2019年高三生物二輪復(fù)習(xí) 專題8 生物技術(shù)實(shí)踐.doc

2019年高三生物二輪復(fù)習(xí) 專題8 生物技術(shù)實(shí)踐一、選擇題(31236分)1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法正確的是()A天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B接種前需對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手等進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個(gè)階段D分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源答案C解析天然培養(yǎng)基是成分不明確的培養(yǎng)基，并不是不需加工配制的培養(yǎng)基；實(shí)驗(yàn)者的雙手需進(jìn)行消毒處理；分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。2加工橘子罐頭，采用酸堿處理脫去中果皮(橘絡(luò))，會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解法去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長在特定環(huán)境中的4類微生物，不能大量產(chǎn)生所用酶的有()A生長在麥麩上的黑曲霉B生長在酸奶中的乳酸菌C生長在棉籽殼上的平菇D生長在木屑上的木霉答案B解析本題考查酶的專一性。橘絡(luò)的主要成分是纖維素，將其分解要用纖維素酶，麥麩、棉籽殼、木屑的主要成分也是纖維素，生長在這三種成分上的黑曲霉、平菇、木霉肯定能產(chǎn)生纖維素酶，所以可以利用。而乳酸菌的培養(yǎng)基為牛奶，其主要成分是蛋白質(zhì)，不含纖維素，所以乳酸菌不能產(chǎn)生纖維素酶。3下列有關(guān)培養(yǎng)基的配制原則，表述正確的是()A任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質(zhì)元素、生長因子B碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受到pH、氧、滲透壓的影響D營養(yǎng)物質(zhì)的濃度越高越好答案C解析不同的微生物需要的營養(yǎng)不同，如自生固氮菌能利用空氣中的N2為氮源，因而培養(yǎng)基中無需添加氮源；營養(yǎng)物質(zhì)濃度太高，會(huì)導(dǎo)致微生物失水。4下列有關(guān)提取和分離血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)敘述錯(cuò)誤的是()A該實(shí)驗(yàn)的材料必需選用雞血B通過透析法可以去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，此為樣品的粗提取C凝膠色譜法是利用蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)D電泳法是利用各種分子帶電性質(zhì)的差異及分子的大小和形狀不同進(jìn)行分離答案A解析因?yàn)殡u血細(xì)胞中含有細(xì)胞核以及各種復(fù)雜的細(xì)胞器，會(huì)給提取血紅蛋白帶來一定的難度，故提取血紅蛋白一般選用哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞。5下列有關(guān)生物技術(shù)在實(shí)踐中的應(yīng)用的敘述，正確的是()A制葡萄醋的溫度要比制葡萄酒的溫度高些B使用加酶洗衣粉在任何條件下洗衣效果都比普通的洗衣粉好C凝膠色譜法是一種根據(jù)不同蛋白質(zhì)對(duì)光的吸收率不同而分離蛋白質(zhì)的有效方法D固定化細(xì)胞比固定化酶的催化效率高，適用于所有生產(chǎn)過程答案A解析酵母菌酒精發(fā)酵的最適溫度為1825，醋酸菌的最適溫度為3035。加酶洗衣粉在酶催化的最適溫度時(shí)，洗衣效果最好，如果條件不適宜使酶變性失活或酶活性降低，則洗滌效果與普通洗衣粉相當(dāng)。凝膠色譜法是一種根據(jù)不同蛋白質(zhì)分子大小而分離蛋白質(zhì)的有效方法。 固定化細(xì)胞固定的是一系列酶，固定化酶固定的是一種酶，兩者適用于不同的生產(chǎn)過程。6某學(xué)生進(jìn)行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”的課題研究。他的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下：設(shè)置2組實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉2組實(shí)驗(yàn)的洗衣粉用量、被洗滌的衣物量、衣物質(zhì)地、污染物性質(zhì)和量、被污染的時(shí)間、洗滌時(shí)間、洗滌方式等全部設(shè)置相同根據(jù)污漬去除程度得出結(jié)果對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)的評(píng)價(jià)，正確的是()A未設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)B.無關(guān)變量設(shè)置太多C沒有自變量 D.因變量不能描述答案A解析實(shí)驗(yàn)課題是“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果”，因此設(shè)置的2組實(shí)驗(yàn)應(yīng)該是：一組用普通洗衣粉作對(duì)照組，另一組用加酶洗衣粉作實(shí)驗(yàn)組。如果設(shè)置3組也正確，一組用普通洗衣粉作對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組設(shè)置使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉。7(xx全國大綱，4)某同學(xué)在、三種條件下培養(yǎng)大腸桿菌，這三種條件是：以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不斷補(bǔ)充培養(yǎng)基，及時(shí)去除代謝產(chǎn)物以葡萄糖為碳源的培養(yǎng)基，不斷補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物以葡萄糖和乳糖為碳源的培養(yǎng)基，不補(bǔ)充培養(yǎng)基，不去除代謝產(chǎn)物根據(jù)培養(yǎng)結(jié)果繪制的一段時(shí)間內(nèi)菌體數(shù)的對(duì)數(shù)隨時(shí)間變化的趨勢如下圖：假設(shè)三種培養(yǎng)基中初始總糖量相等，則、三種條件依次對(duì)應(yīng)的趨勢圖是()A甲、乙、丙 B乙、丙、甲 C丙、甲、乙 D丙、乙、甲答案C解析中的條件是營養(yǎng)物質(zhì)充足，又及時(shí)去除代謝產(chǎn)物，消除了代謝產(chǎn)物對(duì)種群的影響，種群的生長在一段時(shí)間呈“J”型增長，丙曲線符合這一變化趨勢；中不補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，不去除代謝產(chǎn)物，即環(huán)境條件影響種群的生長，種群會(huì)呈現(xiàn)“S”型生長，甲曲線符合這一變化趨勢；中碳源為葡萄糖和乳糖，當(dāng)葡萄糖消耗完后，種群的生長受到一定的影響，但當(dāng)有些大腸桿菌能利用乳糖后，又呈現(xiàn)一段時(shí)間的增長，隨后到達(dá)K值，如果繼續(xù)維持這種生長環(huán)境，種群數(shù)量還可能在到達(dá)K值后下降，乙曲線符合這一變化趨勢。綜上所述，本題應(yīng)選B。8下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是 ()A可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞B反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化酶的活性沒有影響C葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不同D固定化細(xì)胞可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)答案A解析A項(xiàng)正確，酵母細(xì)胞體積大，適合用包埋法，酶體積小，適合用物理吸附法或化學(xué)結(jié)合法；B項(xiàng)錯(cuò)誤，一些反應(yīng)產(chǎn)物可以與酶特異性結(jié)合，從而影響酶的活性；C項(xiàng)錯(cuò)誤，酶固定前后專一性不變；D項(xiàng)錯(cuò)誤，細(xì)胞內(nèi)酶種類有限，且酶具有專一性。9某同學(xué)進(jìn)行“加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果比較”課題研究。下列敘述錯(cuò)誤的是()A設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，分別使用蛋白酶洗衣粉和復(fù)合酶洗衣粉B洗衣粉用量、污漬種類和洗滌溫度等無關(guān)變量全部相同且適宜C根據(jù)相同時(shí)間內(nèi)污漬去除程度的差異得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論D根據(jù)污漬完全洗凈所需時(shí)間的差異得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論答案A解析比較加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗滌效果，設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)該用加酶洗衣粉和普通洗衣粉進(jìn)行對(duì)照。10(xx淮安二模)下面是某同學(xué)用動(dòng)物肝臟做“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的操作，正確的是()A在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，使細(xì)胞破裂釋放核物質(zhì)B調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度至0.14 mol/L，過濾后取濾液進(jìn)行后續(xù)步驟的操作C在含DNA的濾液中加入嫩肉粉，使蛋白質(zhì)與DNA分開D向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后溶液呈藍(lán)色答案C解析因肝臟細(xì)胞沒有分散開，在燒杯中加入肝臟和蒸餾水并進(jìn)行攪拌，不能使細(xì)胞破裂，應(yīng)研磨；DNA在0.14 mol/L 的NaCl溶液中溶解度很低，過濾后DNA不在濾液中；嫩肉粉中有蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解；向溶有DNA的NaCl溶液中加入適量二苯胺試劑后需加熱溶液才能呈藍(lán)色。11下列關(guān)于酶和細(xì)胞的固定化研究及應(yīng)用的敘述，正確的是 ()A用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的方法屬于物理吸附法B用化學(xué)結(jié)合法固定化酶不會(huì)對(duì)其活性產(chǎn)生影響C固定化酶和固定化細(xì)胞催化反應(yīng)的底物都可以是大分子D固定化酶和固定化細(xì)胞都可反復(fù)使用，催化反應(yīng)的速率會(huì)受環(huán)境影響答案D解析用海藻酸鈉固定酵母細(xì)胞的方法屬于包埋法；用化學(xué)結(jié)合法固定化酶是將酶通過化學(xué)鍵連接到天然的或合成的高分子載體上，使用偶聯(lián)劑通過酶表面的基團(tuán)將酶交聯(lián)起來，因而可能會(huì)對(duì)其活性產(chǎn)生影響；固定化細(xì)胞催化的反應(yīng)一般是利用細(xì)胞內(nèi)的一系列酶催化一系列的化學(xué)反應(yīng)，這些反應(yīng)一般在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，大分子物質(zhì)不易進(jìn)入細(xì)胞，因此不適合催化大分子底物；固定化酶和固定化細(xì)胞都能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，因而可反復(fù)使用，但環(huán)境因素會(huì)影響酶的活性和細(xì)胞的生命活動(dòng)。12下列關(guān)于腐乳制作的敘述中，錯(cuò)誤的是 ()A毛霉可利用蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸B豆腐坯表面有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們之間存在競爭關(guān)系C腐乳的前期制作溫度應(yīng)控制在1518環(huán)境條件下D加入較多的香辛料既能調(diào)味又能縮短腐乳成熟的時(shí)間答案D解析制作腐乳主要是利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐內(nèi)的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪分解成甘油和脂肪酸，從而改變豆腐的成分和口味；豆腐坯表面長有毛霉、青霉、曲霉等微生物，它們都利用豆腐內(nèi)的營養(yǎng)來維持生命活動(dòng)，因而存在競爭關(guān)系；毛霉生長的適宜溫度是1518；加入較多的香辛料能調(diào)味，殺菌防腐，酒精含量越高，對(duì)蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長。二、非選擇題(64分)13(10分)(xx山東，35)玉米是重要的糧食作物，經(jīng)深加工可生產(chǎn)酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：(1)玉米秸稈中的纖維素經(jīng)充分水解后的產(chǎn)物可被酵母菌利用發(fā)酵生產(chǎn)酒精。培養(yǎng)酵母菌時(shí)，該水解產(chǎn)物為酵母菌的生長提供_。發(fā)酵過程中檢測酵母菌數(shù)量可采用_法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用_法或_法從玉米胚芽中提取。(3)玉米淀粉經(jīng)酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖異構(gòu)酶的作用下轉(zhuǎn)化成果糖。利用_技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用，從而降低生產(chǎn)成本。(4)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增葡萄糖異構(gòu)酶基因時(shí)，需用耐高溫的_催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括變性、_和_三步。答案(1)碳源顯微鏡直接計(jì)數(shù)(2)壓榨萃取(注：兩空可顛倒)(3)固定化酶(4)(Taq)DNA聚合酶(低溫)復(fù)性(或退火)(中溫)延伸解析(1)培養(yǎng)酵母菌時(shí)，玉米秸稈中纖維素的水解產(chǎn)物能為酵母菌的生長提供碳源。檢測酵母菌數(shù)量可采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法或稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)。(2)玉米胚芽油不易揮發(fā)，宜選用壓榨法或萃取法從玉米胚芽中提取。(3)利用固定化酶技術(shù)可使葡萄糖異構(gòu)酶重復(fù)利用，從而提高酶的利用率，降低生產(chǎn)成本。(4)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增葡萄糖異構(gòu)酶基因時(shí)，需用耐高溫的(Taq)DNA聚合酶催化。PCR一般要經(jīng)歷三十次以上的循環(huán)，每次循環(huán)包括變性、(低溫)復(fù)性(或退火)；(中溫)延伸三步。14(11分)(xx江蘇，30)為了獲得胡蘿卜素產(chǎn)品，某小組開展了產(chǎn)胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取實(shí)驗(yàn)。 請回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是_；為了減少滅菌后器皿被污染，滅菌前應(yīng)該_。(2)為了篩選出酵母菌，培養(yǎng)基中添加了青霉素，其目的是_。(3)右圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖，圖中甲、乙、丙指示的依次是_。 (填序號(hào))安全閥、放氣閥、壓力表放氣閥、安全閥、壓力表安全閥、放氣閥、溫度表放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化，挑取了菌落在3塊相同平板上劃線，結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長，最可能的原因是_。(5)為增加胡蘿卜素提取量，在研磨酵母細(xì)胞時(shí)，添加石英砂的目的是_；研磨時(shí)_(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3，理由是_。答案(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌) 用牛皮紙(報(bào)紙)包扎器皿(2)抑制細(xì)菌(放線菌)生長(3)(4)接種環(huán)溫度過高，菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要胡蘿卜素較耐酸解析(1)對(duì)玻璃器皿常用的滅菌方法是干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)法；用牛皮紙包扎玻璃器皿可有效防止滅菌后的物品被環(huán)境中雜菌污染。(2)青霉素是一種廣譜抗生素，通過抑制肽聚糖的形成而抑制細(xì)胞壁的形成從而抑制細(xì)菌(放線菌)的繁殖、生長。酵母菌是真菌，其細(xì)胞壁的成分是幾丁質(zhì)，添加青霉素的培養(yǎng)基對(duì)酵母菌的繁殖沒有影響，從而篩選出酵母菌。(3)圖示中的甲為安全閥，乙為放氣閥，丙為氣壓表。(4)在將分離得到的菌株純化，一般采用劃線法和涂布平板法，在應(yīng)用劃線法取菌種時(shí)，應(yīng)先將接種環(huán)灼燒滅菌，冷卻后再提取菌種，否則會(huì)因接種環(huán)溫度過高而將菌種殺死，使實(shí)驗(yàn)失敗。(5)在提取胡蘿卜素是，研磨時(shí)添加石英砂，是為了使細(xì)胞研磨充分，胡蘿卜素充分釋放；研磨時(shí)，不需要添加CaCO3，因?yàn)橐缓}卜素較耐酸性環(huán)境，不需要加入CaCO3來保護(hù)胡蘿卜素結(jié)構(gòu)不被破壞。15(10分)(xx海南，30)已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時(shí)間有關(guān)。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學(xué)設(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。回答相關(guān)問題：(1)請完善下列實(shí)驗(yàn)步驟：標(biāo)準(zhǔn)管的制備：用_和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管。樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后在各個(gè)比色管中加入等量的顯色劑進(jìn)行顯色，得到樣品管。將每個(gè)_分別與系列標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行比較，找出與樣品管顏色深淺_的標(biāo)準(zhǔn)管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。(2)下圖表示的是泡菜中_趨勢。(3)泡菜制作過程中產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是_(填“醋酸桿菌”或“乳酸菌”)。答案(1)亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液不同泡制天數(shù)的泡菜濾液樣品管最相近(其他合理答案也給分)(2)亞硝酸鹽含量隨泡制時(shí)間的變化趨勢(其他合理答案也給分)(3)乳酸菌解析(1)亞硝酸鹽可與顯色劑發(fā)生顏色反應(yīng)，根據(jù)顏色的深淺可確定亞硝酸鹽的含量多少。用不同濃度的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液與顯色劑可制成顏色深淺不同的系列標(biāo)準(zhǔn)管，不同顏色深淺對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉濃度是已知的；用不同泡制天數(shù)的泡菜濾液與顯色劑反應(yīng)，制備一系列的樣品管，將樣品管的顏色與標(biāo)準(zhǔn)管進(jìn)行顏色比對(duì)，找到與樣品管顏色深淺最接近的標(biāo)準(zhǔn)管，所對(duì)應(yīng)的亞硝酸鈉濃度即可代表樣品管中的亞硝酸鹽含量。(2)圖示曲線橫軸為時(shí)間，縱軸為亞硝酸鹽含量，該曲線表示泡菜中亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時(shí)間的變化趨勢。(3)泡菜制作的原理是乳酸發(fā)酵，產(chǎn)酸的細(xì)菌主要是乳酸菌。16(11分)(xx新課標(biāo)，39)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成_。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時(shí)，CR可與纖維素形成_色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：酵母膏無機(jī)鹽淀粉 纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲培養(yǎng)基乙注：“”表示有，“”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙_(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_。答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會(huì)形成CR纖維素紅色復(fù)合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌。解析(1)纖維素是一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是含量最豐富的多糖類物質(zhì)，能被土壤中某些微生物分解利用；分解纖維素的纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。(3)根據(jù)有無瓊脂成分，可推知，培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙為固體培養(yǎng)基；纖維素分解菌分離和鑒別要用固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基甲不符合要求；培養(yǎng)基乙不含纖維素粉，不能形成特定的紅色復(fù)合物，乙培養(yǎng)基不符合要求。17(11分)(xx山東實(shí)驗(yàn)中學(xué)二模) 目前，現(xiàn)代生物技術(shù)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保等眾多領(lǐng)域，產(chǎn)生了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。請回答下列生物技術(shù)方面的問題：(1)利用乳酸菌制作泡菜時(shí)，往往會(huì)加入陳的“泡菜水”，作用是_，若泡菜特別咸而不酸，最可能的原因是_。(2)微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_，其中對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌常用的方法是_。(3)柑橘組織培養(yǎng)的操作程序是_；_；接種；培養(yǎng)；移栽；栽培。柑橘皮可以用提取橘皮精油，橘皮在_中的浸泡時(shí)間為10h以上，并且橘皮要浸透，這樣才會(huì)得到高的出油率。(4)PCR技術(shù)是DNA循環(huán)復(fù)制的過程，每次循環(huán)可以分為_三步。答案(1)提供乳酸菌菌種(接種)鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵(2)防止外來雜菌的污染(無菌技術(shù))干熱滅菌法(3)制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒石灰水(4)變性、復(fù)性、延伸解析“泡菜水”中有乳酸菌，可為制作泡菜提供所需的乳酸菌；若鹽過多，抑制了乳酸菌發(fā)酵可導(dǎo)致泡菜特別咸而不酸；微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的污染，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌常用的方法是干熱滅菌法；植物組織培養(yǎng)一般要先制備MS固體培養(yǎng)基，然后對(duì)外植體消毒，然后才能接種等；橘皮在石灰水中浸泡10 h以上，才會(huì)得到高出油率；PCR技術(shù)每次循環(huán)經(jīng)變性、復(fù)性、延伸三步。18(11分)(xx湖南師范大學(xué)附中二模)人和哺乳動(dòng)物的尿中含有尿素，大量尿素的存在會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源?，F(xiàn)對(duì)土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，請回答下列問題：(1)分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無菌操作，包括_和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有_(答2種)。(2)采用_法將樣液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后接種培養(yǎng)。在稀釋土壤溶液的過程中每一步都要在_旁進(jìn)行操作。接種后的培養(yǎng)皿_于37的恒溫箱中培養(yǎng)。(3)用_培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，從功能上劃分該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。若培養(yǎng)基中存在有脲酶的細(xì)菌，其菌落周圍會(huì)出現(xiàn)_，這是由于尿素被分解產(chǎn)生_，遇培養(yǎng)基中加入的酚紅指示劑產(chǎn)生的顏色變化，從而證明這一菌株可以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力_。(4)與全營養(yǎng)培養(yǎng)基中的菌落相比，以尿素為氮源的培養(yǎng)基中的菌落數(shù)_。A多B少C相等D幾乎為零答案(1)培養(yǎng)基灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌(答出其中二項(xiàng)即可) (2)稀釋涂布平板法酒精燈火焰倒置(3)以尿素為唯一氮源選擇紅色環(huán)帶氨越強(qiáng) (4)B