《基因工程的原理和技術(shù)》同步練習(xí)2

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1、基因工程的原理和技術(shù)同步練習(xí)1 .下列屬于獲得目的基因方法的是（）利用mRNA轉(zhuǎn)錄形成從基因文庫(kù)中提取從受體細(xì)胞中提取利用PC殷術(shù)利用DNA專(zhuān)錄人工合成A.B.C.D.2 .下列屬于PC段術(shù)所需條件的是（）單鏈的核甘酸序列引物目的基因所在的DNAt段脫氧核甘酸 核糖核甘酸 DNA1接酶 DN糜合酶 DNA1制酶A.B.C.D.知識(shí)點(diǎn)二形成重組DN剛子和導(dǎo)入受體細(xì)胞3 .要想將目的基因插入作為載體的質(zhì)粒中，在操作中應(yīng)選用（）A. DNA1接酶B.同一種限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA1接酶C.限制性核酸內(nèi)切酶D.不同的限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA1接酶4 .將ada（腺甘酸脫氨酶基因）通過(guò)質(zhì)粒pET28

2、b入大腸桿菌并成功表達(dá)腺甘酸脫氨酶。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.每個(gè)大腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒B.每個(gè)重組質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酸識(shí)別位點(diǎn)C.每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)adaD.每個(gè)才1入的ad旌少表達(dá)一個(gè)腺甘酸脫氨酶分子知識(shí)點(diǎn)三 篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)5 .在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中，下列操作錯(cuò)誤的是（）A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸B.用DNA1接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體C.將重組DN份子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體D.用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞知識(shí)點(diǎn)四基因工程的全過(guò)程6 .回答有關(guān)基因工程的問(wèn)題：（1）構(gòu)建基

3、因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類(lèi)型的限制酶切割 DNAI,可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生 末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接，則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生（相同、不同）粘性末端的限制酶。（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的重組DN所有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí)， 常用 處理大腸桿菌，以利于表達(dá)載體進(jìn)入； 為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與 mRN雜交，該雜 交技術(shù)稱(chēng)為 。為了檢測(cè)胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA否翻譯成 ,常 用抗原一抗體雜交技術(shù)。（3）如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的

4、基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的 中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過(guò)DN座組將目的基因插入植物細(xì)胞的 上?；A(chǔ)落實(shí)7 .人們常選用的細(xì)菌質(zhì)粒分子往往帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因的主要作用 是（）A.提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性B.對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)C.增加質(zhì)粒分子的分子量D.便于與外源基因連接8 .下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是（）從基因文庫(kù)中獲取目的基因利用PC殷術(shù)擴(kuò)增目的基因反轉(zhuǎn)錄法 通過(guò)DN除成儀利用化學(xué)方法人工合成目的基因A.B.C.D.9 .正確表示基因操作“五步曲”的是（）A.目的基因的獲得一重組 DN得入受體細(xì)胞一重組 DNA勺形成一篩選含有目的基因的受 體細(xì)

5、胞一目的基因的表達(dá)B.目的基因的表達(dá)一目的基因的獲得一重組DNA勺形成一重組DN得入受體細(xì)胞一篩選含有目的基因的受體細(xì)胞C.目的基因的獲得一重組 DNA勺形成一重組DN用入受體細(xì)胞一篩選含有目的基因的受 體細(xì)胞一目的基因的表達(dá)D.重組DNA勺形成一目的基因的獲得一重組 DN用入受體細(xì)胞一篩選含有目的基因的受 體細(xì)胞一目的基因的表達(dá)10 下列有關(guān)基因工程技術(shù)的正確敘述是（）A.重組DN被術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶、載體B.為育成抗除草劑的作物新品種，導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體細(xì)胞C.選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因?yàn)榧?xì)菌繁殖快D.只要目的基因進(jìn)入了受體細(xì)胞就能成功表達(dá)11 用基因

6、工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。下列敘述不正確的是（）A.常用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒8. DNA1接酶和RN麋合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒D.導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)6 .利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類(lèi)所需要的產(chǎn)品。下列能說(shuō)明目的基因 完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是 （）A.棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲(chóng)基因B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中卞測(cè)到人生長(zhǎng)素 DN府列D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白能力提升7 .質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)，某細(xì)

7、菌質(zhì)粒上的標(biāo)記基 因如圖所示，通過(guò)標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位 置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況也不同，如圖所示外源基因在質(zhì)粒中可插入的位置有a、b、c點(diǎn)。某同學(xué)根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象對(duì)其插入的位點(diǎn)進(jìn)行分析，其中分析正確的是（）抗青霉素基因 日抗四環(huán)素氈國(guó)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)推論在含青霉素在含四環(huán)素目的基培養(yǎng)培養(yǎng)因基上的生長(zhǎng)基上的生長(zhǎng)插入的情況情況A能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)aB不能生長(zhǎng)能生長(zhǎng)bC能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)cD不能生長(zhǎng)不能生長(zhǎng)c8 .科學(xué)家通過(guò)基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白。以下有關(guān)該基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是()A.采用反轉(zhuǎn)錄的方法可得到目的基因B.基因的某些非編碼區(qū)對(duì)于

8、目的基因在塊莖中的表達(dá)是不可缺少的C.馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞D.用不同種限制酶分別處理質(zhì)粒和含目的基因的DNA可產(chǎn)生相同的粘性末端而形成重組DNA子9 .如圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。相關(guān)敘述中正確的是方法a millmRNA1 Hi -i 11 iiii n n a方法亡 核甘酸，唇,ATP等lTi£b1 11 I 口 I I I 1 1, 1 I IIIA.這三種方法都用到酶，都是在體外進(jìn)行B.堿基對(duì)的排列順序均相同C.片段均不含內(nèi)含子，但含非編碼區(qū)D.方法a不遵循中心法則10 .人們?cè)噲D利用基因工程的方法，用乙種生物生產(chǎn)甲種生物的一種蛋白質(zhì)。生產(chǎn)流程

9、是：甲生物的蛋白質(zhì)的 mRNA目的基因與質(zhì)粒DNAt組導(dǎo)入乙細(xì)胞獲得甲生物的蛋白質(zhì)，下列說(shuō)法正確的是()A.過(guò)程需要的酶是反轉(zhuǎn)錄酶，原料是A、U、G CB.要用限制酶切斷質(zhì)粒 DNA再用DNA1接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起C.如果受體細(xì)胞是細(xì)菌，可以選用枯草桿菌、炭疽桿菌等D.過(guò)程中用的原料不含有 A、U G C11 .以重組DN啦術(shù)為核心的基因工程正在改變著人類(lèi)的生活。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)獲得目的基因的方法通常包括 和。(2)切割和連接DN剛子所使用白酶分別是 和。(3)運(yùn)送目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體一般選用病毒或,后者的形狀成O(4)由于重組DN份子成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的頻率 ,所以在轉(zhuǎn)化

10、后通常需要進(jìn)行 操作。(5)將人胰島素基因分別導(dǎo)入大腸桿菌與酵母菌，從兩者中生產(chǎn)的胰島素在功能和 序列上是相同的。綜合拓展12 .回答下列有關(guān)基因工程的問(wèn)題：(1)基因工程中使用的限制酶，其特點(diǎn)是下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識(shí)別， Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。(2)將兩端用E1切開(kāi)的Tcr基因與用E1切開(kāi)的質(zhì)粒X1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類(lèi)型 有。(可多選)1. X- 1B. X- 2C. X- 3D. X- 4(3)若將上圖所示X1、X- 2、X- 3、X- 4四種質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，然后分別涂布在含 有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在這兩種培養(yǎng)基上

11、均不能生長(zhǎng)的大腸桿菌細(xì)胞類(lèi)型有如果X 1用E1酶切，產(chǎn)生850對(duì)堿基和3 550對(duì)堿基兩種片段：那么質(zhì)粒 X- 2(Tcr基 因的長(zhǎng)度為1 200對(duì)堿基)用E2酶切后的片段長(zhǎng)度為 對(duì)堿基。(5)若將外源的Tcr基因兩端用E2切開(kāi)，再與用E2切開(kāi)的X1混合鏈接，并導(dǎo)入大腸桿菌 細(xì)胞，結(jié)果顯示，含 X-4的細(xì)胞數(shù)與含X- 1的細(xì)胞數(shù)之比為1 ： 3,增大DNA1接酶用量能否 提高上述比值？ 。原因是參考答案:知識(shí)清單一、1.目的基因 宿主細(xì)胞2.工具酶 目的基因 載體 宿主細(xì)胞二、1.(1)需要的基因 (2)化學(xué)方法 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 基因文庫(kù) 2.相同 粘性 末端 DN健接酶重組DN冊(cè)子 3.(1

12、)大腸桿菌 酵母菌 (2)大腸桿菌 氯化鈣通透 性 4.(1)重組DN份子(2)四環(huán)素抗性基因 四環(huán)素目的基因 擴(kuò)增 5.宿主細(xì)胞 功 能物質(zhì)對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練2. D 目的基因應(yīng)該是從供體細(xì)胞中提取，導(dǎo)入受體細(xì)胞中，而不能從受體細(xì)胞中提 取，所以不是獲取目的基因的方法；利用DNA專(zhuān)錄出來(lái)的是RNA但目的基因是DNA所以不能用DNA專(zhuān)錄來(lái)獲取目的基因，不正確。思路導(dǎo)引思考獲取目的基因的方法一對(duì)照選項(xiàng)逐一排查判斷一得出正確答案。知識(shí)鏈接 獲得目的基因的方法(1)從基因文庫(kù)中獲得(2)人工合成目的基因已知核甘酸序列的較小基因，直接利用DN除成儀，用化學(xué)方法合成，不需要模板。反轉(zhuǎn)錄法：利用已知的 mRNA；模

13、板，反轉(zhuǎn)錄獲取目的基因。(3)利用PC或術(shù)擴(kuò)增目的基因原理：利用DN徼鏈復(fù)制的原理，在體外將基因的核甘酸序列不斷地加以復(fù)制，使其 數(shù)量成指數(shù)方式增加。過(guò)程：如圖所示，日的基因t色<I I 11 I I II晝因文陣 ”11 II90-95七:變性，使DNA片段雙鏈解開(kāi), II II I 11II 口 1 I II II55-60七:復(fù)性.使解疑的DNA兩條單鏈分利與相應(yīng)的引物結(jié)合7(75叼酸催化從引物起始合膽子鏈II 11IIIa.從上圖中可以看出利用設(shè)計(jì)的特異性引物對(duì)基因文庫(kù)進(jìn)行PCRT增，提取出了相應(yīng)的目的基因，而不是對(duì)基因文庫(kù)進(jìn)行簡(jiǎn)單、全面地復(fù)制。b.由于DN麋合酶不能從頭合成 D

14、NA只能從3'端延伸DN肥，故目的基因的擴(kuò)增需要 引物。引物是一小段單鏈 DN徵RNA加入引物后，DN糜合酶能從引物的3'端開(kāi)始延伸 DNA 鏈。3. B PCR術(shù)的條件有：模板（即已知序列的DN射段）、原料（即四種脫氧核甘酸）、酶（耐高溫的DN麋合酶）和ATP至于引物，是根據(jù)模板合成的一小段單鏈DNRNA 思路導(dǎo)引了解PC的體外復(fù)制DNAt段的核酸技術(shù)一對(duì)比與 DN腦內(nèi)復(fù)制的異同一確定PC殷術(shù)所需的條件。歸納提升 PC敢術(shù)擴(kuò)增目的基因與 DNAT制的比較PC豉術(shù)DNAT 制相同占八、原理堿基互補(bǔ)配對(duì)原料四種脫氧核甘酸條件模板、ATR酶不同占八、解旋方式DN的高溫卜受性解旋解旋

15、酶催化場(chǎng)所體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶（Taq酶）細(xì)胞內(nèi)含有的DN朦合酶結(jié)果在短時(shí)間內(nèi)形成大量的DN的段形成整個(gè)DN份子3.B 用同一種限制酶切取目的基因和質(zhì)粒，才能使目的基因和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的粘性末端，然后再用DNA!接酶將目的基因和質(zhì)粒連接起來(lái)。思路導(dǎo)引 構(gòu)建重組質(zhì)粒一個(gè)是需要“切”，一個(gè)是需要“接”。要順利的“接”必須要有相同的粘性末端方可。知識(shí)鏈接重組DN份子的構(gòu)建1LIIIKI門(mén)忖A分子 同一種眼.懶n"." 11 nr.HITDNA連接隨重組DMA（1）目的基因是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，沒(méi)有啟動(dòng)子，若只將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 中無(wú)法轉(zhuǎn)錄。（2）目的

16、基因的表達(dá)需要調(diào)控序列，因而用做載體的質(zhì)粒插入目的基因時(shí)須有啟動(dòng)子，插入后須有終止子。（3）目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞中需要有篩選標(biāo)記標(biāo)記基因。因此，一個(gè)重組DN剛子的組成至少應(yīng)該包括：?jiǎn)?dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因。4. C 大腸桿菌成功表達(dá)出腺甘酸脫氨酶，說(shuō)明這些大腸桿菌都至少含有一個(gè)重組質(zhì)粒，A項(xiàng)正確；作為載體的條件為至少含有一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn)，所以作為載體的質(zhì)粒至少含有一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)， 即正確；作為重組DN份子應(yīng)包括目的基因、 啟動(dòng)子、 終止子、標(biāo)記基因四部分，但并不是每個(gè)酶切位點(diǎn)都至少插入一個(gè)ada, C項(xiàng)錯(cuò)誤；由于這些目的基因成功表達(dá)，所以每個(gè) ad旌少表達(dá)一個(gè)腺甘

17、酸脫氨酶分子， D項(xiàng)正確。思路導(dǎo)引 本題考查基因工程的應(yīng)用， 意在考查考生對(duì)知識(shí)的理解能力、綜合運(yùn)用能力。知識(shí)拓展 （1）受體細(xì)胞不同導(dǎo)入的方法不同生物種類(lèi)植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法Ca2+處理法受體細(xì)胞受精卵或體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程重組dnA一農(nóng)桿 菌一導(dǎo)入植物細(xì)胞一整 合到受體細(xì)胞的DN站表達(dá)重組DN舟子提純一 取卵（受精卵）一顯微注 射一爻相卵發(fā)目一猶得具后新性狀的動(dòng)物Ca2+處理細(xì)胞一感受態(tài)細(xì)胞一重組DN冊(cè)子 與感受態(tài)細(xì)胞混合一感 受態(tài)細(xì)胞吸收DN南子特別提醒 目前導(dǎo)入植物細(xì)胞的方法還有花粉管通道法和基因槍法。（2）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的結(jié)果宿主細(xì)胞

18、 或組旗?！钡幕虼嬖谀康幕虿?于受體細(xì)胞的入了染色體 細(xì)胞質(zhì)中 的口忖兒上上圖中發(fā)生與發(fā)生相比， 會(huì)使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)，原因是在進(jìn)行細(xì)胞分裂時(shí)，細(xì)胞核上的 DN庭復(fù)制后平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中，保證了親子代遺傳 性狀的穩(wěn)定性，而細(xì)胞分裂時(shí)，細(xì)胞質(zhì)是不均分的，子細(xì)胞不一定含有目的基因。5. A 基因工程的一般過(guò)程：用限制性核酸內(nèi)切酶切割含目的基因的DN份子（除草劑基因）和載體（質(zhì)粒）；用DNA1接酶連接切割好的目的基因和載體；重組 DN份子導(dǎo)入 受體細(xì)胞，因?yàn)槭侵参锟梢哉f(shuō)是原生質(zhì)體； 用相應(yīng)的試劑和病原體篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞； 用植物組織培養(yǎng)技術(shù)篩選抗體除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草(表達(dá))

19、。思路導(dǎo)引 思考：限制酶識(shí)別的是 DNA還是RNA基因工程的操作過(guò)程怎樣?知識(shí)鏈接 篩選含有目的基因的受體細(xì)胞(1)原理：質(zhì)粒上有抗生素的抗性基因。(2)方法：利用選擇培養(yǎng)基篩選。(3)舉例所有受包含有四環(huán)素箜生活的受 體細(xì)軀一"的培養(yǎng)基 體細(xì)胞入t組DNA分子含四斑素.抗性基因，培,養(yǎng)含度用DNA分子.的.夏體魂隴一一6. (1)平相同(2)RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA最終獲得所需要的蛋白質(zhì)Ca2+ DN陽(yáng)子雜交技術(shù) 人胰島素(3)T DNA染色體的DNA解析(1)限制酶能識(shí)別特定的 DN席列，并在特定位點(diǎn)上切割 DNA形成粘性末端或平 末端；要使

20、目的基因和質(zhì)粒直接進(jìn)行連接，應(yīng)使用同一種限制酶進(jìn)行切割，使二者產(chǎn)生相同的粘性末端。(2)啟動(dòng)子為DN府列，其具有RN朦合酶結(jié)合位點(diǎn)，能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，合成 RNA將 重組DN南子導(dǎo)入大腸桿菌時(shí)，常用 Ca2+處理；檢測(cè)目的基因時(shí)，常用分子雜交技術(shù)檢測(cè)目 的基因或相應(yīng)的mRNA或采用抗原一抗體雜交技術(shù)鑒定相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(3)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，首先將目的基因?qū)朕r(nóng)桿菌 Ti質(zhì)粒的TDNAK再利用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，通過(guò) DNAI組將目的基因插入植物細(xì)胞的染色體的DNAb。知識(shí)鏈接基因工程的圖解舉例(1)抗蟲(chóng)棉的培育過(guò)程棉株如熟(2)利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)凝乳酶的過(guò)程從大腸桿菌中提班質(zhì)

21、粒從出生不到 10 d的小牛的 目中分離出編 碼凝乳酶的展因限制性核/ 酸內(nèi)切叫f質(zhì)粒？ 薛切位點(diǎn)利用限制性 核酸內(nèi)切博和 DN四連接酶， 將凝乳降莖因 捕人質(zhì)甚中由組含有凝乳梅基因的腹 粒裝大腸桿菌吸收< 轉(zhuǎn)化的加菌亙Q)|發(fā)薜罐中培課后作業(yè)7. B 重組DNA5須具有標(biāo)記基因，其目的就是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因， 從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。8. D PCRRJ用白是DNA(鏈復(fù)制原理，即將雙鏈 DN肥間的氫鍵打開(kāi)，變成單鏈 DNA 作為聚合反應(yīng)的模板鏈。反轉(zhuǎn)錄法則是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RN幽模板，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，先反轉(zhuǎn)錄形成互補(bǔ)的單鏈 DNA再合成雙鏈DNA則

22、不需要模板。9. C 基因操作“五步曲”包括：目的基因的獲得，重組DNA勺形成，重組DN羯入受體細(xì)胞，篩選含有目的基因的受體細(xì)胞和目的基因的表達(dá)。10. C A項(xiàng)中的載體不是酶；B項(xiàng)中的受體細(xì)胞常用受精卵，但有時(shí)也可用植物體細(xì)胞；D項(xiàng)中，目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并不一定能成功表達(dá)。11. B 基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶和 DNA1接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶。質(zhì)粒作為載體必須具有標(biāo)記基因，導(dǎo)入的目的基因不一定能成功表達(dá)，還要進(jìn)行修飾或者其他處 理。12. D 基因的表達(dá)是指基因使遺傳信息以一定的方式反映到蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)上這一 過(guò)程，即必須獲得相應(yīng)的蛋白質(zhì)才能說(shuō)明基因完成了表達(dá)。只有D導(dǎo)到了蛋白

23、質(zhì)。13. B 若質(zhì)粒上插入的位置在 c點(diǎn)，那么抗四環(huán)素基因和抗青霉素基因都沒(méi)有被破壞， 導(dǎo)入該重組質(zhì)粒的細(xì)菌在含青霉素的培養(yǎng)基和在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)。14. D 采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到目的基因的過(guò)程是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RN朋模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈 DNA然后在酶的作用下合成雙鏈 DNA從而獲得所需要的目的基因。由于信使RN肝沒(méi)有與內(nèi)含子相對(duì)應(yīng)的部分，所以采用反轉(zhuǎn)錄的方法得到的目的基因不存在內(nèi) 含子?；蚍蔷幋a區(qū)對(duì)于基因的表達(dá)具有調(diào)控作用。植物細(xì)胞的全能性很容易得到表達(dá)，所以轉(zhuǎn)基因植物培育過(guò)程中的受體細(xì)胞可以是植物的體細(xì)胞。限制酶具有專(zhuān)一性，只有用同一種限制酶處理才能獲得相同的粘性

24、末端，才能夠形成重組DN南子。15. A 由圖示可知a為反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因，用到反轉(zhuǎn)錄酶； b為直接從生物體獲得 目的基因，用到限制酶； c為用PC殷術(shù)擴(kuò)增獲取目白基因，用到 Ta串！，且三種方法均在生 物體外進(jìn)行，故A正確。因水稻為真核生物，所以中含內(nèi)含子，但方法 a獲得的目的基因內(nèi) 無(wú)內(nèi)含子序列，所以B、C錯(cuò)誤。方法a遵循中心法則， D昔誤。16. B 過(guò)程是反轉(zhuǎn)錄，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成DN的段，所需要的原料含有 A T、G C;是目的基因與質(zhì)粒 DNA：組階段，需要限制酶切斷質(zhì)粒DNA再用DNA!接酶將目的基因與質(zhì)粒連接在一起；如果受體細(xì)胞是細(xì)菌，則不應(yīng)該用致病菌，而炭疽桿菌是致病菌；過(guò)程

25、是基因的表達(dá)過(guò)程，原料中含有A U、G Co 17. （1）從基因文庫(kù)提取酶切獲?。◤娜旧wDN剛離/從生物細(xì)胞分離）（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）DNA1接酶（3）質(zhì)粒 小型環(huán)狀（雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀）（4）低 篩選 （5）氨基酸解析（1）獲取目的基因的方法可以歸納為兩種：一是從供體生物中提取或從基因文庫(kù) 中提?。欢侨斯ず铣?。（2）基因工程中的工具酶有切割 DN陽(yáng)子的限制性核酸內(nèi)切酶和連接 DN南子的DNA1接酶。（3）載體一般常用質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒，其中質(zhì)粒最為常用， 是很小的環(huán)狀DN份子。（4）重組DN陽(yáng)子導(dǎo)入受體細(xì)胞頻率較低，所以要利用表達(dá)載體上的 標(biāo)記基因進(jìn)行篩選。（5）由于所有

26、生物共用一套密碼子，所以基因工程中表達(dá)的蛋白質(zhì)與自 然狀態(tài)蛋白質(zhì)的氨基酸序列是相同的。18. （1）特異性地識(shí)別和切割 DNA （2）ABC （3）無(wú)質(zhì)粒細(xì)胞含X 3的細(xì)胞 （4）4 750（5）不能 DNA!接酶對(duì)DN的段沒(méi)有選擇性；兩段 DNAk端相同解析（1）限制酶的功能及特點(diǎn)是：特異性地識(shí)別核甘酸序列并在特定位點(diǎn)將磷酸二酯 鍵斷開(kāi)；（2）用E1酶切得的Tcr基因，X1質(zhì)粒的粘性末端均相同，所以混合后會(huì)出現(xiàn)X1、X- 2、X- 3三種不同的連接方式；（3）質(zhì)粒X 3上無(wú)抗生素抗性基因，所以導(dǎo)入該質(zhì)粒的大 腸桿菌及無(wú)質(zhì)粒導(dǎo)入的大腸桿菌場(chǎng)合被抗生素殺死。（4）質(zhì)粒X1被E1酶切割后產(chǎn)生的一長(zhǎng)一短兩種片段，即圖中，Apr片段為850對(duì)堿基，剩余部分為3 550對(duì)堿基。E2酶切X- 2只產(chǎn)一種片段，其長(zhǎng)度為 3 550對(duì)堿基+ Tcr的1 200對(duì) 堿基=4 750對(duì)堿基。（5）由于E藩1切割質(zhì)粒X1與切割Tcr基因產(chǎn)生的粘性末端相同，且DNA!接酶的連接作用無(wú)選擇性，所以增大 DNA1接酶的用量，不會(huì)改變連接比值。