“觀察根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂”實(shí)驗(yàn)方法的改進(jìn)3100字

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1、“觀察根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂”實(shí)驗(yàn)方法的改進(jìn)3100字 　　 "觀察根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂";實(shí)驗(yàn)方法的改進(jìn) /html/zongjie/ 　　"觀察植物根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂";是一個(gè)經(jīng)典的高中生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，通過(guò)該實(shí)驗(yàn)，學(xué)生可以觀察并識(shí)別細(xì)胞有絲分裂的各個(gè)時(shí)期，加深對(duì)較抽象的細(xì)胞有絲分裂過(guò)程的理解。但此實(shí)驗(yàn)也是人教版高中生物必修1必做的十幾個(gè)實(shí)驗(yàn)中成功率最低的一個(gè)實(shí)驗(yàn)，如果按照教科書(shū)上的實(shí)驗(yàn)方法步驟開(kāi)展，①需要較長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行解離及漂洗，勢(shì)必影響后續(xù)觀察，造成實(shí)驗(yàn)難以當(dāng)堂課完成。②用0.01℅龍膽紫染液染色，細(xì)胞染色太深，顯微鏡下的視野呈紫色一片，根本看不清細(xì)

2、胞結(jié)構(gòu)，不易辨認(rèn)染色體。③用兩片載玻片壓片，當(dāng)取下上面的載玻片時(shí)，會(huì)連帶蓋玻片甚至根尖也被取下了。④解離時(shí)間不夠充分，細(xì)胞不僅不容易分散開(kāi)來(lái)，而且細(xì)胞重疊在一起，影響了觀察。為了讓學(xué)生可以真實(shí)地體驗(yàn)到成功的實(shí)驗(yàn)效果，筆者經(jīng)過(guò)課前大量的預(yù)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)參考其他老師的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，通過(guò)不斷改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法步驟，摸索出在40分鐘課時(shí)就可以明顯觀察到實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象（分裂相的細(xì)胞）的有效的實(shí)驗(yàn)方法與步驟，有的班級(jí)一次成功率高達(dá)95%以上?，F(xiàn)將改進(jìn)的實(shí)驗(yàn)方法、步驟介紹如下。 　　一、實(shí)驗(yàn)材料的改進(jìn) 　　1.實(shí)驗(yàn)材料的選擇 　　按本校教學(xué)進(jìn)度安排，本節(jié)實(shí)驗(yàn)課一般排在11月底12月初進(jìn)行。按照教科書(shū)提供的實(shí)驗(yàn)材料洋蔥進(jìn)行生根培

3、養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)不易發(fā)根，即使發(fā)根了，生根數(shù)也少。原來(lái)我們地區(qū)市面出售的洋蔥是本地產(chǎn)的洋蔥。本地產(chǎn)的洋蔥在深秋時(shí)收獲，隨即進(jìn)人休眠期，休眠期一般為三個(gè)月左右，在此期間不發(fā)根或極少發(fā)根。而同時(shí)期的大蒜卻容易發(fā)根，而且大蒜瓣多，每一瓣都可發(fā)根十幾條，比洋蔥經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的多。考慮到洋蔥是鱗莖可培養(yǎng)生根，而在南方11月份上市的水仙、風(fēng)信子等也具備鱗莖，是不是也可以作為觀察根尖有絲分裂的材料呢？通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)證明水仙、風(fēng)信子不僅容易生根，而且發(fā)根整齊、數(shù)量也多，也是觀察的好材料。上述4種材料都是觀察根尖有絲分裂的良好實(shí)驗(yàn)材料，可根據(jù)需要選擇。首選大蒜的根尖為實(shí)驗(yàn)材料，因其不僅生根容易、生根數(shù)多、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，更重要的是其根

4、比較細(xì)，相對(duì)易于解離且分裂相的細(xì)胞也比較多。 　　2.實(shí)驗(yàn)材料的預(yù)處理 　　因?yàn)檠笫[、大蒜、水仙、風(fēng)信子等材料都存在休眠現(xiàn)象，在發(fā)根前先將材料放在4℃的冰箱中3-5天?？梢越獬菝?，容易生根。 　　（1）根尖的培養(yǎng)與處理 　　選用100mL的燒杯，將洋蔥、水仙、風(fēng)信子等外層干死的鱗片葉撕去，將洋蔥、水仙、風(fēng)信子的底盤(pán)舊根刮去，讓洋蔥、水仙、風(fēng)信子的底部與燒杯口的水接觸，放在陰暗處；將大蒜瓣剝?nèi)ネ膺吥べ|(zhì)枯衣，用牙簽將蒜瓣串起，讓牙簽兩端架在燒杯邊緣，讓蒜瓣的底部與燒杯口的水接觸。每個(gè)培養(yǎng)裝置每天換一次水，在室溫下放置4-5天，觀察根長(zhǎng)到2cm左右時(shí)，將整個(gè)培養(yǎng)裝置（根連同燒杯）一起放入4℃

5、冰箱24小時(shí)進(jìn)行低溫處理，以便增加分裂相細(xì)胞。 　?。?）根尖的固定 　　在上午10點(diǎn)至下午4點(diǎn)之間任畢業(yè)收集整理何時(shí)段，剪取根尖2-3cm（長(zhǎng)些比較好，以方便后面的解離、漂洗步驟）放入卡諾氏液（無(wú)水乙醇：冰醋酸=3：1）中浸泡24小時(shí)，而大蒜瓣可以直接將整個(gè)蒜瓣浸泡在卡諾氏液中（因?yàn)榇笏獾母容^細(xì)，待需要時(shí)再剪取根尖更方便）。再放入85℅乙醇半小時(shí)后，轉(zhuǎn)入70℅乙醇中4℃保存。筆者經(jīng)過(guò)比較后發(fā)現(xiàn)，固定后的根尖不僅可以隨用隨取，而且可以縮短解離時(shí)間。 　　二、實(shí)驗(yàn)方法步驟的改進(jìn) 　　1.解離時(shí)間的改進(jìn) 　　教科書(shū)認(rèn)為：剪取根尖2-3mm，立即放入盛有鹽酸和酒精的混合液（1：1）的培養(yǎng)皿中，

6、在室溫下解離3-5min。筆者預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：①解離時(shí)，根尖不能太短，將固定好的2-3cm的根尖整個(gè)放入解離液中解離，以便后面的操作步驟的進(jìn)行。②3-5min的解離時(shí)間不夠，每種實(shí)驗(yàn)材料具體的解離時(shí)間是不同，至少需要解離20min以上。像水仙的根尖較粗，至少需要解離30min。多次的預(yù)實(shí)驗(yàn)證實(shí)：解離這一步驟是最關(guān)鍵的一步，只有充分解離了，分生組織中的細(xì)胞才容易分離，最后的制片步驟中細(xì)胞才容易分散開(kāi)來(lái)。而且，解離時(shí)間即使過(guò)長(zhǎng)（24小時(shí)）也絲毫不影響分裂相細(xì)胞的觀察。所以必須延長(zhǎng)解離時(shí)間。根尖完全酥軟的標(biāo)志是根尖色澤變白，略帶透明，而含分生區(qū)的根尖尖端呈現(xiàn)乳白色。因?yàn)榻怆x時(shí)間長(zhǎng)，教師可在課前預(yù)先完成。

7、上課前10分鐘將解離好的根尖直接放入盛有清水的培養(yǎng)皿中漂洗。即上課前，教師預(yù)先完成解離和漂洗的步驟。上課時(shí)，學(xué)生可直接從盛有清水的培養(yǎng)皿中取根尖進(jìn)入"染色";這一步驟。這樣大大節(jié)省了課堂實(shí)驗(yàn)的時(shí)間。 　　2.染色劑及染色方法的改進(jìn) 　　教科書(shū)認(rèn)為：把根尖放入盛有質(zhì)量濃度為0.01g∕ml的龍膽紫溶液的培養(yǎng)皿中染色。我們發(fā)現(xiàn)顯微鏡視野下只見(jiàn)紫色一片，根本分不清細(xì)胞與染色體。因?yàn)樵?低溫誘導(dǎo)染色體加倍";實(shí)驗(yàn)中使用過(guò)改良的苯酚品紅染液，筆者經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)，用改良苯酚品紅染液染色較龍膽紫染色理想。如圖1-圖5所示。 /html/zongjie/ 　　圖1大蒜根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂 　　（10x4

8、0、改良苯酚品紅染液） 　　改良苯酚品紅染液配方如下：1.母液A：取3g堿性品紅，溶解在100ml的70%酒精（可長(zhǎng)期保存）。2.母液B：取母液A10ml，加入90ml的5%苯酚水溶液（兩周內(nèi)使用）。3.取B液45ml，加入6ml冰醋酸和6ml37%甲醛，此為苯酚品紅染液。4.改良苯酚品紅：取250ml苯酚品紅染液，加入475ml的45%冰醋酸和9g山梨醇，過(guò)濾，即為改良苯酚品紅染液。改良苯酚品紅配制后可立即使用，但染色能力較差；一般在配制兩周后染色能力顯著增加；三個(gè)月后使用效果極佳?？墒褂?-3年。 　　染色方法：用鑷子將根尖從盛有清水的培養(yǎng)皿中取出，放在載玻片中，用吸水紙吸取水分后，用鑷子

9、截取含分生區(qū)的乳白色根尖尖端，根尖的其他部分去除。在根尖尖端用滴管滴一滴改良苯酚品紅染液，用鑷子在染液中直接將根尖搗碎。實(shí)踐證明在染液中將根尖搗碎使染液容易進(jìn)入細(xì)胞，使染色體更容易染上顏色。 　　3.制片步驟的改進(jìn) 　　制片是觀察有絲分裂相比較關(guān)鍵的步驟之一，按照教科書(shū)實(shí)驗(yàn)要求：在蓋玻片上再放一個(gè)載玻片，用拇指輕壓載玻片，使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。但在實(shí)際操作中，取下上面的載玻片時(shí)往往連帶取下了蓋玻片和根尖，影響觀察。而且這個(gè)"輕壓";的程度學(xué)生很難掌握，太重了，蓋玻片容易碎；太輕了，細(xì)胞分散不開(kāi)。教師預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，用鑷子的鈍端或鉛筆帶橡皮頭的一端輕輕敲打蓋玻片，因?yàn)楦庖呀?jīng)充分解離，且在染色時(shí)已搗碎，

10、再進(jìn)行輕敲，則根尖細(xì)胞很容易分散開(kāi)來(lái)。在敲擊過(guò)程中可以用吸水紙蓋在蓋玻片上用左手固定住，一方面防止蓋玻片移位造成細(xì)胞變形，影響觀察，另一方面可以吸去溢出的染液。這樣，臨時(shí)裝片便制作好了，即可在顯微鏡下觀察。 作文 / 　　三、實(shí)驗(yàn)教學(xué)反思 　　通過(guò)上述對(duì)解離、染色、制片等步驟的改進(jìn)，由于，教師在課前已完成解離、染色步驟，縮短了課堂上學(xué)生制作臨時(shí)裝片所用時(shí)間，學(xué)生大概只要用15分鐘就可以完成臨時(shí)裝片的制作與觀察，而且按改進(jìn)的方法步驟制作的裝片內(nèi)分裂相細(xì)胞較多（通常在1張壓片中可以觀察到各分裂相的細(xì)胞），這樣可以有更多的時(shí)間讓學(xué)生識(shí)別各個(gè)時(shí)期的染色體形態(tài)，還會(huì)有時(shí)間對(duì)影響實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象觀察的原因進(jìn)行討論。 　　總之，學(xué)生實(shí)驗(yàn)的成敗，與老師提供的實(shí)驗(yàn)材料、實(shí)驗(yàn)方法步驟的設(shè)計(jì)等密切相關(guān)。這就要求教師一定要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。只有通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)的探究，堅(jiān)持從本校的教學(xué)實(shí)際情況出發(fā)，行之有效地借鑒他人的經(jīng)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)方法、步驟進(jìn)行適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)，才能讓學(xué)生通過(guò)一節(jié)實(shí)驗(yàn)課真正有收獲，有感悟。