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1、2022年高考生物 復(fù)習考點四 DNA的粗提取與鑒定 新人教版選修1
1. 基本原理
2. 操作過程
材料的選?。哼x用DNA含量相對較高的生物組織
去除雜質(zhì):利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的
不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì)
DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,沸水
中加熱5 min,溶液變成藍色
易錯警示 (1)本實驗不能用哺乳動物成熟紅細胞作實驗材料,原因是哺乳動物成熟紅細胞無細胞核。可選用雞血細胞作材料。(2)實驗中兩次使用蒸餾水,第一次的目的是使成熟的雞血細胞漲破釋放出DNA,第二次的目的是稀釋NaC
2、l溶液,使DNA從溶液中析出。
2. 下圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題:
(1)步驟一中,向雞血細胞液中加入____________并攪拌,可使雞血細胞破裂。
(2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的____________。
(3)步驟三、四的操作原理是________________________________________________
________________________________________________________________________;
步驟四中,通過向溶液中加入____
3、________調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至____________mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質(zhì)。
(4)步驟七:向步驟六過濾后的____________中加入等體積的冷卻的____________,靜置2~3 min,溶液中會出現(xiàn)________色絲狀物,這就是粗提取的DNA。
(5)步驟七:DNA遇____________試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈______色。
答案 (1)蒸餾水 (2)濾液 (3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì) 蒸餾水 0.14 (4)濾液 酒精 白 (5)二苯胺 藍
解析 破
4、碎紅細胞應(yīng)用蒸餾水,使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出??赏ㄟ^加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精,遇二苯胺加熱呈藍色。
1. DNA與蛋白質(zhì)在NaCl溶液中溶解度比較
2 mol/L NaCl溶液
0.14 mol/L NaCl溶液
溶解規(guī)律
DNA
溶解
析出
蛋白質(zhì)
部分發(fā)生鹽析沉淀
溶解
NaCl溶液從2 mol/L降低過程中,溶解度逐漸增大
2. DNA粗提取與鑒定中
5、不同試劑的用途及原理比較
試劑
濃度
用途
原理(“△”為實驗的主要原理)
NaCl溶液
2 mol/L
溶解DNA
DNA在NaCl溶液中的溶解度隨溶液濃度的變化而改變,溶解度在2 mol/L時最大、在0.14 mol/L時最小
△
0.14 mol/L
析出DNA
2 mol/L
鑒定時的溶劑
酒精
95%(體積分數(shù))
除去雜質(zhì)以提純DNA
DNA不溶于酒精,但是細胞中的某些物質(zhì)可以溶于酒精
△
二苯胺
鑒定劑
DNA遇二苯胺(沸水浴)會變藍色
△
檸檬酸鈉
0.03 g/mL
抗凝劑
除去血液中的鈣離子,防止血液凝固
3. DNA粗提取實驗材料和方法的選擇
(1)不同生物的組織中DNA含量不同
在選取材料時,應(yīng)本著DNA含量高、材料易得、便于提取的原則。
(2)材料不同所采用的提取方法不同
①植物組織:取材→研磨→過濾→沉淀。
②雞血:制備雞血細胞液→提取核DNA→溶解細胞核內(nèi)DNA→析出并濾取DNA→DNA再溶解→提取較純凈的DNA。