《生物化學(xué)實驗》教學(xué)大綱(精)

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1、生物化學(xué)實驗》教學(xué)大綱 課程名稱 英文名稱 面向?qū)I(yè) 生物化學(xué)實驗 BiochemistryExperiment 生物科學(xué)、生物技術(shù)、 課程編號：030042實驗類別：專業(yè)基礎(chǔ)課實驗實驗學(xué)時：40實驗學(xué)分：2 一、實驗教學(xué)的指導(dǎo)思想和教學(xué)目的 1、生物化學(xué)是一門實驗科學(xué)，它應(yīng)用化學(xué)的方法和手段來研究生物有機體的物質(zhì)組成及變化。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,各種先進的手段愈來愈被廣泛地應(yīng)用于生物化學(xué)研究中。 2、生物化學(xué)實驗是生物化學(xué)教學(xué)中不可缺少的實踐環(huán)節(jié)，其作用是給予學(xué)生以生物化學(xué)實驗的基本方法與技術(shù)的初步訓(xùn)練，從而進一步理解理論課所學(xué)內(nèi)容。 3、生物

2、化學(xué)實驗的教學(xué)要求：使學(xué)生掌握一般生物化學(xué)實驗中最常用的分離分析方法以及相應(yīng)儀器的使用，了解實驗原理和操作方法，使學(xué)生受到生物化學(xué)實驗技能訓(xùn)練。 4、結(jié)合理論課所學(xué)內(nèi)容相應(yīng)地安排實驗課，力求實驗內(nèi)容與理論教學(xué)內(nèi)容相協(xié)調(diào)。 二、實驗教學(xué)的基本要求 生物化學(xué)實驗教學(xué)以學(xué)生在實驗室實踐為主，發(fā)揮學(xué)生的主體作用，教師只作必要的實驗原理和注意事項的講解，并注意引導(dǎo)學(xué)生拓展所學(xué)的內(nèi)容，通過實驗內(nèi)容的學(xué)習(xí)了解生物化學(xué)技術(shù)的原理和操作要點，并注意培養(yǎng)學(xué)生的實踐能力和創(chuàng)新能力。 1．遵守實驗室規(guī)則，愛護實驗儀器設(shè)備。2．實驗前要充分預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)，做好實驗記錄，認(rèn)真完成實驗報告。 3．實驗操作要細(xì)心謹(jǐn)慎

3、，嚴(yán)格遵守操作規(guī)則，注意安全。4．實驗完畢，注意關(guān)閉燈、電、火、窗 三、實驗教材《生物化學(xué)實驗技術(shù)簡明教程》河北科技大學(xué)校內(nèi)自編講議 王金宇張華峰魏弟李敏 生物化學(xué)實驗》 科學(xué)出版社陳鈞輝陶力李俊等 四、實驗考核實驗總成績：實驗過程表現(xiàn)成績、實驗報告成績，各占50%。實驗過程表現(xiàn)成績：包括學(xué)習(xí)態(tài)度是否認(rèn)真、實驗操作是否正確規(guī)范、實驗結(jié)果是否正確、是否具有創(chuàng)新意識、打掃衛(wèi)生等方面。 成績分為：優(yōu)秀、良好、一般、差三級.相當(dāng)于百分制90分以上、75~90分、60~75分、60分以下。 實驗報告成績：包括實驗報告的格式是否正確、原理是否論述清楚、實驗結(jié)果分析討論是否符合邏輯，報告字

4、跡是否清楚等方面。 成績分為：AA-BB-CC-。相當(dāng)于百分制95?100分、90?94分以上、80?89分、70?89 分、60~69分、60分以下。 五、主要儀器設(shè)備與器材 控溫消煮爐自動凱氏定氮儀電泳儀垂直板電泳槽平板電泳槽冰柜分光光度計紫外分光光度計微波爐電冰箱磁力攪拌器電動攪拌機電磁爐電子分析天平恒溫水浴鍋電熱鼓風(fēng)干燥箱核酸蛋白質(zhì)檢測儀層析缸部分收集器蠕動泵等。 六、實驗項目表 序 號 實驗項目 學(xué)時 實驗要求 實驗 類型 每 組 人 數(shù) 課外實習(xí) 糖類 1 血液中葡萄糖的測定 3 掌握鄰甲苯胺法測定血糖的原理和方法

5、 一般 實驗 2 2 總糖和還原糖含量的測定 4 掌握樣品中還原糖和總糖的提取和測定方法 一般 實驗 2 脂類 1 卵磷脂的提取和鑒定 3 了解用乙醇作為溶劑提取卵磷脂的原理和方法 一般 實驗 2 蛋白質(zhì) 1 蛋白質(zhì)濃度的測定一一 微量克氏定氮法； 雙縮脲法測定蛋白質(zhì)濃度；福林（Folin）—酚試劑法測定蛋白質(zhì)的濃度； 紫外吸收法測定蛋白質(zhì)的含量； 考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測定蛋白質(zhì)濃度 3~6 熟悉并掌握一種測定蛋白質(zhì)濃度的原 理和方法 一般 實驗 2 2 氨基酸分離

6、氨基酸紙層析法；離子交換柱層析法分離氨基酸； 5 掌握分配層析的原理；掌握氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)（包括點樣、平衡、展層、顯色、鑒定；掌握離子交換柱層析法分離氨基酸的原理；能夠 一般 實驗 3 學(xué)會操作方法。 3 層析法分離純化蛋白質(zhì)一一離子交換層析分離純化蛋白質(zhì)； 凝膠層析分離純化蛋白質(zhì)；親和層析分離純化蛋白質(zhì)； 4~6 掌握一種或兩層析法分離純化蛋白質(zhì)的原理和操作方法； 一般 實驗 4 4 電泳法分離蛋白質(zhì)一一醋酸纖維素薄膜電泳法聚丙烯酰胺凝膠電泳法 5~8 掌握電泳法分離蛋白質(zhì)的原理及用途，學(xué)會一種或兩種電泳法分離

7、蛋白質(zhì)的方法。 一般 實驗 1,4 5 蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的測 定一一 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳 法； 凝膠層析法； 8 在給定實驗?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生能夠自行設(shè)計實驗，掌握一種測定未知蛋白質(zhì)的分子量的方法；學(xué)會獨立設(shè)計實驗策略、摸索和設(shè)計樣品處理等操作細(xì)節(jié)，并通過獨立思考分析結(jié)果。 設(shè)計 實驗 4 酶 1 酶特性實驗— 酶的專一性；激活劑和抑制齊U、溫度、pH對酶促反應(yīng)速度的影響。 4 本實驗涵蓋了酶（蛋白質(zhì)）的提取、酶活性的影響因素等內(nèi)容，在給定實驗?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生能夠自行設(shè)計實驗.可鍛煉學(xué)生綜合運用所學(xué)生物學(xué)、

8、儀器分析、化學(xué)等專業(yè)知識的能力。 綜合 設(shè)計 實驗 2 2 酶的提純及動力學(xué)研究一一酵母醇脫氫酶;過氧化氫酶；溶菌酶；蔗糖酶；堿性磷酸酶；胰蛋白酶； 4~14 學(xué)會一種酶的提取、純化方法；了解酶動力學(xué)及酶性質(zhì)測定的一般原理和方法；學(xué)會計算酶的活力及比活力；掌握測定米氏常數(shù)Km及Vmax的方法。本實驗可鍛煉不生綜合運用生物學(xué)、化學(xué)、數(shù)學(xué)等專業(yè)知識的能力，使學(xué)生掌握酶的提純、活力測定、米氏方程計算、動力學(xué)測定等實驗操作或知識內(nèi)容。 綜合 設(shè)計 實驗 4 3 谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定 肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定；血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定； 4 了解轉(zhuǎn)氨酶的性質(zhì)，掌握谷丙

9、轉(zhuǎn)氨酶活力的測定方法 一般 實驗 2 核酸 1 核酸的定量測定 3 掌握一種或兩種核酸定量測定的方法 一般 2 RNA的定量測定 實驗 2 核酸的提取及檢測一一動物肝臟中DNA的提取質(zhì)粒DNA的提?。唤湍窻NA的提??；瓊脂糖凝膠電泳 8?10 學(xué)習(xí)和掌握核酸提取的原理和方法在給定實驗?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生學(xué)習(xí)根據(jù)核酸或蛋白質(zhì)樣品設(shè)計電泳實驗方案，分析制膠、染色等操作中的常見問題并設(shè)計方案加以解決。另外，使學(xué)生學(xué)會分析瓊脂糖電泳實驗結(jié)果。 綜合 設(shè)計 實驗 4 七、說明：《生物化學(xué)實驗》教學(xué)共40

10、學(xué)時，每學(xué)期實驗項目的開出是根據(jù)專業(yè)要求、實驗課時實驗條件將以上列出的項目進行合理組合后開出。 八、主要參考資料 1． 《生物化學(xué)》高教出版社 沈同 2． 《生物化學(xué)》高教出版社 古練權(quán) 3． 《生物化學(xué)實驗技術(shù)》講義 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué) 4． 《生命的化學(xué)》期刊 5． 《Biochemistry》期刊 6． 《生物化學(xué)實驗》 科學(xué)出版社 陳鈞輝陶力李俊等 7． 《生物化學(xué)儀器分析與實驗技術(shù)》 化學(xué)工業(yè)出版社 周先碗胡曉倩 8． 《生物化學(xué)實驗方法和技術(shù)》 科學(xué)出版社 陳毓荃 本大綱主筆人： 實驗中心主任： 制定日期：2005年10月