《生物化學實驗》教學大綱(共5頁)

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1、精選優(yōu)質文檔-----傾情為你奉上 《生物化學實驗》課程教學大綱 一、課程基本情況 課程名稱（中文）：生物化學實驗 課程名稱（英文）：Biochemical experiment 課程代碼： 學 分：0.5 總 學 時：24 理論學時： 實驗學時；24 課程性質：學科專業(yè)基礎課 適用專業(yè)：園藝 適用對象：本科 先修課程：生物化學 考核方式：實際操作占20％、實驗報告占50％、技能考核占30％ 教學環(huán)境：實驗室 開課學院：生態(tài)技術與工程學院 （一）課程簡介： 生物化學實驗課程是生命科學教學中重要的基礎課，主要圍繞生物體的組成成分如：蛋白質，核酸，

2、酶等生物大分子的基本性質等方面入手，幫助學生掌握生物化學的基本實驗方法和技能，包括層析、比色、電泳、生化物質的分離、制備、分析和鑒定及實驗方法、操作技術和一些基本儀器的原理和使用，培養(yǎng)學生基本實驗技能，提高綜合分析問題的能力。 （二）實驗目的和要求： 通過本課程的教學使學生了解和掌握現(xiàn)代生物科學研究對本課程的需求，了解生物化學技術的基本原理、方法和技能，包括生物物質的性質鑒定、含量測定、生化分離技術的分離原理（包括鹽析、等電點分離技術、電泳技術、色譜技術等）。通過學生的獨立實驗設計和實踐，訓練學生分析問題和解決問題的能力及實際動手能力，同時培養(yǎng)學生的創(chuàng)新思維及對生命科學探索的興趣和愛好

3、。 要求學生課前預習，寫好預習報告，實驗過程中仔細觀察，認真記錄，課后做實驗報告。 （三）實驗項目列表： 實驗編號 實驗項目名稱 實驗類型 實驗學時 要求 實驗一 生物化學實驗基本知識 蛋白質及氨基酸的呈色反應 驗證 2 必開 實驗二 蛋白質等電點測定和沉淀反應 設計性 3 必開 實驗三 紙層析法分離鑒定氨基酸 綜合性 3 必開 實驗四 醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白 綜合性 3 必開 實驗五 蛋白質的定量測定（紫外分光法） 綜合性 3 必開 實驗六 總氮量的測定-微量凱氏定氮法 綜合性 3 必開 實驗七 酵母R

4、NA的分離及組分鑒定 綜合性 3 必開 實驗八 菜花中核酸的分離和鑒定 設計性 4 必開 實驗九 酶的特性 綜 合性 2 必開 實驗十 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較 三性 4 必開 實驗十一 維生素C的提取及定量測定 綜合性 4 必開 實驗一 生物化學實驗基本知識 蛋白質及氨基酸的呈色反應 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 1 了解實驗室規(guī)則和常用生化儀器名稱，掌握實驗記錄與實驗報告的寫法以及實驗室一些基本知識，掌握緩沖溶液的配制方法，初步掌握一些儀器的正確操作。 2 掌握鑒定蛋白

5、質的原理和方法。 （三）實驗內容： 蛋白質和氨基酸與一些顯色劑反應呈現(xiàn)一定的顏色反應。 （四）要 求： 通過實驗了解蛋白質的一些顏色反應，掌握鑒定蛋白質的方法。 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗二 蛋白質等電點測定和沉淀反應 學時：3 （一）實驗類型：設計性 （二）實驗目的： 1 熟悉蛋白質的沉淀反應。 2 進一步掌握蛋白質的有關性質 3 了解蛋白質的兩性解離性質。 4 學習測定蛋白質等電點的一種方法。 （三）實驗內容： 蛋白質的沉淀和變性，蛋白質的等電點

6、的測定 （四）要 求： 了解各種沉淀試劑使蛋白質沉淀的實質和區(qū)分可逆的鹽析沉淀及不可逆的沉淀作用。掌握測定蛋白質等電點的方法。 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗三 紙層析法分離鑒定氨基酸 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 了解并掌握氨基酸紙層析的原理和方法 （三）實驗內容： 以濾紙為支持物，樣品在不同溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)不同，將各種氨基酸分離，并用茚三酮染色，分析計算移動速率，鑒定氨基酸的種類。 （四）要 求： 掌握氨基酸紙層析的實驗原理，并鑒定混合液中的氨基酸

7、組分。 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗四 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 掌握醋酸纖維薄膜電泳法分離蛋白質的原理和方法，了解電泳技術的一般原理 （三）實驗內容： 以醋酸纖維薄膜為支持物進行電泳，血清中各種蛋白質在電場中移動速率不同，可利用電泳法將它們分離。 （四）要 求： 掌握電泳分離血清蛋白質的方法 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗五 蛋白質的

8、定量測定（紫外吸收法） 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 了解紫外吸收法測定蛋白質濃度的原理 熟悉紫外分光光度計的使用 （三）實驗內容： 本實驗根據蛋白質組成中芳香族的氨基酸在紫外光280nm波長處有最大吸收峰，一定濃度范圍內其濃度與吸光度成正比，用紫外分光光度計通過比色法繪制標準曲線，測定溶液中蛋白質的濃度。 （四）要 求： 掌握蛋白質的定量測定的方法，掌握紫外分光光度計的使用方法 （五）每組人數(shù)：4人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：T6紫外可見分光光度計 2套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗六 總氮量的測定-微量凱氏定

9、氮法 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 掌握凱氏定氮法測定蛋白質含量的原理和方法 學會使用凱氏定氮儀 （三）實驗內容： 用凱氏定氮法測定樣品中蛋白氮的含量，并進一步求得樣品中蛋白質的含量。 （四）要 求： 掌握凱氏定氮儀的使用方法，學會測定蛋白質含量的一種方法。 （五）每組人數(shù)：4人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：凱氏定氮儀 6套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗七 酵母RNA的分離及組分鑒定 學時： 3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 了解核酸的組分，并掌握鑒定核酸和測定RNA含量的方法 （三）實驗內容： 酵

10、母核酸中RNA含量較多，在堿提取液中加入酸性乙醇溶液可以使核糖核酸沉淀，得到RNA粗制品，繼而用苔黑酚法測定RNA 的含量 （四）要 求： 掌握稀堿法提取酵母RNA 的方法，掌握用苔黑酚法測定RNA含量的方法。 （五）每組人數(shù)：4人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：TDZ5-WS臺式離心機 2套 T6紫外分光光度計 2套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗八 菜花中核酸的分離和鑒定 學時： 3 （一）實驗類型：設計性 （二）實驗目的： 學習和掌握從菜花中分離核酸的原理和操作技術 （三）實驗內容： 用

11、冰冷的稀三氯醋酸和稀高氯酸溶液在低溫下抽提菜花勻漿，以除去酸溶性小分子，再用有機溶劑抽提去掉脂溶性物質，最后用濃鹽溶液和高氯酸分別提取DNA和RNA，再進行定性和定量測定。 （四）要 求： 自行設計實驗并掌握從組織中分離核酸的方法，并能進行定性定量測定。 （五）每組人數(shù)：4人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：TDZ5-WS臺式離心機 2臺 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗九 唾液淀粉酶的性質 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 了解溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響 學習測定酶的最適溫度、最適pH的方法 （三）實驗內容：

12、 本實驗以唾液淀粉酶對淀粉及蔗糖的催化作用,觀察酶的專一性.以淀粉及蔗糖的酶水解產物與Benedict試劑的顏色反應觀察淀粉酶,蔗糖酶的專一性.由于有些物質可作為激活劑，能提高酶活性，有些物質可作為抑制劑，能降低酶活性，也能影響淀粉被水解的程度。因此，通過與碘產生的顏色反應判斷淀粉被水解的程度，了解激活劑和抑制劑對酶促作用的影響。 （四）要 求： 掌握酶的專一性，及溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗十 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較 學時：3 （一）實驗類型

13、：設計性 （二）實驗目的： 學習測定淀粉酶活力的方法 了解小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的變化 （三）實驗內容： 小麥發(fā)芽→酶液提取→酶活力測定→酶活力計算 （四）要 求： 自行設計實驗測定小麥萌發(fā)前后淀粉酶的活力 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 實驗十一 維生素C的提取及定量測定 學時：3 （一）實驗類型：綜合性 （二）實驗目的： 掌握2,6-二氯酚靛酚法測定維生素C的原理和方法 （三）實驗內容： 從新鮮果蔬中提取維生素C，通過2,6-二氯酚靛酚法滴定法結合公式計算維生素C 的含量。  （四）要 求： 掌握提取維生素C的方法及其鑒定其含量的方法 （五）每組人數(shù)：1人 （六）主要儀器設備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套 （七）所屬實驗室：生物化學實驗室 專心---專注---專業(yè)