實驗診斷復習重點[共36頁]

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1、血液檢查Examination of Blood 血液:不斷地流動于人體的循環(huán)系統(tǒng)中,直接或間接參與全身各個組織器官的新陳代謝、功能調節(jié)及維持人體內、外環(huán)境間的平衡,完成各項生理功能活動。血液的組成Composition of Blood有形成份:RBC、WBC、PLT無形成份血漿:H2O 1- 92%、蛋白、酶、維生素、激素、電解質、膽紅素、葡萄糖、尿素、肌酐、血脂、抗體、血液一般檢查General Examination of Blood(血常規(guī))血液有形成份的組成參考值、臨床意義何謂MCV、RDW紅細胞形態(tài)觀察Erythrocyte count (RBC) 紅細胞計數Hemoglobin

2、 determination (Hb) 血紅蛋白測定Leukocyte count (WBC) 白細胞計數Differential leukocyte count白細胞分類Platelet count ( PLT) 血小板計數 特點:紅、白細胞都比成人高,紅細胞呈“生理性巨幼紅細胞貧血”的表現,白細胞呈感染的表現(粒細胞增高并左移)紅細胞計數 Erythrocyte Count方法:顯微鏡計數法;全自動血細胞分析儀計數法操作:用等滲稀釋液將血液作 200 倍稀釋,滴入血細胞計數板中靜止 1-2 min,于高倍鏡下計數 5 個中方格紅細胞總數,經換算即得每升血液中血紅細胞數。公式:RBC/L=

3、5個中方格總數510200106報告格式: .1012/L 3.811012 /L參 考 值(男)4.05.51012/L(女)3.55.01012/L(新生兒)6.07.01012/L各種紅細胞的形態(tài)平均紅細胞容積(MCV):MCV=紅細胞比容/紅細胞數紅細胞數參考值:80-100 FL紅細胞容積分布寬度 (RDW):RDW=S.D./ 平均紅細胞體積平均紅細胞體積參考值:11.5-14.5%RDW 的統(tǒng)計學實質是紅細胞大小的變異系數 CV臨床意義:( 增加 )相對性增高:各種原因導致的血漿容量減少,使紅細胞相對增多。劇烈嘔吐、嚴重腹瀉、大面積燒傷、多汗、多尿。絕對性增高:由于缺氧而致紅細胞

4、代償性增多,紅細胞增多的程度與缺氧程度成正比生理性:胎兒、新生兒、高原地區(qū)居民、劇烈體力勞動、情緒激動時,紅細胞可一過性增多病理性:嚴重慢性心、肺疾患,如阻塞性肺氣腫、肺源性心臟病、紫紺型先天性心臟病,真性紅細胞增多癥臨床意義:( 減少 )生理性:妊娠中、后期,血容量增加約 25 %,引起血液稀釋;6個月2歲的兒童由于生長發(fā)育迅速,血容量急劇增加而致造血原料相對不足;老年人造血功能明顯減低致紅細胞減少;月經期暫時引起下降。病理性:各種類型貧血:如缺鐵性貧血、巨幼紅細胞性貧血、溶血性貧血、再生障礙性貧血、繼發(fā)性貧血等。 網織紅細胞計數及正常參考值:網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后,在完全成熟之前的過

5、渡型紅細胞。由于胞漿中尚存核糖體、核糖核酸等嗜堿物質,用煌焦油蘭等染料進行活體染色后,胞漿中可見藍綠或藍色的網狀結構,故名網織紅細胞。成人:0.5%-1.5%新生兒(3月):2%-6%網織紅細胞計數的意義增多:骨髓增生旺盛。常見于溶血性貧血,尤其是急性溶血性貧血(可達20%以上)、急性大失血貧血治療有效。如缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血,經相應治療后1-2日即開始,1周左右達最高峰減少:骨髓增生低下,如再生障礙性貧血、溶血性貧血有再生障礙危象時血紅蛋白測定方法:氰化高鐵血紅蛋白法全自動血細胞分析儀原理:除Hbs外,多種血紅蛋白(Hb)均可被高鐵氫化鉀氧化成高鐵血紅蛋白(Hi),再與CN- 結合生成

6、穩(wěn)定的棕紅色氧化高鐵血紅蛋白(HiCN),在540nm處有一吸收峰貧血Anemia是一種癥狀,是指人體單位體積循環(huán)血中,紅細胞計數、血紅蛋白含量和紅細胞比積低于正常參考值即稱為貧血 RBC:主要功能:攜帶O2、運輸CO2膜組成:膜糖、膜脂、膜蛋白膜結構:不對稱性、流動性、骨架膜功能:物質運輸、抗原性、變形性、免疫功能Hb:是紅細胞中的運輸蛋白,主要功能是吸收肺部大量CO2并輸送到身體各組織Hct:是指抗凝全血經離心沉淀后,測得下沉的紅細胞在全血中所占容積的百分比值 各系統(tǒng)的表現:全身軟弱無力、疲乏困倦、皮膚粘膜蒼白呼吸及循環(huán)系統(tǒng): 心悸、氣短、心率加快、呼吸加重等,嚴重者發(fā)生心力衰竭消化系統(tǒng):

7、食欲不振、腹脹、惡心、嘔吐、消 化不良、腹瀉或便秘等泌尿生殖系統(tǒng): 尿可出現少量蛋白,腎功能輕度減低,甚至發(fā)生尿少、尿閉和急性腎功能衰竭神經系統(tǒng): 頭痛、頭暈、畏寒、反應遲鈍、耳鳴、眼花貧血的病因與發(fā)病機制分類紅細胞生成減少:骨髓造血功能障礙、紅細胞生成素產生缺陷、造血物質缺乏或失利用紅細胞破壞增多:紅細胞內在異常:膜缺陷、酶缺陷、珠蛋白鏈生成異常、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿紅細胞外在異常:免疫性、機械性、化學與物理、感染、單核吞噬細胞系統(tǒng)功能亢進紅細胞丟失過多:急性、慢性失血貧 血 分 類貧血發(fā)病病因分類缺鐵性貧血、巨幼細胞性貧血溶血性貧血、血紅蛋白病紅細胞膜缺陷致溶貧自身免疫性溶貧陣發(fā)性睡眠性

8、血紅蛋白病紅細胞形態(tài)分類類 型 MCV(f l) MCH (pg) 大細胞型 100 32正 常 80 94 26 32單純小細胞 80 26小細胞低色素 80 26紅細胞骨髓增生特點分類骨髓增生活躍性貧血:缺鐵性、溶血性、失血后貧血骨髓增生不良性貧血:原發(fā)性及繼發(fā)性再生障礙性貧血巨幼紅細胞性貧血:營養(yǎng)性巨幼紅細胞性、惡性貧血貧血的診斷了解貧血程度、類型、病因詢問病史、體格檢查、實驗室診斷貧血的檢驗診斷血紅蛋白含量Hb輕度:成年男性120g/L;成年女性110g/L中度:90g/L重度:10.0109/L;急性心肌梗死后12d,常見WBC明顯增高;急性溶血亦見WBC增多,增多成分以中性分葉核粒

9、細胞為主。急性大出血:如脾臟破裂或宮外孕輸卵管破裂后,WBC迅速增多常達20.0109/L。這可能是應激狀態(tài)、或內出血一過性缺氧。急性中毒:如安眠藥、滴滴畏中毒, WBC可高達20109/L以上,代謝性酸中毒。如糖尿病、酮體癥、酸中毒及慢性腎炎尿毒癥時,也常見WBC增多,均以中性粒細胞為主。白血病及惡性腫瘤:急、慢性白血病、肝癌、胃癌等腫瘤細胞可產生促粒細胞生成素,并能吸引骨髓儲備池WBC釋放。白細胞減少某些革蘭氏陰性桿菌感染如傷寒、副傷寒桿菌感染時,白細胞總數可低至2.0109/L;病毒感染。某些血液病如再生障礙性貧血;巨幼紅細胞性貧血;惡性網狀細胞病 (惡組);急性非白血性白血病。脾功能亢

10、進破壞過多、脾素抑制骨髓生成;慢性理化損傷;電離輻射,如X線、放射性核素等;服氯霉素。自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡。 白細胞分類計數與臨床意義中性粒細胞(neutrophil):游走、吞噬 50 70%嗜酸性粒細胞(eosinophil):致敏反應0.5 5%嗜堿性粒細胞(basophil):釋放組織胺、肝素0 1%單核細胞(monocyte):吞噬、清除死亡細胞及異物3 8%淋巴細胞(lymphocyte):參與體液、細胞免疫20 40% 中性粒細胞Neutrophil 生理特性:滲出性、變形性、趨化性、吞噬性骨髓 血液分裂池 成熟池 儲備池 邊緣池循環(huán)池 4-5d 1-3d 2-3d原粒

11、早幼粒中幼粒/晚幼粒桿狀核/桿狀核分葉核/分葉核細胞核左移:周圍血中桿狀核粒細胞增多甚至出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞時均稱為核左移桿狀核粒細胞增多:6%:輕度左移;10%:中度左移;25%:重度左移或稱為類白血病反應類白血病反應 :患兒男, 2.5歲,日本籍,于10天前因受冷而發(fā)熱,自測體溫38(腋下),無畏寒、頭痛、嘔吐、腹瀉,就診于當地醫(yī)院,血常規(guī) WBC 28.9109/L,阿莫西林0.125g 3/日治療,無明顯好轉,4天后患兒面、背及雙上肢皮膚反復出現散在紅色丘疹,停藥否無區(qū)別。1999年7月5日急診住我院。實驗室檢查,血象:Hb110g/L, WBC 23109/L,血小板 1

12、21109/L,幼稚型異常淋巴 56%,成熟淋巴 21%,嗜酸性粒細胞2%,中性粒細胞 21%,骨髓穿刺二次,骨髓細胞分類象同血涂片象。細胞核右移:正常人周圍血中性粒細胞以三葉核者為主,若五葉者超過5% 時為核右移,此時常伴有白細胞總數減少。一過性地出現核右移是正常現象。如在疾病進行期突然出現核右移的變化,則表示預后不良臨床意義生理性增高:見于妊娠期、分娩時、新生兒期;劇烈運動、熱水浴;嚴寒、高溫;午后高于清晨;飲食后高于飲食前等病理性增高:急性感染;嚴重組織損傷;急性大出血;急性中毒;白血病及惡性腫瘤病例:患者朱全妹,女性,47歲,因磚墻砸傷腰骶臀部致左下肢活動受限伴腰骶臀部皮膚發(fā)紫5天于2

13、0011204由急診收治入院。1創(chuàng)傷性失血性休克 2腰骶部、髂后部、右臀后部皮膚嚴重挫擦傷伴皮下積血 3骨盆嚴重骨折 4會陰部、肛門嚴重挫裂傷血常規(guī)檢查結果:Hb:92g/L RBC:3.01012/L PLT:271109/L WBC:32.7109/L:中幼粒細胞: 2% ;晚幼粒細胞:5% 桿狀核粒細胞:35% ;多核粒細胞:45% ;淋巴細胞:9% 單核細胞: 4% 中性粒細胞減少:某些革蘭氏陰性桿菌感染;某些血液病;脾功能亢進;慢性理化損傷;自身免疫性疾病淋巴細胞Lymphocyte 病理性增多見于:病毒性感染;某些慢性感染;各類淋巴細胞性白血病淋巴細胞減少見于:接觸放射線;應用腎上

14、腺皮質激素及腎移植術后、AIDS單核細胞Monocyte單核細胞病理性增多見于:心內膜炎、瘧疾、黑熱病;急性感染的恢復期;活動性肺結核及粟粒性結核;慢性單核細胞白血病嗜酸性粒細胞Eosinophil增高見于:過敏性疾病;寄生蟲病;皮膚病;慢性嗜酸性白血病及淋巴瘤血小板計數platelet是由骨髓中成熟巨核細胞生成;在止血過程中起著重要的作用計數方法:顯微鏡計數法;全自動血細胞分析儀法參考值100300109/L臨床意義血小板增多 400109/L;見于血小板增多癥、慢性粒細胞增多癥、真性紅細胞增多癥、骨髓纖維化、脾切除等。血小板減少 100109/L;見于血小板減少紫癜(ITP)、再生障礙性貧

15、血、急性白血病、X射線照射。病例 患者:女32歲 已婚 ,有一8歲女兒,無業(yè)主述:經常頭痛、疲乏、失眠。右肋骨下疼痛,胸骨疼痛。患者長期服用減肥藥,無間斷血液檢驗結果:WBC:15.4109/L RBC:5.531012/LNC: 85.2% Hb: 150g/L LC: 11.6% PLT: 1321 109/LMO: 1.8% RDW: 17.8 %EOS: 0.9% BAS: 0.5%全自動血細胞分析儀多項參數測定儀器組成:1.主機 2 終端機 3 打印機工作原理閱讀報告:1.18、23 項參數中英文報告2.圖解3. 警告標志4. 含義報告庫爾特原理:孔徑阻抗細胞計數原理白細胞自動化分類

16、二項式分類 粒細胞和非粒細胞三項式分類 淋巴中性粒細胞和中間細胞五項式分類 嗜中嗜堿嗜酸淋巴單核細胞紅 細 胞 直 方 圖缺鐵性貧血鐵粒幼細胞性貧血輕型 - 血紅蛋白生成障礙性貧血巨幼細胞性貧血葉酸治療后第三章Examination of Abnormality in Hemostasis and Coagulation Mechanisms of abnormality in hemostasis and coagulation一、出血與止血Haemorrhage and Hemostasis二、凝血與抗凝Coagulation and Anticoagulation三、纖維蛋白溶解與抗纖維

17、蛋白溶解Fibrinolysis and Antifibrinolysis四、出血性疾病實驗診斷、臨床意義 Laboratory Diagnosis and Clinical Significance of the Haemorrhage Disease第一節(jié)The Basic Theoretcis一、出血與止血Haemorrhage and Hemostasis止血的三個基本條件:(1)血管結構與功能正常:完整性、彈性、收縮,釋放因子,激活血小板、凝血系統(tǒng)(2)血小板功能與量的正常:黏附、凝集、活化、提供界面 等(3)凝血系統(tǒng)的正常:14個因子,(HMW, Kininogen, kallik

18、rein K)二、血液凝固機理The mechanism of coagulation凝血機理血小板基本結構與功能三、抗凝血系統(tǒng)The System of Anticoagulation1細胞抗凝2.體液抗凝四 纖維蛋白溶解機制Fibrinolysis System and MechanismFDP1、抗凝血酶作用2、結合纖維蛋白單體進而抑制纖維蛋白的聚合3、抑制血小板的粘附和聚集功能4、抑制a 活化FSummaryl止血:血管收縮 血小板激活 凝血系統(tǒng)活化局部血粘度升高l血小板:黏附 聚集 釋放 促凝物質 l提供磷脂界面l凝血系統(tǒng):一條共同途徑 兩條凝血道路三個凝血階段 四組(14個)凝血因

19、子l抗凝:細胞抗凝 體液抗凝l纖溶:纖溶酶 FDP第二節(jié) 出血性疾病實驗診斷臨床意義Laboratory Diagnosis and ClinicalSignificance of the Haemorrhage Disease出血、血栓性疾病的檢查Examination of Haemorrhage and Thrombosis DiseasesImportant Factors:血管Blood vessel血小板Platelet凝血因子 Coagulate Factors纖溶Fibronalysis System一、血管壁檢測毛細血管抵抗試驗( CRT,90-100mmHg M5 F10)

20、血管壁結構和/功能缺陷:遺傳性出血性毛細血管擴張癥、過敏性/單純性/其它血管性紫癜血小板量和/質異常:原發(fā)性/繼發(fā)性血小板減少癥、血小板增多癥、先天性/獲得性血小板功能缺陷血管性血友病 (v WD)vWF:Ag測定(94.1%32.5%)減低:vWD增高:血栓性疾病 心梗 心絞痛 腦血管病 糖尿病 妊高征 腎小球病6-keto-PGF1a減低:同上 腫瘤轉移 周圍血管血栓形成 TTPThrombomoduline antigen TM:AgEndothelin-1, ET-1二、血小板數量和功能1、血小板計數 (platelet count, PCT)2、血小板粘附功能(platelet ad

21、hesiveness test PAdT)3、血小板聚集功能(platelet aggregation test PAgT)4、血塊退縮試驗(clot retraction test,CRT)5、血小板相關免疫球蛋白測定6、血小板第三因子測定1.Platelet count參考值:100300x109/L臨床意義:減少400x109/L原發(fā)性:骨髓增生性疾病:CML 真性紅細胞增多癥原發(fā)性血小板增多癥 骨髓纖維化早期 反應性增多:急性感染 急性溶血 某些癌癥2. Platelet adhesion test PAdT (黏附率%)原理增高:血栓前狀態(tài)/血栓性疾?。盒墓?心絞痛 糖尿病 腦血管病

22、 妊高征 腎小球腎炎 動脈粥樣硬化 肺栓塞 深靜脈血栓形成 避孕藥減低:vWD 巨大血小板綜合征 血小板無力癥 尿毒癥 AL 肝硬化 MDS 低/無纖維蛋白血癥 異常蛋白血癥3. Platelet Aggregation Test (PAgT)方法:利用切變力或誘導劑誘導血小板聚集,檢測自發(fā)性血小板聚集和循環(huán)血小板聚集。常用的血小板聚集誘導劑ADP:引起血小板外形改變,GPIIb/IIIa上纖維蛋白原受體暴露,結合纖維蛋白原聚集。血小板表面有三種ADP受體。Col:引起血小板活化、粘附、顆粒釋放、聚集。低劑量聚集由釋放引起。對ASA敏感。受體有GPIa/IIa、GPVI。膠原粘附需vWF和GP

23、Ib。AA:激活血小板,促釋放而聚集,通過環(huán)氧化酶形成TXA2,對ASA敏感。 Adr:通過TXA2形成而活化磷脂酶c,故可被ASA抑制。不完全抑制GPIIb/IIIa活化和與纖維蛋白原結合。其他誘導劑:凝血酶、TXA2類似物、 PAF、5-HT 以及A23187等。 另外:抗原抗體復合物、纖溶酶、蛋白溶酶、某些病毒、細菌及其產物、血管緊張素、某些腫瘤細胞和顆粒材料也可引起血小板聚集成為誘發(fā)血栓形成的病理機制。誘導劑種類選擇與血小板先天性/獲得性缺陷遺傳性或獲得性缺陷 ADP Adr Ris血小板無力癥(GT) 無反應 無反應 正常巨大血小板綜合癥(BSS) 正常 正常 無反應血管性血友病 (

24、vWD) 正常 正常 無反應誘導劑種類和濃度選擇與抗血小板藥物監(jiān)測抗血小板藥物ASAAA 、Col 、ADP抵克力得ADP自發(fā)性血小板聚集(SPA)在急性心梗預后判斷中的意義方法:全血或PRP在不加誘導劑條件下于370C1000rpm連續(xù)攪拌20min。判斷:重度 10min內聚集率 20%輕度 20min內聚集率 20%陰性 20min內聚集率95% CD62P CD633%凝血酶活化血小板:糖尿病伴微血管病變、高血壓病、冠心病、高脂血癥、腦血栓形成短暫性腦缺血發(fā)作、腦動脈硬化 CD42a CD42b CD62p CD63 血小板相關疾病巨血小板:綜合征(BSS)血小板巨大 CD42a CD

25、42b CD61血小板無力癥:(GT)CD41 CD61CD42aCD42b / 血小板群異三、凝血系統(tǒng)檢查1、凝血時間內源途徑(cloting time,CT)2.部分凝血活酶時間內源途徑(active partial thromboplastin,APTT)3.血漿凝血酶原時間測定外源途徑(plasmaprothrombin time, PT)4、纖維蛋白原測定(fibrinogen test)5、凝血酶時間測定共同途徑(thrombin time )6.復鈣交叉試驗(cross recalcification test, CRT ) 四. 抗凝血物質檢測血漿抗凝血酶活性測定;血漿抗凝血酶

26、抗原測定;血漿蛋白C測定;血漿蛋白S測定等五.纖溶活性與降解產物檢測血漿組織型纖溶酶激活物測定;血漿纖溶酶原活性測定;血漿纖溶酶原活化抑制物測定;血漿纖溶酶抗纖溶酶復合物測定;血漿D二聚體檢測;血漿纖維蛋白相關肽檢測;第三節(jié) 一級篩選試試驗1、出血時間(bleeding time BT)測定。原理:血流停止時間主要受血小板及毛細血管的影響。方法:出血時間測定器法參考值:6.9 +/- 2.1min 2、凝血時間(Coagulation time,CT)測定原理:血液接觸帶陰電荷表面(如玻璃、白陶土)激活XIIa,最后使fibrinogen轉化為Fibrin.(檢查內源性途徑)。方法:試管法,3

27、只內徑相同的小試管(內徑8cm)抽血液入針筒時計時。每管注入血液1ml,37水箱,4分鐘后每30s觀察一次,血液不動為止(管),以二管凝血時間為準,第三管可做為血塊收縮用。參考值:412min3. 血小板計數4、血塊凝縮試驗(CRT) 原理:血液凝固 血小板收縮酶 血塊收縮、血清析出血塊凝縮影響因素:) 血小板量和質) FI 濃度3)FXIII的水平4)紅血球的比積方法:靜脈采用1ml,置于內徑8mm,干試管內,加塞靜止37水浴箱中, 于1/2h、1h及24h分別觀察血塊凝 縮情況正常于1/21h開始,24h凝縮完全。結果判斷(1)完全凝縮:血塊與管壁分離,血清析出1/21/3 (2)部分凝縮

28、:血塊大部分凝縮,血清析出1/3 (3) 凝縮不良:血塊略有凝縮,少量血清析出(4) 不凝縮:血塊維持原樣,無血清析出5毛細血管脆性試驗(Capillary resistance test)一級篩選試驗臨床意義及應用參考范圍 實驗名稱 可能原因1出血器法4.8-9 BT 血管2試管法412min CT 凝血因子3100300109/L PC 血小板4完全收縮/24h CRT 抗凝物質510個出血點以內 Capillary Resist Test6比服藥前延長2以內 Aspirin耐量必要時測血小板粘附試驗或聚集試驗 第四節(jié) 二級篩選試試驗1、凝血酶原時間測定(Prothrombin time,

29、 PT)原理:血漿組織凝血活酶(III)+ 鈣 凝血時間 外源途徑方法:Quik氏法(現已用儀器取代)。每次做正常對照。參考值:1214s或大于正常對照3s以上為異常;PTR 1.0+/- 0.5;INRISI 1.0+/- 0.12、部分凝血活酶時間(Active partial thromboplastin time, APTT)。原理:血漿腦磷脂白陶土激活XIIXIIa此試驗主要測定內源系統(tǒng)第一階段有無凝血障礙。參考值:35s45s,患者結果較正常對照延長10s有意義 3、凝血酶時間共同途徑(thrombin time, TT)原理:受檢血漿標準凝血酶 血漿凝固方法:患者血漿 正常血漿

30、凝血酶試劑 0.1ml 0.1ml 0.1ml37水箱 觀察凝固時間參考值:與正常對照相差3s以內為正常,若超過正常對照3s以上為延長。4、血漿纖維蛋白原測定原理:血漿纖維蛋白原與氯化鈣作用生成纖維蛋白。方法:儀器法 (定氮法)參考值:2- 4g/L 5、復鈣交叉試驗 (已有凝血障礙)凝血因子缺失 vs抗凝物質存在;待測血漿加正常血漿(1/51/10);糾正結果第五節(jié) 纖溶活性檢查試驗1.3P試驗(plasma protamine paracoagulation test)2.優(yōu)球蛋白溶解試驗(euglobulin lysis time, ELT ) 3.血漿纖維蛋白降解產物測定(fibrin

31、 degradation products, FDP)4.D-二聚體測定 (D-dimer, DD) 1.血漿魚精蛋白副凝試驗(Plasma protamine paracoagulation Test, 3P)原理:纖維蛋白單體和纖維蛋白的降解產物(FDP)結合成的可溶性復合物,在魚精蛋白的作用下解離,使纖維蛋白單體聚合沉淀呈 現可見的顆粒、纖維蛋白絲或膠凍膠凍膠凍狀。方法:病人血漿0.5ml1魚精蛋白0.05ml搖勻置37水浴箱15min后,觀察結果。臨床意義:正常3P試驗陰性。DIC確診試驗之一 2. 優(yōu)球蛋白溶解試驗原理:優(yōu)球蛋白 溶解在等滲鹽水中纖維蛋白 Ca2(或凝血酶)纖溶酶原纖

32、溶酶凝固溶解血漿活化素方法:加鈣法 加凝血酶法臨床意義:正常溶解時間大于120分鐘; 90分鐘有意義。DIC晚期90分鐘 ,DIC確診試驗之一。3. 血漿纖維蛋白降解產物測定Latex method:參考值:小于 5 mg/L4. D-dimer determinationLatex method:參考值:小于 200ug/L二級篩選試驗應用、臨床意義KPTT延長主要為XI、IX、VIII因子減少,各型血友病篩選試驗, 凝血酶、纖維蛋白原、XII、PF3減少也有影響。PT延長主要見于I、II、VII、V、X因子減少,如肝病、DIC等。TT延長主要見于抗凝血酶物質存在,DIC時延長。纖維蛋白原測

33、定減少,主要見于肝病、DIC、先天性纖維蛋白減少癥。3P陽性說明FDP,有纖溶現象。優(yōu)溶90min說明纖溶亢進。第六節(jié) 血液流變學檢測Blood viscosityPlasma viscosityErythrocyte deformabilityErythrocyte electrophoresis timeDIC(Disseminated Intravascular Coagulation)發(fā)生于感染、敗血癥、外科手術或創(chuàng)傷、惡性腫瘤、病理產科等患者。發(fā)病根本原因是上述因素破壞了人體凝血系統(tǒng)和抗凝血系統(tǒng)之間的平衡,發(fā)病早期凝血功能亢進,使血液處于高凝狀態(tài)而導致彌散性微血管內凝血。晚期由于消耗

34、了大量凝血因子使血液進入低凝狀態(tài),加之廣泛的微血栓激活了纖溶系統(tǒng)導致嚴重的出血表現。DIC診斷標準:初篩試驗1、血小板計數100109/L2、血漿Fg 1.5g/L3、凝血酶原(PT)延長3s(正常對照)以上確診試驗1、凝血酶時間(TT)延長3s(正常對照)以上2、魚精蛋白副凝試驗(3P)陽性3、FDP 5mg/L(N) 4、D二聚體0.2ug /L (N)根據發(fā)病機制分類:一、毛細血管-血小板型出血性疾病:1、臨床表現:自發(fā)性皮膚粘膜出血,以出血點、紫癜、瘀斑、齒齦出血等為主。2、實驗室檢查 以束臂試驗、出血時間、血小板計數、血塊退縮試驗為主,必要時檢做血小板粘附功能、聚集功能檢查。二、凝血

35、障礙抗凝物質型出血性疾病臨床表現:自發(fā)性深部組織(肌肉、關節(jié)、內臟)出血,以血腫為特點,也可有血尿、月經過多等。原因:凝血因子缺陷、纖溶活性增強及血循環(huán)中抗凝物質增多所致。實驗室檢查:PT、KPTT/APTT、TT必要時進一步作凝血因子定量檢查。第二章 骨髓細胞學檢查要點:血細胞發(fā)育演變的一般規(guī)律;各系各階段的正常骨髓象;常用組織化學染色特點;骨髓細胞檢查的臨床意義1、骨髓增生程度分級及其臨床意義2、粒紅之比正常、增高及減少見于哪些情況3、AML 與MDS BM 細胞學診斷標準4、 ALL 各型的骨髓檢查第一節(jié)血細胞的生成與發(fā)育Hematogenesis and Development干細胞

36、STEM CELL1、自我更新能力 RENEWAL 2、高度增殖PROLIFERATION3、多向分化潛能 PLURIPOTENTIAL二、血細胞成熟規(guī)律The Maturation Law of Hemocytes胞體:大?。ň藓思毎喾矗┌麧{:(1)量少多 (淋巴細胞例外)(2)顏色深藍淺藍淡紅紅細胞橘紅(3)顆粒無嗜天青(早幼)特異性(中性、嗜酸、嗜堿) (basophilic myeloblast 核/質散在粗大紫黑色spots)胞核:(1)大小大小 (2)核形規(guī)則不規(guī)則(3)染色質細致而疏松粗而緊密(4)核仁有無(5)核膜不明顯明顯核漿比:核大質少核小質多(巨核細胞相反)第二節(jié) 正常

37、血細胞形態(tài)學各系各階段的正常骨髓象第三節(jié)常用血細胞化學染色檢查過氧化物酶染色Peroxidase POX staining H202 +0二氨基聯苯胺金黃沉淀陽性:粒(強)單(弱、細)系。胞質中藍黑 or 棕黑顆粒。蘇丹黑(SBB)對脂類染色反應同POX中性粒細胞堿性磷酸酶染色Neutrophil Alkaline phosphatase NAP1.判斷標準及分級標 準 評分 胞質中陽性染色顆粒 - 0分 無 + 1分 少量或彌散 淺色 + 2分 中等量或彌散 深色 + 3分 較多或彌散 較深色 + 4分 充滿大顆?;驈浬?深色2.NAP陽性 正常 成熟中性粒細胞3.臨床意義增高:嚴重化膿性感

38、染 類白血病反應 真紅 骨髓纖維化 ALL 慢粒急變MM 再障惡性淋巴瘤 原發(fā)性血小板減少性紫癜減低: CML AML PNH 惡組鑒別診斷: CML vs 類白血病反應 PNH vs AA ALL vs AML堿性磷酸酶的表達許多資料表明,rat、mice的桑格胚細胞和囊胚細胞均有AKP表達,Mice的EC和ES中均含有豐富的AKP。而在已分化的EC和ES中AKP呈弱陽性或陰性。豬、兔的桑格胚和早期囊胚AKP呈陽性。因此,AKP常用來作為鑒定EC或ES分化與否的標志之一。糖原染色Periodic acid-Schiff reaction, PAS正常:幼紅:陰性 巨核系、血小板:陽性 早幼粒

39、以下各期粒細胞漸強,均勻、紅色。判斷標準 胞質中紅色顆粒 1.有核紅細胞 2.淋巴細胞0 無 0 無 + 分散少數或色淺 + 有一圈+ 1-2個濃顆粒環(huán)/彌散紅色 + 有兩圈+ 較粗顆粒小塊/大塊紅色 + 有三圈 +有紅色大團塊其他染色非特異性脂酶染色中性,-醋酸萘脂酶 NAE 酸性,酸性醋酸萘脂酶 ANAE堿性, -丁酸萘酶 NBE特異性脂酶染色氯醋AS-D萘酚酯酶(NAS-DCE)染色表P32骨髓細胞鐵染色細胞外鐵(儲存鐵):骨髓鐵以含鐵血黃素形式貯存于網狀細胞細胞內鐵:BM中、晚幼紅細胞內鐵顆粒BM鐵染色的臨床意義:1.缺鐵性貧血診斷、治療指導BM smear 細胞外鐵消失 鐵粒幼細胞%

40、下降。治療后細胞外鐵增加2.鐵粒幼細胞貧血診斷 幼紅細胞含鐵粒粗而多3.判斷機體內鐵貯存和利用 骨髓貯鐵用完 細胞內外鐵明顯降低 or 消失。小細胞貧血而BM 內外鐵正常or 增多 鐵利用障礙4.MDS 鐵粒幼比例增高 出現環(huán)形鐵粒幼細胞5.非缺鐵性貧血觀察 溶貧 AA leukemia BM 內外鐵正常 第四節(jié)骨髓細胞檢查的臨床意義輔助造血系統(tǒng)疾病和造血相關疾病診斷 (MIC) ;鑒別診斷;治療方案選擇;療效觀察;復發(fā)預測;一、造血系統(tǒng)疾病診斷、鑒別診斷、療效觀察診斷:各種類型貧血和白血病 白細胞減少癥血小板減少性紫癜 鑒別診斷:全血細胞減少癥:脾亢 巨幼紅貧惡性網狀細胞癥 非白血性白血病A

41、A ( aplastic anemia)二、其他疾病診斷MM 部分惡性腫瘤轉移癌某些代謝障礙性疾?。焊哐?Gaucher)癥尼曼匹克(Nieman-Pick)病某些寄生蟲病:瘧疾、黑熱病一、骨髓細胞學檢查結果分析1.骨髓增生程度:表P392. 有核細胞分類和粒/紅比值(myeloid:erythroid M:E)有核細胞分類計數 計數200/500有核細胞,計算出各系統(tǒng)各階段有核細胞百分數。G:E=粒系總數/幼紅總數 1.5-3.4:1細胞分類計數時,巨核細胞另行單獨計數3. 正常骨髓象粒系:增生活躍 占有核細胞50%各階段細胞形態(tài)正常,比例適當: 原粒2% 中幼粒5% 中晚幼粒各15% 嗜酸

42、5% 嗜堿1%紅系:增生活躍 占有核細胞20%各階段形態(tài)正常,比例適當: 原紅細胞2% 早幼紅5% 中晚幼紅各10%淋巴細胞:占有核細胞20%(兒童40%), 單核及漿細胞各4% 大多為成熟階段細胞巨核細胞:易見,主要為產板巨 原巨05% 2070% 裸核030% 血小板簇易見非造血細胞:組織嗜堿內皮細胞、網狀細胞 少量特殊細胞及寄生蟲:無骨髓細胞檢查報告例舉例一 正常髓報告方式1. 取材佳、制片、染色滿意2. 有核細胞增生活躍、粒:紅2:13. 粒系原始粒以下各階段比例正常,形態(tài)未見異4. 紅系各期比例正常、形態(tài)未見異常。5. 淋巴系統(tǒng)正常。6. 巨核系統(tǒng)全片查見20個,均為成熟形,散在成簇

43、血小板易見。意見:正常骨髓象。例二P43例三粒系:40;紅系:46(中幼紅20 ,晚幼紅26);粒:紅0.87:1(粒紅比倒置)缺鐵性貧血骨髓象1. 取材佳、制片、染色尚可2. 有核細胞增生明顯活躍、粒:紅0.87:13. 紅系尤為活躍,以中晚幼紅增生為主占46,部分幼紅細 胞體 積小,漿少偏蘭,邊緣殘缺不齊,核固縮,成熟紅細胞淡 染區(qū)擴大,可見嗜多色紅細胞。4. 粒系相對欠活躍,余未見異常 。5. 淋巴系統(tǒng)大致正常。6. 全片查見巨核細胞30個,均為成熟形,散在成簇血小板多 見,細胞外鐵(),鐵粒幼 紅細胞5。意見:骨髓象符合缺鐵性貧血。骨髓細胞外鐵及鐵粒幼細胞染色臨床意義:見表P47鐵粒幼

44、紅細胞粗大色深多至30粒粗大色深出現環(huán)形鐵粒多1-5粒細小色淡1-2粒顆粒分布4090 50903090030 外鐵巨貧 AA 溶貧鐵粒幼細胞貧血 地貧缺鐵性貧血MDS Myeloidysplastic syndromes1.Definition 全潛能造血干細胞(Totipotent hematopoitic stemm cell)水平上的惡性病變,致分化/成熟障礙而引起的一組克隆性造血系統(tǒng)疾病。特點是向白血病轉化。2.Type RA (refractory anemia)RARS ( with ring sideroblast) RAEB ( with excess of blast) R

45、AEB-t ( in transformation)CMML(chronic myelomonocytic leukemiaMDS的WHO骨髓象診斷標準:見表P49TYPE BMRA Without MD 原始細胞5% RS15% With MD 上條+粒系和/巨核系MDRARS Without MD 原始細胞5% RS15% With MD 上條+粒系和/巨核系MDRAEB RAEB-I 原始細胞 510% RAEB-I 原始細胞 1120%CMML 原始細胞020% 急性白血病原始細胞形態(tài)鑒別:見表P50細胞 原粒細胞 原淋巴細胞 原單核細胞胞體(m) 1220 1016 1622外形 規(guī)則 圓/橢圓 規(guī)則 圓形 圓形或橢圓形/不規(guī)則有偽足形態(tài) 圓形/橢圓 圓/橢圓有切跡 圓/不規(guī)則可有凹陷折疊 偏于胞漿一側細 染色質細顆粒狀; 顆粒狀排列致密;纖維網狀分布 均勻分布平薄感;濃染核膜及核仁 ; 不勻起伏不平 胞 著色淺 周圍更濃集 著色較深 核膜 不清楚 最清楚 較清楚核 核仁 25個 較小12個 清楚 13個大而易見細 量 少 很少 環(huán)繞于核周 較多 常見偽足胞 顏色 淡/中藍清徹 淡/中藍清徹 灰藍色 半透明感漿 Auer小體 常見 無 常見有時不止一條ALL各亞型的細胞學特征:見表P51

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