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1、 酶是活細胞產(chǎn)生的一類具有生物酶是活細胞產(chǎn)生的一類具有生物催化作用的催化作用的有機物有機物. .一一. .酶的概念：酶的概念：產(chǎn)生場所產(chǎn)生場所:作用部位作用部位:作作 用用:化學本質(zhì)化學本質(zhì):活細胞內(nèi)活細胞內(nèi)細胞內(nèi)或外細胞內(nèi)或外催化催化作用作用多數(shù)是蛋白質(zhì)多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是少數(shù)是RNA 作用機理作用機理: 降低化學反應的活化能降低化學反應的活化能組成單體組成單體:合成部位合成部位: 如果你是工程技術(shù)人員，你如何解決如果你是工程技術(shù)人員，你如何解決這個問題？這個問題？包埋法包埋法化學結(jié)合法化學結(jié)合法物理吸附法物理吸附法六、固定化細胞常用的載體材料六、固定化細胞常用的載體材料 ：1 1、明膠、明
2、膠2 2、瓊脂糖、瓊脂糖3 3、海藻酸鈉、海藻酸鈉4 4、醋酸纖維素、醋酸纖維素5 5、聚丙烯酰胺等、聚丙烯酰胺等共同的特點：共同的特點：是不溶于水的多孔是不溶于水的多孔性載體性載體八、固定化細胞實驗操作：八、固定化細胞實驗操作：制備固定化酵母細胞制備固定化酵母細胞1 1、酵母細胞的活化、酵母細胞的活化 2 2、配制物質(zhì)的量濃度為、配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L 0.05mol/L 的的CaClCaCl2 23 3、配制海藻酸鈉的溶液、配制海藻酸鈉的溶液4 4、海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合、海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合5 5、固定化酵母細胞、固定化酵母細胞，以便形成穩(wěn)定，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。
3、的結(jié)構(gòu)。 如何檢驗凝膠珠的質(zhì)量是否合格？如何檢驗凝膠珠的質(zhì)量是否合格？ 一、是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌一、是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有上用手擠壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。 二、是在實驗桌上用力摔打凝膠珠，如果二、是在實驗桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。是成功的。 三、三、觀察凝膠珠的顏色和形狀觀察凝膠珠的顏色和形狀原因分析：原因分析：1、如果制成的凝膠珠容易破裂？、如果制成的凝膠珠容易破裂？海藻酸鈉或
4、海藻酸鈉或CaClCaCl2 2的濃度過低的濃度過低在在CaClCaCl2 2溶液中浸泡的時間短溶液中浸泡的時間短原因分析：原因分析： 如果制作的凝膠珠顏色過淺、如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏 ，固定的酵母細胞數(shù)目固定的酵母細胞數(shù)目 ；如果形；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉的濃度偏說明海藻酸鈉的濃度偏 ，制作失，制作失敗，需要再作嘗試。敗，需要再作嘗試。（二）用固定化細胞發(fā)酵（二）用固定化細胞發(fā)酵1 1、將固定好的酵母細胞、將固定好的酵母細胞( (凝膠凝膠珠珠) )用蒸餾水沖洗用蒸餾水沖洗2-3
5、2-3次。次。 2 2、 將將150mL150mL質(zhì)量分數(shù)為質(zhì)量分數(shù)為10%10%的的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL200mL的錐形的錐形瓶中，再加入固定好的酵母細瓶中，再加入固定好的酵母細胞，置于胞，置于2525下發(fā)酵下發(fā)酵24h24h。怎樣評價這一階段成功與否？怎樣評價這一階段成功與否？發(fā)酵產(chǎn)生酒精，會聞到酒味，發(fā)酵產(chǎn)生酒精，會聞到酒味，可以看到產(chǎn)生了很多氣泡?？梢钥吹疆a(chǎn)生了很多氣泡。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液有酸味，如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液有酸味，發(fā)酵裝置密封，分析原因？發(fā)酵裝置密封，分析原因？發(fā)酵裝置漏氣，分析原因？發(fā)酵裝置漏氣，分析原因？練習：練習：1 1、下列說法不正確的是（、下列說法不正確
6、的是（ ）A A、葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成的是果糖轉(zhuǎn)化成的是果糖B B、從固定化酶反應柱下端流出的是果糖從固定化酶反應柱下端流出的是果糖C C、高果糖漿不會像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、高果糖漿不會像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病糖尿病、齲齒和心血管病D D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以從糖漿中酶溶解于葡萄糖溶液，可以從糖漿中回收回收2、制備固定化酵母細胞的過程中錯誤的、制備固定化酵母細胞的過程中錯誤的是（是（ ）A、取干酵母，加入蒸餾水，使其活化取干酵母，加入蒸餾水，使其活化B、配制海藻酸鈉時，加熱用大火，直配制海藻酸鈉時，加熱用大火，直到海藻酸鈉溶
7、化為止到海藻酸鈉溶化為止C、將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已活化的酵母細胞溫，加入已活化的酵母細胞D、將凝膠珠在將凝膠珠在Cacl2溶液中浸泡溶液中浸泡30 min左右左右3、下列敘述不正確的是（、下列敘述不正確的是（ ）A、從操作角度來考慮，固定化細胞比從操作角度來考慮，固定化細胞比固定化酶容易固定化酶容易B、固定化細胞比固定化酶對酶的活性固定化細胞比固定化酶對酶的活性影響更小影響更小C、固定化細胞固定的是一種酶固定化細胞固定的是一種酶D、將微生物的發(fā)酵過程變成連續(xù)的酶將微生物的發(fā)酵過程變成連續(xù)的酶反應應選擇固定化細胞技術(shù)反應應選擇固定化細胞技術(shù)4 4、
8、研究認為，用固定化酶技術(shù)處理污、研究認為，用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑，可以用來降解殘留在土壤中成制劑，可以用來降解殘留在土壤中的有機磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，的有機磷農(nóng)藥，與用微生物降解相比，其作用不需要適宜的（其作用不需要適宜的（ ）A A、溫度溫度 B B、PHPHC C、水分水分 D D、營養(yǎng)營養(yǎng)5.5.使用固定化細胞的優(yōu)點是使用固定化細胞的優(yōu)點是( )( )。A.A.能催化大分子物質(zhì)的水解能催化大分子物質(zhì)的水解 B.B.可催化一系列化學反應可催化一系列化學反應C.C.與反應物易接近與反應物易接近 D.D.有利于酶在細胞外發(fā)揮作用有利于酶在細胞外發(fā)揮作用6.6.酶的固定方法不包括酶的固定方法不包括( )( )。A.A.將酶吸附在固體表面上將酶吸附在固體表面上 B B將酶相互連接起來將酶相互連接起來C C將酶包埋在細微網(wǎng)格里將酶包埋在細微網(wǎng)格里 D D將酶制成固體酶制劑，如加酶洗將酶制成固體酶制劑，如加酶洗衣粉中的酶衣粉中的酶
江蘇省宿遷市馬陵中學高考生物專題復習 酵母細胞的固定化課件2
