《畢業(yè)答辯模板》PPT課件

《《畢業(yè)答辯模板》PPT課件》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《《畢業(yè)答辯模板》PPT課件（13頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、LOGO江香薷乙酸乙酯提取物對 -葡萄糖苷酶的抑制作用n班級：n 學(xué)生：xxxn 學(xué) 號：n指導(dǎo) 教 師： 概 述 江 香 薷 江 香 薷 (Mosla chinensis Maxmi . cv. jiangxiangru CV. nov. )為 唇 形 科 一 年 生 草 本 植 物 , 以 干 燥 地 上 部 分 入 藥 , 用 于 暑 濕 感 冒 、 惡 寒 發(fā) 熱 、頭 痛 無 汗 、 腹 痛 吐 瀉 、 小 便 不 利 、 水 腫 等 癥 , 是 江西 省 的 地 道 藥 材 之 一 , 主 產(chǎn) 于 江 西 省 新 余 市 渝 水 區(qū)、 分 宜 縣 等 地 。 但 目 前 的 研 究

2、 大 部 分 集 中 在 江 香薷 揮 發(fā) 油 總 成 分 的 抗 菌 、 抗 炎 、 抗 病 毒 、 對 神 經(jīng)系 統(tǒng) 的 抑 制 作 用 等 ， 而 對 于 非 揮 發(fā) 性 成 分 尤 其 是多 糖 及 黃 酮 類 化 合 物 這 些 具 有 廣 泛 生 物 活 性 的 物質(zhì) 的 研 究 很 少 。 因 此 ， 我 們 認 為 ， 從 江 香 薷 的 非揮 發(fā) 性 成 分 中 分 離 出 新 的 生 物 活 性 物 質(zhì) 并 深 入 研究 其 生 物 活 性 作 用 具 有 重 要 的 研 究 意 義 。 實 驗 材 料材 料 ： 江 香 薷 購 自 江 西 省 南 昌 市 黃 慶 仁 棧

3、華 氏 大 藥 房 。u 試 劑 ： -葡 萄 糖 苷 酶 (-G lucosidase)； 4-硝 基 苯 -D-吡 喃 葡 萄 糖 苷 (4-N- trophenyl-D-glucopyranosodide， pNPG )及 還 原 型 谷 胱 甘 肽 均 系 美 國Sigma公 司 產(chǎn) 品 ； 拜 唐 蘋 （ 阿 卡 波 糖 ， 每 片 含 50mg） ， 拜 耳 醫(yī) 藥 保 健 有 限公 司 ； PH 7.4磷 酸 鹽 緩 沖 液 （ Na2H PO412H 2O、 NaH 2PO42H 2O） ； 無 水碳 酸 鈉 （ Na 2CO3） ； 二 甲 亞 砜 (DMSO)； 無 水 乙

4、 醇 ； 石 油 醚 ； 乙 酸 乙 酯 ；正 丁 醇 及 超 純 水 均 為 國 產(chǎn) 分 析 純 。u 儀 器 ： Uv-2550紫 外 分 光 光 度 計 （ 日 本 島 津 公 司 ） ， 智 能 恒 溫 電 熱 套 及 加熱 回 流 裝 置 ； RE-52A旋 轉(zhuǎn) 蒸 發(fā) 儀 ； 分 液 漏 斗 ； 圓 底 燒 瓶 ； sarorius BP211D電 子 天 平 ； JJ200精 密 電 子 天 平 ； H H -4數(shù) 顯 恒 溫 水 浴 箱 ； 各 種 規(guī)格 移 液 器 及 槍 頭 ； KQ-300DE型 數(shù) 控 超 聲 波 清 洗 器 ； JC101型 電 鼓 風(fēng) 干 燥箱 ；

5、凍 干 機 等 。 實 驗 流 程提 取濃 縮萃 取測 定凍 干 將 乙 酸 乙 酯 萃 取 液 濃縮 后 進 行 冷 凍 干 燥分 別 用 石 油 醚 、 乙 酸乙 酯 、 正 丁 醇 萃 取用 10倍 量 80%乙醇 、 水 各 提 取 2小 時用 旋 轉(zhuǎn) 蒸 發(fā) 儀 濃 縮至 100200ml測 定 乙 酸 乙 酯 提 取 物 對 -葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 作 用 實 驗 方 案u江 香 薷 提 取 物 抑 制 -葡 萄 糖 苷 酶 的 純 酶 活 性 測 定1. 方 案 原 理 ： 在 適 宜 的 條 件 下 ， 底 物 pNPG 在 -葡 萄 糖 苷 酶 的催 化 作 用 下 生

6、 成 pNP和 葡 萄 糖 ， 可 表 示 為 : pNP-G lu -G lucosidase pNP + 葡 萄 糖 其 中 pNP在 410nm下 有 特 征 吸 收 峰 ， 而 pNPG 、 葡 萄 糖 在410nm下 的 紫 外 吸 收 很 小 ， 對 結(jié) 果 影 響 可 以 忽 略 不 計 。通 過 酶 與 底 物 反 應(yīng) 進 行 實 驗 ， 對 -葡 萄 糖 苷 酶 與 底 物 反 應(yīng) 的 底物 濃 度 與 反 應(yīng) 時 間 進 行 優(yōu) 化 。江 香 薷 提 取 物 抑 酶 活 性 篩 選 方 案 （ 1） 測 定 江 香 薷 石 油 醚 提 取 物 及 萃 取 剩 余 物 各 需

7、 五 支 微 型離 心 管 ， 分 別 為 A管 、 B管 、 C管 、 D 管 、 E管 （ 2） 各 管 作 用 如 下 ： A管B管E管C管D管 江 香 薷 提 取 物 測 定 管陽 性 對 照 管調(diào) 零 管測 定 提 取 物 吸 光 度未 被 抑 制 酶 活 性 反 應(yīng) 管 測 定 方 法磷 酸 鉀 緩 沖 液 谷 胱 甘 肽 溶 液 +相 應(yīng) 提 取 液-葡 萄 糖 苷 酶 溶 液 磷 酸 鉀 緩 沖 液 谷 胱 甘 肽 溶 液 +蒸 餾 水 -葡 萄 糖 苷 酶 溶 液 磷 酸 鉀 緩 沖 液 谷 胱 甘 肽 溶 液 +蒸 餾 水 -葡 萄 糖 苷 酶 溶 液 磷 酸 鉀 緩 沖

8、液 谷 胱 甘 肽 溶 液 +阿 卡 波 糖 -葡 萄 糖 苷 酶 溶 液 磷 酸 鉀 緩 沖 液 谷 胱 甘 肽 溶 液 +相 應(yīng) 提 取 液-葡 萄 糖 苷 酶 溶 液 加 入 PNPG反 應(yīng) 10min加 入 Na2CO3溶 液 終 止 反 應(yīng) A管B管C管D管E管加 入 PNPG反 應(yīng) 10min 加 入 PNPG反 應(yīng) 10min加 入 Na2CO3溶 液 終 止 反 應(yīng)加 入 Na2CO3溶 液 終 止 反 應(yīng)加 入 Na2CO3溶 液 終 止 反 應(yīng)加 入 蒸 餾 水 反 應(yīng) 10min加 入 Na2CO3溶 液 終 止 反 應(yīng)加 入 蒸 餾 水 反 應(yīng) 10min 結(jié) 果 與

9、討 論u實驗條件優(yōu)化結(jié)果（1）底物濃度優(yōu)化 -葡萄糖苷酶與底物反應(yīng)對底物濃度進行優(yōu)化的結(jié)果見表1與圖1。底 物 濃 度 吸 光 度 1 吸 光 度 2 吸 光 度 3 平 均 值0.020mg/mL 0.095 0.095 0.105 0.098 0.050mg/mL 0.209 0.209 0.207 0.208 0.100mg/mL 0.313 0.316 0.314 0.314 0.200mg/mL 0.565 0.566 0.563 0.565 0.500mg/mL 1.402 1.392 1.403 1.399 表 1 圖 1 （ 2） 反 應(yīng) 時 間 優(yōu) 化 -葡 萄 糖 苷 酶

10、與 底 物 反 應(yīng) 對 反 應(yīng) 時 間 進 行 優(yōu) 化 的 結(jié) 果 見 表2與 圖 2。時 間 吸 光 度1 吸 光 度2 吸 光 度3 平 均 值5 min 0.363 0.369 0.367 0.366 10 min 0.483 0.491 0.498 0.491 15 min 0.328 0.326 0.332 0.329 20 min 0.442 0.432 0.438 0.437 25 min 0.335 0.357 0.361 0.351 30 min 0.380 0.390 0.394 0.388 表 2 圖 2 由以上實驗確定最佳底物濃度確定為為0.200mg/mL ；最佳反應(yīng)

11、時間確定為10min 。 u江 香 薷 提 取 物 抑 酶 活 性 篩 選 結(jié) 果 根 據(jù) 優(yōu) 化 結(jié) 果 進 行 實 驗 。 E管 （ 酶 +底 物 ） pNP吸 光 度 平 均 值 為 0.63； 在 平 行 條件 下 測 得 陽 性 對 照 阿 卡 波 糖 在 濃 度 為 5.0mg/mL時 抑 制 率 為47.51%。 -葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 率 計 算 公 式 如 下 : 酶 活 性 抑 制 率 =AE-(AA-AC)/AE 100%采 用 幾 個 濃 度 梯 度 測 定 乙 酸 乙 酯 萃 取 組 分 對 -葡 萄 糖 苷 酶的 體 外 抑 制 活 性 ， 各 萃 取 組 分

12、 在 各 濃 度 下 對 -葡 萄 糖 苷酶 的 體 外 抑 制 活 性 見 表 3。 根 據(jù) 表 3作 圖 ， 得 圖 3。 濃 度 管 號 吸 光 度 1 吸 光 度 2 吸 光 度 3 平 均 值 A-C差 值 抑 制 率8mg/mL A 1.556 1.555 1.557 1.556 -0.053 108.41%C 1.61 1.607 1.61 1.609 4mg/mL A 0.926 0.928 0.929 0.928 0.212 66.30%C 0.713 0.718 0.715 0.715 2mg/mL A 0.823 0.825 0.825 0.824 0.452 28.31

13、%C 0.373 0.372 0.373 0.373 1mg/mL A 0.735 0.735 0.732 0.734 0.536 14.87%C 0.198 0.198 0.197 0.198 0.5mg/mL A 0.672 0.675 0.676 0.674 0.561 11.01%C 0.115 0.116 0.11 0.114 表 3 圖 3 實 驗 結(jié) 果 表 明 ， 江 香 薷 乙 酸 乙 酯 提 取 物 具 有 較 高 的 抑 制 活 性 ，濃 度 為 4.0mg/mL呈 現(xiàn) 66.30%的 抑 制 率 ， 濃 度 為 8.0mg/mL呈 現(xiàn) 108.41%的 抑 制 率 ，

14、強 于 陽 性 對 照 市 售 -葡 萄 糖 苷 酶 抑 制 劑 阿 卡波 糖 （ 濃 度 5.0mg/mL抑 制 率 為 47.51%） ， 濃 度 2.0mg/mL時 具有 較 好 的 抑 制 活 性 ， 但 其 抑 制 率 已 經(jīng) 低 于 陽 性 對 照 市 售 -葡 萄糖 苷 酶 抑 制 劑 阿 卡 波 糖 。 u大 學(xué) 本 科 的 學(xué) 習(xí) 生 活 即 將 結(jié) 束 。 在 此 ， 我要 感 謝 所 有 曾 經(jīng) 教 導(dǎo) 過 我 的 老 師 和 關(guān) 心 過我 的 同 學(xué) ， 他 們 在 我 成 長 過 程 中 給 予 了 我很 大 的 幫 助 。 本 文 能 夠 順 利 完 成 ， 要 特 別感 謝 我 的 指 導(dǎo) 老 師 xxx老 師 和 xx副 教 授 ，感 謝 各 位 系 的 老 師 的 關(guān) 心 和 幫 助 。u最 后 向 所 有 關(guān) 心 和 幫 助 過 我 的 人 表 示 真 心的 感 謝 。致 謝