體外受精和早期胚胎發(fā)育.ppt

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3 2體外受精和早期胚胎培養(yǎng) 學習目標 1 簡述哺乳動物體外受精技術(shù)的主要操作步驟 2 簡述哺乳動物胚胎的早期培養(yǎng)方法 一 試管動物技術(shù) 1 概念 通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精 并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后 再經(jīng)過移植產(chǎn)生后代的技術(shù)試管動物技術(shù)的三步第一步 卵子和精子的成熟和受精第二步 培養(yǎng)為早期胚胎第三步 胚胎移植 閱讀教材 思考 卵母細胞采集的方法有哪些 采集的卵母細胞都能直接和獲能的精子受精嗎 2 收集精子的方法有哪些 體外使精子獲能的方法有哪些 3 一般在什么溶液中完成受精過程 4 5 發(fā)育培養(yǎng)液的成分有哪些 胚胎早期培養(yǎng)的目的 1 教材72頁圖3 14中 卵母細胞培養(yǎng)的目的 精子離心處理的目的 培養(yǎng)成熟 至減 中期 分離精子 便于獲能處理 二 試管動物技術(shù)的過程 1 體外受精 卵母細胞的采集和培養(yǎng) 采集方法 超數(shù)排卵 用促性腺激素處理 從輸卵管中沖取卵子 注意 卵子能直接與獲能的精子在體外受精 常用對象 實驗動物如小鼠 兔 以及家畜豬 羊等 注意 要在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后 才能與精子結(jié)合完成受精 剛屠宰母畜的卵巢中取卵或活體動物卵巢中取卵 常用對象 大家畜或大型動物 如牛等 1 體外受精 精子的采集和獲能 收集的方法 獲能的方法 假陰道法 手握法 電刺激法 培養(yǎng)法 化學誘導法 如 嚙齒動物 家兔和豬等 如 牛 羊等家畜 放入人工配制的獲能液中 放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液中 卵巢 卵母細胞 新鮮或解凍的精液 卵母細胞培養(yǎng) 精子離心處理 M 期卵母細胞 精子獲能處理 獲能精子 體外受精 受精卵培養(yǎng) 在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程 受精 哺乳動物體外受精過程的示意圖 2 胚胎的早期培養(yǎng) 培養(yǎng)液成分 早期培養(yǎng)的目的 兩鹽 兩素 兩酸 血清等 檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力 牛 羊 桑椹胚或囊胚階段試管嬰兒 8 16個細胞階段 胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時 可將其取出向受體移植或冷凍保存 3 胚胎移植 不同動物胚胎移植時間不同 課內(nèi)小結(jié) 有性生殖無性生殖 核移植技術(shù) 胚胎移植 遵循不遵循 體外受精胚胎移植 比較試管動物和克隆動物 來自2個個體主要來自核供體 鞏固練習 1 下列關于試管動物技術(shù)的敘述正確的是 A 應用該技術(shù)繁育后代的過程屬于無性繁殖類型B 應用該技術(shù)繁育后代的過程屬于有性繁殖類型C 試管動物技術(shù)是利用體細胞繁育后代的技術(shù)D 試管動物技術(shù)培育動物過程全部在體外進行 B 2 哺乳動物體外受精的過程是 卵母細胞的采集 精子的采集 卵母細胞的人工培養(yǎng) 精子的獲能處理 精子與成熟的卵子在受精溶液中共同培養(yǎng) 用CaCl2處理精子 用一定濃度的肝素溶液處理卵母細胞 體外受精 受精卵培養(yǎng) B 4 胚胎工程是一項綜合性的動物繁育技術(shù) 可在畜牧業(yè)和制藥業(yè)等領域發(fā)揮重要作用 下圖是通過胚胎工程培育試管牛的過程 1 從良種母牛采集的卵母細胞 都需要進行體外培養(yǎng) 其目的是 從良種公牛采集的精子需 后才能進行受精作用 2 在體外培育受精卵時 除了給予一定量的O2以維持細胞呼吸外 還需要提供氣體以維持 3 圖中過程A稱為 它在胚胎工程中的意義在于 4 研制能夠產(chǎn)生人類白細胞介素的牛乳腺生物反應器 需將目的基因?qū)肱Ｊ芫?最常用的導入方法是 獲得轉(zhuǎn)基因母牛后 如果即說明目的基因已經(jīng)表達 使卵母細胞成熟 獲能 5 的CO2 培養(yǎng)液的pH 胚胎移植 提高優(yōu)良母畜的繁殖力 顯微注射法 牛奶中含有人類白細胞介素