2020版高考生物新金典大一輪復(fù)習(xí) 課后定時(shí)檢測(cè)案41 基因工程(含解析)新人教版.doc
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課后定時(shí)檢測(cè)案41 基因工程 基礎(chǔ)對(duì)點(diǎn)練——考綱對(duì)點(diǎn)夯基礎(chǔ) 1.下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是( ) A.人目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物 B.限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶 C.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性 D.載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá) 解析:人目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)植物或微生物,A正確;限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶,B正確;胰島素具有生物活性,胰島素原不具有生物活性,所以人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性,C正確;載體上的抗性基因是可用于篩選含重組DNA的細(xì)胞,但不能促進(jìn)目的基因的表達(dá),D錯(cuò)誤。故選D。 答案:D 2.關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法,正確的是( ) A.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作 B.蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子 C.對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)直接改造相應(yīng)的mRNA來(lái)實(shí)現(xiàn)的 D.蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是相同的 解析:由概念可知:蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因分子進(jìn)行操作,改選基因即改選蛋白質(zhì),而且可以遺傳,故A錯(cuò)誤;由概念可知:蛋白質(zhì)工程能生產(chǎn)出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子,故B正確;對(duì)蛋白質(zhì)的改造是通過(guò)直接改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)的基因來(lái)實(shí)現(xiàn)的,故C錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程的流程和天然蛋白質(zhì)合成的過(guò)程是不完全相同的,故D錯(cuò)誤。故選B。 答案:B 3.下列有關(guān)生物技術(shù)安全性和倫理問(wèn)題的觀點(diǎn),不合理的是( ) A.對(duì)于轉(zhuǎn)基因技術(shù),我們應(yīng)該趨利避害,理性看待 B.我國(guó)禁止生殖性克隆和治療性克隆 C.我國(guó)不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器,并反對(duì)其擴(kuò)散 D.對(duì)于基因檢測(cè)應(yīng)該保護(hù)個(gè)人遺傳信息隱私權(quán) 答案:B 4.在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,對(duì)DNA提取量影響較小的是( ) A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,釋放出DNA等核物質(zhì) B.?dāng)嚢钑r(shí)要用玻璃棒沿一個(gè)方向輕緩攪動(dòng) C.在析出DNA黏稠物時(shí),要緩緩加入蒸餾水,直至黏稠物不再增多 D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻 解析:A項(xiàng)的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子,使進(jìn)入濾液中的DNA盡量的多;C項(xiàng)是讓DNA充分沉淀,保證DNA的量;D項(xiàng)的道理同C項(xiàng);而B(niǎo)項(xiàng)的操作并不能使DNA增多或減少。 答案:B 提能強(qiáng)化練——考點(diǎn)強(qiáng)化重能力 5.[經(jīng)典高考]北極比目魚(yú)中有抗凍基因,其編碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,該序列重復(fù)次數(shù)越多,抗凍能力越強(qiáng),下圖是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過(guò)程示意圖,有關(guān)敘述正確的是( ) A.過(guò)程①獲取的目的基因,可用于基因工程和比目魚(yú)基因組測(cè)序 B.將多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成能表達(dá)的新基因,不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白 C.過(guò)程②構(gòu)成的重組質(zhì)粒缺乏標(biāo)記基因,需要轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌才能進(jìn)行篩選 D.應(yīng)用DNA探針技術(shù),可以檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達(dá) 解析:過(guò)程①獲得的目的基因已不含非編碼區(qū)和內(nèi)含子,因此不能用于比目魚(yú)基因組測(cè)序,A錯(cuò)誤;多個(gè)抗凍基因編碼區(qū)依次相連形成的新基因表達(dá)的是多個(gè)抗凍蛋白的重復(fù)序列,而不是抗凍蛋白中11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列,因此不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白,B正確;導(dǎo)入農(nóng)桿菌是為了擴(kuò)增和更易導(dǎo)入番茄細(xì)胞,C錯(cuò)誤;DNA探針技術(shù)不能檢測(cè)基因是否完全表達(dá),目的基因的完全表達(dá)應(yīng)該檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì),D錯(cuò)誤。 答案:B 6.如圖為某種質(zhì)粒的簡(jiǎn)圖,小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn),P為轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點(diǎn),受體細(xì)胞為無(wú)任何抗藥性的原核細(xì)胞。下列有關(guān)敘述,正確的是( ) A.將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切,在DNA連接酶作用下,生成由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種 B.DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來(lái),形成一個(gè)重組質(zhì)粒時(shí)形成兩個(gè)磷酸二酯鍵 C.為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自行環(huán)化,酶切時(shí)可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ D.能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細(xì)胞 解析:DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來(lái),因此將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切,在DNA連接酶作用下,生成由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有3種,即質(zhì)粒與質(zhì)粒連接、目的基因與目的基因連接、目的基因與質(zhì)粒連接,A錯(cuò)誤;DNA連接酶的作用是將酶切后得到的具有相同末端的DNA片斷連接起來(lái),形成一個(gè)重組質(zhì)粒時(shí)形成4個(gè)磷酸二酯鍵,B錯(cuò)誤;EcoRⅠ和BamHⅠ切割形成的黏性末端不同,而DNA連接酶只能將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來(lái),因此為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自行環(huán)化,酶切時(shí)可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ,C正確;導(dǎo)入普通質(zhì)粒的大腸桿菌和導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌都能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng),因此能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的受體細(xì)胞不一定含有目的基因,D錯(cuò)誤。故選C。 答案:C 7.2018年1月30日,加拿大食品檢驗(yàn)局批準(zhǔn)了第三種耐褐變轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果品種上市。研究人員通過(guò)RNA沉默技術(shù),特異性降低蘋(píng)果細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)水平,使蘋(píng)果被切開(kāi)后即使長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中也不會(huì)被氧化褐變。如圖是此過(guò)程原理示意圖,下列有關(guān)的敘述錯(cuò)誤的是( ) A.細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)包括圖示中的①②過(guò)程 B.將目的基因成功導(dǎo)入蘋(píng)果細(xì)胞中需限制酶、DNA連接酶和RNA聚合酶 C.“RNA沉默”的含義是mRNA不能翻譯產(chǎn)生多酚氧化酶 D.目的基因的表達(dá)序列與多酚氧化酶基因的表達(dá)序列互補(bǔ),且要同時(shí)在同一細(xì)胞內(nèi)表達(dá) 解析:圖示中的①②過(guò)程分別為轉(zhuǎn)錄、翻譯,多酚氧化酶基因的表達(dá)指多酚氧化酶基因控制多酚氧化酶合成的過(guò)程,需要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯兩個(gè)過(guò)程,A項(xiàng)正確;將目的基因成功導(dǎo)入蘋(píng)果細(xì)胞中需要構(gòu)建基因表達(dá)載體,該過(guò)程需要限制酶、DNA連接酶,不需要RNA聚合酶,B項(xiàng)錯(cuò)誤;據(jù)圖可知,目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA可以和多酚氧化酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA互補(bǔ)配對(duì),形成RNA雙鏈,使mRNA不能與核糖體結(jié)合,從而阻止了翻譯過(guò)程,C項(xiàng)正確;使目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA和多酚氧化酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA互補(bǔ)配對(duì),應(yīng)使目的基因的表達(dá)序列與多酚氧化酶基因的表達(dá)序列互補(bǔ),且要同時(shí)在同一細(xì)胞內(nèi)表達(dá),D項(xiàng)正確。 答案:B 大題沖關(guān)練——綜合創(chuàng)新求突破 8.干旱是影響植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要因素,脫落酸(ABA)在植物應(yīng)對(duì)干旱逆境方面發(fā)揮重要的作用。科學(xué)家從堿蓬細(xì)胞克隆出ABA基因(圖甲),將其與質(zhì)粒(圖乙)重組,再轉(zhuǎn)入水稻植株內(nèi)。分析并回答問(wèn)題: (1)對(duì)獲取的ABA基因常用________技術(shù)來(lái)擴(kuò)增數(shù)量,該過(guò)程需要DNA模板、________、________和________等物質(zhì)。 (2)據(jù)圖分析,構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中,需要________酶處理ABA基因和質(zhì)粒。常用________法將目的基因?qū)胨居鷤M織的細(xì)胞中。要將成功導(dǎo)入ABA基因并表達(dá)的水稻愈傷組織細(xì)胞篩選出來(lái)需________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析:(1)對(duì)目的基因可用PCR技術(shù)進(jìn)行體外擴(kuò)增;該技術(shù)所用原理是DNA復(fù)制,因此該過(guò)程需要條件有:DNA模板、原料(四種脫氧核苷酸)、酶(Taq酶)、引物等。(2)根據(jù)甲圖和乙圖可知,目的基因所在DNA片段和運(yùn)載體質(zhì)粒上都有共同的限制酶切點(diǎn),可用EcoRⅠ分別處理ABA基因和質(zhì)粒,再用DNA連接酶連接獲得重組質(zhì)粒;用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨居鷤M織的細(xì)胞中。根據(jù)重組質(zhì)粒中所含標(biāo)記基因進(jìn)行篩選,即在愈傷組織細(xì)胞的培養(yǎng)基上添加一定濃度的青霉素,能存活的細(xì)胞即是成功導(dǎo)入ABA基因并表達(dá)的細(xì)胞。 答案:(1)PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)) 四種脫氧核苷酸 Taq酶(耐高溫的DNA聚合酶) 引物 (2)EcoRⅠ 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 在愈傷組織細(xì)胞的培養(yǎng)基上添加一定濃度的青霉素,能存活的細(xì)胞即是成功導(dǎo)入ABA基因并表達(dá)的細(xì)胞 9.[2019湖南長(zhǎng)郡月考]菊天牛是菊花的主要害蟲(chóng)之一??蒲腥藛T將抗蟲(chóng)基因轉(zhuǎn)入菊花,培育出抗蟲(chóng)菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題: (注:卡那霉素抗性基因KanR為標(biāo)記基因,菊花葉片對(duì)卡那霉素高度敏感) (1)質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,其化學(xué)本質(zhì)是________________。 (2)限制酶M和N切割后產(chǎn)生的相同黏性末端是______,連接它們所需要的基本工具是________。 (3)為了促進(jìn)對(duì)重組質(zhì)粒的吸收,可用________處理土壤農(nóng)桿菌,使其處于感受態(tài)。 (4)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及________的固體培養(yǎng)基中,在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng),篩選轉(zhuǎn)基因菊花。 (5)用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時(shí),需根據(jù)抗蟲(chóng)基因(目的基因)兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)特異引物,若其中一種引物共用了31個(gè),則目的基因最多擴(kuò)增了________次。 (6)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲(chóng),實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。請(qǐng)據(jù)表回答: 組別 處理 菊天牛死亡率(%) 實(shí)驗(yàn)組 飼喂轉(zhuǎn)基因菊花植株的嫩莖及葉片與人工飼料混合物 53.33 對(duì)照組 13.33 ①對(duì)照組應(yīng)飼喂______________與人工飼料混合物。 ②實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示______________差異顯著,說(shuō)明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的毒殺作用。 解析:(1)質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,是基因工程采用的運(yùn)載體。(2)根據(jù)圖示限制酶M和N的識(shí)別序列可知,它們切割產(chǎn)生的黏性末端都是GATC(CTAG);DNA連接酶能將具有相同黏性末端的DNA片段連接形成重組DNA分子。(3)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞(農(nóng)桿菌)時(shí),常采用感受態(tài)細(xì)胞法,即用Ca2+(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌細(xì)胞,使其處于易于吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。(4)由圖可知,標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基來(lái)篩選轉(zhuǎn)基因菊花。(5)用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時(shí),需根據(jù)抗蟲(chóng)基因(目的基因)兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)特異引物,假設(shè)目的基因擴(kuò)增了n次,則需要引物的對(duì)數(shù)為2n-1,已知其中一種引物共用了31個(gè),則2n-1=31,n=5。 (6)①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循對(duì)照原則和單一變量原則,本實(shí)驗(yàn)的目的是探究轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲(chóng)的作用,可見(jiàn)自變量為是否加入轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片,因此對(duì)照組應(yīng)飼喂等量的非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物。 ②據(jù)表分析,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組菊天牛死亡率差異顯著,說(shuō)明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的毒殺作用。 答案:(1)環(huán)狀DNA (2)GATC DNA連接酶 (3)氯化鈣溶液(Ca2+) (4)卡那霉素 (5)5 (6)等量非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組菊天牛死亡率 10.[2019江西新余模擬]科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因與pBR322質(zhì)粒進(jìn)行重組,得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵,使其發(fā)育為轉(zhuǎn)基因牛,再通過(guò)細(xì)胞工程培育為轉(zhuǎn)基因克隆牛。pBR322質(zhì)粒含有兩個(gè)抗生素抗性基因和5個(gè)限制酶切點(diǎn)(如圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題。 (1)圖1中顯示的人的生長(zhǎng)激素基因是通過(guò)人工合成的,圖中①過(guò)程需要的酶是________。該過(guò)程所依據(jù)的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則是__________________________(用字母和箭頭表示)。 (2)圖1中的mRNA是從人體的____________細(xì)胞中獲取。 (3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選,方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,通過(guò)含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察大腸桿菌的生長(zhǎng)、繁殖情況進(jìn)行判斷,如圖3所示: ①如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,而不能在培養(yǎng)基B上生長(zhǎng)、繁殖,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的__________________,即目的基因插入了____________________中。 ②如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,而在培養(yǎng)基B上能生長(zhǎng)、繁殖,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________,即目的基因插入了______________中。 ③如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長(zhǎng)、繁殖形成菌落,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的____________。 解析:(1)根據(jù)圖1分析,目的基因是通過(guò)mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化;RNA中的堿基是A、U、C、G,DNA中的堿基是A、T、C、G,所以配對(duì)方式是A→T、U→A、G→C、C→G。(2)根據(jù)題意,生長(zhǎng)激素基因是目的基因,該基因表達(dá)產(chǎn)物由垂體細(xì)胞分泌,所以需要從垂體細(xì)胞中提取相應(yīng)的mRNA。(3)①根據(jù)題意,受體菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存,不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存,所以限制酶切點(diǎn)位于抗四環(huán)素基因內(nèi)部,由圖可知,是切點(diǎn)3、4、5。②根據(jù)題意,受體菌不能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存,能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存,所以限制酶切點(diǎn)位于抗氨芐青霉素基因內(nèi)部,由圖可知,是切點(diǎn)1。③根據(jù)題意,受體菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存,也能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存,所以這兩個(gè)基因都沒(méi)有被破壞,由圖可知,是切點(diǎn)2。 答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄酶 A→T U→A G→C C→G (2)垂體 (3)①切點(diǎn)3或切點(diǎn)4或切點(diǎn)5 抗四環(huán)素基因?、谇悬c(diǎn)1 抗氨芐青霉素基因 ③切點(diǎn)2 11.大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體,某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中,如果沒(méi)有插入外源基因,LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí),Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落,反之,則形成白色菌落。如圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程。 (1)已獲得的目的基因可利用________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。 (2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中,需要DNA連接酶恢復(fù)________鍵。 (3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是__________________;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,目的是________________________________________________。 (4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如________和生長(zhǎng)因子,還應(yīng)加入IPTG、Xgal以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________________________________。 (5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)________色菌落,則說(shuō)明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利于重組質(zhì)粒的篩選,原因是______________________________________________。 解析:(1)PCR技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因,所以已獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。(2)DNA連接能將雙鏈DNA片斷“縫合”起來(lái),恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的磷酸二酯鍵。(3)試管Ⅰ中含有重組質(zhì)粒,將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是使目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞(大腸桿菌)內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá),即進(jìn)行轉(zhuǎn)化;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,增大細(xì)胞壁的通透性,使之處于易于吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。(4)培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水和生長(zhǎng)因子,由于是選擇培養(yǎng)基,還應(yīng)加入IPTG、Xgal以及氨芐青霉素;由于質(zhì)粒上含有氨芐青霉素抗性基因,因此導(dǎo)入質(zhì)粒的大腸桿菌能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),所以培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌。(5)分析題圖:大腸桿菌pUC18質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因和LacZ基因,由于限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中,所以構(gòu)建成功的重組質(zhì)粒上的LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β半乳糖苷酶,若大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,則其在含有IPTG和Xgal的培養(yǎng)基中形成白色菌落。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則無(wú)論大腸桿菌中是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,都會(huì)表達(dá)出β半乳糖苷酶,故均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落。 答案:(1)PCR (2)磷酸二酯 (3)進(jìn)行轉(zhuǎn)化 使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài) (4)碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水 導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌 (5)白 無(wú)論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問(wèn)題本站不予受理。
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