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《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》課程教學(xué)大綱
一、課程基本情況
課程名稱(中文):生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)
課程名稱(英文):Biochemical experiment
課程代碼:
學(xué) 分:0.5
總 學(xué) 時(shí):24
理論學(xué)時(shí):
實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí);24
課程性質(zhì):學(xué)科專業(yè)基礎(chǔ)課
適用專業(yè):園藝
適用對象:本科
先修課程:生物化學(xué)
考核方式:實(shí)際操作占20%、實(shí)驗(yàn)報(bào)告占50%、技能考核占30%
教學(xué)環(huán)境:實(shí)驗(yàn)室
開課學(xué)院:生態(tài)技術(shù)與工程學(xué)院
(一)課程簡介:
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課程是生命科學(xué)教學(xué)中重要的基礎(chǔ)課,主要圍繞生物體的組成成分如:蛋白質(zhì),核酸,
2、酶等生物大分子的基本性質(zhì)等方面入手,幫助學(xué)生掌握生物化學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)方法和技能,包括層析、比色、電泳、生化物質(zhì)的分離、制備、分析和鑒定及實(shí)驗(yàn)方法、操作技術(shù)和一些基本儀器的原理和使用,培養(yǎng)學(xué)生基本實(shí)驗(yàn)技能,提高綜合分析問題的能力。
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?
通過本課程的教學(xué)使學(xué)生了解和掌握現(xiàn)代生物科學(xué)研究對本課程的需求,了解生物化學(xué)技術(shù)的基本原理、方法和技能,包括生物物質(zhì)的性質(zhì)鑒定、含量測定、生化分離技術(shù)的分離原理(包括鹽析、等電點(diǎn)分離技術(shù)、電泳技術(shù)、色譜技術(shù)等)。通過學(xué)生的獨(dú)立實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和實(shí)踐,訓(xùn)練學(xué)生分析問題和解決問題的能力及實(shí)際動(dòng)手能力,同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維及對生命科學(xué)探索的興趣和愛好
3、。
要求學(xué)生課前預(yù)習(xí),寫好預(yù)習(xí)報(bào)告,實(shí)驗(yàn)過程中仔細(xì)觀察,認(rèn)真記錄,課后做實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
(三)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目列表:
實(shí)驗(yàn)編號(hào)
實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱
實(shí)驗(yàn)類型
實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)
要求
實(shí)驗(yàn)一
生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)
蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
驗(yàn)證
2
必開
實(shí)驗(yàn)二
蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測定和沉淀反應(yīng)
設(shè)計(jì)性
3
必開
實(shí)驗(yàn)三
紙層析法分離鑒定氨基酸
綜合性
3
必開
實(shí)驗(yàn)四
醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白
綜合性
3
必開
實(shí)驗(yàn)五
蛋白質(zhì)的定量測定(紫外分光法)
綜合性
3
必開
實(shí)驗(yàn)六
總氮量的測定-微量凱氏定氮法
綜合性
3
必開
實(shí)驗(yàn)七
酵母R
4、NA的分離及組分鑒定
綜合性
3
必開
實(shí)驗(yàn)八
菜花中核酸的分離和鑒定
設(shè)計(jì)性
4
必開
實(shí)驗(yàn)九
酶的特性
綜 合性
2
必開
實(shí)驗(yàn)十
小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較
三性
4
必開
實(shí)驗(yàn)十一
維生素C的提取及定量測定
綜合性
4
必開
實(shí)驗(yàn)一 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)
蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
1 了解實(shí)驗(yàn)室規(guī)則和常用生化儀器名稱,掌握實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫法以及實(shí)驗(yàn)室一些基本知識(shí),掌握緩沖溶液的配制方法,初步掌握一些儀器的正確操作。
2 掌握鑒定蛋白
5、質(zhì)的原理和方法。
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
蛋白質(zhì)和氨基酸與一些顯色劑反應(yīng)呈現(xiàn)一定的顏色反應(yīng)。
(四)要 求:
通過實(shí)驗(yàn)了解蛋白質(zhì)的一些顏色反應(yīng),掌握鑒定蛋白質(zhì)的方法。
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測定和沉淀反應(yīng)
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:設(shè)計(jì)性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
1 熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)。
2 進(jìn)一步掌握蛋白質(zhì)的有關(guān)性質(zhì)
3 了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)。
4 學(xué)習(xí)測定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的一種方法。
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
蛋白質(zhì)的沉淀和變性,蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)
6、的測定
(四)要 求:
了解各種沉淀試劑使蛋白質(zhì)沉淀的實(shí)質(zhì)和區(qū)分可逆的鹽析沉淀及不可逆的沉淀作用。掌握測定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的方法。
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)三 紙層析法分離鑒定氨基酸
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
了解并掌握氨基酸紙層析的原理和方法
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
以濾紙為支持物,樣品在不同溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)不同,將各種氨基酸分離,并用茚三酮染色,分析計(jì)算移動(dòng)速率,鑒定氨基酸的種類。
(四)要 求:
掌握氨基酸紙層析的實(shí)驗(yàn)原理,并鑒定混合液中的氨基酸
7、組分。
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)四 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
掌握醋酸纖維薄膜電泳法分離蛋白質(zhì)的原理和方法,了解電泳技術(shù)的一般原理
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
以醋酸纖維薄膜為支持物進(jìn)行電泳,血清中各種蛋白質(zhì)在電場中移動(dòng)速率不同,可利用電泳法將它們分離。
(四)要 求:
掌握電泳分離血清蛋白質(zhì)的方法
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)五 蛋白質(zhì)的
8、定量測定(紫外吸收法)
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
了解紫外吸收法測定蛋白質(zhì)濃度的原理
熟悉紫外分光光度計(jì)的使用
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
本實(shí)驗(yàn)根據(jù)蛋白質(zhì)組成中芳香族的氨基酸在紫外光280nm波長處有最大吸收峰,一定濃度范圍內(nèi)其濃度與吸光度成正比,用紫外分光光度計(jì)通過比色法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,測定溶液中蛋白質(zhì)的濃度。
(四)要 求:
掌握蛋白質(zhì)的定量測定的方法,掌握紫外分光光度計(jì)的使用方法
(五)每組人數(shù):4人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):T6紫外可見分光光度計(jì) 2套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)六 總氮量的測定-微量凱氏定
9、氮法
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
掌握凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法
學(xué)會(huì)使用凱氏定氮儀
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
用凱氏定氮法測定樣品中蛋白氮的含量,并進(jìn)一步求得樣品中蛋白質(zhì)的含量。
(四)要 求:
掌握凱氏定氮儀的使用方法,學(xué)會(huì)測定蛋白質(zhì)含量的一種方法。
(五)每組人數(shù):4人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):凱氏定氮儀 6套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)七 酵母RNA的分離及組分鑒定
學(xué)時(shí): 3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
了解核酸的組分,并掌握鑒定核酸和測定RNA含量的方法
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
酵
10、母核酸中RNA含量較多,在堿提取液中加入酸性乙醇溶液可以使核糖核酸沉淀,得到RNA粗制品,繼而用苔黑酚法測定RNA 的含量
(四)要 求:
掌握稀堿法提取酵母RNA 的方法,掌握用苔黑酚法測定RNA含量的方法。
(五)每組人數(shù):4人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):TDZ5-WS臺(tái)式離心機(jī) 2套
T6紫外分光光度計(jì) 2套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)八 菜花中核酸的分離和鑒定
學(xué)時(shí): 3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:設(shè)計(jì)性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
學(xué)習(xí)和掌握從菜花中分離核酸的原理和操作技術(shù)
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
用
11、冰冷的稀三氯醋酸和稀高氯酸溶液在低溫下抽提菜花勻漿,以除去酸溶性小分子,再用有機(jī)溶劑抽提去掉脂溶性物質(zhì),最后用濃鹽溶液和高氯酸分別提取DNA和RNA,再進(jìn)行定性和定量測定。
(四)要 求:
自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并掌握從組織中分離核酸的方法,并能進(jìn)行定性定量測定。
(五)每組人數(shù):4人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):TDZ5-WS臺(tái)式離心機(jī) 2臺(tái)
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)九 唾液淀粉酶的性質(zhì)
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
了解溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響
學(xué)習(xí)測定酶的最適溫度、最適pH的方法
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
12、
本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶對淀粉及蔗糖的催化作用,觀察酶的專一性.以淀粉及蔗糖的酶水解產(chǎn)物與Benedict試劑的顏色反應(yīng)觀察淀粉酶,蔗糖酶的專一性.由于有些物質(zhì)可作為激活劑,能提高酶活性,有些物質(zhì)可作為抑制劑,能降低酶活性,也能影響淀粉被水解的程度。因此,通過與碘產(chǎn)生的顏色反應(yīng)判斷淀粉被水解的程度,了解激活劑和抑制劑對酶促作用的影響。
(四)要 求:
掌握酶的專一性,及溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)十 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型
13、:設(shè)計(jì)性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
學(xué)習(xí)測定淀粉酶活力的方法
了解小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的變化
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
小麥發(fā)芽→酶液提取→酶活力測定→酶活力計(jì)算
(四)要 求:
自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)測定小麥萌發(fā)前后淀粉酶的活力
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)十一 維生素C的提取及定量測定
學(xué)時(shí):3
(一)實(shí)驗(yàn)類型:綜合性
(二)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?
掌握2,6-二氯酚靛酚法測定維生素C的原理和方法
(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:
從新鮮果蔬中提取維生素C,通過2,6-二氯酚靛酚法滴定法結(jié)合公式計(jì)算維生素C 的含量。
(四)要 求:
掌握提取維生素C的方法及其鑒定其含量的方法
(五)每組人數(shù):1人
(六)主要儀器設(shè)備及配套數(shù):常規(guī)儀器 25套
(七)所屬實(shí)驗(yàn)室:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室
專心---專注---專業(yè)