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1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,*,檢測組織中的脂質(zhì),生物實驗 八年級,一、實驗?zāi)康?1,、嘗試用化學(xué)試劑檢測生物組織中的脂質(zhì),2,、,識記用于脂質(zhì)鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色,二、實驗原理,脂肪和類脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)統(tǒng)稱為脂類。它是構(gòu)成人體組織的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶劑中。在化學(xué)組成上,脂類屬于脂肪酸的酯或與這些酯有關(guān)的物質(zhì)。脂類的主要功能是氧化供能。,脂肪主要存積于脂肪組織中,并以油滴狀的微粒存在脂肪細胞漿內(nèi)。,在病理檢驗中,脂類染色法最常用以證明脂肪變性,脂肪栓子以及腫瘤的鑒別。脂類染色使用最廣泛的染料是
2、蘇丹染料,最常用的有蘇丹,蘇丹,蘇丹黑及油紅O等。脂肪被染色,實際上是蘇丹染料被脂肪溶解吸附而呈現(xiàn)染料的顏色。經(jīng)研究認為組織中脂質(zhì)在液態(tài)或半液態(tài)時,對蘇丹染料著色效果最好。根據(jù)這一原理,適當提高溫度(37-60)對組織切片染色效果是有好處的。,脂類染色,用冰凍或石蠟切片,以水溶性封固劑封固,如甘油、明膠和阿拉伯糖膠等。,脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色或橙紅色(或被蘇丹染液染成紅色),膽脂素呈淡紅色,脂肪酸不著色,細胞核呈藍色。,三、實驗材料,做脂肪的鑒定實驗。應(yīng)選富含脂肪的種子,以花生種子為最好,實驗前一般要浸泡34小時(也可用蓖麻種子)。,四、實驗用具,雙面刀片、試管(最好用刻度試管)、試管夾
3、、試管架、大小燒杯、小量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、毛筆、吸水紙、顯微鏡,五、實驗試劑,蘇丹或蘇丹染液,六、方法步驟,操 作 方 法,注 意 問 題,解 釋,花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。,干種子要浸泡,34,小時,新花生的浸泡時間可縮短。,因為浸泡時間短,不易切片;浸泡時間過長,組織較軟,切片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察。,在子葉薄片上滴,23,滴,染色,1,分鐘。,染色時間不宜過長。,用吸水紙吸去薄片周圍染液,用,50%,酒精洗去浮色,吸去酒精。,酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時,酒精是脂溶性溶劑,可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。,用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上,12,滴蒸餾水,蓋上蓋玻片。,滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。,低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細胞中有染成。,時間一長,油滴會溶解在乙醇中。,七、實驗現(xiàn)象,現(xiàn)象描述:,八、思考與討論,討論:,思考題:,1,、花生種子切片為何要?。?2,、轉(zhuǎn)動細準焦螺旋時,若花生切片的細胞總有一部分清晰,另一部分模糊,其原因一般是什么?,3,、脂肪鑒定中乙醇作用?,