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1、專題九 第1講基因工程與細胞工程
1.(2010·全國卷Ⅱ)下列敘述符合基因工程概念的是( )
A.B淋巴細胞與腫瘤細胞融合,雜交瘤細胞中含有B淋巴細胞中的抗體基因
B.將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導入大腸桿菌,獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株
C.用紫外線照射青霉菌,使其DNA發(fā)生改變,通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株
D.自然界中天然存在的噬菌體自行感染細菌后其DNA整合到細菌DNA上
解析:基因工程又叫基因拼接技術或DNA重組技術,是一種人為的操作過程。A項屬
于細胞工程;B項符合基因工程的概念;C項屬于誘變育種;D項是自然發(fā)生的,不是
人為操作的,不屬于基因工程。
答案
2、:B
2.某DNA分子中含有某限制酶的一個識別序列,用該限制酶切割該DNA分子,可能
形成的兩個DNA片段是(多選)( )
解析: 由于DNA的兩條鏈反向平行,因此讀堿基序列時,上面一條鏈從左向右讀的
話,則下面一條鏈從右向左讀;同一個限制酶切割產(chǎn)生的末端存在相同且互補序列。A
選項中兩個黏性末端的堿基序列不相同也不互補,不是同種限制酶切割產(chǎn)生的;B選項
中兩個平末端的堿基序列若連接起來:上面是GGAT,下面是ATCC,堿基序列也不同,不是同種限制酶切割產(chǎn)生的。
答案:CD
3.(2010·朝陽模擬)目前人類利用基因工程的方法成功培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,以下說法正確
3、的是( )
A.蘇云金芽孢桿菌的毒蛋白基因與質(zhì)粒結(jié)合后直接進入棉花的葉肉細胞表達
B.抗蟲基因?qū)朊藁ㄈ~肉細胞后,可通過傳粉、受精的方法,使抗蟲性狀遺傳下去
C.標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因
D.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉經(jīng)過種植,棉鈴蟲不會產(chǎn)生抗性,這樣可以有效消滅棉鈴蟲
解析:蘇云金芽孢桿菌的毒蛋白基因與質(zhì)粒結(jié)合后需用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入棉花的葉肉
細胞,不能直接進入棉花的葉肉細胞表達;棉花葉肉細胞不能進行減數(shù)分裂產(chǎn)生配
子,故抗蟲基因?qū)朊藁ㄈ~肉細胞后,可以通過組織培養(yǎng)技術,使抗蟲性狀遺傳下
去;棉鈴蟲抗性的產(chǎn)生是基因突變的結(jié)果,但抗蟲棉的自然選擇會使棉鈴蟲的抗性基
4、因頻率升高。
答案:C
4.下列關于動物細胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( )
A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞
B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變
C.二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的
D.惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)
解析:由于接觸抑制,動物細胞培養(yǎng)時只能形成單層細胞;克隆培養(yǎng)法在培養(yǎng)時,由
于所有子代細胞來自于一個親代細胞,所以基因型一般都相同;二倍體細胞的傳代培
養(yǎng)次數(shù)通常是有跟的,只有少數(shù)細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,才能無限增殖;惡性細胞系
的細胞具有癌變的特點,可進行傳代培養(yǎng)。
答案:D
5.下列有關植物體細胞雜交技術的
5、描述,不正確的是( )
A.利用植物體細胞雜交可以獲得某種多倍體植株
B.獲得原生質(zhì)體的過程中需要纖維素酶和果膠酶
C.通常用聚乙二醇或滅活病毒誘導原生質(zhì)體融合
D.可根據(jù)細胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定雜種細胞
解析:滅活病毒是誘導動物細胞融合的方法,而不能誘導植物細胞原生質(zhì)體融合。
答案:C
6.(2010·江蘇高考)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點,圖1、圖2中箭頭表示
相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題:
(1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后,分別含有________個游離的磷酸基團。
(2)若對圖中質(zhì)粒進行改造,插入的SmaⅠ酶切
6、位點越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越_______。
(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是
________________________________________________________________________。
(4)與只使用EcoRⅠ相比較,使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源
DNA的優(yōu)點在于可以防止
________________________________________________________________________。
(5)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并
7、加入________酶。
(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了
____________________________________________。
(7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因,將重組質(zhì)粒導入喪失吸收蔗糖能力
的大腸桿菌突變體,然后在____________________________的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成
目的基因表達的初步檢測。
解析:本題考查基因工程的限制性內(nèi)切酶的作用特點。
(1)質(zhì)粒切割前是雙鏈環(huán)狀DNA分子,所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵,故不含游離
的磷酸基團。從圖1可以看出,質(zhì)粒上只含有一個SmaⅠ的切點,因此被該酶切割后
8、,
質(zhì)粒變?yōu)榫€性雙鏈DNA分子,因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團,因此切割后含有
兩個游離的磷酸基團。
(2)由題目可知,SmaⅠ識別的DNA序列只有G和C,而G和C之間可以形成三個氫
鍵,A和T之間可以形成二個氫鍵,所以SmaⅠ酶切位點越多,熱穩(wěn)定性就越高。
(3)質(zhì)??股乜剐曰驗闃擞浕?,由圖2可知,標記基因和外源DNA目的基因中均
含有SmaⅠ酶切位點,都可以被SmaⅠ破壞,故不能使用該酶剪切質(zhì)粒和含有目的基因
的DNA。
(4)只使用EcoRⅠ,則質(zhì)粒和目的基因兩端的黏性末端相同,用連接酶連接時,會產(chǎn)生
質(zhì)粒和目的基因自身連接物,而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時
9、,質(zhì)粒和目的基因兩端的
黏性末端不同,用DNA連接酶連接時,不會產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物。
(5)質(zhì)粒和目的基因連接后獲得重組質(zhì)粒,該過程需要連接酶作用,故混合后加入DNA
連接酶。
(6)質(zhì)粒上的抗性基因為標記基因,用于鑒別和篩選含有重組質(zhì)粒的受體細胞。
(7)目的基因為蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因,所用的受體細胞為喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突
變體,若將重組質(zhì)粒導入了受體細胞,則受體細胞應能從培養(yǎng)基中吸收蔗糖,故應在
以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。
答案:(1)0、2 (2)高 (3)SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 (4)
質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
10、 (5)DNA連接 (6)鑒別和篩選含有目的
基因的細胞 (7)蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)
7.植物組織培養(yǎng)是克隆植物的一種方法,過程如圖所示,回答相應的問題:
(1)為了獲得脫毒植株,外植體往往取自植物的花芽、葉芽等處的分生組織,其原因
__________________。
(2)培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除添加營養(yǎng)物質(zhì)外,還需要添加植物激素,其目的是誘導外植體
____________。
(3)在生產(chǎn)實踐中為獲得大量的細胞產(chǎn)物如:紫杉醇,可將①____________放入液體培
養(yǎng)基中,經(jīng)機械作用分散成單個細胞,制備成細胞懸浮液,再經(jīng)過
___________________
11、_________即可獲得大量細胞。
(4)組織培養(yǎng)過程需要植物生長和繁殖的最適條件,否則在光學顯微鏡下可能觀察到發(fā)
生________________異常,進而使植物出現(xiàn)遺傳不穩(wěn)定甚至不育。
(5)植物組織培養(yǎng)技術不僅應用于花卉、果樹的快速、大量繁殖以及脫毒植株的獲取,
還廣泛用于____________、____________、____________等育種過程中。
解析: (1)植物的花芽、葉芽等處的分生組織病毒極少,常被用于獲得脫毒植株。
(2)植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵
性激素。
(3)植物組織培養(yǎng)過程中,要獲得細
12、胞產(chǎn)物,只需要把外植體培養(yǎng)到愈傷組織階段即
可。
(4)光學顯微鏡下可能觀察到的變異類型是染色體變異。
(5)植物組織培養(yǎng)技術廣泛應用于花卉、果樹的快速繁殖以及脫毒植株的獲取和植物體
細胞雜交育種、基因工程育種、單倍體育種等育種過程。
答案: (1)這些部位病毒極少
(2)脫分化和再分化
(3)愈傷組織 細胞分裂
(4)染色體結(jié)構與數(shù)目
(5)植物體細胞雜交育種 基因工程育種 單倍體育種
8.(2010·福建高考)紅細胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白,可用于治
療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限,目前臨床上使用的紅細胞生成素
主要來自基因
13、工程技術生產(chǎn)的重組人紅細胞生成素(rhEPO),其簡要生成流程如下圖。
請回答:
(1)圖中①所指的是__________技術。
(2)圖中②所指的物質(zhì)是__________,③所指的物質(zhì)是__________。
(3)培養(yǎng)重組CHO細胞時,為便于清除代謝產(chǎn)物,防止細胞產(chǎn)物積累對細胞自身造成危
害,應定期更換________。
(4)檢測rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的________
細胞,可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合而成。
解析:(1)可通過PCR技術來擴增DNA分子。(2)反轉(zhuǎn)錄是以mRNA為模板形成DNA
分子的,因此圖中的②是mRNA;根據(jù)圖中最終的結(jié)果是分離純化得到rhEPO,因此
③是rhEPO。(3)定期更換培養(yǎng)液,可便于清除細胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的代謝廢物。(4)單
克隆抗體是由雜交瘤細胞產(chǎn)生的。
答案:(1)PCR (2)mRNA rhEPO (3)培養(yǎng)液
(4)雜交瘤
內(nèi)容總結(jié)
(1)(2)植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵
性激素
(2)根據(jù)圖中最終的結(jié)果是分離純化得到rhEPO,因此
③是rhEPO