《穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)外抗炎》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)外抗炎（17頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,新穿心蓮內(nèi)酯在體內(nèi)外抗炎活性研究,選自：The American Journal of Chinese Medicine,SCI影響因子0.710,Abstract,新穿心蓮內(nèi)酯，是一個來自穿心蓮植物的一種提取物。本文主要研究新穿心蓮內(nèi)酯在體內(nèi)和體外的抗炎作用及機制。研究發(fā)現(xiàn)口服新穿心蓮內(nèi)酯（150毫克/千克）顯著抑制二甲苯所致小鼠耳腫脹?？诜麓┬纳弮?nèi)酯（100150毫克/千克）也能減少醋酸致小鼠血管通透性增加。在體外進行研究，利用巨噬細胞系RAW 264.7探討新穿心蓮內(nèi)酯抑制phorbol-12-my
2、ristate-13-acetate刺激呼吸系統(tǒng)和脂多糖誘導(dǎo)產(chǎn)生一氧化氮、腫瘤壞死因子（腫瘤壞死因子-）。,通過光學測量，結(jié)果顯示新穿心蓮內(nèi)酯抑制有刺激因子刺激呼吸系統(tǒng)產(chǎn)生炎癥因子，新穿心蓮內(nèi)酯抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞產(chǎn)生的一氧化氮和腫瘤壞死因子-，促進抗炎活性的作用。這些結(jié)果表明，新穿心蓮內(nèi)酯具有顯著的抗炎作用。,關(guān)鍵詞：新穿心蓮內(nèi)酯；耳水腫；血管通透性；一氧化氮；腫瘤壞死因子-；巨噬細胞炎癥。,Materials and Methods,制備新穿心蓮內(nèi)酯的主要方法：冷浸法，干葉（1千克）被浸漬在95%乙醇在室溫下保存三天。過濾后，乙醇溶液是在真空蒸發(fā)去除溶劑。殘留（320克）浸膏用乙酸乙酯
3、對水和乙酸乙酯部分（45克）在硅膠柱進行層析，洗脫用石油醚/丙酮（7:3），產(chǎn)生2克純新穿心蓮內(nèi)酯。新穿心蓮內(nèi)酯的化學結(jié)構(gòu)鑒定紅外，紫外，核磁共振和質(zhì)譜等進行測定。其純度大于96%，以高效液相色譜分析（圖1）。該新穿心蓮內(nèi)酯溶解在二甲基亞砜（DMSO）存放在20的環(huán)境中。,其他化學試劑：醋酸豆寇酯、內(nèi)毒素（脂多糖），青霉素，鏈球菌霉素，魯米諾（苯巴比妥），三乙胺和其他生化試劑等。醋酸豆寇酯溶解在DMSO中，脂多糖（50克/毫升）不是加入的磷酸緩沖溶液。都存放到-20C 的環(huán)境中。,實驗動物：小白鼠（282克）,抗炎活性的新穿心蓮內(nèi)酯化學結(jié)構(gòu),實驗一：二甲苯引起的小鼠耳腫脹,局部應(yīng)用二甲苯50微
4、升，涂于老鼠的左耳，右耳為對照。新穿心蓮內(nèi)酯分為三個不同的劑量（50，100和150毫克/千克）一小時前讓小白鼠口服，再加一組地塞米松（20毫克/公斤）作為陽性對照,實驗二：醋酸刺激誘導(dǎo)小鼠內(nèi)臟痛模型,把小鼠分成5組，分別給予動物腹腔注射1毫升/100克醋酸（0.6%，體積比）。30分鐘后注射醋酸和腹腔沖洗正常鹽水（3毫升）1小時后口服新穿心蓮內(nèi)酯（50，100和150毫克/千克），0.2毫升伊萬斯藍染料（0.25%生理鹽水）靜脈注射部位在尾靜脈。對照組注入地塞米松（20毫克/千克）同等劑量和生理鹽水相比較。在610納米條件下對染料進行檢測。,實驗三：新穿心蓮內(nèi)酯對LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞中一氧化
5、氮生產(chǎn)的影響,新穿心蓮內(nèi)酯并沒有顯著影響基底原料264.7巨噬細胞。然而，新穿心蓮內(nèi)酯在沒有生產(chǎn)的巨噬細胞治療內(nèi)毒素的情況下是劑量依賴性地抑制內(nèi)毒素（圖4），在濃度從30到150m。結(jié)果的基礎(chǔ)上的微量細胞活力檢測，新穿心蓮內(nèi)酯無毒性從30到90m（細胞存活超過95%與對照組相比）。只有在最高劑量（150m），一些細胞（細胞存活率明顯低于65%與對照組相比）。,實驗四：在LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞下新穿心蓮內(nèi)酯對腫瘤壞死因子-生產(chǎn)的影響。,腫瘤壞死因子-是一個重要的炎癥介質(zhì)分泌的脂多糖，誘導(dǎo)264.7巨噬細胞系巨噬細胞。圖5顯示，新穿心蓮內(nèi)酯從30到150m，腫瘤壞死因子-濃度在LPS處理組劑量依賴性
6、減少，相比于對照組在無脂多糖誘導(dǎo)下。,Result,實驗一：新穿心蓮內(nèi)酯顯著（0.05）的二甲基苯致耳毒水腫在150毫克/千克劑量后二甲基苯應(yīng)用（表1）。地塞米松也有顯著抑制水腫。新穿心蓮內(nèi)酯對在不同時間段由醋酸刺激小鼠所引起的內(nèi)臟絞痛誘導(dǎo)模型，而使其血管統(tǒng)透性增加有一定的抑制和調(diào)解作用?；瘜W誘導(dǎo)的血管通透性（如乙酸）會立即持續(xù)反應(yīng)?？诜?00150毫克/公斤新穿心蓮內(nèi)酯誘發(fā)一個明顯的劑量相關(guān)的抑制醋酸致小鼠血管通透性增加（表2）。抑制表明，新穿心蓮內(nèi)酯可有效地抑制急性炎癥的滲出期。,實驗二：新穿心蓮內(nèi)酯隨著劑量的增加能顯著增加血管的通透性。,實驗三：新穿心蓮內(nèi)酯對LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞中一氧化
7、氮的生產(chǎn) 具有明顯的抑制作用,實驗四：在LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞新穿心蓮內(nèi)酯對腫瘤壞死因子-生產(chǎn)有明顯的抑制作用。,Discussion,穿心蓮提取物已被用于傳統(tǒng)中醫(yī)治療細菌性感染和炎癥性疾病。然而，這些機制的生物活性尚未完全澄清。在目前的研究，一個從穿心蓮植物中分離出來的二萜內(nèi)酯類化合物新穿心蓮內(nèi)酯在體內(nèi)和體外的抗炎機制和作用我們發(fā)現(xiàn)：體內(nèi)藥理結(jié)果發(fā)現(xiàn)新穿心蓮內(nèi)酯具有抗炎活性在甲基苯致小鼠耳腫脹模型和醋酸所致刺激的內(nèi)臟傷害小鼠模型。為了澄清新穿心蓮內(nèi)酯抗炎機制，新穿心蓮內(nèi)酯對活化巨噬細胞的抑制作用介紹在體外進行試驗。在炎癥過程，在具體的和非特異性免疫過程中。被激活的巨噬細胞釋放大量的炎癥介質(zhì)，如
8、活性氧、白三烯、白細胞介素、腫瘤壞死因子-等。所有這些抗炎物質(zhì)有能力誘導(dǎo)組織損傷直接或間接增加炎癥反應(yīng)。因此，一種藥物能夠防止釋放炎癥介質(zhì)應(yīng)該可能具有抗炎作用。,從本報告數(shù)據(jù)表明，新穿心蓮內(nèi)酯引起劑量依賴性抑制一氧化氮和腫瘤壞死因子-產(chǎn)生在LPS誘導(dǎo)的巨噬細胞中。新穿心蓮內(nèi)酯，對加脂多糖誘導(dǎo)的巨噬細胞炎癥介質(zhì)產(chǎn)生有抑制作用但沒有細胞毒作用。這表明，新穿心蓮內(nèi)酯并不是由于細胞死亡從而減少和減輕炎癥介質(zhì)的釋放和作用。低濃度新穿心蓮內(nèi)酯有輕度刺激免疫反應(yīng)的作用對在體內(nèi)沒有生產(chǎn)免疫因子的時候。這可能意味著，新穿心蓮內(nèi)酯，在低濃度時，可作為免疫刺激劑?？梢赃M一步的研究其機制和構(gòu)效關(guān)系的進展。,總之，新穿心蓮內(nèi)酯的抗炎活性可能有助于對改善炎癥性疾病在早期階段的巨噬細胞活化。因此，穿心蓮植物中所含的新穿心蓮內(nèi)酯是其一個主要參與抗炎作用的組成部分。,
穿心蓮內(nèi)酯體內(nèi)外抗炎
