（新課標通用）2020屆高考生物一輪復習 考點42 微生物的培養(yǎng)與應用訓練檢測（含解析）

考點42微生物的培養(yǎng)與應用一、基礎題組1利用選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物，通過缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機培養(yǎng)基，可從土壤中分離出的微生物依次是()A硝化細菌、放線菌、根瘤菌B根瘤菌、青霉菌、圓褐固氮菌C圓褐固氮菌、放線菌、硝化細菌D圓褐固氮菌、酵母菌、硝化細菌答案D解析缺氮培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機培養(yǎng)基上能生長的生物依次是自生固氮微生物、真菌、硝化細菌。根瘤菌屬于共生固氮微生物，放線菌不屬于真菌，因此只有D項符合題意。2下列關于制備固體培養(yǎng)基時倒平板的敘述，正確的是()A倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進行高壓蒸汽滅菌處理B應將打開的培養(yǎng)皿的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿的皿蓋上C為了防止微生物落入培養(yǎng)基，要在火焰旁進行操作D倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，要立即將平板倒過來放置答案C解析培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿都應該在倒平板之前進行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；倒平板時，用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約1020 mL)倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿，等培養(yǎng)基冷卻凝固后，再將平板倒過來放置，D錯誤。3.在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種如圖甲、培養(yǎng)結果如圖乙。有關敘述錯誤的是()A接種前應對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌B連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落C接種過程中至少需要對接種環(huán)灼燒5次D圖甲中a區(qū)域為劃線的起始位置答案D解析用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基在接種前應進行高壓蒸汽滅菌，A正確；微生物接種采用連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落，B正確；由圖甲可知，平板共劃線4次，每次劃線前和劃線結束后均需灼燒接種環(huán)，所以至少需要對接種環(huán)灼燒5次，C正確；由圖乙可知，圖甲中d區(qū)域為劃線的起始位置，D錯誤。4下列關于微生物培養(yǎng)和利用的敘述不正確的是()A利用稀釋涂布平板法只能分離微生物不能對微生物進行計數(shù)B接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D用大白菜腌制泡菜的過程中亞硝酸鹽含量變化是先增加后減少答案A解析用稀釋涂布平板法可以分離微生物也可以對微生物進行計數(shù)，A錯誤；接種劃線可以將菌體分散，經過培養(yǎng)可以得到單菌落，B正確；以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌，C正確；在泡菜腌制過程中，開始亞硝酸鹽含量增加，一般腌制10天后含量開始下降，D正確。5高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中是極為重要的酶制劑。研究者從熱泉中篩選出了能高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，篩選過程如下圖所示。(1)進行過程所用的接種方法是_。微生物篩選培養(yǎng)過程，為了防止雜菌污染，需要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_處理，整個過程中需要進行_操作。(2)培養(yǎng)基一般要含有細菌生存所需的水、無機鹽、碳源和_。(3)部分嗜熱菌在號培養(yǎng)基上生長時可釋放_分解培養(yǎng)基中的淀粉，在不同菌落周圍形成大小不同的透明圈，應挑出_的菌落，接種到號培養(yǎng)基上。(4)分離細胞時通常用固體培養(yǎng)基，原因是_。(5)培養(yǎng)微生物實驗中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過_處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴散。答案(1)稀釋涂布平板法滅菌無菌(2)氮源(3)淀粉酶透明圈大(4)固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進行篩選(5)滅菌解析微生物培養(yǎng)前需對培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等進行滅菌處理，整個接種過程中需要進行無菌操作；培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機鹽、碳源、氮源；本題是要選擇能產生耐高溫淀粉酶的嗜熱菌，所以能產生淀粉酶的細菌會分解培養(yǎng)基中的淀粉，培養(yǎng)基中出現(xiàn)以淀粉分解菌為中心的透明圈，依此可挑選出相應的菌落。6某實驗小組為了研究不同的碳源對纖維素分解菌分解纖維素能力的影響，以稻草粉、纖維素粉和濾紙漿為纖維素來源，研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌，實驗結果如表所示。請分析回答下列問題：菌株CMC酶活性(mg·mL)/30 min稻草粉纖維素粉濾紙漿A0.270.240.56B0.680.340.63C0.830.330.78D0.180.300.53(1)實驗室培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分除了碳源還有_，培養(yǎng)基滅菌的常用方法為_。接種微生物的常用方法有_。(2)實驗室分離纖維素分解菌的培養(yǎng)基一般要加入_，該物質能和纖維素形成紅色復合物，當纖維素分解菌將纖維素分解后，紅色復合物消失，形成的_的大小可作為判斷纖維素酶活性大小的依據(jù)。(3)分析表格可知，該實驗的自變量是_，若要分解稻草粉中的纖維素，則最好選擇_(填表格中的字母)菌株。(4)通過實驗數(shù)據(jù)可以得出的實驗結論是_。答案(1)氮源、水和無機鹽高壓蒸汽滅菌法平板劃線法和稀釋涂布平板法(2)剛果紅透明圈(3)纖維素的來源、菌種C(4)不同菌株對同一碳源作用產生的酶活性不一樣，同一菌株對不同纖維素碳源的分解能力也不一樣解析(1)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分包括碳源、氮源、水和無機鹽等，培養(yǎng)基滅菌常用的方法為高壓蒸汽滅菌法。平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物常用的方法。(2)在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，這樣，我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。透明圈越大，說明纖維素酶活性越大。(3)該實驗研究不同的碳源對纖維素分解菌分解纖維素能力的影響，并研究了A、B、C、D四種纖維素分解菌， 因此自變量為纖維素的來源、菌種。由表格可知，以稻草粉為纖維素來源時，纖維素分解菌C的CMC酶活性最高，因此要分解稻草粉中的纖維素，最好選擇C菌株。7在調查和分離湖水中耐鹽細菌的實驗中，先將10升湖水水樣濃縮至10毫升，然后各取濃縮水樣1毫升，涂布到多個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請分析回答下列問題：(1)可以通過提高培養(yǎng)基中_的濃度，篩選被調查細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_培養(yǎng)基。(2)要提高實驗結果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設置的對照組是_。為檢驗(1)中篩選方法的效果，可以設置的對照組是_。(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是_。為防止冷凝水影響細菌的生長，需將培養(yǎng)皿_培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產生的單個菌落在生態(tài)學中可以被稱為_。(4)根據(jù)培養(yǎng)皿上菌落的平均數(shù)可以計算湖水中該種細菌的密度，但計算的數(shù)據(jù)要比實際活菌的數(shù)目少，原因是_。(5)在3個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的樣品液0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別是156、178和191。該過程采取的接種方法是_，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為_個。答案(1)鹽(NaCl)選擇(2)未接種(或接種等量無菌水)的培養(yǎng)基未加高濃度鹽的培養(yǎng)基培養(yǎng)(3)高壓蒸汽滅菌倒置種群(4)當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落(5)稀釋涂布平板法1.75×108解析(5)每克樣品中的菌株數(shù)(C÷V)×M(156178191)÷3÷0.1×1051.75×108個。8某興趣小組欲調查學校某區(qū)域土壤中微生物的種類，并進行了微生物的分離等工作。回答下列問題：(1)該小組采用稀釋涂布平板法從土壤中分離分解纖維素的微生物，在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；分離得到的純化單菌落屬于_(填“種群”或“群落”)；篩選纖維素分解菌常用_法，根據(jù)菌落周圍是否出現(xiàn)_來判定。(2)該小組采用平板劃線法分離土壤中的微生物，操作時，接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是_。(3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的_(至少兩點)等特征。在實驗中小組每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果，這樣可以防止_。答案(1)檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格種群剛果紅染色透明圈(2)灼燒將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落(3)形狀、大小、隆起程度及顏色因培養(yǎng)時間不足導致遺漏菌落數(shù)目解析(1)在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格；分離得到的純化單菌落是同種生物，屬于種群；篩選纖維素分解菌常用剛果紅染色法，根據(jù)菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈來判定。(2)接種環(huán)常采用灼燒滅菌法滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落。(3)鑒定土壤中微生物的種類，可以通過菌落的形狀、大小、隆起程度及顏色等特征。在實驗中小組每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足導致遺漏菌落數(shù)目。9下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方，請根據(jù)表格和所學知識回答下列相關問題：成分含量成分含量蛋白胨10.0 g乳糖5.0 g蔗糖5.0 gK2HPO22.0 g顯色劑(伊紅美藍)0.2 g瓊脂12.0 g將上述物質溶解后，用蒸餾水定容到1000 mL(1)大腸桿菌的同化類型為_，從生態(tài)系統(tǒng)的成分上看，大腸桿菌屬于_。(2)在微生物的實驗室培養(yǎng)中，獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是_，因此需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行_(填“消毒”或“滅菌”)，操作者的雙手需要進行清洗和_?？諝庵械募毦捎米贤饩€殺滅，其原因是紫外線能使_，還能破壞DNA的結構。(3)根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于_(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細菌，需將培養(yǎng)基中_換成_，若要鑒定分解尿素的細菌，還需將伊紅美藍換成_。(4)培養(yǎng)大腸桿菌時，常用的接種方法是_和_。通過上述方法可以分離得到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，稱為_。(5)(多選)使用以下微生物發(fā)酵生產特定產物時，所利用的主要微生物的細胞結構與大腸桿菌相同的是()A制作果酒 B由果酒制作果醋C制作泡菜 D制作腐乳答案(1)異養(yǎng)型'分解者 (2)防止外來雜菌的污染'滅菌'消毒'蛋白質變性 (3)鑒別'蛋白胨' 尿素' 酚紅指示劑(4)平板劃線法' 稀釋涂布平板法' 菌落(5)BC解析該培養(yǎng)基含有顯色劑(伊紅美藍)，可使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)金屬光澤，因此屬于鑒別培養(yǎng)基。若要分離能分解尿素的細菌，應以尿素為唯一氮源，因此應將蛋白胨換成尿素。若要鑒別尿素分解菌，應在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。制作果酒、果醋、泡菜和腐乳利用的微生物分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌和毛霉，其中醋酸菌、乳酸菌與大腸桿菌都屬于原核生物，酵母菌和毛霉屬于真核生物。二、模擬題組10(2018·成都一診)土壤中的苯酚(C6H5OH)對環(huán)境有極大的污染，實驗室希望能從土壤中分離出能專一性降解苯酚的微生物，下圖是部分實驗過程?；卮鹣铝袉栴}：(1)為了分離純化目的菌種，步驟的培養(yǎng)基中都加入了一定濃度的苯酚，該物質能為微生物提供_，除此之外，培養(yǎng)基中一般都還需要水、_等營養(yǎng)物質。(2)制備步驟所需要的固體培養(yǎng)基，操作順序是：計算稱量_倒平板。為了在步驟的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養(yǎng)液進行多次稀釋，原因是_。(3)研究人員想通過比較試管甲和乙中微生物的生長情況，來證明分離出來的微生物只能以苯酚作為碳源，若甲試管中的液體培養(yǎng)基中的唯一碳源是苯酚，那么，乙試管中培養(yǎng)基成分與甲相比，區(qū)別是_。研究人員對甲、乙兩只試管進行接種時，所選菌種都來自步驟平板上的同一個單菌落，這樣做的目的是_。答案(1)碳源氮源和無機鹽(2)溶化滅菌在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細胞(3)用其他碳源替代苯酚保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的解析(1)步驟的培養(yǎng)基中苯酚可以為微生物提供碳源，此外培養(yǎng)基中還應該包括水、氮源和無機鹽等營養(yǎng)成分。(2)制備固體培養(yǎng)基的操作順序為：計算稱量溶化滅菌倒平板。為了在步驟的平板上形成單個的菌落，涂布平板前，需要對培養(yǎng)液進行多次稀釋，是因為在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成單個細胞。(3)甲乙試管是對照實驗，如果甲加入的是苯酚，則乙試管加入的是可以替代苯酚的其他碳源。研究人員對甲、乙兩只試管進行接種時，所選菌種都來自步驟平板上的同一個單菌落，以保證甲、乙兩支試管中的微生物種類是相同的。11(2018·山東二模)科研人員從青藏高原祁連山地區(qū)的土壤中分離篩選出一株高效耐低溫原油降解菌YF281(8)，應用該菌能夠提高高寒地區(qū)石油等烴類污染物的分解效率，為我國的環(huán)境保護事業(yè)做出貢獻。請回答相關問題：(1)選擇青藏高原祁連山地區(qū)進行篩選，其原因是_。(2)篩選原油降解菌的培養(yǎng)基中應加入_作為唯一碳源。從功能上看，該種培養(yǎng)基稱為_培養(yǎng)基。(3)用平板劃線法純化該細菌時，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是_。(4)研究人員設計實驗探究該菌降解原油的最適溫度。實驗分為5組，下圖AE為各組培養(yǎng)一段時間后菌落的生長情況。本實驗所使用的接種方法是_，接種操作時應特別注意控制的無關變量是_。AE組控制的不同條件是_。若要確定更準確的最適溫度，應該在_組和_組所對應的溫度范圍內設置更小的溫度梯度，進一步實驗。答案(1)該地區(qū)的微生物更耐低溫(2)原油(或石油)選擇(3)將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落(4)稀釋涂布平板法接種的菌液量(或涂布器的滅菌情況)溫度BD解析(1)要篩選出耐低溫的原油降解菌，需從低溫環(huán)境去選擇。(2)要想篩選出能降解石油的細菌，培養(yǎng)基中只有一種碳源，即原油，這是一種選擇培養(yǎng)基。(3)第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始的原因是將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落。(4)由圖示可知，該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法。接種時應特別注意控制的無關變量是接種的菌液量、涂布器的滅菌情況等。AE組控制的不同條件是溫度。從圖中可以看出C組的菌落數(shù)最多，因此要確定更準確的最適溫度，應該在B和D所對應的溫度范圍內設置更小的溫度梯度，進一步實驗。12(2018·廣東一模)下圖表示某種感染細菌的實驗室培養(yǎng)過程，其中中出現(xiàn)6個菌落。請回答下列有關問題：(1)中是固體培養(yǎng)基，與()中的液體培養(yǎng)基所含的基本成分相同，都含有_，不同的是制作時加入了_以使培養(yǎng)基呈固態(tài)。(2)鑒定前進行細菌培養(yǎng)，目的是_；兩次接種均應在_條件下操作，防止雜菌污染。(3)中出現(xiàn)的理想菌落應分別由_所形成。若菌落連成片，則應對中的培養(yǎng)液進行_處理再接種；通過觀察菌落的_能初步鑒定可疑細菌。(4)為進一步了解這種細菌對抗生素的敏感性以方便對癥下藥，現(xiàn)用青霉素、羅紅霉素進行實驗，請簡述實驗思路：_。答案(1)水、碳源、氮源、無機鹽瓊脂 (2)讓細菌繁殖，獲得足夠數(shù)量的細菌用于實驗無菌(3)單個活細菌稀釋特征(4)分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，再分別處理中各兩個菌落，另兩個菌落作對照，然后在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況或分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，準備多個與相同的(無菌)培養(yǎng)基，平均分成三組，用青霉素、羅紅霉素溶液分別處理兩組，另一組不處理作對照，然后同時對三組進行接種，在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況解析(1)固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的基本成分都含有水、碳源、氮源、無機鹽；固體培養(yǎng)基含有瓊脂以使培養(yǎng)基呈固態(tài)。(2)鑒定前進行細菌培養(yǎng)，目的是讓細菌繁殖，獲得足夠數(shù)量的細菌用于實驗；兩次接種均應在無菌條件下操作，防止雜菌污染。(3)號培養(yǎng)基中出現(xiàn)的理想菌落應分別由單個活細菌所形成；若菌落連成片，則應對中的培養(yǎng)液進行稀釋處理再接種；通過觀察菌落的特征能初步鑒定可疑細菌。(4)根據(jù)題意分析，實驗的目的是探究這種細菌對青霉素、羅紅霉素的敏感性，自變量是抗生素的種類，根據(jù)單一變量原則和對照性原則設計實驗：分別配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，再分別處理中各兩個菌落，另兩個菌落作對照，然后在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況?；蚍謩e配制濃度適宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌)，準備多個與相同的(無菌)培養(yǎng)基，平均分成三組，用青霉素、羅紅霉素溶液分別處理兩組，另一組不處理作為對照，然后同時對三組進行接種，在適宜條件下培養(yǎng)，觀察菌落的生長情況。13(2018·保定一模)下表是某研究小組配制的適合尿素分解菌生長的培養(yǎng)基，請回答下列問題：KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4·7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g瓊脂15.0 g將上述物質溶解后，用蒸餾水定容至1000 mL(1)上述培養(yǎng)基的成分中，為尿素分解菌提供碳源的是_，提供氮源的是_。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于_培養(yǎng)基；從功能上看，屬于_培養(yǎng)基。(2)當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于_，此時平板上的菌落數(shù)較能準確的反映樣品中的活菌數(shù)。(3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在_區(qū)間的平板統(tǒng)計計數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的真實數(shù)目低，原因是_。(4)尿素分解菌經X射線照射后不能正常生長，添加某種維生素后才能正常生長，原因是_。答案(1)葡萄糖尿素固體選擇(2)樣品稀釋液中的一個活菌(3)30300當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落(4)X射線照射導致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶解析(1)題中表格的培養(yǎng)基成分中，為尿素分解菌提供碳源的是葡萄糖，提供氮源的是尿素。該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)上看，屬于固體培養(yǎng)基；從功能上看，屬于選擇培養(yǎng)基。(2)當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，此時平板上的菌落數(shù)較能準確的反映樣品中的活菌數(shù)。(3)培養(yǎng)過程中，常選擇菌落數(shù)在30300區(qū)間的平板統(tǒng)計計數(shù)。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的真實數(shù)目低，是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落。(4)尿素分解菌經X射線照射后不能正常生長，添加某種維生素后才能正常生長，可能是因為X射線照射導致尿素分解菌發(fā)生基因突變，從而缺少合成某種維生素必需的酶。三、高考題組14(2017·全國卷)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：(1)有些細菌能分解尿素，有些細菌則不能，原因是前者能產生_。能分解尿素的細菌不能以尿素的分解產物CO2作為碳源，原因是_。但可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是_(答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇_(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是_。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有_(答出兩點即可)。答案(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定解析(1)有些細菌能分解尿素是因為這些細菌能產生脲酶，將尿素分解成CO2和NH3。能分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2作為碳源合成有機物，但這些細菌可用葡萄糖作為碳源，進入細菌體內的葡萄糖的主要作用是作為能源物質氧化分解為細胞生命活動提供能量，為其他有機物的合成提供原料。(2)為了篩選可分解尿素的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應選擇尿素作為唯一氮源，這樣只有能分解尿素的細菌才能在培養(yǎng)基上生存。若選擇“NH4NO3”或“尿素NH4NO3”作為氮源，能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，它們可以為細菌生長提供無機營養(yǎng)；同時，KH2PO4和Na2HPO4還可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定。15(2017·江蘇高考)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中，對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟，從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題：(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水，其中可作為碳源的有_。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng)，苯酚用量應隨轉接次數(shù)增加而逐漸_，以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集，應進一步_，以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質外，還必須添加_。(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖，在圖中_(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應，下表中15號比色管的苯酚濃度應分別為_。管號123456苯酚濃度(mg/L)1如果廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，則需將殘留液稀釋_(填序號：51020)倍后，再進行比色。答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8解析(1)分析富集培養(yǎng)基的成分可知，培養(yǎng)基中蛋白胨、苯酚中含C，可作為碳源。(2)在接種培養(yǎng)時，隨轉接次數(shù)的增加，應逐漸增加培養(yǎng)基中苯酚(碳源)的含量，以達到富集酚降解菌的目的。若接種培養(yǎng)后平板中菌落過于密集，應繼續(xù)稀釋涂布，以降低平板上菌落密度，便于菌落計數(shù)與分離。稀釋涂布時所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質外，還必須添加瓊脂等物質作為凝固劑。(3)利用連續(xù)劃線法接種時，越在最后劃線區(qū)域，菌落的密度越小，越容易獲得單菌落，所以，圖中區(qū)域更易獲得單菌落。(4)根據(jù)表中6號比色管中苯酚濃度為1 mg/L可以推知，15號比色管的苯酚濃度應分別為0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。根據(jù)題意，廢水為50 mg/L苯酚溶液，降解后約有21%的苯酚殘留，要使稀釋后的苯酚殘留液濃度介于01 mg/L之間，需將殘留液稀釋20倍左右，再進行比色。16(2018·全國卷)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制_的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質，營養(yǎng)物質類型除氮源外還有_(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有_(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是_，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是_。(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結果：甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133；乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。有人認為這兩位同學的結果中，乙同學的結果可信度低，其原因是_。答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同學的結果中，1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差解析(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其他微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物生長需要多種營養(yǎng)物質，除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質等。氮元素是蛋白質和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有蛋白質和核酸。(3)依據(jù)淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產淀粉酶的微生物。(4)乙同學結果不合理，因為1個平板的計數(shù)結果與另2個相差懸殊，結果的重復性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結果。17(2018·全國卷)在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：(1)在實驗室中，玻璃和金屬材質的實驗器具_(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是_。(3)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_，在照射前，適量噴灑_，可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經過_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內并沒有達到相應溫度，最可能的原因是_。答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少(3)破壞DNA結構消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內冷空氣排盡解析(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)煮沸消毒法即在100 煮沸56 min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在7075 煮30 min 或在80 煮15 min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少。(3)因紫外線能破壞DNA結構，所以密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。(4)乙醇消毒后有氣味，影響水質，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；氯氣具有強氧化性可以用于水源消毒，因此水廠供應的自來水通常是經過氯氣消毒的。(5)采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達到設定要求，而鍋內并沒有達到相應溫度的現(xiàn)象。- 14 -