草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程（定稿）

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ICS65.020 B 61 DB37 山東省地方標準 DB 37/T ××××—×××× 草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程 Technical regulotions of seedlings breeding for strawberry ×××× - ×× - ××發(fā)布 ×××× - ×× - ××實施 山東省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布 DB 37/T ××××—×××× 前??言 本標準按照GB/T 1.1—2009給出的規(guī)則起草。 本標準由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實施。 本標準由山東省農(nóng)業(yè)標準化技術(shù)委員會歸口。 本標準起草單位：山東農(nóng)業(yè)工程學院、龍口市農(nóng)業(yè)局、濟南普朗特生物科技有限公司。 本標準主要起草人：秦旭、范崇慧、崔剛、王猛、劉文寶、段曦、束靖、徐波、魯萌。 7 草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程 1　 范圍 本標準規(guī)定了草莓苗木繁育的品種與植株選擇、脫毒苗繁育、生產(chǎn)用苗繁育和生產(chǎn)檔案等。 本標準適用于山東省內(nèi)草莓苗木繁育。 2　 規(guī)范性引用文件 下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。 GB/T 8321（所有部分）　農(nóng)藥合理使用準則 NY/T 496　肥料合理使用準則　通則 NY/T 1276　農(nóng)藥安全使用規(guī)范　總則 NY/T 5010　無公害農(nóng)產(chǎn)品　種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件 NY/T 5105　無公害食品　草莓生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程 3　 品種與植株選擇 3.1　 品種選擇 選擇抗性強、品質(zhì)優(yōu)良草莓品種。促成栽培選擇休眠短的品種。 3.2　 植株選擇 選擇健康草莓植株，種苗質(zhì)量標準為有三片以上新葉，根須發(fā)達，無病蟲害。 4　 脫毒苗繁育 4.1　 繁育流程 包括培養(yǎng)室培養(yǎng)和溫室馴化移栽兩個階段。 4.2　 培養(yǎng)室培養(yǎng) 4.2.1　 培養(yǎng)室設置 4.2.1.1　 配藥室 配備冰箱、實驗臺、天平、恒溫培養(yǎng)箱、加熱器、pH計、蒸餾水制備器、三角瓶、培養(yǎng)皿、量筒、燒杯、容量瓶等儀器設備。 4.2.1.2　 洗滌室 配備洗瓶池、洗瓶機、純水發(fā)生器等。 4.2.1.3　 滅菌室 配備高壓滅菌鍋等設備。 4.2.1.4　 更衣室 用于操作人員更衣，放置無菌操作服。 4.2.1.5　 冷凝室 用于存儲培養(yǎng)基。 4.2.1.6　 接種室 用于操作人員接種操作，放置超凈工作臺、雙目顯微鏡、臭氧發(fā)生器等滅菌儀器、鑷子、剪刀、接種刀設備。 4.2.1.7　 培養(yǎng)室 用于組培苗培養(yǎng)，放置多層培養(yǎng)架，室內(nèi)保持在20 ℃～25 ℃，空氣相對濕度保持在50 %～60 %，采用日光燈、LED燈等補充光照，培養(yǎng)室內(nèi)每日光照12 h～14 h，光照強度2 000 lx～3 000 lx。 4.2.2　 熱處理 將選好草莓植株放入39 ℃±1 ℃恒溫培養(yǎng)箱或人工氣候箱內(nèi)進行培養(yǎng)，光照模擬自然光，待長出匍匐莖作為外植體。 4.2.3　 莖尖誘導培養(yǎng) 4.2.3.1　 外植體清洗 洗滌劑清洗2 min～3 min，再用吐溫清洗2 min～3 min，清洗過程中不停搖晃，以便清洗充分；清洗過后用流水沖洗30 min～40 min。 4.2.3.2　 外植體消毒 在超凈工作臺上將外植體置于無菌瓶中；用75 %酒精浸泡30 s，過程中不斷搖晃，消毒均勻徹底；無菌水沖洗4～5遍；用1 ‰的HgCL浸泡3 min，過程中不斷搖晃，消毒均勻徹底；無菌水沖洗4～5遍。 4.2.3.3　 培養(yǎng)基制作 基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。將加熱溶化的培養(yǎng)基分裝在100 ml三角瓶或其它培養(yǎng)容器中，在121 ℃高壓滅菌20分鐘。莖尖分化培養(yǎng)基和增殖繼代培養(yǎng)基添加6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.2 mg·L-1～0.5 mg·L-1，赤霉素（GA3）0.1 mg·L-1～0.5 mg·L-1，吲哚丁酸（IBA）0～0.02 mg·L-1；生根培養(yǎng)基附加6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.1 mg·L-1～0.2 mg·L-1，吲哚丁酸（IBA）0.02 mg·L-1～0.1 mg·L-1。 4.2.3.4　 莖尖剝離 在雙目解剖鏡下，用解剖針將0.3 mm～0.5 mm的生長點完整取下，然后將其接入配制好的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。 4.2.3.5　 莖尖培養(yǎng) 接種后的玻璃瓶放在培養(yǎng)室中培養(yǎng)。環(huán)境條件同培養(yǎng)室要求。培養(yǎng)大約2個月，草莓莖尖可長成完整植株，此后進行增殖繼代培養(yǎng)。 4.2.4　 病毒檢測 組培苗要進行病毒檢測，每個組培無性系抽取1 %的樣品進行草莓斑駁病毒（SMoV）、草莓輕型黃邊病毒（SMYEV）、草莓鑲脈病毒（SVBV）及草莓皺縮病毒（SCrV）檢測，檢測采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）、PCR、分子標記法進行。檢測無病毒后繼續(xù)增殖繼代培養(yǎng)。 4.2.5　 增殖繼代培養(yǎng) 培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.05 mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.01 mg/L+糖25 g/L。在超凈工作臺上用鑷子、剪刀將其分隔成3～4株在一起的小芽叢，再放入新培養(yǎng)基瓶中培養(yǎng)，每瓶3～4個芽叢，每代周期大約30 d～40 d，最好不超過兩代，繼代培養(yǎng)時間不應超過1年。 4.2.6　 生根培養(yǎng) 培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基+吲哚丁酸（IBA）0.2 mg/L+糖20 g/L。當瓶內(nèi)苗增殖到需要數(shù)量時，將芽叢分成單株，每株應達到2～3片葉，放置在生根培養(yǎng)基的瓶內(nèi)生根。4～5周后將生根的草莓苗從瓶內(nèi)移栽到溫室中。 4.3　 煉苗移栽—原原種苗 4.3.1　 溫室條件 用于瓶苗移栽的溫室應設有防蟲網(wǎng)，溫度控制在10 ℃～25 ℃。 4.3.2　 脫毒苗出瓶 用鑷子夾住草莓苗從培養(yǎng)瓶中輕輕拉出，在水中清洗附帶在根系的瓊脂，放入盛有水的容器內(nèi)防萎縮，然后拿到溫室。 4.3.3　 脫毒苗馴化 4.3.3.1　 移栽 瓶苗首先移栽至5 cm深穴盤，移栽基質(zhì)可選用椰糠（EC值為1）、草炭等，移栽時根須全部進入基質(zhì)，生長點露出基質(zhì)表面。移栽后澆透水，使根系與基質(zhì)緊密結(jié)合。 4.3.3.2　 移栽后管理 移栽后，保持葉片濕潤、基質(zhì)潮濕即可，每周噴一次殺菌劑（見附錄A）。30天左右根系盤滿，移栽至11 cm深穴盤，基質(zhì)要求同上，每2 d澆一遍透水，每周噴一次葉面肥及殺菌劑。再過30天左右根系盤滿，移栽至16 cm×16 cm營養(yǎng)缽，移栽基質(zhì)為水洗后的混合基質(zhì)（EC值為1.5），每5 d澆一遍透水，每周噴一次葉面肥及殺菌劑（見附錄A）。 4.4　 原種苗培育 將原原種苗生長出的匍匐莖進行壓苗培育，在良好隔離條件下生產(chǎn)出符合質(zhì)量標準的草莓原種苗。種苗質(zhì)量標準有3片以上完全展開的新葉，根須發(fā)達。 5　 生產(chǎn)用苗繁育 5.1　 產(chǎn)地環(huán)境 建立專用繁苗圃；選擇地勢平坦、土層深厚、排灌方便、通透性好、微酸性土壤、富含有機質(zhì)、三年以上沒有栽植過草莓的地塊，忌馬鈴薯、生姜、茄果類等蔬菜茬地。環(huán)境條件應符合NY/T 5105的規(guī)定。 5.2　 整地做壟 定植前7 d整地，深翻兩遍，深度為30 cm，每667 m2施入腐熟農(nóng)家肥5 000 kg、磷酸二銨15 kg、硫酸鉀10 kg。起大壟，壟高40 cm，壟寬120 cm～150 cm，根據(jù)育苗時間長短設定。壟溝呈“V”字型。起壟后，壟溝內(nèi)澆透水備用。肥料的使用應符合NY/T 496和NY/T 5105的規(guī)定。 5.3　 定植原種苗 5.3.1　 定植時期 根據(jù)山東省氣候條件，草莓原種苗定植在4月上中、旬進行。 5.3.2　 定植 4月上旬，將原種苗定植在壟溝內(nèi)，每壟溝定植兩行，行距為20 cm，株距20 cm，定植要求“深不埋心，淺不露根”。定植后，及時順溝澆定植水。 5.4　 田間管理 5.4.1　 肥水管理 宜使用肥水一體化技術(shù)。土壤相對濕度保持在60 %～70 %。6月～7月為草莓苗生長旺盛期，每隔20 d，每667 m2沖施高氮復合肥(N- P2O5-K2O含量為22-15-18)20 kg～30 kg，8月份停止施用氮肥，可噴0.5 %磷酸二氫鉀溶液2次，并適當控制水分。 5.4.2　 劈葉 定植后8 d～10 d，草莓苗心葉已開始生長，此時及時進行劈除老葉，減少養(yǎng)分消耗，促進植株迅速恢復生長 5.4.3　 促生匍匐莖 定植后20 d～30 d，每667 m2噴50 mg·L～1的赤霉素25 L-30 L，15 d左右再噴一次，促進抽生匍匐莖。 5.4.4　 匍匐莖管理 5.4.4.1　 領蔓。匍匐莖抽出后，及時領蔓，使匍匐莖向畦面均勻伸展。 5.4.4.2　 人工壓莖。匍匐莖抽生幼葉時前端用少量細土壓向地面，生長點外露。 5.4.4.3　 斷莖。當母苗抽生的第一子苗長到4片～5片葉時，將匍匐莖切斷。 5.4.4.4　 除匍匐莖。每株保留50個左右匍匐莖苗（繁殖系數(shù)低的品種30個～40個），每667 m2合格匍匐莖苗控制在4萬株以內(nèi)，多余的在未扎根之前盡早去掉。 5.4.4.5　 摘除花序及病、老、殘葉。生產(chǎn)季節(jié)要及早去掉母株的花序，及時去掉老葉片和病殘葉片。 5.4.5　 除草 隨時人工除草。 5.4.6　 病蟲害防治 應及時防治白粉病、葉斑病、蚜蟲、地老虎等病蟲害（見附錄A），農(nóng)藥使用應符合GB/T 8321（所有部分）和NY/T 1276的規(guī)定。 5.5　 假植苗培育 5.5.1　 假植時間 定植前25 d～30 d進行假植。 5.5.2　 假植方式 主要有苗床假植和營養(yǎng)缽假植兩種方式。提倡使用營養(yǎng)缽假植育苗，提早花芽分化，整缽出苗。 5.5.3　 營養(yǎng)缽假植 5.5.3.1　 育苗土準備 育苗土為無病蟲害的肥沃表土，加入一定比例的草炭、炭化稻殼、腐熟秸稈等有機物料，混勻后加入優(yōu)質(zhì)腐熟農(nóng)家肥20 kg/m3。 5.5.3.2　 假植 選取二葉一心以上已經(jīng)生根的匍匐莖子苗，栽入直徑10 cm或12 cm的塑料營養(yǎng)缽中。將栽好苗的營養(yǎng)缽排列在架子上或苗床上。 5.5.3.3　 假植期管理 栽植后澆透水，第1周遮陰，保持濕潤。栽植15 d后葉面噴施1次0.3 %尿素，再隔10 d噴施1次0.3 %～0.5 %的磷酸二氫鉀。及時摘除抽生的匍匐莖、枯葉和病葉，并進行病蟲害綜合防治。后期，苗床上的營養(yǎng)缽苗要通過轉(zhuǎn)缽斷根。 5.5.4　 苗床假植育苗 5.5.4.1　 苗床準備 苗床寬1.2 m，每667 m2施腐熟有機肥2 m3，并加入一定比例的有機物料。 5.5.4.2　 假植 選擇具有三片展開葉的匍匐莖苗進行栽植，株行距（10～15）cm×15 cm。 5.5.4.3　 假植期管理 適當遮陰。栽后立即澆透水，并在3 d內(nèi)每天噴2次水，以后見干澆水。栽植15 d后葉面噴施1次0.2 %尿素，每隔10 d噴施1次0.3 %～0.5 %的磷酸二氫鉀。及時中耕鋤草，摘除抽生的匍匐莖和枯葉、病葉，并進行病蟲害綜合防治。8月下旬至9月初進行斷根處理。 5.6　 苗床起苗 5.6.1　 苗木出圃 8月中旬至9月上旬起苗，起苗前2 d～3 d適量灌水。苗床假植的起苗時，從苗床的一端用鍬挖土深20 cm～30 cm，取出草莓苗（營養(yǎng)缽假植的直接取出即可），去掉土塊、老葉和病葉，剔出弱苗和病蟲危害苗，按標準分級，打包或定植。 5.6.2　 苗木質(zhì)量標準 苗木質(zhì)量與分級要求應符合表1規(guī)定。 表1　 草莓苗木質(zhì)量標準 項 目 分 級 一 級 二 級 根 初生根數(shù) 5條以上 3條以上 初生根長 7.0 cm以上 5.0 cm以上 根系分布 均勻舒展 均勻舒展 新莖 新莖粗 1.0 cm以上 0.8 cm以上 機械傷 無 無 葉 葉片顏色 正常 正常 成齡葉片 4個以上 3個以上 葉柄 健壯 健壯 芽 中心芽 飽滿 飽滿 苗木 蟲害 無 無 病害 無 無 病毒癥狀 無 無 5.6.3　 苗木包裝及貯藏 不能立即定植的草莓苗木應用密閉塑料袋包裝，用恒溫庫短時貯藏，貯藏溫度為-2 ℃～0 ℃。長途運輸應用冷藏車進行低溫運送。 6　 生產(chǎn)檔案 建立草莓苗木繁育技術(shù)檔案，詳細記錄繁育品種、繁育時間、繁育數(shù)量、出圃時間、出圃數(shù)量等，并保存3年以上，以備查閱。 A A 附　錄　A （資料性附錄） 草莓有害生物化學綜合防控方案 草莓有害生物化學綜合防控方案見表A.1。 表A.1　 草莓有害生物化學綜合防控方案 物候期(時期) 主要有害生物 防 控 方 案 馴化期 灰霉病、蚜蟲、紅蜘蛛 1、葉面噴施40 %嘧霉胺懸浮劑2 000倍液防灰霉?。? 2、葉面噴施10 %吡蟲啉可濕性粉劑2 000倍液防蚜蟲； 3、葉面噴施1.8%阿維菌素乳油3 000倍液防紅蜘蛛。 定植前 （3月下旬－4月上旬） 地老虎 整畦后，隨水沖施50 %辛硫磷乳油100 ml殺滅地下害蟲。 生長期 （5月－7月） 白粉病、炭疽病、蚜蟲 1、葉面噴施40 %氟硅唑乳油6 000倍或10 %苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑2 000倍液防白粉?。? 2、葉面噴施50 %咪鮮胺可濕性粉劑600倍液+20 %葉枯唑可濕性粉劑600倍液防炭疽病； 3、葉面噴施10 %吡蟲啉可濕性粉劑2 000倍液防蚜蟲。 假植期 (8月) 白粉病、炭疽病 1、葉面噴施40 %氟硅唑乳油6 000倍或10 %苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑2 000倍液防白粉病 2、葉面噴施50 %咪鮮胺可濕性粉劑1 500倍液+20 %葉枯唑可濕性粉劑600倍液防炭疽病 _________________________________