《石墨爐原子吸收光譜測(cè)定人血中鉛的含量》由會(huì)員分享，可在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)《石墨爐原子吸收光譜測(cè)定人血中鉛的含量（26頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,石墨爐原子吸收光譜測(cè)定人血中鉛的含量,馬 璐,石墨爐原子吸收光譜測(cè)定人血中鉛的含量,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理及意義,實(shí)驗(yàn)步驟及方法,注意事項(xiàng),實(shí)驗(yàn)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.了解石墨爐原子吸收法檢測(cè)血鉛的基本原理。,2.理解血鉛的測(cè)定在職業(yè)鉛中毒診斷和職業(yè)性健康檢查中的意義。,3.了解不同基體改進(jìn)劑對(duì)石墨爐原子吸收法測(cè)定血鉛的影響。,實(shí)驗(yàn)原理,職業(yè)性慢性鉛中毒：,由于接觸鉛煙或鉛塵所致的以神經(jīng)、消化、,造血系統(tǒng)障礙為主的全身性疾病,鉛的代謝及分布,鉛塵、鉛煙,肺,血液,（紅細(xì)胞、血漿）,骨骼,肝、腎、腦,尿液,鉛中毒,線(xiàn)
2、粒體,卟啉代謝紊亂,-氨基-r-酮戊酸（ALA),血原卟啉（FEP),血鋅原卟啉(ZPP),血紅素合成抑制,神經(jīng)系統(tǒng)：周?chē)窠?jīng)病,中毒性腦病,消化系統(tǒng)：腹絞痛,血液系統(tǒng)：貧血,點(diǎn)彩紅細(xì)胞,血管、腎臟：牙齦鉛線(xiàn),Fanconi,中毒診斷,血鉛2.9mol/L,(0.6mg/L、600g/L),輕、中、重,鉛中毒實(shí)驗(yàn)室診斷,指標(biāo),職業(yè)接觸限值,診斷值,血鋅原卟啉(ZPP)mol/L(g/gHb),2.91(13.0),血原卟啉(EP)mol/L(g/L),3.56(2000),血鉛(PbB)mol/L(g/L),1.9(400),2.9(600),尿鉛(PbB)mol/L(g/L),0.34(70
3、),0.58(120),尿-氨基-r-酮戊酸(ALA)mol/L(g/L),61.0(8000),結(jié)合,職業(yè)接觸史,、,作業(yè)環(huán)境調(diào)查,、,臨床表現(xiàn),作出診斷（,GBZ37-2002),觀(guān)察對(duì)象,血鉛1.9mol/L,(0.4mg/L、400g/L,),石墨爐原子吸收法-血鉛,基本原理：,血液經(jīng)硝酸處理后進(jìn)入石墨爐原子化器中進(jìn)行原子 化，,被測(cè)元素（Pb）形成基態(tài)原子蒸氣,；,鉛空心陰極燈輻射出的,特征譜線(xiàn)283.3 nm,通被基態(tài)原子態(tài),吸收,，,生成相應(yīng)吸光度值,；,在一定實(shí)驗(yàn)條件下，其,吸光度,與,試樣中的鉛濃度,成,正比,，據(jù)此進(jìn)行血液中鉛的定量分析。,石墨爐原子吸收法-血鉛,基本步驟：
4、,干燥,灰化,原子化,（收集信號(hào)）,氬氣,（保護(hù)、清除,基體蒸汽及雜質(zhì)）,調(diào)整,氣流量、溫度、持續(xù)時(shí)間,對(duì)試驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化,石墨爐原子吸收法-血鉛,基體改進(jìn)劑,作用：保護(hù)被測(cè)物質(zhì),消除基體干擾,血鉛：Triton X-100、磷酸二氫銨,意義及應(yīng)用,血液中95%的鉛在紅細(xì)胞中，其濃度與機(jī)體鉛吸收、分布、排出處于平衡狀態(tài),當(dāng)生活或生產(chǎn)環(huán)境不變，鉛暴露基本穩(wěn)定的情況下，血鉛不僅反映了,近期的鉛接觸水平,，也一定程度上作為,內(nèi)暴露水平,反映,體內(nèi)的鉛負(fù)荷,采樣方便、不易污染、靈敏度高，血鉛常被用于反映鉛對(duì)人體危害的指標(biāo),實(shí)驗(yàn)器材與試劑,儀器：原子吸收分光光度計(jì)（有石墨爐原子化,器和背景校正裝置）；,
5、鉛空心陰極燈；,器材：15ml、1.5 ml 離心管；肝素鈉抗凝真空采血管,燒杯、100ml容量瓶、移液管、膠頭滴管、移,液槍?zhuān)?ml及200ul)及槍頭,試劑：血樣；鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1.00 mg/ml），,硝酸（G.R）；Triton X-100（G.R）；,磷酸二氫銨溶液（A.R）；高純水。,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,（一）溶液配制,鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液、基體改進(jìn)劑、血鉛標(biāo)準(zhǔn)液,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,鉛標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液配制（已配好）,1.00 mg/ml的鉛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用,1%的硝酸,稀釋為：,1 mg/L Pb,標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液I，,0.1 mg/L的Pb,標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II。,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,基體改進(jìn)劑,基體改進(jìn)劑1,100
6、ml溶液含,0.1%Triton X-100,（WS/T 20-1996），,0.1%硝酸,基體改進(jìn)劑2,100 ml溶液含,0.2%磷酸二氫銨，0.3%Triton X-100，0.1%硝酸,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,血鉛標(biāo)準(zhǔn)液配制（,基體改進(jìn)劑-血液-Pb標(biāo)準(zhǔn)液,）,分別用基體改進(jìn)劑1、基體改進(jìn)劑2配置兩組血鉛的標(biāo)準(zhǔn)溶液，,濃度分別為0，10，,20，40，80，g/L,Pb標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（g/L）,0,10,20,40,80,血液（l）,100,100,100,100,100,Pb標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液I（l）,0,0,0,40,80,Pb標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II（l）,0,100,200,0,0,基體改進(jìn)劑,（l）,9
7、00,800,700,860,820,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,（二）被測(cè)樣品制備,1.采用肝素鈉抗凝真空采血管采集被測(cè)血樣，混勻后保存于4C冰箱；,2.吸取100 l血樣分別加兩種基體改進(jìn)劑，稀釋至1ml，充分混勻，配成血液檢測(cè)樣，分別儲(chǔ)存于1.5 ml 離心管中備用。,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,（三）樣品檢測(cè),1.選定被檢測(cè)元素，設(shè)置檢測(cè)條件及參數(shù)；,2.對(duì)血鉛標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測(cè)定，得出吸光度值并擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)；,3.對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)，將吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行比對(duì)，得出血液檢測(cè)液濃度。,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,序號(hào),操作步驟,溫度,（C）,持續(xù)時(shí)間,(s),氣體流量,(L/min),1,干燥1,60,1.0,0.3,2,干燥2
8、,90,40,0.3,3,干燥3,120,10,0.3,4,灰化1,350,0.2,0.3,5,灰化2,650,10,0.3,6,灰化3,650,5.0,0.0,7,原子化,2000,0.9,0.0,8,原子化,2000,3.0,0.0,9,清除,2600,0.3,0.3,10,清除,2600,5.0,0.3,信號(hào)收集,讀數(shù),樣品檢測(cè),注意：,樣品檢測(cè)前，清洗清潔池及進(jìn)樣管；,進(jìn)樣程序開(kāi)始前，先對(duì)石墨管進(jìn)行空燒，排除上次檢測(cè)的余樣，減少干擾；,上樣前需將樣品充分混勻，減少測(cè)量誤差,實(shí)驗(yàn)方法與步驟,結(jié)果分析,1.繪制血鉛的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得出標(biāo)準(zhǔn)方程式,2.樣品的吸光度值減去試劑空白的吸光度值，由標(biāo)準(zhǔn)
9、曲線(xiàn)算得的濃度即為稀釋血樣中的鉛濃度c,0,（g/L）。,3.血樣中鉛的濃度：c=c,0,*,s,注意事項(xiàng),所有實(shí)驗(yàn)使用的器皿都用20%硝酸浸泡48h，然后依次用去離子水和高純水沖洗，晾干備用；,血樣采集、運(yùn)輸、保存及配置過(guò)程中也應(yīng)避免鉛污染；,操作時(shí)，避免實(shí)驗(yàn)器皿觸碰到皮膚及桌面，以防止外源的鉛污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；,正確使用移液槍?zhuān)珳?zhǔn)加樣；,如果血樣含鉛量超出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的測(cè)定范圍，可增加稀釋倍數(shù)。,實(shí)驗(yàn)分組及分工,全班分兩個(gè)組（12人/組）,組1：基體改進(jìn)劑1,基體改進(jìn)劑1作為溶劑的,血鉛標(biāo)準(zhǔn)液,及,被測(cè)血樣的稀釋,組2：基體改進(jìn)劑2,基體改進(jìn)劑2作為溶劑的,血鉛標(biāo)準(zhǔn)液,及,被測(cè)血樣的稀釋,
10、注：每組2份被測(cè)血樣，分別來(lái)自不同的受檢個(gè)體,實(shí)驗(yàn)結(jié)果全班共享，兩組對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行整合及比較，完成結(jié)果討,論及分析,實(shí)驗(yàn)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)方法：簡(jiǎn)單敘述操作步驟,實(shí)驗(yàn)結(jié)果,1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算樣品含鉛濃度；,2.根據(jù)國(guó)家職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)對(duì)被測(cè)者血鉛濃度進(jìn)行初步評(píng)價(jià)及診斷；若要確診，還需哪些資料的補(bǔ)充？,3.討論：加入基體改進(jìn)劑對(duì)血鉛的測(cè)定有什么影響？,實(shí)驗(yàn)試劑的配制,基體改進(jìn)劑,基體改進(jìn)劑1,100 ml溶液含,0.1%Triton X-100,（WS/T 20-1996），,0.1%硝酸,基體改進(jìn)劑2,100 ml溶液含,0.2%磷酸二氫銨，0.3%Triton X-100，0.1%硝酸,檢測(cè)樣品配制,吸取,100 l,血樣加入基體改進(jìn)劑，,稀釋至1ml,，充分混勻，配成血液檢測(cè)樣，分別儲(chǔ)存于1.5 ml 離心管中備用,Pb標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（g/L）,0,10,20,40,80,血液（l）,100,100,100,100,100,Pb標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液I（l）,0,0,0,40,80,Pb標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液II（l）,0,100,200,0,0,基體改進(jìn)劑,（l）,900,800,700,860,820,血鉛標(biāo)準(zhǔn)品配制,謝 謝！,
石墨爐原子吸收光譜測(cè)定人血中鉛的含量
