐和黑腐等。

5、根據(jù)組織分解的程度不同,有干腐、濕腐和軟腐之分,比較堅硬的植物組織發(fā)生腐爛稱為干腐,柔軟而多汁的植物的組織發(fā)生腐爛稱為濕腐,寄主組織細(xì)胞間中膠層的破壞稱為軟腐。(四)萎蔫Wilt:指植物根部或莖部的維管束組織受到侵染而發(fā)生的枯萎現(xiàn)象,萎蔫可以是局部的也可以是全株性的。典型的萎蔫病害無外表病癥,植物皮層組織完好,但內(nèi)部維管束組織受到破壞。(五)畸型Malformation:植株生長反常,促使植物的各個器官發(fā)生變態(tài)。1矮化:植株生長較正常的矮小。2徒長:植株生長較正常的植株生長高大。3叢生:枝干的節(jié)間停止伸長而使葉片呈叢生狀。4卷葉、蕨葉和縮葉:葉片的卷曲和皺縮。5發(fā)根:根系過度分枝而成叢生狀。6

6、癭瘤:部分組織細(xì)胞過度生長而形成的變態(tài)。7劍葉:葉片發(fā)育受到控制,使寬大的葉片變?yōu)榧?xì)小狹長狀。8菌癭:病部變成菌的集合體,如黑粉病。病癥類型:(一)粉狀物:病原真菌在植物受害部位形成黑色、白色、鐵銹色的粉狀物。(二)霉?fàn)钗铮翰≡婢谥参锸芎Σ课恍纬砂咨⒑稚?、黑色的霉層?三)小黑點:病原真菌在植物受害部位形成的黑色小顆粒。(四)菌 核:病原真菌在植物受害部位形成大小不同的褐色或黑色顆粒。(五)白 銹:病原真菌在植物受害部位形成的白瓷狀物。(六)菌膿和菌痂:病原細(xì)菌在植物受害部位形成的粘液和膠痂狀物。觀察水稻白葉枯病組織的菌溢現(xiàn)象。* 注意:以上病癥只針對真菌和細(xì)菌,病毒、植原體、線蟲病害和

7、寄生性種子植物,以及非侵染性病害無病癥表現(xiàn)。 四、作業(yè) 將上述病害標(biāo)本的發(fā)病部位,病狀類型和病癥類型,填于下表:植物病害癥狀觀察表 病害名稱發(fā)病部位 病狀類型病癥類型 五、思考題1植物病害的主要特征是什么?2癥狀在病害診斷上有什么作用?3植物病害對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的危害性如何?六、所需學(xué)時實驗二、三 真菌形態(tài)觀察真菌分布廣泛,種類繁多,已報導(dǎo)的將近45000多種,是植物病原生物中最主要的一大類群,它所引起的病害占植物病害的80%以上,盡管真菌形態(tài)差異很大,但基本結(jié)構(gòu)相似,大多數(shù)真菌有營養(yǎng)體和繁殖體之分,營養(yǎng)體是指吸收養(yǎng)分的器官,繁殖體是指從營養(yǎng)體上產(chǎn)生的各種類型的孢子。真菌產(chǎn)生孢子的機(jī)構(gòu),無論是有形性

8、的還是無性的,統(tǒng)稱為子實體。真菌的孢子分為無性孢子和有性孢子兩類。無性孢子有游動孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子;有性孢子有休眠孢子囊、卵孢子、接合孢子、子囊孢子和擔(dān)子孢子。真菌孢子的形態(tài)特征是鑒定和分類學(xué)上的重要依據(jù),其營養(yǎng)體及其變態(tài)和菌組織體則是真菌分類的重要參考依據(jù),有的還是重要的鑒別特征和分類依據(jù)。一、目的要求通過本次實驗熟悉真菌的營養(yǎng)體和繁殖體的基本形態(tài),為以后真菌病害的病原物鑒定和真菌分類奠定初步基礎(chǔ)。 二、內(nèi)容、材料和方法(一)真菌的營養(yǎng)體1菌絲和菌絲體 除少數(shù)原始的類群以外,真菌典型的營養(yǎng)體是極為細(xì)小的絲狀體,這種絲狀體稱為菌絲,生長成叢的菌絲稱為菌絲體,低等真菌的菌絲是無隔

9、的,大多數(shù)真菌是有隔的。(1)挑取馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)或瓜果腐霉病菌(Pythium aphanidermatum)制片,鏡檢無隔菌絲。(2)挑取立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)制片鏡檢有隔菌絲。(3)觀察各種病原真菌在平面和斜面培養(yǎng)基上形成的菌落,注意菌落大小、形狀、厚薄、質(zhì)地、顏色等形態(tài)特點。2菌絲組織體有些真菌的菌絲體,在一定的條件下或一定的發(fā)育階段,可形成特殊的組織體,常見有菌核、子座和根狀菌索。(1)菌核:菌核是由擬薄壁組織和疏絲組織形成的一種休眠體,既是真菌貯藏養(yǎng)分的器官,又是真菌用以度過不良環(huán)境的休眠機(jī)構(gòu),菌核大小不一,

10、色澤和形狀也各不相同。菌核中的菌絲組織已有分化現(xiàn)象,外皮組織細(xì)胞排列緊密,色深壁厚,具有保護(hù)作用,為擬薄壁組織;內(nèi)層細(xì)胞壁薄色淡,排列疏松,仍可維持營養(yǎng)作用,為疏絲組織。肉眼觀察麥角病、油菜菌核病、黃瓜菌核病和大蔥菌核病標(biāo)本,比較菌核形狀、大小、顏色;鏡檢細(xì)辛菌核病的菌核制片,注意比較表皮與內(nèi)部組織細(xì)胞的排列特點。(2)子座:子座是由擬薄壁組織和疏絲組織形成的容納子實體的座墊狀結(jié)構(gòu),或由菌絲體與部分寄主組織結(jié)合而成的稱為假子座。子座是真菌從營養(yǎng)體到繁殖體的過渡機(jī)構(gòu),除可在其上或其內(nèi)形成子實體外,也有度過不良環(huán)境的作用。肉眼觀察稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)的分生孢子座;

11、鏡檢蘋果樹腐爛病菌(Valsa mali)和稻香柱菌(Epichloe typhina)所形成的子座制片,注意子座形狀,著生部位及內(nèi)部繁殖體類別。(3)根狀菌索:少數(shù)高等真菌的菌絲體還可糾結(jié)成繩索狀的組織體,形如高等植物的根,故稱根狀菌索,其作用是幫助菌體蔓延和抵抗不良環(huán)境,根狀菌縈組織也有表皮和內(nèi)部組織的分化。肉眼觀察林木上根狀菌索的外部形狀,注意和菌核比較,找出二者區(qū)別。3菌絲體上分化出的吸收養(yǎng)分組織(1)吸器:是寄生在細(xì)胞間的真菌,特別是一些專性寄生菌在菌絲體上形成的吸收養(yǎng)分的器官,形狀有球狀、絲狀、掌狀、裂片狀等。鏡檢小麥白粉病菌(Blumeria graminis)吸器制備片,注意吸

12、器的形狀及其形成的部位。(2)假根:為伸入基物內(nèi)的菌絲體,形如高等植物的根系,故稱假根。假根除用其吸收養(yǎng)分外,還有固著菌體的作用。挑取培養(yǎng)基中培養(yǎng)的甘薯軟腐病菌(Rhizopus nigricans)的菌絲(注意針尖要插入培養(yǎng)基內(nèi))制片鏡檢或鏡檢根足霉(Rhizopus sp.)制備片,注意假根與普通營養(yǎng)菌絲的區(qū)別。(3)附著胞:從幻燈片或照片觀察病菌侵染寄主植物形成附著胞的形態(tài)。(4)菌環(huán)和菌網(wǎng):捕食性真菌常由菌絲分化成菌環(huán)和菌網(wǎng)組織來捕捉線蟲等小動物,然后再由菌絲侵入線蟲體內(nèi)吸取營養(yǎng)。(二)真菌的繁殖體孢子真菌的繁殖方式分無性和有性兩種,分別產(chǎn)生無性孢子和有性孢子兩大類型。真菌的無性繁殖包

13、括斷裂、出芽和產(chǎn)生孢子等,真菌的有性生殖包括質(zhì)配、核配和減數(shù)分裂三個階段。1無性孢子:不經(jīng)過性細(xì)胞或性器官的結(jié)合便能產(chǎn)生孢子,稱為無性孢子。真菌產(chǎn)生的無性孢子類型很多,主要的有游動孢子、孢囊孢子、分生孢子和厚垣孢子。(1)游動孢子:游動孢子為鞭毛菌亞門真菌特有的無性孢子,產(chǎn)生在由菌絲頂端細(xì)胞或由菌絲分化成的孢子囊梗的頂端細(xì)胞膨大形成的孢子囊內(nèi)、具鞭毛,能游動。制片鏡檢用線麻粒誘發(fā)的綿霉和水霉的游動孢子囊和游動孢子,鏡檢番茄晚疫病菌(Phytophthora infestans)的游動孢囊梗、游動孢子囊和游動孢子。(2)孢囊孢子:孢囊孢子為接合菌亞門真菌特有的無性孢子,生成方式和游動孢子相似,也

14、是內(nèi)生的,但無鞭毛,不能游動。挑取黑根霉(Rhizopus sp.)制片(或取制備片)鏡檢孢子囊梗,孢子囊和孢囊孢子,注意觀察孢子囊的形態(tài)及其著生位置及孢囊孢子的形態(tài),顏色和產(chǎn)生的數(shù)目。(3)分生孢子:子囊菌亞門真菌和大部分半知菌亞門真菌都產(chǎn)生分生孢子,分生孢子外生在分生孢子梗上,形狀、大小、顏色不一,單生,鏈生或集生,分生孢子梗有的散生,有的束生,有的產(chǎn)生在分生孢子盤上或分生孢子器內(nèi),產(chǎn)生在分生孢子器內(nèi)的分生孢子也叫器孢子。取玉米大斑病(Exserohilum turcicum)的病葉,用刀片輕輕刮取病斑上的霉?fàn)钗镏破R檢分生孢子梗和分生孢子或挑取斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)的小麥根腐病菌(Bipola

15、ris sativum)制片鏡檢分生孢子梗和分生孢子,另取蘋果灰斑病(Phyllosticta pirina)制片鏡檢分生孢子器和器孢子,注意分生孢子的形狀,色澤,細(xì)胞數(shù)目及著生情況。(4)厚垣孢子:鏡檢厚垣孢子制備片,菌絲中或孢子中個別細(xì)胞膨大、細(xì)胞壁加厚的孢子即厚垣孢子。2有性孢子:由兩個不同的性細(xì)胞或性器官相結(jié)合而產(chǎn)生的孢子叫有性孢子,有性孢子主要有以下4種。(1)卵孢子:部分鞭毛菌亞門真菌的有性孢子,由菌絲上產(chǎn)生的兩種異形配子囊交配產(chǎn)生。制片鏡檢谷子白發(fā)病菌(Sclerospora graminicola)的卵孢子或鏡檢大豆霜霉病菌(Peronospora manshurica)卵孢子

16、制備片,注意卵孢子形狀、大小、顏色,孢壁形態(tài)。(2)接合孢子:為接合菌亞門真菌的有性孢子,由兩個同形配子囊交配而成。鏡檢毛霉(Mucor)接合孢子制片,注意接合孢子的大小,形狀,顏色及表現(xiàn)特點。(3)子囊孢子:為子囊菌亞門真菌產(chǎn)生的有性孢子,由兩個異形配子囊交配生成,子囊孢子產(chǎn)生在子囊內(nèi),多為8個,子囊除極少數(shù)子囊菌裸生外,多數(shù)子囊菌生于子囊果中。取山楂白粉病(Podosphaera oxyacanthae)病葉,用解剖針將白粉上的小黑點(閉囊殼)仔細(xì)撥至載玻片上的水滴中,加蓋片并輕輕壓破閉囊殼,鏡檢閉囊殼,子囊、子囊孢子和附屬絲的形態(tài),特別注意子囊的數(shù)目和附屬絲的特點,另取油菜菌核病菌(Sc

17、lerotinia sclerotium 132)制備片,鏡檢子囊盤、子囊和子囊孢子。(4)擔(dān)孢子:為擔(dān)子菌亞門真菌的有性孢子,由菌絲結(jié)合后減數(shù)分裂而成,外生于擔(dān)子或先菌絲上。挑取萌發(fā)的玉米絲黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana)制片鏡檢冬孢子、先菌絲及擔(dān)孢子的形態(tài),另取小麥腥黑穗病菌(Tilletia caries)冬孢子萌發(fā)的制備片,鏡檢冬孢子、先菌絲及擔(dān)孢子的形態(tài),比較兩種黑粉病菌的區(qū)別。另外還有一種有性孢子為休眠孢子囊,由兩個游動配子結(jié)合而成,為二倍體,萌發(fā)時減數(shù)分裂釋放出單倍體的游動孢子。如壺菌、根腫菌可產(chǎn)生休眠孢子囊,根腫菌產(chǎn)生的休眠孢子囊萌發(fā)時通常只釋放出一個游

18、動孢子,有時也稱為休眠孢子。三、作業(yè)1繪有隔菌絲,無隔菌絲和菌核剖面圖。2繪分生孢子、孢囊孢子、卵孢子及子囊孢子的形態(tài)圖。 四、思考題1菌絲有無隔膜是否反應(yīng)一定的進(jìn)化關(guān)系?2菌核和子座在形態(tài)和功能上有何不同?3真菌吸器的有無與寄生性的強(qiáng)弱是否有一定關(guān)系?4分生孢子和孢囊孢子的生成過程,形成數(shù)量(與產(chǎn)孢細(xì)胞比較)及著生部位等方面有何不同?5卵孢子、接合孢子、子囊孢子和擔(dān)子孢子在有性生殖過程中形成的時期有何不同? 五、所需學(xué)時4學(xué)時。*附:安斯沃思(Ainsworth,1973)的分類系統(tǒng) 真菌界的門和亞門分類檢索表1有原生質(zhì)團(tuán)或假原生質(zhì)團(tuán)粘菌門Mycomycota1無原生質(zhì)團(tuán)或假原生質(zhì)團(tuán),同化階

19、段為典型的菌絲體真菌門Eumycota 2有能動細(xì)胞(游動孢子或游動配子),有性階段產(chǎn)生典型的卵孢子鞭毛菌亞門Mastigomycotina2無能動細(xì)胞3有有性階段4有性階段產(chǎn)生接合孢子接合菌亞門Zygomycotina4有性階段產(chǎn)生子囊孢子子囊菌亞門Ascomycotina4有性階段產(chǎn)生擔(dān)子孢子擔(dān)子菌亞門Basidiomycotina3無有性階段半知菌亞門Deuteromycotina *真菌詞典(1995)第8版的分類體系 原生動物界(Protozoa)集胞粘菌門(Acrasiomycota)網(wǎng)柱粘菌門(Dictyosteliomycota)粘菌門(Myxomycota)根腫菌門(Plas

20、modiophoromycota) 假菌界(Chromista)絲壺菌門(Hyphochytriomycota)網(wǎng)粘菌門(Labyrinthulomycota)卵菌門(Oomycota) 真菌界(Fungi)子囊菌門(Ascomycota)擔(dān)子菌門(Basidiomycetes)擔(dān)子菌綱(Basidiomycetes)冬孢菌綱(Teliomycetes)黑粉菌綱(Ustomycetes)壺菌門(Chytridiomycetes)接合菌門(Zygomycota)毛菌綱(Trichomycetes)接合菌綱(Zygomycetes?實驗四、五 鞭毛菌亞門(Mastigomycotina)真菌及其所

21、致病害癥狀觀察 鞭毛菌亞門真菌也叫鞭毛菌,是真菌門中最低等的一類,主要特征是無性繁殖產(chǎn)生帶有12根鞭毛的游動孢子(有的還有游動配子)。根據(jù)營養(yǎng)體的形態(tài)及鞭毛的特征,鞭毛菌亞門分為根腫菌綱、壺菌綱、絲壺菌綱和卵菌綱,除絲壺菌綱尚未發(fā)現(xiàn)有侵染植物的成員外,其余三個綱特別是卵菌綱都有較重要的病原物。 一、目的要求通過本實驗了解鞭毛菌亞門中根腫菌綱、壺菌綱和卵菌綱真菌的主要形態(tài)特征,掌握與植物病害有關(guān)的重要屬的基本形態(tài)特征、分類依據(jù)及其所致病害的癥狀特點。同時,學(xué)習(xí)使用檢索表來鑒定病菌,為分類鑒定打下初步基礎(chǔ)。學(xué)會病原物標(biāo)本臨時玻片的制作方法。 二、內(nèi)容、材料和方法(一)根腫菌綱(Plasmodiop

22、horomycetes)根腫菌綱的分類地位,至今意見還不一致,該綱真菌為數(shù)不多,只有一個目,根腫菌目(Plasmodiophorales)。根腫菌的特點是營養(yǎng)體為無細(xì)胞壁的原質(zhì)團(tuán);有性繁殖整個原生質(zhì)團(tuán)形成大量散生或成堆的厚壁休眠孢子(休眠孢子囊);無性繁殖也由原生質(zhì)團(tuán)形成薄壁的游動孢子囊,其中產(chǎn)生前端具有兩根長短不等尾鞭的游動孢子,根腫菌都是植物細(xì)胞內(nèi)的專性寄生菌,具有明顯的水生習(xí)性,常引起植物根部產(chǎn)生刺激性病變,形成膨腫狀,其越冬和傳播與土壤關(guān)系密切,與植物病害關(guān)系密切的有以下兩屬。1根腫菌屬(Plasmodiophora)觀察白菜根腫病(P.brassicae)的液浸標(biāo)本,注意根腫的特點,

23、然后鏡檢白菜根腫病菌制備片(001),注意在寄主細(xì)胞內(nèi)能否見到成堆的休眠孢子?受病細(xì)胞的大小與正常細(xì)胞有無區(qū)別?是薄壁細(xì)胞受害,還是輸導(dǎo)組織受害?2粉痂屬(Spongospora)觀察馬鈴薯粉痂病(S.subterranea)標(biāo)本,鏡檢該病的制備片(002),注意馬鈴薯塊莖皮層上形成的瘡痂狀小瘤及寄主細(xì)胞內(nèi)由休眠孢子聚集成多孔的海綿狀圓球。(二)壺菌綱(Chytridiomycetes)壺菌營養(yǎng)體形態(tài)變化較大,較高等的開始有原始的絲狀體,無性繁殖產(chǎn)生后端具有單根尾鞭的游動孢子;有性繁殖最主要的方式是兩個同型的游動配子交配形成合子,本綱只有壺菌目(Chytridiales)中的少數(shù)成員寄生高等植

24、物引起病害,重要的只有節(jié)壺菌屬(Physoderma)中的玉蜀黍節(jié)壺菌(P.maydis)引起玉米褐斑病。觀察玉米褐斑病標(biāo)本,注意發(fā)病部位,病斑大小,顏色,是否隆起,用解剖針挑破病斑可見到大量黃褐色的粉末,即病菌的休眠孢子,制片鏡檢休眠孢子的形態(tài),或鏡檢玉米褐斑病菌制備片(003)注意休眠孢子胞壁厚薄、顏色,是否有蓋。(三)卵菌綱(Oomycetes)卵菌的特征是營養(yǎng)體為真正的菌絲體;無性繁殖產(chǎn)生具有一根尾鞭和一根茸鞭的游動孢子,有性繁殖通過異型的雄器和藏卵器交配產(chǎn)生卵孢子,根據(jù)藏卵器內(nèi)卵孢子數(shù)目的多少及其他特性,卵菌綱分為水霉目和霜霉目兩個目。1水霉目(Saprolegniales)水霉目真

25、菌的主要特征是藏卵器中形成一個以上的卵孢子;游動孢子有兩游現(xiàn)象,游動孢子囊(菌絲頂端原生質(zhì)高度濃縮,基部有分隔與菌絲分開)不脫落,與菌絲無顯著差異,該目與植物病害關(guān)系較大的有以下兩屬。1)水霉屬(Saprolegnia)鏡檢培養(yǎng)皿中用線麻籽或大米粒誘發(fā)培養(yǎng)的水霉菌,注意菌絲和游動孢子囊的形態(tài),菌絲和游動孢子囊區(qū)別是否明顯?次生游動孢子囊是否從初生游動孢子囊的空殼內(nèi)生出(層生)?藏卵器內(nèi)卵孢子數(shù)是一個,還是多個;能否看到藏卵器和雄器交配?能否看到游動孢子釋放的現(xiàn)象。(2)綿霉屬(Achlya)鏡檢培養(yǎng)皿中用線麻籽或大米粒誘發(fā)培養(yǎng)的綿霉菌,注意和水霉屬真菌的區(qū)別,能否看到單個或成串產(chǎn)生的厚壁孢子的

26、情況以及游動孢子釋放后聚集在孢子囊附近的情形。2霜霉目(Peronosporales)霜霉目真菌與水霉目真菌的主要區(qū)別是藏卵器中只形成一個卵孢子;游動孢子沒有兩游現(xiàn)象,孢子囊一般是產(chǎn)生在特殊分化的孢囊梗上:孢子囊較易從孢囊梗上脫落。根據(jù)孢囊梗的形態(tài)特點,霜霉目分為腐霉菌科(Pythiaceae)、白銹菌科(Albuginaceae)和霜霉菌科(Peronosporaceae)(見附錄),該目與植病關(guān)系密切的有以下幾個屬。1)腐霉屬(Pythium)觀察蔬菜幼苗猝倒病標(biāo)本,注意受害部位和癥狀特點。將瓜果腐霉(P.aphanidermatum)斜面菌種的菌落少許移置在清水中,在1820下培養(yǎng)243

27、6小時,然后用解剖針從水中挑取少量菌絲制片鏡檢。觀察菌絲有沒有隔膜?游動孢子囊形狀?與菌絲差別是否明顯?能否看到孢子囊萌發(fā)的情景?泄管和泡囊的形態(tài)如何? 2)疫霉屬(Phytophthora) 取馬鈴薯晚疫病(P.infestans)標(biāo)本,觀察受害部位。注意癥狀特點,特別要注意葉片上病斑的位置,大小、狀態(tài)、顏色,邊緣是否清楚,是否產(chǎn)生灰白色的霉層(特別是葉背面)?挑取馬鈴薯晚疫病菌斜面培養(yǎng)菌制片(或取制備片008)鏡檢游動孢囊梗、游動孢子囊和游動孢子,注意孢囊梗分枝的特點及游動孢子囊的形態(tài)。(3)單軸霉屬(Plasmopara)觀察葡萄霜霉病(P.viticola)標(biāo)本,注意為害部位及癥狀特點

28、,挑取葡萄霉病病葉病斑上的霉層制片(或取制備片015)鏡檢孢子囊梗的形態(tài),注意分枝特點及分枝末端的特征。(4)霜霉屬(Peronospora)觀察十字花科霜霉病(P.paraditica)和大豆霜霉病(P.manschurica)標(biāo)本,注意為害部位的癥狀和特點,然后挑取少許霉層制片(或取制備片027或018)鏡檢孢囊梗和孢子囊,注意孢子囊的梗分枝特點。(5)假霜霉屬(Pseudoperonospora)觀察黃瓜霜霉病(P.cupensis)標(biāo)本,注意為害部位和病狀特點,挑取霉層制片或取制備片013)鏡檢孢囊梗和孢子囊,注意孢囊梗的分枝特點,與霜霉屬形態(tài)有何異同。(6)盤梗霉屬(Bremia)觀

29、察萵苣霜霜霉病(B.lacrucae)標(biāo)本,注意癥狀特點,挑取病葉上的霉層制片(或取制備片016),鏡檢孢子囊梗的形態(tài),注意分枝末端是否膨大呈盤狀?邊緣是否有小梗?孢子囊的形態(tài)及著生位置如何?7)白銹菌屬(Albugo)取十字花科白銹病(A.candida),注意受害部位,癥狀特點,切取白銹病病葉制片鏡檢(或鏡檢制備片009無性,010有性),注意孢子囊梗著生的位置,形態(tài)和排列特點,孢子囊的形態(tài),注意觀察藏卵器內(nèi)卵孢子的數(shù)目,藏卵器壁與卵孢子壁是否愈合,另取該菌無性世代制備片009,觀察孢子囊梗的形態(tài),特別要注意分枝特點。 三、作業(yè)1繪馬鈴薯晚疫病菌(P.infestans)和十字花科白銹病菌

30、(A.candida)孢囊梗和孢子囊形態(tài)圖。2繪葡萄霜霉病菌(Plasmopara viticola)和黃瓜霜霉病菌(Ps.cubensis)形態(tài)圖。3鏡檢鑒定大蔥霜霉病、向日葵霜霉病,波菜霜霉病的病原菌,鑒定到屬。 四、思考題1試比較說明水霉、腐霉、疫霉和霜霉,從低級向高級演化的情況。2鞭毛菌亞門真菌四個綱是怎樣劃分的?它們?yōu)楹χ参飼r各具什么特點?3水霜目和霜霉目真菌,在寄生性和形態(tài)上有什么不同?4霜霉為害植物時,為什么多發(fā)生在葉部?為什么多在病斑背面形成霉層?為什么常在低溫多濕的條件下受害嚴(yán)重? 五、所需學(xué)時4學(xué)時。*附:霜霉目真菌科及主要屬分類檢索表1孢囊梗與菌絲無顯著差異,孢子囊依次頂

31、生,陸續(xù)形成,兼性寄生腐霉科(Pythiaceae)2孢子囊一般不能脫落,萌發(fā)時先生出泄管,形成泡囊,在泡囊中形成游動孢子腐霉屬(Pythium)如瓜類猝倒病菌(P.aphanidermatum)2孢子囊一般脫落,萌發(fā)時不形成泡囊,游動孢子在孢子囊內(nèi)形成,從乳頭狀突起部泄出疫霉屬(Phytophtora)如馬鈴薯晚疫病菌(P.infestans) 1孢囊梗與菌絲顯著不同,專性寄生2孢囊梗多分枝,由氣孔伸出寄主體外,孢子囊單生于頂端霜霉科(Peronosporaceae)3卵孢子大量產(chǎn)生,卵孢子壁與藏卵器壁相愈后,寄生于禾本科植物4孢囊梗粗壯,頂端叢生小梗指梗霉屬(Sclerospora)如谷子

32、白發(fā)病菌(S.graminicola)3卵孢子發(fā)生較少,卵孢子壁不與藏卵器壁愈合;囊孢梗細(xì)小,且具明確分枝4孢囊梗單軸分枝或假單軸分枝5 孢囊梗單軸分枝,分枝與主枝成直角,頂端平單軸霉屬(Plasmopara)如葡萄霜霉病(P.viticola)5孢囊梗假單軸分枝,分枝與主枝成銳角,頂端尖銳假霜霉屬(Pseudoperonospora)如黃瓜霜霉病菌(P.cubensis)5孢囊梗二叉狀分枝5分枝末端尖細(xì)霜霉屬(Peronospora)如白菜霜霉病(P.parasitica)5分枝末端膨大成盤狀 盤梗霉病(Bremia)如萵苣霜霉病菌(B.lactucae)2孢囊梗不分枝,呈棍棒狀,孢子囊鏈生

33、于孢囊梗上,埋生于寄生表皮下,形成孢子堆白銹科(Albugiaceae) 白銹屬(Albugo)如蘿卜白銹病 返回 返回 返回 實驗九、十 擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)真菌及其所致病害癥狀觀察 一、目的擔(dān)子菌亞門的真菌稱為擔(dān)子菌,是真菌中最高等的一類真菌,其特點是有性生殖產(chǎn)生擔(dān)子和擔(dān)孢子,擔(dān)孢子是一種外生孢子。由于多數(shù)擔(dān)子菌沒有明顯的單倍體營養(yǎng)階段,所以很少見到分生孢子繁殖,擔(dān)子菌有兩種類型的菌絲體,一種是由擔(dān)孢子萌發(fā)形成的單倍體,每個細(xì)胞只有一個核的初生菌絲體,另一種是經(jīng)過雙核化而形成的每個細(xì)胞中有一對細(xì)胞核的次生菌絲體,常見的是后一種,擔(dān)子菌菌絲體上鎖狀聯(lián)合現(xiàn)象比較普遍。通

34、過本次試驗掌握擔(dān)子菌的形態(tài)特征及擔(dān)子菌所致病害的癥狀特點,為擔(dān)子菌的分類和病害鑒定打下初步基礎(chǔ)。 二、內(nèi)容、材料和方法根據(jù)擔(dān)子菌是否形成擔(dān)子果,以及擔(dān)子果是裸果型還是被果型等性狀特點,將擔(dān)子菌亞門分為冬孢菌綱(Teliomycotes),層菌綱(Hymenomycetes)和腹菌綱(Gasteromycetes)三個綱。其中寄生性較強(qiáng),與植物病害關(guān)系密切的是冬孢菌綱的銹菌目的黑粉菌目,冬孢菌綱真菌一般認(rèn)為是低等擔(dān)子菌,沒有擔(dān)子果,形成分散或成堆的冬孢子。(一) 銹菌目銹菌的特征是冬孢子從雙核菌絲的頂端細(xì)胞形成,擔(dān)子(上擔(dān)子或后擔(dān)子)是由外生型的冬孢子(下?lián)踊蛟瓝?dān)子)萌發(fā)而成的,擔(dān)子多產(chǎn)生三個橫隔分為四個細(xì)胞,每個細(xì)胞上產(chǎn)生一個擔(dān)

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