高考二輪生物復(fù)習(xí) 專題八 生物技術(shù)實(shí)踐 微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用
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1、 (2011江蘇生物,3)下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述,正確的是 ()。 A腐乳制作所需要的適宜溫度最高 B果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵 C使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA第第1講微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用講微生物的利用和生物技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用一、理解能力一、理解能力1. 解析果酒制作用的是酵母菌,酵母菌發(fā)酵時(shí),最適溫度在1825 ;制果醋時(shí)用到的醋酸菌是一種好氧菌,最適生長(zhǎng)溫度為3035 ;制腐乳時(shí)主要用的菌種是毛霉,其最適溫度在1518 ;酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA,故D正確。
2、 答案D (2010北京理綜,1)在家庭中用鮮葡萄制作果酒時(shí),正確的操作是 () A讓發(fā)酵裝置接受光照 B給發(fā)酵裝置適時(shí)排氣 C向發(fā)酵裝置通入空氣 D將發(fā)酵裝置放在45 處 解析本題主要考查果酒制作的相關(guān)知識(shí)。A項(xiàng),制作果酒所使用的菌種是酵母菌,酵母菌的生長(zhǎng)與光照無(wú)直接聯(lián)系;B項(xiàng),在發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生CO2,因而要給發(fā)酵裝置適時(shí)排氣;C項(xiàng),酵母菌發(fā)酵是在無(wú)氧條件下進(jìn)行的,因而不能向裝置中通入空氣;D項(xiàng),酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在1825 。 答案B2. (2011海南生物,2)關(guān)于酵母菌的敘述,錯(cuò)誤的是()。 A酵母菌既含有核基因,又含有線粒體基因 B酵母菌無(wú)氧呼吸的終產(chǎn)物經(jīng)主動(dòng)運(yùn)輸運(yùn)
3、到細(xì)胞外 C培養(yǎng)液中酵母菌的種群數(shù)量在培養(yǎng)早期呈“J”型增長(zhǎng) D碳源充足和不充足的培養(yǎng)液中酵母菌種群的K值不同 解析酵母菌屬于真核生物,既含有核基因,線粒體中又含有質(zhì)基因;酵母菌無(wú)氧呼吸的終產(chǎn)物是CO2和酒精,兩者均通過(guò)自由擴(kuò)散運(yùn)出細(xì)胞;用培養(yǎng)液培養(yǎng)酵母菌的早期,資源和空間充足,酵母菌的種群數(shù)量呈“J”型增長(zhǎng);碳源充足的培養(yǎng)液中酵母菌種群的K值大于碳源不充足的培養(yǎng)液中酵母菌種群的K值。 答案B3. (2011課標(biāo)全國(guó)卷,39)有些細(xì)菌可分解原油,從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株。請(qǐng)回答問(wèn)題。 (1)在篩選過(guò)程中,應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以
4、_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上。從功能上講,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。 (2)純化菌種時(shí),為了得到單菌落,常采用的接種方法有兩種,即_和_。 (3)為了篩選出高效菌株,可比較單菌落周圍分解圈的大小,分解圈大說(shuō)明該菌株的降解能力_。 (4)通常情況下,在微生物培養(yǎng)過(guò)程中,實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、_和_。無(wú)菌技術(shù)要求實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈_附近進(jìn)行,以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。4. 解析(1)從受原油污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株,使用的培養(yǎng)基應(yīng)是以原油為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,通過(guò)控制碳源這種營(yíng)養(yǎng)成分,來(lái)促進(jìn)能高效降解原油的菌株的生長(zhǎng),抑制其他微生物的生長(zhǎng)。 (2)菌種純化培養(yǎng)時(shí),常采用平板
5、劃線法和稀釋涂布平板法接種。 (3)當(dāng)固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出單菌落后,可通過(guò)比較菌落周圍分解圈的大小,來(lái)判斷菌株降解原油能力的大小。一般來(lái)說(shuō),分解圈越大說(shuō)明該菌株的降解能力越強(qiáng),反之則越弱。 (4)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的過(guò)程中,常用灼燒滅菌法對(duì)接種環(huán)、接種針、試管口、瓶口等進(jìn)行滅菌;用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基、試管等進(jìn)行滅菌;用干熱滅菌法對(duì)玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等進(jìn)行滅菌。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行,因?yàn)榫凭珶艋鹧媾钥尚纬梢粋€(gè)無(wú)菌環(huán)境,可防止微生物的污染。 答案(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法 (3)強(qiáng)(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰 (2011山東理綜,34)研究發(fā)現(xiàn)柚皮精油和乳
6、酸菌素(小分子蛋白質(zhì))均有抑菌作用,兩者的提取及應(yīng)用如圖所示。 (1)柚皮易焦糊,宜采用_法提取柚皮精油,該過(guò)程得到的糊狀液體可通過(guò)_除去其中的固體雜質(zhì)。 (2)篩選乳酸菌A時(shí)可選用平板劃線法或_接種。對(duì)新配制的培養(yǎng)基滅菌時(shí)所用的設(shè)備是_。實(shí)驗(yàn)前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行_處理。 (3)培養(yǎng)基中的尿素可為乳酸菌A生長(zhǎng)提供_。電泳法純化乳酸菌素時(shí),若分離帶電荷相同的蛋白質(zhì),則其分子量越大,電泳速度_。二、獲取信息的能力二、獲取信息的能力5. (4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí),在長(zhǎng)滿致病菌的平板上,會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈。可通過(guò)測(cè)定透明圈的_來(lái)比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。 解析(1)植物芳香油的提取方法有蒸
7、餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來(lái)決定。柚皮易焦糊,宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過(guò)程中得到的糊狀液體需用過(guò)濾法除去其中固定雜質(zhì)。(2)篩選、純化培養(yǎng)某一特定微生物時(shí),常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染,需對(duì)器具、培養(yǎng)基等進(jìn)行消毒或滅菌處理,培養(yǎng)基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行高溫滅菌處理,而超凈工作臺(tái)常使用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒處理。(3)微生物培養(yǎng)過(guò)程中為微生物的生長(zhǎng)提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質(zhì)。電泳法純化特定生物成分,是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,這些不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中不
8、同分子的分離。當(dāng)待分離分子所帶電荷相同時(shí),分子量越大,電泳速度越慢。(4)抑菌實(shí)驗(yàn)時(shí),在長(zhǎng)滿致病菌的平板上,會(huì)出現(xiàn)以抑菌物質(zhì)為中心的透明圈,透明圈越大,抑菌效果越好。 答案(1)壓榨過(guò)濾(2)稀釋涂布平板法(或:稀釋混合平板法)高壓蒸汽滅菌鍋消毒(3)氮源越慢(4)直徑(或:大小) (2011浙江自選,17)楊梅是浙江省的特色水果之一,為對(duì)其進(jìn)行深加工,某廠進(jìn)行了楊梅酒和楊梅醋的研制,基本工藝流程如下:6. 請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)在制備楊梅酒過(guò)程中,為了提高楊梅的出汁率,在壓榨前可加入一定濃度的纖維素酶和_酶。甲罐頂上彎管中加水的主要目的是_。發(fā)酵一定時(shí)間后,觀察到發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有_,說(shuō)明
9、發(fā)酵基本完畢。 (2)在制備楊梅醋過(guò)程中,乙罐內(nèi)先填充經(jīng)_處理的木材刨花,然后加入含_菌的培養(yǎng)液,使該菌_在刨花上,再讓甲罐中發(fā)酵完畢的楊梅酒流入乙罐進(jìn)行楊梅醋發(fā)酵,楊梅醋的pH可通過(guò)控制楊梅酒的_來(lái)調(diào)節(jié)。 (3)若甲罐中的楊梅酒全部流經(jīng)乙罐制成楊梅醋,則乙罐中CO2的產(chǎn)生量是_。 A甲罐的2倍 B與甲罐的相等 C甲罐的一半 D幾乎為零 (4)在楊梅酒和楊梅醋發(fā)酵的整個(gè)過(guò)程中,某物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化的示意圖如右,該物質(zhì)是_。 解析(1)纖維素酶和果膠酶具有專一性,能分解細(xì)胞壁中的纖維素和果膠,破壞細(xì)胞壁,以提高出汁率;酒精發(fā)酵罐頂上彎管中加水是為了防止空氣進(jìn)入;發(fā)酵一段時(shí)間后,發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有
10、氣泡產(chǎn)生,說(shuō)明發(fā)酵基本完畢。(2)在制備楊梅醋過(guò)程中,醋酸發(fā)酵罐中填充的木材刨花要經(jīng)過(guò)滅菌,然在制備楊梅醋過(guò)程中,醋酸發(fā)酵罐中填充的木材刨花要經(jīng)過(guò)滅菌,然后加入含有醋桿菌的培養(yǎng)液,使該菌附著在刨花上,通過(guò)調(diào)節(jié)楊梅酒進(jìn)入后加入含有醋桿菌的培養(yǎng)液,使該菌附著在刨花上,通過(guò)調(diào)節(jié)楊梅酒進(jìn)入乙罐的流速來(lái)調(diào)節(jié)楊梅醋的乙罐的流速來(lái)調(diào)節(jié)楊梅醋的pH。(3)比較乙醇和醋酸的生成反應(yīng)式即可得出答案:比較乙醇和醋酸的生成反應(yīng)式即可得出答案:葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式:葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式:C6H12O62CO22C2H5OH 乙醇氧化成醋酸的反應(yīng)式: C2H5OHO2CH3COOHH2O (4)結(jié)合楊梅酒和楊梅醋
11、的發(fā)酵全過(guò)程,分析圖示曲線(先上升,后下降)可知,該物質(zhì)應(yīng)為酒精。 答案(1)果膠防止空氣進(jìn)入氣泡冒出 (2)滅菌醋桿附著流速(3)D (4)酒精 微生物的利用是選修1 生物技術(shù)實(shí)踐中最重要的專題,是考查的重點(diǎn)和熱點(diǎn),多與社會(huì)、生活實(shí)際密切聯(lián)系,通過(guò)一些新的情境或材料進(jìn)行考查。本專題考查的重點(diǎn)就是微生物的生存條件、分離、純化和實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程;特定微生物的數(shù)量測(cè)定;培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用,包括培養(yǎng)基的成分、制備等;消毒、滅菌、平板劃線法、稀釋涂布平板法等基本的操作技術(shù)等。選修1的考查難度都較低,多是識(shí)記歸納性質(zhì)的試題或是簡(jiǎn)單的拓展應(yīng)用題。 進(jìn)行本講復(fù)習(xí)應(yīng)從如下角度展開(kāi) 根據(jù)考查特點(diǎn),復(fù)習(xí)中要注
12、意重點(diǎn)回顧教材中實(shí)驗(yàn)的流程、操作要求、實(shí)驗(yàn)現(xiàn) 象、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析等方面的知識(shí),加深理解、強(qiáng)化記憶,并能夠簡(jiǎn)單地靈活運(yùn)用。專家箴言通過(guò)以上高考體驗(yàn),可以歸納總結(jié): 微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)比較 微生物的化學(xué)組成與其他生物大體相同,也是主要由C、H、O、N、P、S等元素組成,這些元素最終來(lái)自外界環(huán)境中的各種無(wú)機(jī)化合物和有機(jī)化合物,歸納為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水。四者的區(qū)別(見(jiàn)下表):更清晰考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用考試說(shuō)明考試說(shuō)明 (1)(1)微生物的分離和培養(yǎng)微生物的分離和培養(yǎng)/(2)/(2)某種微生物數(shù)量的測(cè)定某種微生物數(shù)量的測(cè)定(3)(3)培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用1營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)物
13、質(zhì)定定 義義作作 用用主要來(lái)源主要來(lái)源碳源碳源凡能提供所需凡能提供所需_的的物質(zhì)物質(zhì)構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物,有些是異一些代謝產(chǎn)物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無(wú)機(jī)化合物:無(wú)機(jī)化合物:_、NaHCO3;有機(jī)化合物:;有機(jī)化合物:_、脂肪酸、花生粉脂肪酸、花生粉餅、石油等餅、石油等氮源氮源凡能提供所需凡能提供所需_的的物質(zhì)物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、合成蛋白質(zhì)、_以以及及含氮的代謝產(chǎn)物含氮的代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)化合物:無(wú)機(jī)化合物:N2、NH3、銨、銨鹽、硝酸鹽;有機(jī)化合物:鹽、硝酸鹽;有機(jī)化合物:尿素、牛肉膏、蛋白胨等尿素、牛肉膏、蛋白胨等水水在生物體內(nèi)含量在生物體內(nèi)含量
14、很高,在低等生很高,在低等生物內(nèi)含量更高物內(nèi)含量更高不僅是優(yōu)良的溶劑,而且不僅是優(yōu)良的溶劑,而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定穩(wěn)定無(wú)機(jī)無(wú)機(jī)鹽鹽為微生物提供除為微生物提供除碳、氮以外的各碳、氮以外的各種重要元素,包種重要元素,包括大量元素和微括大量元素和微量元素量元素細(xì)胞內(nèi)的組成成分,生理細(xì)胞內(nèi)的組成成分,生理調(diào)節(jié)物質(zhì),某些化能自養(yǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì),某些化能自養(yǎng)菌的能源,酶的激活劑菌的能源,酶的激活劑碳元素碳元素CO2糖類糖類氮元素氮元素核酸核酸 2.培養(yǎng)基種類及用途(見(jiàn)下表)劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特特 點(diǎn)點(diǎn)用用 途途物理物理性質(zhì)性質(zhì)_培養(yǎng)基培養(yǎng)基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)
15、生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基加凝固劑加凝固劑,如,如瓊脂瓊脂觀察微生物觀察微生物的的_、分類、分類、鑒定鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、活菌計(jì)數(shù)、_化學(xué)化學(xué)成分成分天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明確的含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)_培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分已知的化用化學(xué)成分已知的化學(xué)物質(zhì)配成學(xué)物質(zhì)配成)分類、鑒定分類、鑒定液體液體運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)保藏菌種保藏菌種合成合成用途用途_培養(yǎng)基培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)
16、所需要的微生物的生長(zhǎng)需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物培養(yǎng)、分離出特定微生物(如如培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí),可在培養(yǎng)酵母菌和霉菌時(shí),可在培養(yǎng)基中加入青霉素;培養(yǎng)培養(yǎng)基中加入青霉素;培養(yǎng)金黃色葡萄球菌時(shí),可在培金黃色葡萄球菌時(shí),可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽)鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種種_或或化學(xué)藥化學(xué)藥品品鑒別不同種類的微生物,如鑒別不同種類的微生物,如可用伊紅可用伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌腸桿菌(若有,菌落呈深紫若有,菌落呈深紫色,并帶有金屬
17、光澤色,并帶有金屬光澤)選擇選擇指示劑指示劑 3.無(wú)菌技術(shù)(消毒和滅菌的區(qū)別)(見(jiàn)下表)項(xiàng)目項(xiàng)目消消 毒毒滅滅 菌菌條件條件使用較為使用較為_(kāi)的的理化方法理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物害的微生物(不包括不包括_)殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括括_適用適用實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣服和手實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣服和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和_等等常用常用方法方法煮沸消毒法煮沸消毒法(如在如在100 ,煮沸,煮沸56 min)、_消毒消毒法法
18、(如在如在80 ,煮,煮15 min);使用酒精、氯氣、石炭酸等;使用酒精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒灼燒滅菌、干熱滅菌灼燒滅菌、干熱滅菌、_滅菌滅菌溫和溫和芽孢和孢子芽孢和孢子芽孢和孢子芽孢和孢子培養(yǎng)基培養(yǎng)基巴氏巴氏高壓蒸汽高壓蒸汽 4.三種常用滅菌方法的比較(見(jiàn)下表)滅菌滅菌方法方法適用材料適用材料或用具或用具滅菌條件滅菌條件滅菌時(shí)間滅菌時(shí)間_滅菌滅菌接種環(huán)、接種針或其接種環(huán)、接種針或其他金屬工具他金屬工具酒精燈火焰酒精燈火焰的充分的充分燃燒燃燒層層直至燒紅直至燒紅干熱干熱滅菌滅菌玻璃玻璃器皿器皿(吸管、培養(yǎng)吸管、培養(yǎng)皿皿) 和金屬用具等和金屬用具等_內(nèi)內(nèi),160170
19、 12 h高壓蒸高壓蒸汽滅菌汽滅菌_等等100 kPa,121 1530 min干熱滅菌箱干熱滅菌箱培養(yǎng)基培養(yǎng)基灼燒灼燒 5.微生物的純化培養(yǎng)常用的兩種接種方法的比較(見(jiàn)下表)方法方法平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法注注意意事事項(xiàng)項(xiàng)(1)接種環(huán)的灼燒接種環(huán)的灼燒a第一次劃線前:殺死殘留微生物,第一次劃線前:殺死殘留微生物,避免污染菌種和培養(yǎng)基避免污染菌種和培養(yǎng)基b每次劃線前:每次劃線前: _殘留菌種,殘留菌種,保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末保證每次劃線菌種來(lái)自上次劃線末端端c劃線結(jié)束后:殺死殘留菌種,避劃線結(jié)束后:殺死殘留菌種,避免污染環(huán)境和感染操作者免污染環(huán)境和感染操作者(2
20、)灼燒接種環(huán)之后,要灼燒接種環(huán)之后,要 _后后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種菌種(3)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連域相連(4)劃線用力要大小適當(dāng),防止用力劃線用力要大小適當(dāng),防止用力過(guò)大將培養(yǎng)基劃破過(guò)大將培養(yǎng)基劃破(1)稀釋操作時(shí):每支試管及其中的稀釋操作時(shí):每支試管及其中的9 mL水、移液管等均需滅菌;操作水、移液管等均需滅菌;操作時(shí),試管口和移液管應(yīng)在離火焰時(shí),試管口和移液管應(yīng)在離火焰12 cm處處(2)涂布平板時(shí):涂布平板時(shí):a涂布器涂布器用用 _酒精消毒酒精消毒,取出時(shí),讓多余酒精在燒杯中滴盡,取出時(shí),讓多余酒精在燒杯
21、中滴盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在酒然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃精燈火焰上引燃b不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒酒精的燒杯中,以免引燃其中的酒精精c酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適,酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適,移液管管頭不要接觸任何物體移液管管頭不要接觸任何物體目的目的 獲得單細(xì)胞菌落:在培養(yǎng)基上形成的由單個(gè)菌種繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體獲得單細(xì)胞菌落:在培養(yǎng)基上形成的由單個(gè)菌種繁殖而來(lái)的子細(xì)胞群體培養(yǎng)培養(yǎng)平板冷凝平板冷凝后后 _培養(yǎng)培養(yǎng),使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),防止皿蓋,使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染上
22、水珠落入培養(yǎng)基造成污染殺死殺死70%冷卻冷卻倒置倒置 微生物的分離和計(jì)數(shù) (1)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。 測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法:統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。 過(guò)程:土壤取樣樣品的稀釋微生物的培養(yǎng)與觀察。 (2)分解纖維素的微生物的分離 實(shí)驗(yàn)原理 心堂亮 1 即:可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解菌。 流程 土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋涂布平板挑選菌落。 統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法稀釋涂布平板法(也叫活菌計(jì)數(shù)法) (1)原理 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌,通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品大約含有多少個(gè)
23、活菌。 (2)操作 設(shè)置重復(fù)組,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。將待測(cè)樣品經(jīng)一系列10倍稀釋,然后選擇三個(gè)稀釋度的菌液,分別取0.1 mL 接種到已制備好的平板上,然后用無(wú)菌涂布棒將菌液涂布整個(gè)平板表面,放在適宜的溫度下培養(yǎng),計(jì)算菌落數(shù)。為使結(jié)果接近真實(shí)值,可將同一稀釋度加到三個(gè)或三個(gè)以上的平板上,經(jīng)涂布、培養(yǎng),計(jì)算出菌落平均數(shù)。2 為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30300個(gè)的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),若設(shè)置的重復(fù)組中結(jié)果相差太遠(yuǎn),意味著操作有誤,需重新實(shí)驗(yàn)。 (3)計(jì)算公式 從自然菌樣篩選較理想的生產(chǎn)菌種的一般步驟是:采集菌樣富集培養(yǎng)純種分離性能測(cè)定。 (1)不同微生物的生存環(huán)境不同,獲得理想微生物的第一
24、步是從適合的環(huán)境采集菌樣,然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng)從_環(huán)境采集。 (2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件,使其在群落中的數(shù)量大大增加,從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇_的培養(yǎng)基,并在_條件下培養(yǎng)。 (3)下面兩圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,請(qǐng)分析接種的具體方法。強(qiáng)信心 【例例1】 獲得圖A效果的接種方法是_,獲得圖B效果的接種方法是_。 (4)配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行_,接種前要進(jìn)行_,在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中,一定要注意在_條件下進(jìn)行。 審題關(guān)鍵“嗜鹽菌”、“富
25、集培養(yǎng)”、“耐高溫淀粉酶”、“溶化后分裝前”。 命題來(lái)源純化培養(yǎng)和分離技術(shù)。 思路分析(1)嗜鹽菌就生活在高鹽環(huán)境中,如:海灘等環(huán)境。(2)耐高溫淀粉酶應(yīng)存在于以淀粉為唯一碳源且在高溫環(huán)境中生存的微生物體內(nèi)。(3)從不同菌落之間的關(guān)系可以看出,A純化微生物的接種方法是稀釋涂布平板法,B純化微生物的接種方法是平板劃線法。(4)培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)先溶化,再調(diào)整pH,滅菌。 答案(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫 (3)稀釋涂布平板法平板劃線法(4)pH調(diào)整高壓蒸汽滅菌無(wú)菌 1幾種常用發(fā)酵菌種的比較(見(jiàn)下表)更清晰考點(diǎn)二傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)考試說(shuō)明考試說(shuō)明運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本方法運(yùn)用發(fā)酵加工食品的基本
26、方法 菌種菌種 項(xiàng)目項(xiàng)目酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌生物學(xué)生物學(xué)分類分類_生物生物原核生物原核生物_生物生物原核生物原核生物代謝類型代謝類型異養(yǎng)兼異養(yǎng)兼性厭氧性厭氧_異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧_厭氧厭氧繁殖方式繁殖方式適宜條件適宜條件下出芽生殖下出芽生殖二分裂二分裂孢子生殖孢子生殖二分裂二分裂生產(chǎn)應(yīng)用生產(chǎn)應(yīng)用釀酒釀酒釀醋釀醋制作制作_制作泡菜制作泡菜發(fā)酵條件發(fā)酵條件前期需氧,前期需氧,后期不需氧后期不需氧一直需氧一直需氧一直需氧一直需氧不需氧不需氧真核真核真核真核異養(yǎng)異養(yǎng)異養(yǎng)異養(yǎng)腐乳腐乳需氧需氧 2.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌種及控制條件的比較(見(jiàn)下表) 制作內(nèi)容制作內(nèi)容比較項(xiàng)目
27、比較項(xiàng)目 果酒果酒果醋果醋腐乳腐乳泡菜泡菜菌種菌種酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌控制控制 條件條件O2的有無(wú)的有無(wú)有氧有氧有氧有氧有氧有氧無(wú)氧無(wú)氧最適溫度最適溫度1825 30_1518 常溫常溫35 3.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作過(guò)程的比較及亞硝酸鹽含量的檢測(cè)果酒和果醋制作果酒和果醋制作腐乳的制作腐乳的制作制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量量(山東考區(qū)不作要求山東考區(qū)不作要求)制制作作原原理理果酒:無(wú)氧呼吸果酒:無(wú)氧呼吸果醋:果醋:_多種微生物多種微生物發(fā)酵發(fā)酵泡菜制作:乳酸菌無(wú)氧呼泡菜制作:乳酸菌無(wú)氧呼吸;吸;亞硝酸鹽檢測(cè):在鹽酸酸化亞硝酸鹽檢測(cè):在鹽酸酸化條
28、件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,與與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料形成玫瑰紅色染料實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)流流程程圖圖挑選葡萄挑選葡萄沖洗沖洗榨汁榨汁酒精發(fā)酵酒精發(fā)酵醋酸發(fā)酵醋酸發(fā)酵果酒果酒 果醋果醋讓豆腐上長(zhǎng)讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉出毛霉加加鹽腌制鹽腌制加加鹵湯裝瓶鹵湯裝瓶密封腌制密封腌制操操作作提提示示材料的選擇與處理;防止材料的選擇與處理;防止發(fā)酵液被污染;控制好發(fā)發(fā)酵液被污染;控制好發(fā)酵條件酵條件控制好材料控制好材料的用量;防的用量;防止雜菌污染止雜菌污染泡菜壇的選擇;腌制的條泡菜壇的選擇;腌制的條件;測(cè)定亞硝酸鹽含量
29、的操件;測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作作有氧呼吸有氧呼吸 4.果酒、果醋與腐乳制作過(guò)程注意點(diǎn)的比較(見(jiàn)下表) 下面是有關(guān)食醋和泡菜制作的實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下面的問(wèn)題。 (1)食醋可用大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵來(lái)制作: 第一步:大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶,將原料中的淀粉分解成_(填中間產(chǎn)物),然后進(jìn)一步分解成葡萄糖,這一過(guò)程可用_(填淀粉指示劑)來(lái)檢測(cè),因?yàn)樵撛噭┯龅矸鄢仕{(lán)色,遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。 第二步:用_菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇,這一發(fā)酵過(guò)程中,玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是_ _。強(qiáng)信心 【例例2】 第三步:用_菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸,這一過(guò)程_氧氣。 (2)泡菜發(fā)酵過(guò)程中,會(huì)產(chǎn)生多種酸,其中主要是_,還有
30、少量的亞硝酸。對(duì)亞硝酸鹽的定量測(cè)定可以用_法,因?yàn)閬喯跛猁}與對(duì)氨基苯磺酸的反應(yīng)產(chǎn)物能與N1萘基乙二胺偶聯(lián)成_色化合物。進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí),還要取等量水進(jìn)行同樣的測(cè)定,目的是_。 審題關(guān)鍵“大米為原料”“發(fā)酵制作”。 命題來(lái)源微生物的發(fā)酵。 思路分析(1)大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶(淀粉酶必須冷卻后加入,因?yàn)槊傅拇呋钚允軠囟鹊挠绊?,大米的主要成分是淀粉,在淀粉酶催化作用下,分解成糊精(主要含麥芽糖等),這一過(guò)程可用碘液(或KII2溶液)來(lái)檢測(cè)反應(yīng)的情況。酵母菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇的過(guò)程中產(chǎn)生CO2,隨反應(yīng)的進(jìn)行發(fā)酵瓶中CO2逐漸增多,瓶?jī)?nèi)壓力升高,可能引起破裂,所以不要完全密閉。醋酸桿菌是好氧型
31、細(xì)菌,在將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸的過(guò)程中消耗氧氣;(2)泡菜發(fā)酵過(guò)程離不開(kāi)乳酸菌,其產(chǎn)生的酸主要是乳酸和少量的亞硝酸,亞硝酸鹽總量達(dá)到0.30.5 g時(shí)就會(huì)引起人中毒,必須對(duì)泡菜中亞硝酸鹽的含量進(jìn)行測(cè)定,其測(cè)定方法可用比色法。 答案(1)糊精碘液酵母發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量CO2,使瓶?jī)?nèi)壓力升高而可能引起爆裂醋酸桿需要消耗 (2)乳酸(或有機(jī)酸)(光電)比色紫紅作為對(duì)照 植物芳香油三種提取方法的比較(見(jiàn)下表)更清晰考點(diǎn)三植物有效成分的提取考試說(shuō)明考試說(shuō)明從生物材料中提取某些特定成分從生物材料中提取某些特定成分提取方法提取方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理方法步驟方法步驟適用范圍適用范圍水蒸氣水蒸氣蒸餾蒸餾利用水蒸氣將揮
32、利用水蒸氣將揮發(fā)性較發(fā)性較_的的植植物芳香油攜帶出物芳香油攜帶出來(lái)來(lái)a.水蒸氣水蒸氣蒸餾蒸餾b分離油層分離油層 c除水除水_適用于提取適用于提取_、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油油壓榨法壓榨法通過(guò)機(jī)械加壓,通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的壓榨出果皮中的芳香油芳香油a.石灰水浸泡、漂洗石灰水浸泡、漂洗b壓榨、過(guò)濾、靜置壓榨、過(guò)濾、靜置c再次過(guò)濾再次過(guò)濾適用于柑橘、適用于柑橘、_等等易焦糊原料中芳香油的提易焦糊原料中芳香油的提取取有機(jī)溶有機(jī)溶劑萃取劑萃取使芳香油溶解在使芳香油溶解在_中中,蒸發(fā)溶劑后,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油就可獲得芳香油a.粉碎、干燥粉碎、干燥b_、過(guò)濾過(guò)濾c濃縮濃縮
33、適用范圍廣,要求原料的適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充顆粒要盡可能細(xì)小,能充分溶解在有機(jī)溶劑中分溶解在有機(jī)溶劑中強(qiáng)強(qiáng)過(guò)濾過(guò)濾玫瑰油玫瑰油檸檬檸檬有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑萃取萃取 實(shí)驗(yàn)流程設(shè)計(jì) (1)玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)流程 (2)橘皮精油的提取實(shí)驗(yàn)流程 石灰水浸泡橘皮漂洗壓榨過(guò)濾靜置再次過(guò)濾橘皮油。 (3)提取胡蘿卜素的實(shí)驗(yàn)流程 胡蘿卜粉碎干燥萃取過(guò)濾濃縮胡蘿卜素。 特別提醒:三種提取方法的選用是由植物原料的特點(diǎn)決定的,三種方法的原理和操作過(guò)程不同,但都需過(guò)濾。 植物精油的提取實(shí)驗(yàn)為粗提取,可進(jìn)一步提純。 純植物精油的保質(zhì)期較長(zhǎng),通常為12年,檸檬精油揮發(fā)較快,一般三個(gè)月即可揮發(fā)完。 心堂亮
34、 生物組織中有機(jī)物的提取方法有很多種。例如,凝膠色譜法、電泳法、蒸餾法、壓榨法和萃取法等,不同的有機(jī)物提取的方法各有不同。 (1)玫瑰精油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加劑或化學(xué)原料,其提取方法主要是_。 (2)杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑,主要通過(guò)_法提取。 (3)萃取胡蘿卜素前,要將胡蘿卜徹底粉碎的主要目的是 _。 (4)血紅蛋白的提取方法可以采用_,該方法主要是利用血紅蛋白的哪一特性將它與其他物質(zhì)分開(kāi)的? _。強(qiáng)信心 【例例3】 審題關(guān)鍵“不含有任何添加劑或化學(xué)原料”、“杏仁油”、“徹底粉碎”、“血紅蛋白”。 命題來(lái)源有機(jī)物的提取方法(水蒸氣蒸餾法、壓榨法、萃取法、凝膠色譜法)。 思路分析(1)玫瑰精油不能含有任何化學(xué)原料,所以不能用萃取法,而其又具有揮發(fā)性較強(qiáng)等特點(diǎn),適于水蒸氣蒸餾法。(2)杏仁油的提取原料為種子,一般用于食用,應(yīng)采用壓榨法。(3)萃取法的萃取效率在原料相同時(shí)決定于萃取劑的性質(zhì)和使用量。(4)血紅蛋白分子的相對(duì)分子質(zhì)量的大小與成熟的紅細(xì)胞中的其他成分相差較大。 答案(1)水蒸氣蒸餾法(2)壓榨(3)使原料顆粒變小,提高萃取效率(4)凝膠色譜法相對(duì)分子質(zhì)量的大小
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