《海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取與鑒定》課件 新人教版選修1》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取與鑒定》課件 新人教版選修1(28頁珍藏版)》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、自主學(xué)習(xí)(實(shí)驗(yàn)思路)自主學(xué)習(xí)(實(shí)驗(yàn)思路) 1、DNA從哪提?。浚ㄓ檬裁捶椒ㄆ扑榧?xì)胞而從哪提???(用什么方法破碎細(xì)胞而DNA不受破壞)不受破壞) 2、怎樣將、怎樣將DNA與細(xì)胞中的其他生物大分子分離?與細(xì)胞中的其他生物大分子分離? 3、怎樣鑒定我們提取的、怎樣鑒定我們提取的DNA?一、基礎(chǔ)知識(shí)一、基礎(chǔ)知識(shí)(一)提?。ㄒ唬┨崛NADNA的方法的方法閱讀課本閱讀課本5454頁,思考:頁,思考:提取生物大分子的基本思路是什么?提取生物大分子的基本思路是什么?DNADNA主要與哪些生物大分子分離?主要與哪些生物大分子分離?方法方法1 1:根據(jù):根據(jù)DNADNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同和蛋白質(zhì)等其他成分
2、在不同濃度的濃度的NaClNaCl溶液中的溶解度不同,提取溶液中的溶解度不同,提取DNADNA結(jié)合圖,思考回答課本的問題結(jié)合圖,思考回答課本的問題 在在NaClNaCl溶液濃度小于溶液濃度小于0.14 mol/L0.14 mol/L時(shí),時(shí),DNADNA的溶的溶解度隨解度隨NaClNaCl溶液濃度的溶液濃度的增 加 而 逐 漸 降 低 ; 在增 加 而 逐 漸 降 低 ; 在0.14 mol/L0.14 mol/L時(shí),時(shí),DNADNA溶解溶解度最小;當(dāng)溶液濃度繼度最??;當(dāng)溶液濃度繼續(xù)增加時(shí),續(xù)增加時(shí),DNADNA的溶解度的溶解度又逐漸增大。又逐漸增大。當(dāng)當(dāng)NaClNaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的
3、量濃度為2 mol2 molL L時(shí),時(shí),DNADNA的溶解度最大,濃度為的溶解度最大,濃度為 0.14 mol0.14 molL L時(shí),時(shí),DNADNA的溶解度最的溶解度最低。利用這一原理,可以使低。利用這一原理,可以使DNADNA在在鹽溶液中溶解或析出鹽溶液中溶解或析出1、DNADNA在在0.14 mol0.14 molL NaClL NaCl溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)溶液中溶解度最低而蛋白質(zhì)此時(shí)的溶解度最高的特點(diǎn),可以使此時(shí)的溶解度最高的特點(diǎn),可以使DNADNA與蛋白質(zhì)分離,與蛋白質(zhì)分離,形成沉淀析出,通過過濾,得到初提取的濾出物形成沉淀析出,通過過濾,得到初提取的濾出物DNADNA。2
4、2、利用、利用DNADNA不溶于不溶于酒精酒精,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可溶于酒精的特點(diǎn),可以將精的特點(diǎn),可以將DNADNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。3 3、蛋白酶蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是對能水解蛋白質(zhì),但是對DNADNA沒有影響沒有影響4 4、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受、大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60608080C C的高溫的高溫,而,而DNADNA在在8080C C以上才會(huì)變性(蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生以上才會(huì)變性(蛋白質(zhì)變性后溶解度降低而產(chǎn)生沉淀)沉淀)5 5、洗滌劑洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜(脂質(zhì)),但對能夠瓦解細(xì)胞膜(脂質(zhì)),但對DNADNA沒有影響沒有影響(在
5、植物材料中提?。ㄔ谥参锊牧现刑崛NADNA使用)使用)(二)檢驗(yàn)原理:(二)檢驗(yàn)原理: 1 1、DNADNA遇二苯胺(沸水?。┏仕{(lán)色遇二苯胺(沸水?。┏仕{(lán)色 2 2、甲基綠與、甲基綠與DNADNA結(jié)合,呈綠色結(jié)合,呈綠色(二)破碎細(xì)胞,獲取含(二)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液的濾液(DNA釋放和溶解)釋放和溶解) 1、破碎動(dòng)物細(xì)胞的方法、破碎動(dòng)物細(xì)胞的方法2、破碎植物細(xì)胞的方法、破碎植物細(xì)胞的方法滲透吸水脹破滲透吸水脹破洗滌劑洗滌劑+食鹽攪拌研磨食鹽攪拌研磨(三)去除濾液中的雜質(zhì)(三)去除濾液中的雜質(zhì)(DNADNA的純化)的純化) 閱讀課本閱讀課本5555頁的三個(gè)方案頁的三個(gè)方案新鮮的雞血新
6、鮮的雞血 雞血細(xì)胞雞血細(xì)胞 離心離心雞血雞血細(xì)胞細(xì)胞足量的蒸餾水足量的蒸餾水玻璃棒一個(gè)方向玻璃棒一個(gè)方向快速充分?jǐn)嚢杩焖俪浞謹(jǐn)嚢杓?xì)胞細(xì)胞破裂破裂一層紗布一層紗布過濾(過濾(1)含染色質(zhì)的濾液含染色質(zhì)的濾液3、去除濾液中的雜質(zhì),獲取、去除濾液中的雜質(zhì),獲取DNA的粗提取物的粗提取物 (DNA的的純化)純化) 染色染色質(zhì)濾質(zhì)濾液液玻璃棒一個(gè)方向攪拌玻璃棒一個(gè)方向攪拌DNA溶液溶液3、去除濾液中的雜質(zhì),獲取、去除濾液中的雜質(zhì),獲取DNA的粗提取物的粗提取物 (DNA的的純化)純化) DNA溶液溶液藍(lán)色藍(lán)色無藍(lán)色無藍(lán)色1、在制備雞血細(xì)胞液的過程中,加入檸檬酸鈉的目的、在制備雞血細(xì)胞液的過程中,加入檸檬
7、酸鈉的目的是(是( ) A .防止凝血防止凝血 B. 加快加快DNA析出析出 C .加快加快DNA溶解溶解 D.加速凝血加速凝血2、DNA的溶解度最低時(shí),的溶解度最低時(shí),NaCl的物質(zhì)的量濃度為(的物質(zhì)的量濃度為( ) A . 2mol/l B. 0.1mol/l C . 0.14mol/l D. 0.015mol/l3、在向溶解、在向溶解DNA的的NaCl溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是溶液中,不斷加入蒸餾水的目的是( ) A .加快加快DNA溶解的速度溶解的速度 B. 加快溶解雜質(zhì)的速度加快溶解雜質(zhì)的速度 C .減小減小DNA的溶解度,加快的溶解度,加快DNA析出析出 D.減小雜質(zhì)的溶解度,
8、加快雜質(zhì)的析出減小雜質(zhì)的溶解度,加快雜質(zhì)的析出4、向溶有、向溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中不斷加溶液中不斷加入蒸餾水入蒸餾水,在這個(gè)過程中在這個(gè)過程中DNA的溶解度變化情況的溶解度變化情況分別是分別是 A 減小減小;減小減小 B 增大增大;增大增大 C 先減小后增大先減小后增大 D增大增大; 減小減小5、欲使溶有、欲使溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中的溶液中的DNA析出,最有效的辦法是析出,最有效的辦法是 A 加蒸餾水加蒸餾水 B 加礦泉水加礦泉水 C 加清水加清水 D 加生理鹽水加生理鹽水6、與析出、與析出DNA粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的是粘稠物有關(guān)的敘述,不正確的
9、是A 操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水,降低操作時(shí)緩慢滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度的溶解度B 操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證操作時(shí)用玻棒輕緩攪拌以保證DNA分子的完整分子的完整C 加蒸餾水可以同時(shí)降低加蒸餾水可以同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度和蛋白質(zhì)的溶解度D 當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí),當(dāng)絲狀粘稠物不再增加時(shí),NaCl溶液的濃度可溶液的濃度可以認(rèn)為是以認(rèn)為是0.14mol/L7、你能采用其他方法對、你能采用其他方法對DNA進(jìn)行鑒定嗎?進(jìn)行鑒定嗎?用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。用甲基綠染液。結(jié)果絲狀呈現(xiàn)綠色。8、DNA遇二苯胺會(huì)染成(沸水?。┯龆桨窌?huì)染成(沸水?。?A 硅紅色硅紅色 B 紅色紅色 C 紫色紫色 D 藍(lán)色藍(lán)色