【基金標書】2011CB505300-基于“十八反”的中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究

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項目名稱： 基于“十八反”的中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究首席科學家： 段金廒 南京中醫(yī)藥大學起止年限： 2011.1至 2015.8依托部門： 國家中醫(yī)藥管理局 江蘇省科技廳二、預期目標（一）總體目標依據(jù)中醫(yī)藥配伍理論，以“十八反” 為研究對象，圍繞科學假說，創(chuàng)建基于藥物相互作用的客觀表征中藥配伍禁忌量-毒-時-效關(guān)系的研究模式、方法和技術(shù)體系；回答反與不反、為什么反、怎么反的關(guān)鍵科學問題；闡明臨床應(yīng)用反藥配伍與妨害治療的效應(yīng)機制及其理論基礎(chǔ)；揭示含有反藥配伍組合的代表性方劑的宜忌條件和配伍關(guān)系；集成古今文獻與實驗研究成果，豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論體系。最終目標是通過中藥“ 十八反 ”配伍關(guān)系及其科學實質(zhì)的系統(tǒng)研究，形成一個有結(jié)論性的、能夠指導臨床實踐的、具有理論性的研究成果。為我國中藥配伍禁忌和藥物安全性研究提供示范，為臨床安全用藥提供指導，為制定我國中醫(yī)臨床用藥配伍禁忌指南和安全用藥指導原則奠定基礎(chǔ)，豐富和發(fā)展中醫(yī)藥配伍理論，服務(wù)于經(jīng)濟社會發(fā)展和人口健康需求做出應(yīng)有的貢獻。（二）五年預期目標1、完成中藥“ 十八反” 烏頭組、甘草組、藜蘆組的系統(tǒng)毒性評價研究，明確回答各反藥組合反與不反的問題；2、完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)及機理研究，明確其配伍致毒/增毒的化學實質(zhì)及生物學基礎(chǔ)；3、完成烏頭組、甘草組、藜蘆組的各反藥配伍致毒/增毒的多組分毒代動力學及其體內(nèi)過程研究，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律； 4、確定中藥“ 十八反” 烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥配伍組合的人體等效性毒效劑量范圍； 5、創(chuàng)建基于藥物相互作用的客觀表征中藥配伍禁忌量-毒-時-效關(guān)系的研究模式、方法和技術(shù)體系；6、闡明中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機制與理論基礎(chǔ)；7、揭示含反藥配伍組合及代表性方劑的宜忌條件和配伍關(guān)系；8、完善中藥配伍禁忌理論，豐富和發(fā)展中藥配伍理論體系；9、培養(yǎng)中藥配伍禁忌與藥物相互作用研究的學術(shù)創(chuàng)新團隊；培養(yǎng)博士后 7-9 名，博士研究生 20-28 名，碩士研究生 50-60 名， ；10、國內(nèi)外學術(shù)核心期刊發(fā)表論文 110-130 篇，其中 SCI 收錄 20-30 篇；申請國家發(fā)明專利 3-5 項；出版相關(guān)專著 1-2 部。三、研究方案（一）學術(shù)思路本項目組認為：中藥“ 十八反 ”是基于中醫(yī)臨床長期實踐的經(jīng)驗總結(jié)形成的中藥配伍禁忌代表性內(nèi)核，反藥配伍其藥性與功效的相反是“十八反” 的核心內(nèi)容，表現(xiàn)出物質(zhì)的、效應(yīng)的選擇性臟腑歸屬特征和量-毒-時-效關(guān)系。 “十八反” 是有條件的、動態(tài)的配伍禁忌，這是有別于西藥禁忌的一個重要特點，即在特定的病理條件、特定的配伍關(guān)系和特定的給藥方式下， “十八反” 中藥能有限利用。因此對“十八反 ”反與不反的客觀界定、配伍禁忌的內(nèi)在規(guī)律，以及轉(zhuǎn)化條件成為“十八反”基礎(chǔ)研究的關(guān)鍵科學問題，并依此形成本項目的科學假說。項目總體研究思路的特色在于：以海量古今信息數(shù)據(jù)挖掘為支撐，集成藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量-毒-時-效關(guān)系的研究模式。揭示“十八反” 配伍毒效表征及其機理；闡明中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機制與理論基礎(chǔ)；基于臨床從反藥組合及其方劑不同層面揭示宜忌條件及配伍關(guān)系。從而對科學假說進行驗證，揭示其科學內(nèi)涵，提煉形成創(chuàng)新知識和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。（二）子課題設(shè)置思路圍繞“十八反 ”配伍關(guān)系研究的關(guān)鍵科學問題，在中醫(yī)藥理論指導下，創(chuàng)建客觀適宜的研究模式：從古今中醫(yī)藥信息資源中挖掘 以“十八反”為代表的中藥配伍禁忌的配伍關(guān)系特點和毒性反應(yīng)等科學內(nèi)涵；針對其致毒、增毒特點，集成毒理學、化學、藥效學、毒代動力學、生物信息學等多學科方法，揭示“十八反”烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥組合的毒效表征及其機理；從妨害治療的角度評價“十八反 ”組合影響藥效的特點，從反藥配伍組合及方劑配伍角度分析反藥配伍應(yīng)用的宜忌條件及配伍關(guān)系。圍繞項目總體目標，緊扣擬解決的關(guān)鍵科學問題，設(shè)立了環(huán)環(huán)相扣的 6 個研究課題，集成各課題組在中藥配伍禁忌領(lǐng)域的特色優(yōu)勢開展相關(guān)研究。19課 題 一 中 藥 “十 八 反 ”宜 忌 條 件 與轉(zhuǎn) 化 研 究中 藥 “十 八 反 ”配 伍 減 效的 基 礎(chǔ) 研 究基 于 十 八 反 的 中 藥 配 伍 禁 忌數(shù) 據(jù) 挖 掘 與 知 識 發(fā) 現(xiàn) 研 究“半 蔞 貝 蘞及 攻 烏 ”配伍 關(guān) 系 與毒 效 表 征課 題 二 “藻 戟 遂 芫俱 戰(zhàn) 草 ”配伍 關(guān) 系 與毒 效 表 征 課 題 四課 題 三 ”諸 參 辛 芍叛 藜 蘆 “配伍 關(guān) 系 與毒 效 表 征課 題 五 課 題 六致 毒 增 毒致 毒 增 毒反 藥 配 伍彼 我 交 讎配 伍 減 效配 伍 減 效反 藥 配 伍相 反 相 制 宜 忌 轉(zhuǎn) 化宜 忌 轉(zhuǎn) 化反 藥 配 伍相 激 相 成中 藥 “十 八 反 ”可行性分析1、研究思路可行在中醫(yī)藥理論指導下，以海量古今信息數(shù)據(jù)挖掘為支撐，以現(xiàn)代研究方法揭示“十八反”毒效表征及其機理、妨害治療的減效機制與理論基礎(chǔ)，臨床宜忌條件及配伍關(guān)系，從而對科學假 說進行驗證。2、技術(shù)方法可行本項目集成藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥 配伍禁忌量-毒-時-效關(guān)系的研究模式，以揭示“ 十八反”配伍毒效表征及其機理，闡明其科學內(nèi)涵。所采用的研究方法和技 術(shù)具有相關(guān)研究積累，其方法和技術(shù) 可行性強。3、團隊合理的知識結(jié)構(gòu)和相關(guān)積累是實現(xiàn)項目預期目標的根本保證項目組整合了我國在中藥“十八反” 相關(guān)領(lǐng)域具有深厚 積累的學術(shù)團隊，在相關(guān)研究積累中形成了集傳統(tǒng)中醫(yī)與臨床中藥，化學研究與毒效評價、信息科學與生物技術(shù)相結(jié)合、知識結(jié)構(gòu)合理是項目高質(zhì)量完成的根本保證。4、研究團隊具有良好的硬軟件條件是實現(xiàn)預期目標的有力支撐項目承擔單位擁有國家級、省部級重點實驗室、重點學科、 創(chuàng)新工程中心等，具備良好條件和完備的儀器設(shè)施，保障項目的高質(zhì)量完成。創(chuàng)新點在中醫(yī)藥理論指導下，基于前期研究工作積累，采用多學科交叉技術(shù)和手段，開展“十八反 ”的系統(tǒng)研究，揭示其科學實質(zhì)，促進中藥配伍理論的豐富與發(fā)展。1、研究思路創(chuàng)新 （1）以古今信息數(shù)據(jù)挖掘為支撐，集成藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物 質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，創(chuàng)建客觀表征中藥配伍禁忌量-毒-時-效關(guān)系的研究模式。（2）通過對“十八反 ”三組反 藥組合配伍關(guān)系的系統(tǒng) 研究，客觀界定各反藥組合反與不反，明確配伍致毒/增毒的化學實質(zhì)及生物學基 礎(chǔ)，闡明反藥配伍的相互作用規(guī)律，揭示基于“十八反”的中藥配伍禁忌科學內(nèi)涵，提煉形成創(chuàng)新知識和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。2、技術(shù)方法創(chuàng)新 （1）建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘和知識發(fā)現(xiàn)體系；（2）建立集經(jīng)典毒理學、系統(tǒng)毒理學與快速篩查于一體的客觀、適宜、系 統(tǒng)的“十八反”毒性評價體系；（3）采用代謝組學及胚胎干細胞技術(shù)，早期發(fā)現(xiàn)反藥配伍的潛在毒性；（4）建立以致毒器官、藥物代謝酶為主要靶標的中藥配伍禁忌致毒機理研究平臺；（5）建立以多組分毒代動力學為特點的網(wǎng)絡(luò)藥理-毒理學和藥物相互作用研究方法和技術(shù)體系；（6）建立基于復合色譜-人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)相結(jié)合的體內(nèi)外微量效應(yīng)物質(zhì)富集與檢測技術(shù)平臺。技術(shù)路線互為補充相互驗證基于 “十八反”的中藥配伍禁忌理論基礎(chǔ)研究安全性評價1. 單次給藥毒性評價2. 多次給藥毒性評價3. 安全藥理評價快速篩查毒性評價1. 高內(nèi)涵評價2. 高通量篩選3. 模式生物評價客觀界定中藥“十八反”反藥配伍組合“反”與“不反”客觀評價反藥配伍組合致毒/增毒特點及其毒性程度揭示中藥“十八反”配伍致毒/增毒的作用機理闡明中藥“十八反”妨害治療的效應(yīng)機制與理論基礎(chǔ)闡釋含有“十八反”的代表性方劑宜忌條件與配伍關(guān)系物質(zhì)基礎(chǔ)研究1. 毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 2. 化學物質(zhì)庫的建立妨害治療基礎(chǔ)研究1. 妨害作用的藥效學評價2. 妨害作用的化學實質(zhì)研究3. 妨害作用的生物學基礎(chǔ)研究“十八反”反藥配伍前后毒效評價回答☆ “十八反”藥對反與不反？☆ 配伍致毒/增毒/減效程度與特點？量-毒 -效關(guān)系研究1. 量-毒關(guān)系研究 2. 量-效關(guān)系研究毒效機制研究1. 體內(nèi)過程研究 2. 藥物相互作用研究反藥配伍的宜忌條件研究1. 臨床文獻回顧性調(diào)查2. 適宜病證效應(yīng)評價3. 宜忌條件與配伍關(guān)系揭示課題一 基于 “十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)研究主要研究內(nèi)容圍繞“十八反 ”中藥配伍禁忌理 論基礎(chǔ)研究的總體目 標，立足于中醫(yī)藥配伍理論和豐富的歷史經(jīng)驗，開展基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)研究，通過 “十八反”中藥文獻數(shù)據(jù)的收集考證，規(guī)范文獻信息，建立基于“ 十八反”配伍禁忌相關(guān)數(shù)據(jù)庫；整合多種數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)，建立適宜有效的數(shù)據(jù)挖掘平臺，進行“十八反 ”中藥配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究，尋求其潛在規(guī)律；通過“十八反” 同方配伍的方劑分析，探討配伍禁忌的轉(zhuǎn)化條件和應(yīng)用特點；建立研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺，使各課題之間形成有機整體，并為整合文獻和 實驗信息、形成知 識發(fā)現(xiàn)體系、豐富中藥配伍禁忌理 論提供支撐。1、中藥“十八反”文獻數(shù)據(jù)的收集考證及數(shù)據(jù)庫建立（1）“配伍禁忌 ”是指一般情況下不宜相互配合使用的藥物，傳統(tǒng)中藥的禁忌主要包括“十八反、十九畏”， 《本經(jīng)》明言：“勿用相惡 相反者” ?；仡櫸迨陙淼南嚓P(guān)研究成果和研究經(jīng)驗，為項 目研究參考。收集整理與本項目研究相關(guān)的古今文獻，考證 各“ 十八反”中藥的衍化過程，整理歸納歷代醫(yī)家對“十八反” 中藥的理論闡述、歷 代相反藥項的范圍 和臨床實踐經(jīng)驗， 現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報道、醫(yī)院處方和實驗研究文獻，分析提取以“十八反”為代表的配伍禁忌相關(guān)內(nèi)容，探討其來源、范圍 、現(xiàn)狀和有爭議的問題。（2）通過規(guī)范文獻信息，建立基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫，主要包含“十八反”中藥相關(guān)的歷 史文獻、中藥和方劑資料、臨床案例，以及現(xiàn)代研究獲得的物質(zhì)基礎(chǔ)、毒效等生物學信息相關(guān)數(shù)據(jù)。設(shè)計特征性關(guān)聯(lián)檢索策略， 為本項目研究開展提供堅實的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。2、 “十八反”中藥配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究探索改進更適用于方藥特征的挖掘方法，建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的數(shù)據(jù)挖掘模型，進行挖掘算法和模型的適應(yīng)性評價。以“ 十八反”中藥為代表， 針對反藥配伍特點開展數(shù)據(jù)挖掘研究，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系； 發(fā)現(xiàn)“ 十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對的特殊屬性， 為實驗研究及臨床應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。3、 “十八反”同方配伍的特征條件和應(yīng)用特點“十八反”中藥的臨床應(yīng)用主要表 現(xiàn)為在方劑中與其他 藥物配伍共同發(fā)揮功效。通過對 方劑組成、功效、主治病 證、配伍關(guān)系等內(nèi)容的比較分析，建立相關(guān)模型，提取特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系，分析在不同方劑中的地位和作用，探討“十八反”具體應(yīng)用的病證特點，以及針對 不同病證，配伍的 藥物種 類、 劑量、給藥方式，為“十八反”中藥能否在 臨床安全、合理應(yīng)用提供參考。4、建立項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺基于項目研究的數(shù)據(jù)特點，建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、 匯交、共享、分析、管理等功能為一體的數(shù)據(jù)管理平臺，形成多維、 動態(tài)、實時 、在線的 E-Science 項目研究模式，使各課題之間形成有機整體，并為整合文獻和 實驗信息，豐富中 藥配伍禁忌理論提供支撐。預期目標1、整合古今文獻信息和實驗結(jié)果， 創(chuàng)建我國中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫； 2、建立在線的項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺；3、建立適宜的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖據(jù)模型，揭示其配伍特征和毒效內(nèi)在關(guān)系；4、通過知識發(fā)現(xiàn)和集成，闡釋基于“十八反” 的中藥配伍禁忌理論的科學內(nèi)涵，豐富發(fā)展中藥配伍理論 ；5、培養(yǎng)碩士研究生 6-8 名、博士研究生 2-3 名；在國內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學術(shù)論文 15-20 篇。承擔單位：南京中醫(yī)藥大學負 責 人：范欣生 研究員科研骨干：錢大瑋 研究員 尚爾鑫 助理研究員 郭建明 助理研究員經(jīng)費比例：8 %課題二 “半蔞貝蘞及攻烏”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容圍繞 “十八反”中藥配伍禁忌理論研究的總體目標 ，針對“半蔞貝蘞及”與烏頭反藥配伍組合的藥性與功效特點，開展“半蔞貝蘞 及攻烏”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。參考臨床用藥習慣選擇半夏、瓜 蔞、浙 貝母、川貝母、白蘞、白及、川烏、附子 為研究對象，首先進行“半蔞貝蘞及攻烏” 相關(guān)配伍毒性評價研究，明確“半蔞貝蘞 及攻烏” 相反配伍的致毒 /增毒特點；明確“ 半蔞貝蘞及攻烏”單味藥材的化學組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學成分變化，明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實驗 相結(jié)合考察相反配伍致毒/ 增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學基礎(chǔ)。最終闡 明中藥十八反“半蔞貝蘞 及攻烏”反與不反、如何反以及為什么反的科學內(nèi)涵。1、 “半蔞貝蘞及攻烏”毒性評價研究采用經(jīng)典毒理學、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性 發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合， 進行“半蔞貝蘞及攻烏” 配伍毒性評 價研究，確 認已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。2、 “半蔞貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用體外化學組與藥物代謝物組學等方法，研究“半 蔞貝蘞及攻烏”配伍致毒/增毒的化學實質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學成分 變化，發(fā)現(xiàn)藥物進入體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。 進一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進行毒性確認，最終明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì) 基礎(chǔ)。3、 “半蔞貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)相互作用規(guī)律研究采用動物整體 ADME、藥物吸收體外動態(tài)仿生系統(tǒng)及藥物代謝酶等技術(shù)，在體、離體實驗相結(jié)合，研究“半蔞貝蘞及攻烏” 配伍致毒/增毒物質(zhì)毒代動力學特征及吸收、代謝等相互作用規(guī) 律。4、 “半蔞貝蘞及攻烏”配伍量-毒-時-效關(guān)系研究基于多劑量、多指標優(yōu)化的實驗設(shè)計，考察半 蔞貝蘞及與烏頭配伍，考察其配伍后毒效變化，以及是否 產(chǎn)生其他毒性。 計算藥物配伍前后的中毒劑量、有效量和安全范圍，結(jié)合各毒效相關(guān)成分的含量變化， 對 其量-毒-效數(shù)據(jù)進行非線性模擬建模，考察和評價反藥 配伍前后在體內(nèi)致毒物質(zhì)的代謝速率、累積規(guī)律和蓄積致毒的時空關(guān)系，揭示其量 -毒-時-效關(guān)系及其變化規(guī)律。5、 “半蔞貝蘞及攻烏”致毒/增毒物質(zhì)生物學機制研究采用代謝組學及胚胎干細胞等技術(shù)，考察“半蔞貝蘞 及攻烏”相反配伍及其毒性成分引起的代謝組學變化，明確相反配伍致毒/增毒的生物學機制。研究目標1、完成“ 半蔞貝蘞及攻烏”系統(tǒng)毒性評價研究，明確回答“半蔞貝蘞及攻烏” 配伍反與不反的問題；2、完成“ 半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍致毒/增毒物質(zhì)基 礎(chǔ)及機理研究，明確 “半蔞貝蘞及攻烏” 配伍致毒/ 增毒的化學實質(zhì)及生物學基礎(chǔ)；3、完成“ 半蔞貝蘞及攻烏”相反配伍致毒/增毒物質(zhì)毒代 動力學及相互作用規(guī)律研究，通過量- 毒-時-效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，闡明“ 半蔞貝蘞及攻烏”配伍致毒/ 增毒物質(zhì)基礎(chǔ)相互作用規(guī)律；4、培養(yǎng)碩士研究生 8-10 名，博士研究生 3-5 名；在國內(nèi)外期刊發(fā)表高質(zhì)量學術(shù)論文 20-25 篇， SCI 收錄論 文 10 篇以上；申請發(fā)明專利 1 項。承擔 位：天津中醫(yī)藥大學 江西中醫(yī)學院負 責 人：張艷軍 教授 科研骨干：楊世林 教授 何 新 教授 何曉暉 教授 經(jīng)費比例：16%課題三 “藻戟遂芫俱戰(zhàn)草”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容圍繞項目總體目標，針對“藻戟遂芫”與甘草反藥配伍組合的各組藥物，開展中藥十八反“ 藻戟遂芫俱戰(zhàn) 草” 的系統(tǒng)研究，揭示大戟、甘遂、芫花等峻下逐水 類中藥與甘草配伍和海藻類中藥與甘草配伍組對反與不反？為什么反？以及致毒增毒特點及其機理；闡明中藥十八反“藻戟遂芫俱戰(zhàn) 草” 的科學內(nèi)涵。1、 “藻戟遂芫”與甘草配伍毒性評價體系的建立及其配伍毒性評價研究建立由經(jīng)典毒理學、系統(tǒng)毒理學、毒性快速篩查技術(shù)和安全藥理學方法組成的、適宜于中藥“ 十八反”反藥配伍組合毒性研究的評價體系，依據(jù)《中華人民共和國藥典》所規(guī)定的劑量范圍，通過對“藻戟遂芫”與甘草反藥配伍組合在整體、器官、細 胞和分子水平進行系 統(tǒng)地毒理學研究和安全性評價，揭示“ 藻戟遂芫”與甘草配伍前后的毒性變化及其規(guī)律。圍繞本課題反藥組合可能的毒性特點以及毒性靶部位，采用體外腸管孵育、離體肝臟灌流，胃腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)、肝細胞培養(yǎng)、P 糖蛋白、水通道蛋白、 P450 酶分子等評價模型，揭示“藻戟遂芫” 與甘草反藥配伍組合致毒/增毒特點。2、 “藻戟遂芫 ”與甘草配伍的毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究利用極性分級溶出法、各種色譜方法， 對單味藥及反藥配伍組合進行化學物質(zhì)組分的系統(tǒng)分離，并對所得 單體化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定，建立化學物質(zhì)庫；進而對甘草系列相反藥物配伍前后的化學物質(zhì)變化進行研究，比較配伍前后各成分含量、類 型的改變，并與毒效作用進行關(guān)聯(lián)，發(fā)現(xiàn)與相反配伍和毒效作用相關(guān)的化學成分及其含量；采用制備色譜、成分剔除等技術(shù)分離制備毒效相關(guān)成分，確定相反配伍物質(zhì)基礎(chǔ)；為全面考察相反配伍的成分變化，針對單味藥和相反配伍制成的湯劑/散劑，分析其成分差異，研究在不同環(huán)境下各藥物毒效物質(zhì)的溶出釋放規(guī)律。3、 “藻戟遂芫”與甘草配伍量-毒-時-效關(guān)系研究基于多劑量、多指標優(yōu)化的實驗設(shè)計，考察峻下逐水藥物大戟、甘遂、芫花與甘草配伍，對胃腸道和肝 腎器官的毒性作用及其瀉下、利尿和抗水腫的藥效作用；考察海藻與甘草配伍后藥效變化，以及是否產(chǎn)生其他毒性。計算藥物配伍前后的中毒劑量、有效量和安全范圍， 結(jié)合各毒效相關(guān)成分的含量變化， 對其量-毒-效數(shù)據(jù) 進行非 線性模擬建模，考察和評價反藥配伍前后在體內(nèi)致毒物質(zhì)的代謝速率、累積規(guī)律和蓄積致毒的 時空關(guān)系，揭示其量 -毒-時-效關(guān)系及其變化規(guī)律。評價反藥配伍前后經(jīng)不同環(huán)節(jié)體外煎煮、體內(nèi)代謝過程、體內(nèi)靶器官等環(huán)節(jié)，毒性物質(zhì)體內(nèi)外的定性定量變化，分析其動態(tài)變化過程，闡明配伍-毒性物質(zhì)含量-毒性間的關(guān)系，定量表征其致毒增毒程度。4、 “藻戟遂芫”與甘草各配伍組合體內(nèi)過程及相互作用研究以藥物體內(nèi)過程各環(huán)節(jié)為研究重點，探討甘草分別與海藻、大戟、芫花、甘遂配伍前后的吸收特點、分布規(guī)律、代 謝轉(zhuǎn)化過程、毒性成分排泄及蓄積致毒特征。利用中藥多成分同步定量分析技術(shù)，探 討反藥配伍中多成分配伍前后體內(nèi)動力學參數(shù)的差異，分析其配伍致毒增毒的原因及其相互作用；采用體內(nèi)體外方法，研究反藥配伍后吸收轉(zhuǎn)運過程及其相互作用機理；利用常規(guī)組織分布研究方法結(jié)合微透析技術(shù)，分析毒性靶器官與非毒性靶器官中成分差別，與毒效評價研究相結(jié)合闡明甘草組反藥配伍毒效物質(zhì)基礎(chǔ)；通過整體、在體、離體等多個層次，研究反藥配伍組合體內(nèi)外代謝途徑，明確本組藥物配伍對代謝酶的影響及其相互作用機理；探討反藥配伍對藥物排泄相關(guān)蛋白的影響及其體內(nèi)排泄經(jīng)時變化過程及其相互作用機理。5、 “藻戟遂芫”與甘草各反藥配伍組合致毒/增毒的分子機制研究采用細胞、分子生物學技術(shù)，研究 該組反藥配伍組合對腸上皮細胞、肝 細胞功能損傷和凋亡誘導的毒性作用。從炎性因子釋放、細胞線粒體損傷、胞內(nèi)離子平衡、氧化壓力和凋亡蛋白表達，多角度、多途徑分析該組反藥誘導細胞損傷的分子機制。在此基礎(chǔ)上，以計算機分子對接技術(shù)為先 導，快速 篩選反藥毒效物質(zhì)的生物學靶標；并集成多種光譜/色譜等技術(shù)開展小分子毒效物 質(zhì)與關(guān)鍵靶標間的相互作用研究；通過毒性靶標群的生物信息學網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，揭示該組反藥配伍致毒增毒的分子網(wǎng)絡(luò)機制。研究目標1、建立客觀、適宜、系統(tǒng)的毒性評價體系，以確切回答“藻戟遂芫” 與甘草配伍反與不反及其致毒/增毒特點；2、建立涵蓋“藻戟遂芫”與甘草配伍前后提取物、化學部位、化學成分的化學物質(zhì)庫，以有效支撐和評價研究其毒效物質(zhì)變化；3、通過量-毒-時-效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，揭示“ 藻戟遂芫”與甘草配伍的相互作用機制；4、通過系統(tǒng)的毒理學評價，確定人體等效性毒效劑量范圍， 為指導臨床安全用藥提供科學依據(jù)；5、通過本課題研究，為系統(tǒng)揭示“十八反” 中藥配伍禁忌的科學內(nèi)涵提供支撐，為豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論提供科學依據(jù)；1、建立客觀、適宜、系統(tǒng)的毒性評價體系，以確切回答“藻戟遂芫” 與甘草配伍反與不反及其致毒/增毒特點；2、建立涵蓋“藻戟遂芫”與甘草配伍前后提取物、化學部位、化學成分的化學物質(zhì)庫，以有效支撐和評價研究其毒效物質(zhì)變化；3、通過量-毒-時-效關(guān)系與體內(nèi)過程變化研究，揭示“ 藻戟遂芫”與甘草配伍的相互作用機制；4、通過系統(tǒng)的毒理學評價，確定人體等效性毒效劑量范圍， 為指導臨床安全用藥提供科學依據(jù)。通過以上研究，為系統(tǒng)揭示“十八反”中藥配伍禁忌的科學內(nèi)涵提供支撐，為豐富和發(fā)展中藥配伍禁忌理論提供科學依據(jù)。6、在國內(nèi)外學術(shù)核心期刊發(fā)表論文 30–40 篇，其中 SCI 收 錄 10–15 篇；申請國家發(fā)明專利 1–2 項；7、培養(yǎng)博士后 2–3 名，博士研究生 3–4 名，碩士研究生 8–10 名。培養(yǎng)高層次青年人才 2–4 名。承擔單位：南京中醫(yī)藥大學 中國藥科大學負 責 人：段金廒 教授科研骨干：唐于平 研究員 劉曉東 教 授 徐 立 教授 郝海平 副教授 宿樹蘭 副研究員 阿基業(yè) 副教授經(jīng)費比例：28%課題四 “諸參辛芍叛藜蘆” 配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容本課題以十八反中的“諸參辛芍叛藜蘆”為研究對象，圍繞中藥“十八反”配伍理論的關(guān)鍵科學問題研究項目總體目標，針對“諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的藥性與功效特點，開展“諸參辛芍叛藜蘆”配伍關(guān)系與毒效表征的基礎(chǔ)研究。首先進行“諸參辛芍叛藜蘆”相關(guān)配伍毒性評價研究，明確“諸參辛芍叛藜蘆”相反配伍的致毒/增毒特點；明確“諸參辛芍叛藜蘆”中主要藥材的化學組成，并考察相反配伍的體內(nèi)外化學成分變化，明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)；在體、離體實驗相結(jié)合考察相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)間的相互作用規(guī)律及其生物學基礎(chǔ)。最終闡明中藥十八反“諸參辛芍叛藜蘆”反與不反、如何反以及為什么反的科學內(nèi)涵。1. 、 ““諸參辛芍”與藜蘆配伍的毒性評價研究以中醫(yī)藥理論為指導，參照《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導原則》 ，采用傳統(tǒng)毒理學、毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等相結(jié)合，進行“諸參辛芍叛藜蘆”配伍毒性評價研究，確認已知毒性，發(fā)現(xiàn)潛在毒性。2. 、 “諸參辛芍”與藜蘆配伍的致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用現(xiàn)代色譜技術(shù)特別是液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立“諸參辛芍叛藜蘆”中各單藥與藜蘆相互配伍后毒性成分的指紋圖譜及量毒關(guān)系；研究“諸參辛芍叛藜蘆”配伍致毒/增毒的化學實質(zhì)；明確藥物配伍在體外發(fā)生的化學成分變化，發(fā)現(xiàn)藥物進入體內(nèi)后藥物發(fā)生的代謝物變化。進一步利用毒性快速篩查技術(shù)、潛在毒性發(fā)現(xiàn)技術(shù)等進行毒性確認，最終明確相反配伍致毒/增毒的物質(zhì)基礎(chǔ)。3.、 “諸參辛芍”與藜蘆配伍的前后的量-毒-時-效關(guān)系研究以藥物體內(nèi) ADME 各環(huán)節(jié)為研究重點，以人參-藜蘆配伍組合作為研究范例，進行體內(nèi)過程研究，對人參-藜蘆配伍多成分的體內(nèi)過程進行同步定量分析，構(gòu)建體內(nèi)外物質(zhì)的關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò)，系統(tǒng)研究人參-藜蘆配伍前后化學成分吸收特點，分布規(guī)律、代謝轉(zhuǎn)化、毒效物質(zhì)排泄及蓄積致毒等，探討人參-藜蘆配伍前后體內(nèi)動力學參數(shù)的差異，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。4. 、 “諸參辛芍”與藜蘆配伍的致毒/增毒物質(zhì)生物學機制研究采用分子生物學、蛋白質(zhì)組學、現(xiàn)代色譜分析和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，對藜蘆中典型毒性成分的代謝特征進行動態(tài)性觀察，找到受調(diào)控的 P450 酶及對藜蘆有毒中藥成分代謝影響及其與毒性效應(yīng)的機制；利用蛋白質(zhì)組學技術(shù)尋找并確定“諸參辛芍叛藜蘆”中反藥組合相互作用后與藥物毒性成分發(fā)揮作用相關(guān)的肝臟代謝、信號通路及轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中蛋白質(zhì)組的動態(tài)變化過程，尋找配伍藥物毒效成分的體內(nèi)作用靶點及診斷標志物，從分子水平揭示藜蘆配伍致毒規(guī)律，進而系統(tǒng)揭示“諸參辛芍叛藜蘆”配伍藥物相互作用可能機制。為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。預期目標1、通過安全性評價體系的建立與毒性評價，構(gòu)建基于 PXR～CYP3A 通路的細胞篩選模型，從動物和細胞兩個層面建立“諸參辛芍叛藜蘆” 各單藥及與藜蘆配伍后毒性成分的毒效關(guān)系，明確回答“諸參辛芍叛藜蘆” 配伍反與不反；2、揭示“諸參辛芍叛藜蘆” 配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基礎(chǔ)。通過現(xiàn)代色譜技術(shù)研究十八反中“ 諸參辛芍叛藜蘆 ”的物質(zhì)基礎(chǔ)，并建立相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫 ；3、闡明“諸參辛芍 ”與藜蘆配伍 前后的量-毒-時-效關(guān)系，確定不同配比不同劑量下 LD50、MTD 參數(shù)的變化，確定有毒藥物的安全劑量范圍，提出各反藥配伍組合的毒性動態(tài)變化范圍；4、選擇代表性配伍組合作為研究范例，進行體內(nèi)過程研究，闡明其配伍前后體內(nèi)動力學參數(shù)差異，明確其體內(nèi)過程，闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。5、闡明“ 諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的相互作用和分子機制。通過在酶活性水平建立毒性評價技術(shù)平臺和蛋白質(zhì)組學技術(shù)，從分子和蛋白水平上揭示“十八反”配伍藥物相互作用的可能機制；6、在國內(nèi)外學術(shù)核心期刊發(fā)表論文 15–20 篇，其中 SCI 收錄 5 篇以上；7、培養(yǎng)博士后 4 名，博士研究生 5 名，碩士研究生 10 名。1、通過安全性評價體系的建立與毒性評價，構(gòu)建基于 PXR～CYP3A 通路的細胞篩選模型，從動物和 細胞兩個層面建立“諸參辛芍叛藜蘆 ”各單藥及與藜蘆配伍后毒性成分的毒效關(guān)系，明確回答“諸參辛芍叛藜蘆 ”配伍反與不反。2、揭示“ 諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合致毒/增毒物質(zhì)基 礎(chǔ)。通 過 UPLC-Q-TOF技術(shù)研究十八反中“ 諸參辛芍叛藜蘆 ”的物質(zhì)基礎(chǔ)研究并建立相 應(yīng)的數(shù)據(jù)庫。3、闡明“ 諸參辛芍”與與藜蘆配伍的前后的量-毒-效關(guān)系，確定不同配比不同劑量下 LD50、MTD 參數(shù)的變化，確定有毒藥物的安全劑量范圍，提出各藥對的毒性動態(tài)變化范圍。4、以人參-藜蘆藥對作為研究范例， 進行體內(nèi)過程研究，闡明人參- 藜蘆配伍前后體內(nèi)動力學參數(shù)的差異，明確其體內(nèi)過程， 闡明其體內(nèi)作用物質(zhì)與毒性的關(guān)系。5、闡明“ 諸參辛芍叛藜蘆”配伍組合的相互作用和分子機制。通過在酶活性水平、mRNA 水平和蛋白水平建立基于 P450 酶的中 藥毒性評價技術(shù)平臺和蛋白質(zhì)組學技術(shù) 尋找“諸參辛芍叛藜蘆”單獨或配對使用對 P450 酶及其他肝臟蛋白質(zhì)豐度、翻譯后修飾狀態(tài)的改 變，并確定其 詳細的修 飾位點。從分子和蛋白水平上進一步探討“ 十八反” 配伍 藥物相互作用的可能機制。6、研究成果將以論文形式在國際、國內(nèi)重要學 術(shù)刊物上發(fā)表有價值的學術(shù)論文 15-20 篇，其中 SCI 論 文 5 篇以上，并總結(jié)申報軍隊國家級科技獎勵。培養(yǎng)4 名博士后，博士研究生 5 名， 碩士研究生 10 名。承擔單位：軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所 北京蛋白質(zhì)組研究中心負 責 人：王宇光 副研究員科研骨干：馬增春 副研究員 梁乾德 副研究員 郝運偉 副研究員 孫愛華 副研究員經(jīng)費比例：16%課題五 基于妨害治療的中藥“十八反”配伍基礎(chǔ)研究主要研究內(nèi)容圍繞項目總體目標，以中醫(yī)藥配伍理論為指導、 歷代臨床用藥經(jīng)驗為參考、前期研究為基礎(chǔ)為依托，從妨害治療的角度研究中藥“ 十八反”配伍禁忌。通過文獻挖掘和知識發(fā)現(xiàn)尋找中藥“十八反” 配伍應(yīng) 用時影響相反組對（或方劑）內(nèi)藥物療效的數(shù)據(jù)信息及潛在規(guī)律；在病理生理條件下評估“十八反” 代表性反藥藥對配伍組合及其含相反藥對方劑是否存在干擾、改變、降低或消除藥效的作用，探索影響因素；考察相關(guān)藥對反藥配伍前后化學成分的變化規(guī)律及體內(nèi)相互作用過程，研究相反配伍妨害療效的作用機理和生物學基礎(chǔ)。以此闡述“ 中藥藥對兩藥配伍使用時即使既使不發(fā)生毒牲性增強現(xiàn)象也不等于安全有效，妨害治療的藥物也不適宜相互配合使用”的學術(shù)觀點，為 十八反配伍禁忌的新涵義的認識提供科學依據(jù)，最終從妨害治療角度揭示中藥“ 十八反”反與不反、如何反以及為什么反的科學內(nèi)涵。1、 “十八反”配伍妨害治療作用的文獻挖掘中藥十八反是傳統(tǒng)的中藥配伍禁忌， “相反配伍將致毒性增 強或產(chǎn)生劇烈毒性”相沿成為 十八反的主要涵 義。然而，古人對于相反涵義還存在著另外一種認識， 《本草衍 義補遺》稱：“(人參)與藜蘆相反，若服一兩參，入藜蘆一錢，其一兩參虛費矣！戒之！” ，其他醫(yī)家也有類似這種“相反藥物配伍藥效抵消”的見解。我們前期的實驗研究證明：有的相反組對（或在方劑中）可能干擾或妨害組對內(nèi)藥物的某些藥效。為了提供相關(guān)妨害治療研究的理論基礎(chǔ)，本課題擬較全面收集梳理十八反中藥配伍禁忌的古今文獻， 基于梳理并提取歷代醫(yī)家、對“ 十八反”中藥的臨床實踐經(jīng)驗， 現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報道、醫(yī)院 處方和實驗 研究中有關(guān)“十八反”中藥物質(zhì)基礎(chǔ)、 療效及藥理效應(yīng)、毒性等妨害治療的相關(guān)信息，通過數(shù)據(jù)挖掘和知識發(fā)現(xiàn)尋找其潛在規(guī)律。同時 ，分析藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點、毒性反應(yīng)的配伍關(guān)系，探索“十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對的特殊屬性。2、 “十八反”配伍妨害治療作用的藥效學評價研究利用能較準確、客觀反映臨床實際的動物模型及藥效指標，觀察“ 十八反”代表性藥對配伍組合及其含相反藥對對模型動物藥效的干預影響，評估相反組對（或和復方劑）在病理生理條件下是否存在干擾或妨害組對內(nèi)藥物的某些藥效作用，探索其可能的影響因素。3、 “十八反”配伍妨害治療作用的化學物質(zhì)基礎(chǔ)研究采用化學組學、藥代動力學、藥物代謝組學研究方法，考察“十八反”配伍前后體外化學成分的變化規(guī)律及配伍對入體成分的吸收、分布、代謝、排泄的影響，明確“十八反 ”代表性組對 配伍妨害藥效的物質(zhì)基礎(chǔ) 。4、 “十八反”配伍妨害治療作用的生物學基礎(chǔ)研究根據(jù)上述研究結(jié)果或結(jié)論選擇相應(yīng)的動物模型和細胞模型，結(jié)合形態(tài)和功能，從整體、器官、細胞、分子和基因等不同層次考察配伍藥物或相關(guān)成分產(chǎn)生妨害治療作用的主要藥理機理和部分生物學機制。預期目標1、完成研究代表性“十八反”配伍組合的妨害效應(yīng)研究，探索妨害治療的存在條件，從妨害治療角度闡明 闡述“十八反”的配伍減效機制；2、揭示“ 十八反”配伍妨害效應(yīng)的化學實質(zhì)及其相互作用規(guī)律，并闡明妨害效應(yīng)的生物學基礎(chǔ)；3、闡明代表性“十八反”配伍組合及其方劑妨害治療的理論基礎(chǔ)。4、在國內(nèi)外學術(shù)核心期刊發(fā)表論文 15–20 篇，其中 SCI 收錄 5 篇以上；5、培養(yǎng)博士后 1-2 名，博士研究生 3-5 名， 碩士研究生 8-10 名。4、國內(nèi)外學術(shù)期刊發(fā)表研究論文 20~25 篇，其中被 SCI 收錄 5~10 篇。培養(yǎng)博士后 1~2 名，博士研究生 3~5 名，碩士研究生 8~10 名。承擔單位：中國中醫(yī)科學院 中科院長春應(yīng)化所負 責 人：林 娜 研究員科研骨干：劉志強 研究員 彭春龍 研究員 宋鳳瑞 教授 隋峰 副研究員經(jīng)費比例：16%課題六 基于臨床應(yīng)用的中藥”“十八反””宜忌條件及配伍關(guān)系研究主要研究內(nèi)容1、從文獻研究方面分析評價中藥“十八反”配伍臨床應(yīng)用的療效和安全性（1）“十八反”配伍及其方劑 的臨床應(yīng)用范圍及文獻特征分析 。從現(xiàn)代臨床研究文獻的角度，鑒定探討是否存在“十八反 ”反藥藥對配伍組合的臨床使用情況，再進一步 分析“十八反”藥對配伍組合、劑量及其方劑的臨床應(yīng)用范圍（病證及分布趨勢）、特定適用對象及使用條件。從現(xiàn)代臨床研究的角度反映“十八反”藥對配伍組合 及其方劑的臨床治療應(yīng)用 的情況現(xiàn)狀。探索“十八反” 藥對及其方劑治療腫瘤臨床研究文獻中使用現(xiàn)狀、配對規(guī)律、使用劑量、適用病癥的關(guān)聯(lián)性。（2）從文獻角度進行“ 十八反 ”配伍及其方劑的治療 性臨床研究的療效和安全性的評價。本著循證醫(yī)學系統(tǒng)評價的思想，根據(jù)已經(jīng)發(fā)表的臨床研究文獻，系統(tǒng)地評價“十八反”藥對配伍組合及其方 劑在臨床治療領(lǐng)域的 療效和安全性，為“十八反” 藥物使用宜忌的基礎(chǔ)研究及進一步的臨床應(yīng)用研究提供證據(jù)。2、從實驗研究方面，以相關(guān)疾病模型為載體， ，方藥結(jié)合研究中藥“十八反”配伍應(yīng)用的宜忌條件（1）以古方海藻玉壺湯為切入點，基于臨床用藥特點，設(shè)計特定的病理模型，從方藥結(jié)合的角度，探討不同給藥劑量、配伍比例等因素對方中“ 十八反”藥對配伍組合（海藻與甘草）生物效應(yīng)的影響，探索其用藥特點及規(guī)律。2010 年版《中國藥典·一部》中記載的海藻功能主治是“消痰軟堅散結(jié)，利水消腫。用于 癭瘤，瘰疬，睪丸 腫痛，痰 飲水腫” ，因此， 選擇反映藥物功效，又有臨床基礎(chǔ)海藻玉壺湯為切入點，研究海藻和甘草配伍應(yīng)用的宜忌條件。本課題選擇甲狀腺腫大動物模型，通過研究海藻玉壺湯中，海藻和甘草在不同給藥劑量、不同劑量配比、不同炮制品種等條件下，對模型動物的一般生理、血液生化指標以及組織器官的影響，探討基于臨床應(yīng)用的海藻與甘草配伍對動物機體生物效應(yīng)影響的宜忌條件，選擇具有顯著效果的配伍條件組合，根據(jù)實驗結(jié)果進一步從甲狀腺合成、 儲存、 釋放、調(diào)控等方面 進行藥效機制的研究，并從整體動物實驗和離體實驗兩個環(huán)節(jié)進行毒性機制的探討，以期闡明海藻玉壺湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。（2）以古方甘遂半夏湯為切入點，基于臨床用藥特點，設(shè)計特定的病理模型，從方藥結(jié)合的角度，探討不同 給藥劑量、 炮制品種、給藥次數(shù)、配伍比例、 給藥劑型等因素對方中“ 十八反”藥對配伍組合（甘遂與甘草）生物效 應(yīng)的影響，探索其用藥特點及規(guī)律。2010 年版藥典中記載甘遂的功能主治是“瀉水逐飲，消腫散結(jié)。用于水腫脹滿，胸腹積水，痰飲積聚，氣逆咳喘，二便不利，風痰癲癇，癰腫瘡毒”。因此，選擇反映甘遂的主要功效瀉水逐飲，又有臨床基礎(chǔ)的名方甘遂半夏湯作為切入點，研究甘遂和甘草的配伍宜忌條件。本課題選擇腹水模型反映其臨床應(yīng)用“攻逐水飲”的特點，設(shè)計相關(guān)試驗，在方中除甘遂及甘草外，其他諸藥不變的情況下，對甘遂與甘草配伍的不同宜忌條件進行實驗，選擇具有顯著效果的配伍條件組合，根據(jù)實驗結(jié)果進一步從組織水平、激素水平、細胞分子水平進行藥效機制的研究，并從整體動物實驗和體外實驗兩個環(huán)節(jié)進行毒性機制的探討，以期闡明甘遂半夏湯臨床應(yīng)用的宜忌條件和作用規(guī)律。研究目標1、基于中藥“十八反”臨床應(yīng)用， 對的中藥“十八反”相關(guān)文獻進行收集整理，探討 中藥“ 十八反”藥對配伍臨床應(yīng)用的宜忌條件及其規(guī)律，并在文獻研究的基礎(chǔ)上， 本著循證醫(yī)學系統(tǒng)評 價的思想， 對其療效和安全性進行評價。 ；2、在特定病理條件下，以傳統(tǒng)名方作為切入點， 以 “十八反”代表性反藥配伍組合及其方劑，研究影響方中“十八反” 藥對生物效 應(yīng)的因素，探討其效應(yīng)機制，揭示其基于臨床應(yīng)用的宜忌條件及規(guī)律特點。 ；3、建立基于臨床應(yīng)用的中藥“十八反”宜忌條件的研究平臺，為研究相反藥藥對配伍組合臨床應(yīng)用宜忌條件提供研究思路與方法。 ；4、從多角度完善豐富中藥“十八反”配伍禁忌理論，指導臨床合理、安全、有效地使用中藥“ 十八反” 藥對 反藥配伍。 ；5、培養(yǎng)博士研究生 4~-6 名，碩士研究生 8~-12 名，青年骨干教師 4~-6 名；6、在國內(nèi)外核心期刊發(fā)表學術(shù)論文 2015~-3020 篇。承擔單位：北京中醫(yī)藥大學 南京中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院負 責 人：鐘贛生 研究員 科研骨干：周學平 教授 孫紅梅 教授 蔣萌王 旭 教授 洪 纓 教授 馬長華 教授 經(jīng)費比例：16%四、年度計劃研究內(nèi)容 預期目標第一年1、基于“十八反 ”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)研究。主要對“ 十八反”中藥古今文獻信息進行收集與考證； 2、啟動建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的管理平臺；3、建立中藥“十八反 ”毒性評價體系，開展烏頭組、甘草組、藜蘆組各反藥配伍組合的毒性評價研究；4、初步建立中藥“ 十八反”藥味與反藥配伍組合樣品制備及化學物質(zhì)庫；5、啟動中藥“十八反 ”代表性反藥配伍組合及方劑妨害治療效應(yīng)基礎(chǔ)研究；6、從臨床文獻分析角度，考察分析中 藥十八反配伍應(yīng)用的宜忌條件。1、 歸納以“十八反” 為代表的歷代中藥配伍禁忌理論和臨床經(jīng)驗；2、 建立多屬性、多層次的數(shù)據(jù)挖掘模型；3、 初步評價中藥“十八反” 各反藥配伍組合反與不反；4、 初步明確“十八反” 代表性反藥配伍組合及方劑配伍的妨害治療效應(yīng)；5、 明確臨床應(yīng)用的反藥配伍組合的宜忌條件；6、 在國內(nèi)外期刊發(fā)表學術(shù)論文 10-15 篇，其中 SCI 收錄 2-4 篇；7、 培養(yǎng)博士研究生 1-2 名，碩士研究生4-6 名。第二年1、基于文獻信息數(shù)據(jù)結(jié)合實驗 研究結(jié)果，進行中藥“十八反” 配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究；中藥“十八反” 在方劑中的應(yīng)用 特點與知識發(fā)現(xiàn)；2、基于古今文獻信息和研究結(jié) 果信息的集成和分析，初步創(chuàng)建我國中 藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、反藥配伍組合致毒/增毒特點及毒性程度研究；4、中藥“十八反 ”配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究；5、中藥“十八反 ”各反藥配伍量-毒- 時-效關(guān)系研究6、中藥“十八反 ”體內(nèi)過程研究；7、“十八反”代表性反藥配伍組合及方劑妨害治療的物質(zhì)基礎(chǔ)研究；8、選擇含有反藥配伍的代表性方 劑海藻玉壺湯，研究其宜忌條件與配伍關(guān)系。1、 建立適宜的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖據(jù)模型；2、 初步創(chuàng)建我國中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 明確反藥配伍組合致毒/增毒特點及毒性程度；4、 初步揭示中藥“十八反” 配伍前后毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究；5、 闡明各反藥配伍組合的量—毒—效關(guān)系與特點；6、 初步發(fā)現(xiàn)各反藥配伍組合的體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄特點；7、 初步明確中藥“十八反” 代表性配伍組合妨害治療的毒效物質(zhì)基礎(chǔ)；8、 初步闡釋反藥配伍組合在海藻玉壺湯中的宜忌條件與配伍關(guān)系；9、 在國內(nèi)外期刊發(fā)表學術(shù)論文 20-25 篇，其中 SCI 收錄 5-7 篇；申請專利 1-2項；10、培養(yǎng)博士后 1 名，博士研究生 2-3名，碩士研究生 6-8 名。研究內(nèi)容 預 期目標第三年1、 以文獻資料結(jié)合實驗數(shù)據(jù)， 針對不同病證發(fā)現(xiàn)反藥配伍特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系；2、 采用整體、器官組織等評 價指標， 對反藥配伍組合致毒/增毒/減效的作用機理進行研究；3、 中藥“十八反” 配伍前后毒效化學成分群研究；4、 采用多因素非線性回歸、人工神 經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、智能機器學習等方法，對中藥十八反配伍前后化學物質(zhì)變化與毒效作用進行關(guān)聯(lián)研究；5、 中藥“十八反” 體內(nèi)相互作用研究；6、 “十八反”妨害治療代表性反藥配伍組合體內(nèi)過程研究；7、 含有反藥配伍的代表性方劑甘遂半夏湯的宜忌條件和配伍關(guān)系研究。1、 發(fā)現(xiàn)十八反各配伍組合的特征性配伍關(guān)系；2、 完善中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 初步揭示反藥配伍組合致毒/增毒/ 減效作用機理；4、 初步闡明反藥配伍組合致毒/增毒/ 減效的毒效成分；5、 分析獲得致毒/增毒/減效相關(guān)化學物質(zhì)；6、 初步闡明各反藥配伍組合體內(nèi)相互作用機制；7、 初步闡明反藥配伍組合產(chǎn)生妨害治療的體內(nèi)作用機理；8、 初步揭示反藥配伍組合同方配伍的宜忌關(guān)系；9、 在國內(nèi)外期刊發(fā)表學術(shù)論文 20-30 篇，其中 SCI 收錄 3-5 篇；申請國家發(fā)明專利 2-3 項；10、培養(yǎng)博士后 2-3 名，博士研究生 3-4名，碩士研究生 6-10 名。第四年1、 完善數(shù)據(jù)存貯、展示、匯交、共享、分析、管理等功能為一體的管理平臺；2、 豐富中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 采用細胞、分子水平評價指 標， 對反藥配伍組合致毒/增毒/減效的作用機理進行研究；4、 中藥“十八反” 毒效化學成分群的分離制備，豐富化學物質(zhì)庫；5、 采用分子生物學、蛋白質(zhì)組 學、 現(xiàn)代色譜分析和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，建立各反藥配伍組合對 P450 酶產(chǎn)生誘導或抑制的技術(shù)平臺；6、 基于藥代動力學與藥物代謝酶研究代表性反藥配伍組合的妨害物質(zhì)相互作用；7、 研究不同病理狀態(tài)、給藥 途徑、 給藥次數(shù)、配伍比例、不同劑型等因素對生物效應(yīng)的影響。1、 建立在線的項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺；2、 完善中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 從細胞分子水平揭示反藥配伍組合致毒/增毒/減效作用機理；4、 獲得毒效化學成分，以供分析；同時豐富化學物質(zhì)庫；5、 明確十八反配伍組合對 P450 酶活性、mRNA 及蛋白質(zhì)表達水平的影響；6、 揭示“十八反” 代表性反藥配伍組合及方劑配伍前后對相關(guān)成分吸收、分布、排泄等環(huán)節(jié)的變化規(guī)律；7、 揭示其臨床應(yīng)用的宜忌條件與配伍關(guān)系；8、 在國內(nèi)外期刊發(fā)表學術(shù)論文 20-30 篇，其中 SCI 收錄 6-8 篇；9、 培養(yǎng)博士研究生 4-6 名，碩士研究生8-10 名。研究內(nèi)容 預 期目標第五年1、 豐富完善在線的項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺；2、 建立較為完善的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 基于信息數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)，總結(jié)歸納中藥“十八反” 配伍禁忌的科學內(nèi)涵、提煉形成和豐富完善中藥 配伍理論；4、 在各課題組的研究結(jié)果基礎(chǔ)上，基于計算機人工智能技術(shù)，對各種 實驗結(jié)果進行分析、比較、分類研究，提取不同反藥配伍組合間共同及差異部分，與中醫(yī)藥配伍理論和藥性理論有機聯(lián)系與密切關(guān)聯(lián)，形成中藥“十八反”配伍關(guān)系與變化規(guī)律的知識體系；5、 創(chuàng)建中藥配伍禁忌研究模式；6、 形成“十八反” 中藥配伍禁—忌—宜關(guān)系示范性研究思路與方法，提煉形成中藥十八反配伍禁忌理論， 進 而豐富和發(fā)展中藥配伍理論體系。1、 豐富完善在線的項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺；2、 建立較為完善的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫；3、 創(chuàng)建中藥配伍禁忌研究模式，為同類研究提供示范性；4、 通過中藥“十八反” 配伍關(guān)系及其科學實質(zhì)的系統(tǒng)研究，形成一個有結(jié)論性的、能夠指導臨床實踐的、具有理論性的研究成果。為我國中藥配伍禁忌和藥物安全性研究提供示范，為臨床安全用藥提供指導，為制定我國中醫(yī)臨床用藥配伍禁忌指南和安全用藥指導原則奠定基礎(chǔ)，豐富和發(fā)展中醫(yī)藥配伍理論，服務(wù)于經(jīng)濟社會發(fā)展和人口健康需求做出應(yīng)有的貢獻。5、 在國內(nèi)外期刊發(fā)表學術(shù)論文 25-30 篇，其中 SCI 收錄 5-8 篇；6、 培養(yǎng)博士后 2-3 名，博士研究生 3-5名，碩士研究生 8-10 名。高質(zhì)量完成項目。一、研究內(nèi)容本項目以古今信息數(shù)據(jù)挖掘為支撐，以藥物安全性評價、毒理毒代、毒效物質(zhì)、藥物相互作用等現(xiàn)代研究方法，揭示“十八反” 反藥配伍組合的毒效表征及其機理；評價中醫(yī)臨床常用代表性反藥組合及其同方配伍妨害治療的效應(yīng)機制與理論基礎(chǔ)；基于臨床從反藥配伍及同方配伍不同層面揭示宜忌條件及配伍關(guān)系，從而對科學假說進行驗證，揭示其科學內(nèi)涵，提煉形成 創(chuàng)新知識和豐富發(fā)展中藥配伍禁忌理論。提出科學假說中藥“十八反 ”是藥性相反或相制的代表性組合；相反藥對的構(gòu)成—劑量—物質(zhì)變化具有特定的毒效表征；妨害治療及宜忌轉(zhuǎn)化是反藥配伍規(guī)律的辯證體現(xiàn)。擬解決關(guān)鍵科學問題1、客觀界定和明確回答中藥“十八反” 各反藥配伍組合 “反”與“ 不反”；2、系統(tǒng)揭示中藥“ 十八反 ”各反藥配伍組合“反”的化學實質(zhì)與生物學基礎(chǔ)；3、科學闡明中藥“ 十八反 ”代表性反藥組合同方配伍的妨害與宜忌條件； 4、闡明以十八反為代表的中藥配伍禁忌理論的科學內(nèi)涵。圍繞科學假說和擬解決的關(guān)鍵科學問題，開展以下研究工作：（一）基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)挖掘與知識發(fā)現(xiàn)研究1、中藥“十八反”文獻數(shù)據(jù)的收集考證及數(shù)據(jù)庫建立（1）“配伍禁忌 ”是指一般情況下不宜相互配合使用的藥物，傳統(tǒng)中藥的禁忌主要包括“十八反、十九畏”， 《本經(jīng)》明言：“勿用相惡 相反者” ?；仡櫸迨陙淼南嚓P(guān)研究成果和研究經(jīng)驗，為項 目研究參考。收集整理與本項目研究相關(guān)的古今文獻，考證 各“ 十八反”中藥的衍化過程，整理歸納歷代醫(yī)家對“十八反” 中藥的理論闡述、歷 代相反藥項的范圍 和臨床實踐經(jīng)驗， 現(xiàn)代名家醫(yī)案、臨床報道、醫(yī)院處方和實驗研究文獻，分析提取以“十八反”為代表的配伍禁忌相關(guān)內(nèi)容，探討其來源、范圍、 現(xiàn)狀和有爭議的問題。（2）通過規(guī)范文獻信息，建立基于“十八反”的中藥配伍禁忌數(shù)據(jù)庫，主要包含“十八反”中藥相關(guān)的歷 史文獻、中藥和方劑資料、臨床案例，以及現(xiàn)代研究獲得的物質(zhì)基礎(chǔ)、效應(yīng)、毒性相關(guān)數(shù)據(jù)信息。 設(shè)計特征性關(guān) 聯(lián)檢索策略，為本項目研究開展提供堅實的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。2、 “十八反”中藥配伍關(guān)系的數(shù)據(jù)挖掘研究探索改進更適用于方藥特征的挖掘方法，建立適宜于中藥配伍多屬性、多層次關(guān)系研究的數(shù)據(jù)挖掘模型，進行挖掘算法和模型的適應(yīng)性評價。以“ 十八反”中藥為代表， 針對反藥配伍特點開展數(shù)據(jù)挖掘研究，分析 藥物性味歸經(jīng)、升降沉浮等屬性與劑量比例、功效特點、毒性反 應(yīng)的配伍關(guān)系； 發(fā)現(xiàn)“ 十八反”中藥區(qū)別于其他中藥和藥對的特殊屬性， 為實驗研究及臨床應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支持。3、 “十八反”同方配伍的特征條件和應(yīng)用特點“十八反”中藥的臨床應(yīng)用主要表 現(xiàn)為在方劑中與其他 藥物配伍共同發(fā)揮功效。通過對方劑組成、功效、主治病 證、配伍關(guān)系等內(nèi)容的比較分析，建立相關(guān)模型，提取特征性關(guān)聯(lián)關(guān)系，分析在不同方 劑中的地位和作用，探討“十八反”具體應(yīng)用的病證特點，以及針對 不同病證，配伍的 藥物種 類、 劑量、給藥方式，為“十八反”中藥能否在臨床安全、合理應(yīng)用提供參考。4、建立項目研究數(shù)據(jù)匯交管理平臺基于項目研究的數(shù)據(jù)特點，建立融數(shù)據(jù)存貯、展示、 匯交、共享、分析、管理等功能為一體的數(shù)據(jù)管理平臺，形成多維、 動態(tài)、實時、在線的 E-Science 項目研究模式，使各課題之間形成有機整體，并為整合文獻和實驗信息，豐富中 藥配伍禁忌理論提供支撐。（二）中藥“十八反”毒性評價體系的建立與毒性評價研究以安全性評價經(jīng)典方法為主，結(jié)合體外及快速篩查體系，對中藥十八反配伍致毒/ 增毒特點及其毒性程度進行系統(tǒng)評價，科學界定其“反”與“ 不反”。1、經(jīng)典毒理學評價體系的建立及其反藥配伍毒性評價依據(jù)《中華人民共和國藥典》的劑量范圍，建立基于整體、器官、細胞及分子水平的毒性評價體系，觀察中 藥“十八反“配伍前后毒性發(fā)生與否及其致毒程度，評價毒性作用靶部位；考察不同給藥劑量、不同檢測指標配伍毒性的產(chǎn)生及變化。通過單次及多次給藥毒性研究，以 LD50、血常 規(guī)、血生化、尿常規(guī)、尿生化、病理組織學檢查等指標為依據(jù)， 獲得毒性評價結(jié)果， 為進 一步研究提供依據(jù)與指引。2、快速篩查體系的建立及其反藥配伍毒性篩查（1）基于模式生物的毒性評價與快速篩查?？疾觳煌o藥方法、不同藥物劑量、不同 檢測指標藥物對模式生物生理狀態(tài)的影響，并對其急性毒性數(shù)據(jù) 進行相關(guān)性分析，建立模式生物用于毒性快速篩查的方法學。（2）基于體外高通量模型的快速篩查。采用體外組織器官、細胞、亞細胞、分子等水平的模型，評價“十八反” 的致毒/增毒特點及毒性程度。針對代謝酶干擾構(gòu)建含 CYP3A4 、CYP1A1、CYP1A2 等調(diào)控區(qū)應(yīng)答元件序列的報告基因細胞模型，快速 篩選藥物配伍對代謝酶的影響；針對神經(jīng)毒性，構(gòu)建神經(jīng)軸突生長、神經(jīng)細胞毒、神經(jīng)遞質(zhì)、MAO 和 AChE 快速篩選技術(shù)。3、安全藥理學評價體系建立及其反藥配伍毒性評價通過安全藥理學方法評價“十八反” 配伍前后產(chǎn)生的與治 療目的無關(guān)的效應(yīng)，主要包括觀察指標：精神神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等，研究其致毒 /增毒類型和毒性程度。采用已建立的整體動物與體外評價方法和模型，系統(tǒng)研究中藥十八反基于常用劑量的單次給藥及多次給藥后產(chǎn)生的毒性效應(yīng)、毒性作用靶器官、靶組織等；利用非線性生物信息學技術(shù)進行毒理數(shù)據(jù)的整合與分析，評估其致毒增毒的特點及毒性程度，初步判斷其可能的致毒/增毒機理，客觀界定中藥十八反配伍反與不反，為 深入研究其致毒/ 增毒機制提供依據(jù)與指引。（三）中藥“十八反”毒效物質(zhì)基礎(chǔ)研究1、中藥“十八反”反藥配伍組合樣品制備及化學物質(zhì)庫的建立“十八反”涉及藥材均統(tǒng)一基源、產(chǎn)地、 飲片規(guī)格等，質(zhì)量符合 2010 版《中華人民共和國藥典》項下標準。 遵從中醫(yī)臨床主要傳統(tǒng)湯劑/散劑的不同劑型用法，合理設(shè)計供試樣品的制備方案；在毒效評價引導下，逐級分離/分析毒效物質(zhì)基礎(chǔ)，建立化學物質(zhì)庫，為分析其配伍前后毒效物質(zhì)變化及規(guī)律奠定基礎(chǔ)。2、中藥“十八反”配伍前后毒效物質(zhì)變化研究以甘草組、烏附組和藜蘆組 3 個系列組為研究對象，利用現(xiàn)代分離分析多級聯(lián)用技術(shù)， 對各相反藥對配伍前后毒效物質(zhì)的化學指紋圖譜及化學成分定性定量比較