淋巴瘤知識(shí)入門

上傳人:good****022 文檔編號(hào):119698954 上傳時(shí)間:2022-07-15 格式:PPT 頁數(shù):138 大?。?3.63MB
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1、淋巴瘤知識(shí)入門,本幻燈片大部分圖片內(nèi)容 來自陳國(guó)璋教授的慷慨饋贈(zèng) 特此致謝!,診斷的客觀條件,診斷外部條件,制作精良的HE切片 質(zhì)控良好的免疫組化染色 臨床病史 分子生物學(xué)檢測(cè)(可選) 流式細(xì)胞光度術(shù)(可選),正常淋巴結(jié)結(jié)構(gòu),淋巴結(jié)結(jié)構(gòu),皮質(zhì)區(qū) 副皮質(zhì)區(qū) 髓質(zhì) 包膜和纖維分隔 竇區(qū),流入淋巴管,纖維包膜,邊緣竇,次級(jí)濾泡,套區(qū),生發(fā)中心,初級(jí)濾泡,纖維分隔,皮質(zhì)區(qū),流入淋巴管,髓質(zhì)及淋巴竇,肥胖內(nèi)皮的小靜脈,門區(qū)淋巴竇,靜脈,動(dòng)脈,流出淋巴管,副皮質(zhì)區(qū),髓索,皮質(zhì)區(qū): B細(xì)胞區(qū),初級(jí)淋巴濾泡 初始 B 細(xì)胞和成熟 B 細(xì)胞 濾泡樹突細(xì)胞,CD21,皮質(zhì)區(qū):淋巴結(jié)的B細(xì)胞區(qū),次級(jí)淋巴濾泡 中心母

2、細(xì)胞, 中心細(xì)胞 (濾泡中心 B 細(xì)胞; CD10+) 濾泡樹突細(xì)胞 T細(xì)胞 (CD10 強(qiáng) +; 常 CD4+/T輔助及 CD57+) 吞噬碎片的巨嗜細(xì)胞 套區(qū)B細(xì)胞 (IgM+D),次級(jí)濾泡結(jié)構(gòu)示意圖,邊緣區(qū)細(xì)胞 (IgM),套區(qū)細(xì)胞 (IgM+D),生發(fā)中心細(xì)胞 (IgM, IgG, IgA or IgE, not IgD),CD20,CD21,CD10,CD20,皮質(zhì)區(qū):淋巴結(jié)的B細(xì)胞區(qū),邊緣區(qū)B細(xì)胞 多數(shù)淋巴結(jié)中不明顯 在腹腔淋巴結(jié)容易見到,即在套區(qū)外側(cè),淡白色區(qū)域,胞漿較豐富、透明,Mantle zone,Marginal zone,CD20,皮質(zhì)反應(yīng)性增生改變,反應(yīng)性濾泡增生 對(duì)

3、T細(xì)胞依賴抗原反應(yīng)而發(fā)生 生發(fā)中心有極性:亮區(qū)及暗區(qū),扁桃體最明顯 可伴有漿細(xì)胞增多,抗原流入的方向,套細(xì)胞在頂端較厚“帽子”,生發(fā)中心的亮區(qū)(中心細(xì)胞較多),生發(fā)中心的暗區(qū) (中心母細(xì)胞較多),Dark zone,Light zone,Ki67,副皮質(zhì)區(qū):淋巴結(jié)的T區(qū),T細(xì)胞為主 (CD4CD8): 小淋巴細(xì)胞, 偶有較大的T細(xì)胞 (一些散在于副皮質(zhì)區(qū)的大細(xì)胞是激活的B細(xì)胞) 高度增生內(nèi)皮的小靜脈 (淋巴細(xì)胞在其內(nèi)流通) S100+ 的細(xì)胞 (指突狀樹突狀細(xì)胞) Cytokeratin+ 樹突細(xì)胞 (纖維母細(xì)胞性樹突細(xì)胞?),IDC,CD3,CD20,副皮質(zhì)區(qū)的反應(yīng)性增生,最常見原因: 病毒

4、感染, 過敏反應(yīng), 腫瘤引流淋巴 皮質(zhì)增寬, 有時(shí)形成結(jié)節(jié). T結(jié)節(jié)緊鄰B濾泡,有時(shí)融合 高度增生內(nèi)皮細(xì)胞的血管; 混合性小細(xì)胞和免疫母細(xì)胞,髓索,有較多漿細(xì)胞 可顯著或不明顯 B細(xì)胞反應(yīng)時(shí)可顯著, 如反應(yīng)性濾泡增生、漿細(xì)胞性Castleman 病時(shí),竇,流入淋巴管 邊緣竇 淋巴內(nèi)竇 髓質(zhì)淋巴竇 流出淋巴管 淋巴竇被覆竇內(nèi)襯細(xì)胞 (有橋粒). 竇內(nèi)有一些組織細(xì)胞和淋巴細(xì)胞 腹腔內(nèi)淋巴結(jié)淋巴竇常明顯擴(kuò)張,結(jié)締組織網(wǎng)架,纖維包膜以及向淋巴結(jié)內(nèi)伸出的纖維小梁構(gòu)成網(wǎng)架 正常情況下不明顯 反應(yīng)性增生及周圍淋巴結(jié)腫大時(shí)較明顯,Any Question? Take a break!,免疫組化的一般問題,免疫

5、組化的重要性,鑒別淋巴瘤 VS 反應(yīng)性增生 鑒別淋巴瘤 VS 其他惡性腫瘤 淋巴瘤的分類 淋巴瘤的預(yù)后及臨床分期 治療靶標(biāo),沒有高質(zhì)量的免疫組化 就不能很好地進(jìn)行淋巴瘤診斷,染色結(jié)果的判定,正確的染色結(jié)果判定,比免疫組化染色本身一樣重要 染色的判斷必須緊密結(jié)合組織學(xué),必須確定究竟應(yīng)該是哪一種細(xì)胞著色,哪一種成分不應(yīng)著色,CD20,染色結(jié)果的判斷,必須申明哪種細(xì)胞為陽性,尤其是病變含有多種細(xì)胞成分時(shí) 如果病理報(bào)告如下: CD20+, CD3+, CD5+, Bcl2+, CD10-, Bcl6- ,沒有價(jià)值 正確的表述: 大細(xì)胞 CD20+, CD3-, CD5-, CD10- 背景的小淋巴細(xì)胞

6、: CD3+ CD5+ CD8+ 有散在的網(wǎng)格狀 CD21+ 濾泡樹突細(xì)胞,染色結(jié)果的判斷,陽性比陰性更有價(jià)值,因?yàn)殛幮钥赡苡捎冢?抗原丟失 抗原修復(fù)不足 敏感性不足 抗體過期 加錯(cuò)抗體或試劑添加步驟錯(cuò)誤,染色結(jié)果的判斷,必須有陽性的內(nèi)對(duì)照和外對(duì)照,證明染色結(jié)果可信 染色應(yīng)得到正確的預(yù)期結(jié)果 大多數(shù)白細(xì)胞的標(biāo)記為膜陽性 TdT, S100 及轉(zhuǎn)錄因子類抗體均為核陽性,Cyclin D1,CD20,TdT,淋巴細(xì)胞的表型,B,T,NK,緊密相關(guān),淋巴系統(tǒng)的形成,胸腺,?骨髓 ? Peyer 結(jié),淋巴結(jié)、脾、粘膜組織,中心淋巴組織: “前驅(qū)”細(xì)胞的貯存庫(kù); 由此細(xì)胞發(fā)育成熟,外周淋巴組織: 成熟細(xì)

7、胞的貯存庫(kù) 準(zhǔn)備對(duì)抗原產(chǎn)生反應(yīng),T,B,NK,?,前前B細(xì)胞,前B細(xì)胞,不成熟B細(xì)胞,成熟B細(xì)胞,激活的B細(xì)胞,漿細(xì)胞,前驅(qū)細(xì)胞,非抗體依賴,初始(Virgin) B 細(xì)胞,非抗體依賴,中心細(xì)胞 抗體依賴,TdT,CD20, CD22,CD19, PAX5,CD79a,CD10,Bcl-6,CD138,Cytoplasmic CD22,前胸腺細(xì)胞,包膜下胸腺細(xì)胞,皮質(zhì)胸腺細(xì)胞,髓質(zhì)胸腺細(xì)胞,外周T細(xì)胞,前驅(qū)細(xì)胞,成熟T細(xì)胞,Cytoplasmic,Surface,CD4,CD8,CD1,CD4, CD8,CD3,CD2,CD7,TdT,淋巴瘤 VS 其他惡性腫瘤?,有時(shí)淋巴瘤與分化差的癌、惡性

8、黑色素瘤、肉瘤鑒別非常困難 淋巴瘤也可有各種形態(tài) (如小梁狀排列、粘液變性、 菊形團(tuán)、梭形細(xì)胞) 免疫組化對(duì)于鑒別很有幫助,對(duì)于分化差的腫瘤,* 大細(xì)胞間變淋巴瘤和淋巴母細(xì)胞淋巴瘤可以LCA陰性 需要加染其他標(biāo)志 (如 CD30),Cytokeratin, CAM5.2,白細(xì)胞共同抗原,CD45 (CD45RB): Leukocyte common antigen 除漿細(xì)胞之外的所有正常淋巴細(xì)胞 (B, T 或 NK 系) Reed-Sternberg 細(xì)胞 (Hodgkin lymphoma) CD45- 通常對(duì)于淋巴瘤,不必染LCA: 直接染 CD20 和CD3,扁桃體,LCA/CD45,

9、免疫組化對(duì)淋巴瘤分類有多重要?,只有極少數(shù)淋巴瘤不做免疫組化,可明確診斷: 濾泡性淋巴瘤 邊緣區(qū)B細(xì)胞淋巴瘤, 粘膜相關(guān)淋巴組織類 小淋巴細(xì)胞淋巴瘤 絕大多數(shù)其他類型均需要免疫組化,尤其是: 套細(xì)胞淋巴瘤 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤 各種T細(xì)胞淋巴瘤,B 系細(xì)胞標(biāo)記,CD20 (e.g. L26): 非常敏感 (95% B細(xì)胞淋巴瘤陽性), 有時(shí)B小淋巴細(xì)胞淋巴瘤染色不佳,B細(xì)胞淋巴母細(xì)胞淋巴瘤可為陰性 漿細(xì)胞、漿細(xì)胞瘤和漿母細(xì)胞淋巴瘤陰性 (對(duì)于這類腫瘤,CD20陰性是一診斷線索) 核陽性不能判定為陽性,任何細(xì)胞過度熱修復(fù)均可核陽性,CD20,B 系細(xì)胞標(biāo)志,CD79a (mb-1): B cell

10、 receptor complex: sensitive and specific B cell marker (normal plasma cells are positive; germinal center cells are stained weakly) 50% plasmacytomas are positive But can be positive in T-lymphoblastic lymphoma/leukemia Antibody expensive: Use as back-up Immunoglobulin (cytoplasmic and/or surface I

11、g),CD79a,CD79a,Plasmacytoma,New B-lineage marker PAX-5 Oct-2 Bob. 1,PAX-5,PAX-5,PAX-5,Oct-2,Bob.1,Oct-2,Bob.1,T-系細(xì)胞標(biāo)志,胞漿CD3 (polyclonal against CD3e, monoclonal also available, e.g. PS1): T系細(xì)胞高度敏感和特異 核周或核皺折處染色深 組織細(xì)胞有時(shí)弱漿陽性,但無核周濃聚 90% T 和NK 細(xì)胞淋巴瘤陽性 合并使用其他T細(xì)胞標(biāo)志 (e.g. CD45RO, CD2),CD3,CD3,T系細(xì)胞標(biāo)志,表面 CD3

12、(e.g. Leu4, T3, OKT3): 需要冰凍切片染色 大部分T細(xì)胞淋巴瘤表面CD3陽性 NK 細(xì)胞表面 CD3-, 胞漿 CD3+,T系細(xì)胞標(biāo)志,CD45RO (e.g. UCHL1, A6): 高度敏感的T細(xì)胞標(biāo)志,一些T細(xì)胞淋巴瘤 CD3- CD45RO+ 但組織細(xì)胞和髓系細(xì)胞及其腫瘤也陽性 CD43 (e.g. MT1, DFT1, Leu22): 高度敏感的T細(xì)胞標(biāo)志,但不特異 組織細(xì)胞和髓系細(xì)胞及其腫瘤也陽性 EBV感染時(shí),B細(xì)胞也表達(dá) 小B細(xì)胞淋巴瘤時(shí)也為陽性,T 系細(xì)胞標(biāo)志,CD4, CD8: 診斷T細(xì)胞淋巴瘤時(shí)并不常用 CD2: 敏感而特異的全T細(xì)胞標(biāo)志 比CD3貴,

13、備用標(biāo)志 CD7: T細(xì)胞發(fā)育早期階段表達(dá) 尤其在診斷T淋巴母細(xì)胞淋巴瘤時(shí)有用 (一些病例 CD3-),一個(gè)新的T細(xì)胞標(biāo)志: LAT,當(dāng)一個(gè)“淋巴瘤” 僅CD43陽性時(shí),可能是一個(gè)真正的T細(xì)胞淋巴瘤/白血病 一定要考慮到: 髓系白血病/粒細(xì)胞肉瘤 組織細(xì)胞腫瘤,i.e. the specific T and B markers negative,CD43+: T cell lymphoma?,No: See myeloperoxidase,NK 細(xì)胞標(biāo)志,CD56 (e.g. 123C3): NK細(xì)胞淋巴瘤的最好標(biāo)志 不完全是NK細(xì)胞特異性標(biāo)志; 一些表達(dá) gd T細(xì)胞受體的T細(xì)胞淋巴瘤也陽性

14、 CD56 在神經(jīng)細(xì)胞和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞也陽性,診斷NK細(xì)胞淋巴瘤時(shí)必須有其他白細(xì)胞標(biāo)志,CD56 (NK/T cell lymphoma),小結(jié): B或者T細(xì)胞淋巴瘤?,CD20 CD3,CD20+,B細(xì)胞淋巴瘤; 加其他分類標(biāo)志,CD3+,T或NK細(xì)胞淋巴瘤; 加其他標(biāo)志 (CD56, CD30),CD20- CD3-,非造血組織腫瘤? 漿細(xì)胞瘤? 漿母細(xì)胞性淋巴瘤? T細(xì)胞淋巴瘤? 淋巴母細(xì)胞淋巴瘤?,淋巴瘤進(jìn)一步分類,小B細(xì)胞淋巴瘤 CD5 CD23 IgD Cyclin D1 bcl-6 or CD10,淋巴瘤進(jìn)一步分類,Bcl-2: 僅區(qū)別反應(yīng)性增生和濾泡性淋巴瘤 診斷漿細(xì)胞瘤: L

15、CA L26(-), CD79a(+/-), CD138(+), Oct-2(+), Bob.1(+), Ig(+),CD138 (syndecan-1),CD138 在漿細(xì)胞、漿母細(xì)胞和一些免疫母細(xì)胞的胞膜陽性表達(dá) 用于診斷漿細(xì)胞瘤 單獨(dú)的CD138陽性不足以診斷漿細(xì)胞瘤,必須加 LCA (CD45)等,CD138,LCA/CD45,淋巴瘤進(jìn)一步分類,CD10 CD10 急性淋巴母細(xì)胞白血病標(biāo)志, 也表達(dá)于正常的生發(fā)中心B細(xì)胞和中心T細(xì)胞 價(jià)值: 濾泡中心細(xì)胞分化 (濾泡性淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、一些大B細(xì)胞淋巴瘤) 血管免疫母T細(xì)胞淋巴瘤,CD10,Strongly positive

16、 cells are T cells,RFH,FL,淋巴瘤進(jìn)一步分類,Bcl-6 核陽性 正常表達(dá)于濾泡中心B細(xì)胞、濾泡周圍的CD30+細(xì)胞和少數(shù)T細(xì)胞 以下淋巴瘤陽性: 濾泡性淋巴瘤 一些大B細(xì)胞淋巴瘤 Burkitt 淋巴瘤 一些大細(xì)胞間變性淋巴瘤,Bcl-6,Bcl-6,淋巴瘤進(jìn)一步分類,濾泡樹突細(xì)胞標(biāo)志 (CD21, CD35, clusterin) 助于診斷 濾泡性淋巴瘤 套細(xì)胞淋巴瘤 (疏松散在網(wǎng)格) 血管免疫母T細(xì)胞淋巴瘤 大細(xì)胞間變性淋巴瘤 CD30, ALK1,Mantle cell lymphoma: CD21,Angioimmunoblastic T-cell lymph

17、oma,Tonsil: Clusterin,Follicular lymphoma with diffuse component: Clusterin,CD30,激活淋巴細(xì)胞標(biāo)志 淋巴結(jié)反應(yīng)性增生時(shí)CD30+ 細(xì)胞增多 必須是膜 +/- 高爾基區(qū)陽性、彌漫漿著色不應(yīng)判定為陽性 CD30 經(jīng)典的何杰金 間變性大細(xì)胞淋巴瘤 其他一些大細(xì)胞淋巴瘤,CD30,CD30,淋巴瘤進(jìn)一步分類,Ki67: 幫助診斷 Burkitt 淋巴瘤(100%) 細(xì)胞毒性標(biāo)志, e.g. TIA1, granzyme B, NK/T細(xì)胞性淋巴瘤、脂膜炎樣T細(xì)胞淋巴瘤 淋巴母細(xì)胞淋巴瘤: TdT,Burkitt lymph

18、oma,TIA-1,TdT (terminal deoxynucleotidyl transferase),TdT (thymoma),TdT (tonsil),T-lymphoblastic lymphoma,淋巴瘤的分期和預(yù)后,套細(xì)胞淋巴瘤中,高 Ki67 index 與預(yù)后不良有關(guān) ZAP-70 表達(dá)是 B-CLL預(yù)后不良的標(biāo)志 大細(xì)胞間變淋巴瘤: ALK+ 比 ALK- 預(yù)后要好,ALK1,原發(fā)系統(tǒng)性ALCL的總生存期 (Falini et al, 1999),0,5,10,Years,ALCL, t(2;5) or ALK+,100%,50%,ALCL, t(2;5) or ALK-

19、,淋巴瘤的預(yù)后與分期,累及其他部位的淋巴瘤,如骨髓等,可以用一些標(biāo)志檢測(cè)出來 ALK 、CD30: 大細(xì)胞間變淋巴瘤 Cyclin D1 :套細(xì)胞淋巴瘤 CD56 :NK細(xì)胞淋巴瘤,ALK1,治療靶標(biāo),治療性抗體的靶標(biāo): anti-CD20 (Rituximab,美洛華) anti-CD22 anti-CD52 淋巴瘤的治療過程中,臨床大夫會(huì)要求病理大夫染一些抗體標(biāo)志 治療后的淋巴瘤細(xì)胞有時(shí)會(huì)失去抗原, e.g. CD20,小結(jié): 有用的分類標(biāo)志,B 系細(xì)胞 CD20 (可選: CD79a, PAX-5) T 系細(xì)胞 CD3 (可選: CD45RO, CD2) NK 系細(xì)胞 CD56 髓質(zhì)細(xì)胞

20、 Myeloperoxidase 濾泡中心細(xì)胞 CD10 (or bcl-6),小結(jié): 有用的分類標(biāo)志,套區(qū)細(xì)胞 IgD 不成熟的前驅(qū)細(xì)胞 TdT 漿細(xì)胞 CD20-, CD138+ (可選: Oct-2, Bob.1) 組織細(xì)胞 CD68 (PGM1 KP1) 濾泡樹突細(xì)胞 CD21 + CD35 Langerhans細(xì)胞 S100, CD1a,小結(jié): 重要的淋巴瘤分類標(biāo)志,淋巴母細(xì)胞淋巴瘤: TdT、CD99、CD34 B-CLL: CD5, CD23 套細(xì)胞淋巴瘤: Cyclin D1 濾泡性淋巴瘤: CD10 (or bcl-6) Burkitt 淋巴瘤: Ki67 index(100%) 血管免疫母細(xì)胞T細(xì)胞淋巴瘤: CD10, 濾泡樹突細(xì)胞標(biāo)志 (CD21,CD35) 間變性大細(xì)胞淋巴瘤: CD30, ALK,Thank you for Attention!,

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