（浙江專用）高考生物二輪復習 專題八 現(xiàn)代生物科技專題 第1講 基因工程和克隆技術課件.ppt

第1講基因工程和克隆技術 專題八現(xiàn)代生物科技專題 2016高考導航 專題八現(xiàn)代生物科技專題 專題八現(xiàn)代生物科技專題 1 基因工程的工具 1 限制性核酸內切酶 來源 主要從原核生物中分離純化出來 作用a b 結果 產(chǎn)生 特異性識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列 切割兩個核苷酸之間的化學鍵 粘性末端 2 DNA連接酶作用 將具有 的兩個DNA片段連接在一起 3 質粒 從存在位置看 在細菌中獨立于擬核之外 從化學成分上看 為雙鏈環(huán)狀DNA分子 從功能上看 能自主復制 從結構上看 常含有抗生素抗性基因 相同粘性末端 基因文庫 較小基因 逆轉錄酶 3 將目的基因導入受體細胞 農桿菌轉化 Ca2 4 篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達 篩選 用含 的培養(yǎng)基培養(yǎng)受體細胞 選擇含 的受體細胞 表達 目的基因在宿主細胞內表達產(chǎn)生人們需要的 抗生素 重組質粒 功能物質 3 幾種重要的克隆技術分析 1 植物細胞培養(yǎng) 器官培養(yǎng)和原生質體培養(yǎng)的關系 愈傷組織 器官 單個細胞 除去細胞壁 機械消化或胰蛋白酶消化 原代 傳代 細胞系 單個細胞 血清 滋養(yǎng)細胞 仙臺病毒或聚乙二醇 5 動物的克隆繁殖 命題點1基因工程及轉基因技術的安全性 目的基因的獲取 將目的基因導入受體細胞 目的基因的檢測與鑒定 農桿菌轉化法 細胞質 染色體DNA T DNA片段 內部 植物組織培養(yǎng) 粘性 磷酸二酯鍵 1 目的基因應插入啟動子與終止子之間的部位 2 將目的基因導入受體細胞沒有堿基互補配對現(xiàn)象 3 原核生物作為受體細胞的優(yōu)點 繁殖快 多為單細胞 遺傳物質相對較少等 4 一般情況下 用同一種限制酶切割質粒和含有目的基因的片段 但有時可用兩種限制酶分別切割質粒和目的基因 以避免質粒和質粒之間 目的基因和目的基因之間的連接 5 標記基因的作用 篩選 檢測目的基因是否導入受體細胞 6 受體細胞常用植物受精卵或體細胞 經(jīng)組織培養(yǎng) 動物受精卵 一般不用體細胞 微生物 大腸桿菌 酵母菌 等 7 啟動子 DNA片段 起始密碼子 RNA 終止子 DNA片段 終止密碼子 RNA 限制酶 DNA連接酶 Ca2 感受 重組質粒和感受態(tài)細胞 脫分化 再分化 卡那霉素 顯微注射 動物體細胞的全能性一般不能表現(xiàn) 性別鑒定 逆轉錄 限制酶 BamH 和Pst 經(jīng)研究發(fā)現(xiàn) 如果將該凝乳酶的第20位和24位氨基酸變?yōu)榘腚装彼?則其催化能力將提高2倍 現(xiàn)已知通過蛋白質工程可生產(chǎn)高效凝乳酶 請寫出有關制備步驟 找到相對應的脫氧核苷酸序列 定向改造凝乳酶基因 將改造后的凝乳酶基因導入受體細胞等 答案合理即可 命題點2克隆技術 流動性 獲能 減數(shù)第二次分裂中期 促性腺激素 細胞壁 纖維素酶和果膠 離心 振動 電刺激 形成了新的細胞壁 植物組織培養(yǎng) 生長素 雜交瘤 特異性抗體 選擇 3 1 答題時不能混用的兩種細胞 重組細胞和雜交細胞 1 重組細胞 體細胞的細胞核移植到去核卵母細胞之后形成的細胞叫重組細胞 2 雜交細胞 動物細胞融合形成的細胞常稱為雜交細胞 2 明確單克隆抗體制備過程中的兩次篩選第一次篩選 利用特定選擇培養(yǎng)基篩選 獲得雜交瘤細胞 即AB型細胞 A為效應B細胞 B為骨髓瘤細胞 不需要A B AA BB型細胞 第二次篩選 利用多孔板法和抗原 抗體雜交法篩選 獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞 植物組織培養(yǎng) 植物細胞的全能性 細胞分裂素 生長素 滅菌 愈傷組織 胚狀體 農桿菌轉化 灰 胚胎移植 冷凍 低溫 液氮 內細胞團 體 乳腺 高度分化的動物細胞的細胞核具有全能性 藥物生產(chǎn) 答案合理即可 優(yōu)良種畜的培育與擴大 治療性克隆 拯救瀕危動物 答案合理 不與前一空答案重復即可 骨髓瘤細胞 抗原刺激過的B細胞 或效應B細胞 雜交瘤細胞 2 過程類似于植物組織培養(yǎng)技術中的 過程 與纖維母細胞相比 誘導干細胞的全能性較 過程的實質是 3 生產(chǎn)單克隆抗體一般不直接培養(yǎng)效應B細胞 主要原因是 脫分化 高 基因的選擇性表達 效應B細胞高度分化 不能無限 或大量 增殖 4 處需要篩選 從而得到 細胞 且培養(yǎng)該細胞的氣體環(huán)境為 能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤 95 的空氣 5 的CO2