2018-2019學(xué)年高中生物 第二章 克隆技術(shù) 第5課時 動物的克隆(Ⅰ)學(xué)案 浙科版選修3.doc

第5課時動物的克隆()知識內(nèi)容要求考情解讀動物的克隆a1.簡述動物細胞、組織培養(yǎng)。2.說出動物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展歷程；描述細胞系及細胞株的含義。3.簡述動物的克隆培養(yǎng)法。一、動物細胞、組織培養(yǎng)與動物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展1動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)：動物的細胞和組織培養(yǎng)。2動物細胞培養(yǎng)(1)培養(yǎng)過程思考培養(yǎng)前為什么要將動物組織分散成單個細胞？答案分散后細胞能與培養(yǎng)液充分接觸，更易進行物質(zhì)交換。(2)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)將動物組織通過酶或機械方法分散成單個細胞后進行的初次培養(yǎng)，稱為原代培養(yǎng)，即從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)。初次培養(yǎng)的細胞生長、繁殖一定時間后，由于空間不足或細胞密度過大導(dǎo)致營養(yǎng)枯竭，影響細胞的生長，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進行分瓶擴大培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)，即細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個培養(yǎng)瓶。3動物組織培養(yǎng)(1)概念：動物組織在體外及人工條件下維持生活狀態(tài)或生長特性。(2)結(jié)果：由于細胞的運動、變化和培養(yǎng)物的組織成分發(fā)生變化，長期的培養(yǎng)結(jié)果最終成了簡單的細胞培養(yǎng)。(3)在廣義的組織培養(yǎng)中還包括器官培養(yǎng)，即器官的原基、器官的一部分或整個器官在體外和人工控制的條件下得以保存、生長，在此過程中保持器官的結(jié)構(gòu)、功能及分化能力。探究1科學(xué)探究填寫動物細胞的培養(yǎng)過程圖，思考回答有關(guān)問題：1原理：細胞增殖。2方法：懸浮培養(yǎng)法。3常用培養(yǎng)液：雞胚浸出液、人工培養(yǎng)液“199”。4動物細胞與組織培養(yǎng)為什么需要無菌、無毒的環(huán)境？答案細菌、真菌和病毒等均可造成細胞培養(yǎng)環(huán)境的污染，而離體培養(yǎng)的細胞已失去了對微生物和有毒物質(zhì)的防御能力，一旦受到污染或自身代謝物質(zhì)積累等，培養(yǎng)的細胞就會死亡。5為什么要放入CO2培養(yǎng)箱中保溫培養(yǎng)？答案動物細胞培養(yǎng)過程中通入CO2的目的是調(diào)節(jié)pH。6原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)(1)從機體取出后立即進行的細胞、組織培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)；也將最初的若干次傳代歸入原代范圍。(2)將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移或移植到另一個培養(yǎng)瓶就稱為傳代培養(yǎng)。探究2比較異同比較動物的細胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)1動物組織培養(yǎng)的特點(1)動物組織培養(yǎng)過程中伴隨著組織分化。(2)不管采用什么手段和培養(yǎng)條件，組織培養(yǎng)中主要的生命活動成分仍是以細胞為單位的。(3)長期培養(yǎng)可以使動物組織培養(yǎng)轉(zhuǎn)化成動物細胞培養(yǎng)。由于細胞的運動、變化，使得培養(yǎng)物的組織成分也發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能變異，結(jié)果長期的組織培養(yǎng)只能使單一類型的細胞保存下來，最終成了簡單的細胞培養(yǎng)。2動物細胞培養(yǎng)的目的是獲得大量的細胞群體，而動物組織培養(yǎng)的目的是獲得動物的器官和組織。3動物組織在離體的情況下，也能培養(yǎng)并表現(xiàn)出正常的生命活動，但與細胞培養(yǎng)也有不同的地方：在得到離體的組織后，需要機械處理或胰蛋白酶處理得到分散的細胞再進行細胞培養(yǎng)，同時動物組織培養(yǎng)過程中可以伴隨組織分化。4動物的細胞培養(yǎng)和組織培養(yǎng)在一定程度上可以看作是同義詞。例1動物細胞培養(yǎng)過程的順序是()原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理組織，形成分散的細胞懸浮液A BC D答案D解析動物細胞培養(yǎng)是用動物體內(nèi)一部分組織通過胰蛋白酶處理制成單細胞懸浮液，再通過原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)得到細胞株或細胞系。例2下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是()A動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基成分不同，但能源物質(zhì)相同，都是葡萄糖B植物組織培養(yǎng)無需添加抗生素，動物細胞培養(yǎng)過程中必須添加抗生素C通過煙草葉片細胞離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個體，可獲單倍體煙草植株D動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒答案D解析植物組織培養(yǎng)基中能源物質(zhì)為蔗糖，A錯誤；動植物組織培養(yǎng)過程中，都需要加入適量的抗生素，B錯誤；煙草葉片細胞離體培養(yǎng)獲得的是正常植株，花藥離體培養(yǎng)得到的才是單倍體植株，C錯誤；動物細胞培養(yǎng)，可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖細胞幾乎不含病毒，可通過植物組織培養(yǎng)獲得脫毒幼苗，D正確。方法技巧植物組織培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)的比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)理論基礎(chǔ)細胞的全能性細胞的增殖培養(yǎng)基類型固體或半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、瓊脂、植物激素葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清取材部位植物幼嫩部位或花藥動物胚胎或幼齡動物器官和組織對光的需求再分化階段需光不需光過程結(jié)果獲得植株新個體或獲得大量的細胞和細胞產(chǎn)物只能獲得大量細胞或細胞產(chǎn)物，不能得到生物個體用途植株快速繁育；脫毒植物的培育；制造人工種子；生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等；轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)；皮膚移植材料的培養(yǎng)；檢測有毒物質(zhì)；生理、病理、藥理學(xué)研究共性都需無菌條件，培養(yǎng)基中含有有機物和無機物等營養(yǎng)物質(zhì)；都是細胞有絲分裂過程二、細胞系、細胞株與克隆培養(yǎng)法1細胞系和細胞株(1)細胞系：可連續(xù)傳代的細胞。原代培養(yǎng)物在首次傳代時就成為細胞系，能連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為連續(xù)細胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細胞系稱為有限細胞系。二倍體細胞通常為有限細胞系。連續(xù)細胞系被認為是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細胞系，大多數(shù)具有異倍體核型。有的連續(xù)細胞系是惡性細胞系，具有異體致瘤性；有的連續(xù)細胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌。(2)細胞株：通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞稱為細胞株。細胞株一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等。可以連續(xù)多次傳代的細胞株稱為連續(xù)細胞株，傳代次數(shù)有限的細胞株稱為有限細胞株。2克隆培養(yǎng)法(或細胞克隆)(1)概念：把一個單細胞從群體中分離出來單獨培養(yǎng)，使之繁衍成一個新的細胞群體的技術(shù)。(2)結(jié)果：經(jīng)過克隆以后的細胞的后裔細胞群，由于來源于一個共同的祖細胞，所以稱為純系，也就是克隆。(3)提高細胞克隆形成率的措施：選擇適宜的培養(yǎng)基、添加血清(胎牛血清最好)、以滋養(yǎng)細胞支持生長、激素(胰島素等)刺激、使用CO2培養(yǎng)箱、調(diào)節(jié)pH等。歸納總結(jié)(1)判斷細胞株和細胞系的方法細胞系是可以傳代的細胞，分為兩種類型：有限細胞系(細胞系的生存期有限)和連續(xù)細胞系(大多具有異倍體核型)。細胞株是通過一定的純化或選擇法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞，分為兩種類型：連續(xù)細胞株和有限細胞株。細胞系所有細胞都能傳代培養(yǎng)，卻不一定具有相同的特征，不能稱為細胞克隆；而細胞株是具有特殊性質(zhì)的細胞系，一個細胞株就是一個細胞克隆。(2)克隆的類型探究比較異同比較細胞系、細胞株，完善下表：項目細胞系細胞株概念可連續(xù)傳代的細胞通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞分類有限細胞系、連續(xù)細胞系有限細胞株、連續(xù)細胞株特點二倍體細胞通常為有限細胞系；連續(xù)細胞系大多數(shù)具有異倍體核型。有的連續(xù)細胞系是惡性細胞系，具有異體致瘤性；有的連續(xù)細胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等聯(lián)系細胞株來自于原代培養(yǎng)物或細胞系，細胞系指可連續(xù)傳代的細胞，細胞株是具有特殊性質(zhì)的細胞系例3下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A細胞克隆需要滋養(yǎng)細胞支持生長B長期動物組織培養(yǎng)最終會成為簡單的細胞培養(yǎng)C細胞系在連續(xù)傳代過程中遺傳性狀始終保持均一D細胞株是從細胞系中選擇出的具有特殊性質(zhì)的細胞答案C解析提高動物細胞克隆形成率的措施有：選擇適宜的培養(yǎng)基、激素刺激、添加血清及以滋養(yǎng)細胞支持生長等，A正確；動物組織培養(yǎng)過程中伴隨著組織的分化，長期的組織培養(yǎng)最終會成為簡單的細胞培養(yǎng)，B正確；細胞系在連續(xù)傳代的過程中大多數(shù)會發(fā)生遺傳物質(zhì)改變，而具有異倍體核型，C錯誤；細胞株是從細胞系中經(jīng)過選擇或純化，獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞，D正確。例4下列關(guān)于細胞系和細胞株的說法中，正確的是()A細胞系有分裂次數(shù)的限制，細胞株可連續(xù)傳代B細胞系的遺傳物質(zhì)沒有變化，細胞株的遺傳物質(zhì)也沒有改變C細胞系是原代培養(yǎng)建成的，細胞株是傳代培養(yǎng)建成的D細胞系是可傳代的細胞，細胞株是具有特殊性質(zhì)的細胞系答案D解析細胞系是指可連續(xù)傳代的細胞，分為有限細胞系和連續(xù)細胞系，連續(xù)細胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細胞，遺傳物質(zhì)已經(jīng)發(fā)生變化；從細胞系中選擇出的具有特殊性質(zhì)的細胞是細胞株。1下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是()A培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基B培養(yǎng)結(jié)果只能獲得大量細胞及生物制品，而不能獲得生物體C需要氧來滿足細胞代謝的需要，不需要二氧化碳D通過細胞培養(yǎng)可以檢測有毒物質(zhì)，判斷某物質(zhì)的毒性答案C解析動物細胞一般用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，需要無菌環(huán)境、基本營養(yǎng)物質(zhì)、適宜的溫度和pH、一定量的O2和CO2等；通過動物細胞培養(yǎng)可以生產(chǎn)生物制品，可以培養(yǎng)皮膚移植的材料，還可以檢測有毒物質(zhì)，用于生理、病理、藥理等方面的研究；由于動物細胞分化程度高，雖然細胞核內(nèi)具有該物種的全套遺傳物質(zhì)，但單個細胞不具備形成完整個體的其他條件，所以目前還不能通過動物細胞培養(yǎng)獲得生物體。2(2017鄞州中學(xué)測試)下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A在培養(yǎng)基中加入胰島素可提高動物細胞克隆形成率B細胞克隆可以從普通細胞系中分離出缺乏特殊基因的突變細胞系C連續(xù)細胞系可認為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細胞系，大多數(shù)具有二倍體核型D連續(xù)細胞系比有限細胞系更容易克隆答案C解析在培養(yǎng)基中加入胰島素可提高動物細胞克隆形成率，A項正確；細胞克隆即克隆培養(yǎng)法，是將單一細胞從細胞群體中分離出來單獨培養(yǎng)形成純系的技術(shù)，從普通細胞系中分離出單個突變細胞即可采用這種方法培養(yǎng)成細胞系，B項正確；連續(xù)細胞系被認為是發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細胞系，大多具有異倍體核型，C項錯誤；連續(xù)細胞系增殖能力更強，更易克隆，D項正確。3動物細胞培養(yǎng)中，出現(xiàn)遺傳物質(zhì)改變的細胞是()A連續(xù)細胞系 B細胞株C原代細胞 D傳代細胞答案A解析原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了，少數(shù)能傳到4050代，50代后，有少部分細胞遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，變成了無限增殖的細胞，這些稱為連續(xù)細胞系。4下列有關(guān)細胞系的說法不正確的是()A二倍體細胞通常為有限細胞系B連續(xù)細胞系就是惡性細胞系，具異體致瘤性C能連續(xù)多次傳代的細胞系稱為連續(xù)細胞系D從細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞稱為細胞株答案B解析細胞系分為連續(xù)細胞系(能連續(xù)多次傳代的細胞系)和有限細胞系，二倍體細胞分裂次數(shù)有限，通常為有限細胞系，A、C正確；連續(xù)細胞系分為惡性細胞系和不死系，前者具有異體致瘤性，后者保留接觸抑制，不致癌，B錯誤；細胞株是細胞系經(jīng)過分離、純化后獲得的具有特殊性質(zhì)的細胞，一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性等，D正確。5回答下列問題：(1)在動物細胞培養(yǎng)過程中，當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面_時，細胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的_。此時，瓶壁上形成的細胞層數(shù)是_。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是_。(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)_的細胞，但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成_細胞，該種細胞的粘著性_，細胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量_。(3)檢查某種有毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選擇_期的細胞用顯微鏡進行觀察。答案(1)相互接觸接觸抑制單層(或一層)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性(無限增殖)降低減少(3)有絲分裂中解析(1)動物細胞培養(yǎng)過程中當(dāng)貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖。這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。此時，瓶壁上形成單層細胞。要使貼壁的細胞從瓶壁上分離下來，需要用胰蛋白酶處理。(2)隨著細胞傳代次數(shù)的增多，絕大部分細胞分裂停止，進而出現(xiàn)衰老甚至死亡，但極少數(shù)細胞可以連續(xù)增殖，其中有些細胞會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成無限增殖的細胞，該種細胞的粘著性降低，細胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量減少，稱之為細胞系(朝癌變方向發(fā)展)。(3)檢查某種有毒物是否能改變細胞染色體的數(shù)目，最好選擇有絲分裂中期的細胞進行顯微鏡觀察，因為在有絲分裂中期染色體形態(tài)穩(wěn)定，數(shù)目清晰，便于觀察。題組一動物細胞、組織培養(yǎng)1下列關(guān)于動物細胞和組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()A動物細胞和組織培養(yǎng)是動物克隆技術(shù)的基礎(chǔ)B用于培養(yǎng)的細胞最好取自健康動物體內(nèi)的組織細胞C動物細胞培養(yǎng)是將所取的組織先用胰蛋白酶進行處理，使其分散成單個細胞D動物細胞、組織通過培養(yǎng)最終在體外能發(fā)育成一個新個體答案D解析動物細胞的全能性隨分化程度的提高而受到限制，分化潛能變?nèi)?。動物細胞和組織在體外不能發(fā)育為成熟的動物個體。2下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述中，正確的是()A培養(yǎng)保留接觸抑制的細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞B克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變C二倍體細胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D惡性細胞系的細胞可進行傳代培養(yǎng)答案D解析動物細胞在培養(yǎng)過程中有接觸抑制現(xiàn)象，細胞在培養(yǎng)瓶中會貼壁生長，形成一層細胞，相互接觸后停止生長；克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中，僅有極少數(shù)細胞的基因型會發(fā)生改變；二倍體細胞的傳代培養(yǎng)一般傳至10代后就不易傳下去了；惡性細胞系的細胞具有不死性，可以進行傳代培養(yǎng)。3下列關(guān)于動物細胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A連續(xù)細胞系的細胞大多具有二倍體核型B某些癌細胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細胞C由多個細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆D未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀答案B解析連續(xù)細胞系的細胞一般都培養(yǎng)了多次，二倍體核型發(fā)生了改變，大多數(shù)具有異倍體核型；細胞癌變是基因突變引起的，如細胞在一定條件下發(fā)生基因突變，有可能使癌細胞恢復(fù)成正常細胞；一個克隆是指一個細胞經(jīng)培養(yǎng)形成的細胞群；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系可能是由多個能無限增殖的細胞增殖來的，不一定具有相同的性狀。4動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的重要區(qū)別在于()A培養(yǎng)基不同B動物細胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行C動物細胞可以傳代培養(yǎng)，而植物細胞不能D動物細胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細胞只能培養(yǎng)成植株答案A解析動物細胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基不同，動物細胞一般用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)，而植物細胞一般用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)；與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中還要加動物血清等；它們都是在無菌條件下培養(yǎng)的；動植物細胞都可以傳代培養(yǎng)；植物細胞可以培養(yǎng)成植株，也能培養(yǎng)成大量細胞。題組二原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)5動物體內(nèi)的細胞不易受到外界細菌、病毒等微生物的感染，原代培養(yǎng)的細胞()A對微生物有一定的防御能力B細胞培養(yǎng)的環(huán)境中可以有一定量的微生物C對微生物已失去了防御能力D剛離體的細胞必須生活在無菌條件下，以后的培養(yǎng)對無菌條件要求不嚴格答案C解析動物體具有一定免疫力，是因為動物體具有非特異性免疫系統(tǒng)和特異性免疫系統(tǒng)，對各種病原微生物有一定的防御能力，而離體的動物細胞失去了對各種微生物的防御能力，因此，動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境中不能存在微生物，否則，動物細胞就會死亡。6下列動物細胞培養(yǎng)過程中，屬于原代培養(yǎng)的是()A用胰蛋白酶使組織分散成單個細胞的過程B從機體取得細胞后立即進行培養(yǎng)的過程C出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取出的細胞的培養(yǎng)過程D生物制藥廠通過細胞培養(yǎng)的方法生產(chǎn)細胞產(chǎn)物答案B解析原代培養(yǎng)是指從動物機體組織取出細胞后的立即培養(yǎng)，直到細胞出現(xiàn)接觸抑制為止。因為細胞的接觸抑制，細胞停止分裂增殖，并逐漸走向衰亡，所以要想繼續(xù)細胞培養(yǎng)，必須將細胞取出分裝后才能進行，分裝后的細胞培養(yǎng)是傳代培養(yǎng)。生物制藥廠通過細胞培養(yǎng)法，用于生產(chǎn)細胞產(chǎn)物的細胞一般具有無限增殖的能力，屬于傳代培養(yǎng)。題組三細胞系、細胞株與克隆培養(yǎng)法7連續(xù)細胞系的細胞特點是()A遺傳物質(zhì)沒有改變，可以無限傳代B遺傳物質(zhì)有癌變特點，不可無限傳代C遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代D遺傳物質(zhì)有癌變特點，可以無限傳代答案D解析細胞系是指可以連續(xù)傳代的細胞，連續(xù)細胞系能連續(xù)傳代的原因是遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，而且有癌變特點。8不屬于細胞株特點的是()A不具有恒定的染色體組型B具有同功酶類型C具有病毒敏感性D具有生化特性答案A解析細胞株的特點是具有恒定的染色體組型、同功酶類型、病毒敏感性和生化特性。9下列有關(guān)克隆技術(shù)的敘述正確的是()A動物細胞培養(yǎng)時，保留接觸抑制的連續(xù)細胞系獲得不死性，但不致癌B由于植物細胞具有全能性，水稻等在多次傳代培養(yǎng)后，細胞全能性的表達能力不變C從個體中分離出單個組織進行培養(yǎng)是細胞克隆最基本要求D原生質(zhì)體的獲取需在較低滲透壓的環(huán)境下進行答案A解析動物細胞培養(yǎng)時，保留接觸抑制的連續(xù)細胞系獲得不死性，但不致癌，A正確；由于植物細胞具有全能性，水稻等在多次傳代培養(yǎng)后，細胞全能性的表達能力越來越小，B錯誤；從個體中將細胞分散成單個，制成細胞懸浮液，是動物細胞克隆最基本要求，C錯誤；原生質(zhì)體的獲取需在0.50.6 mol/L較高滲透壓的甘露醇溶液中進行，D錯誤。10下列屬于細胞克隆的是()A棉花根尖細胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗B單細胞的DNA在體外大量擴增C培養(yǎng)單抗細胞株D小鼠體細胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠答案C解析棉花根尖細胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗過程是植物組織培養(yǎng)，屬于個體水平的克隆，故A錯誤；PCR技術(shù)將單細胞的DNA在體外大量擴增，產(chǎn)生的大量DNA分子，屬于分子水平的克隆，故B錯誤；小鼠體細胞經(jīng)誘導(dǎo)培育成小鼠，屬于克隆動物，屬于個體水平的克隆，故D錯誤。題組四綜合應(yīng)用11對某種動物的肝腫瘤細胞進行細胞培養(yǎng)，下列說法正確的是()A取單個肝腫瘤細胞進行培養(yǎng)，獲得細胞群的方法不屬于克隆培養(yǎng)法B細胞培養(yǎng)過程中不需考慮細菌的污染問題C該培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒D在原代培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)的細胞最終也會出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象答案D解析A選項的描述屬于細胞層次的克隆；培養(yǎng)液受細菌污染后，其中的營養(yǎng)成分會發(fā)生改變，不利于細胞的培養(yǎng)，B錯誤；病毒的生存離不開細胞，用培養(yǎng)液不能培養(yǎng)病毒，C錯誤；原代培養(yǎng)過程中，細胞會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，將停止增殖，D正確。12實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()A甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶消化C丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型D丁過程得到的細胞具有異質(zhì)性答案C解析取小鼠皮膚組織進行培養(yǎng)時需對實驗小鼠進行消毒；通過胰蛋白酶消化皮膚組織可獲得皮膚細胞；丙過程為原代培養(yǎng)，細胞核型穩(wěn)定；來源于多個細胞的非克隆培養(yǎng)所得到的細胞系具有異質(zhì)性，該實驗小鼠皮膚細胞屬于非克隆培養(yǎng)，丁過程得到的細胞具有異質(zhì)性。13動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機制意義重大。如圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題：(1)將肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細胞_。(2)氣室中充入5 %CO2氣體的主要作用是_。(3)如果經(jīng)細胞培養(yǎng)形成的皮膚組織移植給患者，培養(yǎng)的細胞來源最好是_，以避免移植后發(fā)生排斥現(xiàn)象。答案(1)吸收氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)、排出代謝廢物(2)維持培養(yǎng)液適宜的pH(3)患者本人的健康皮膚解析(1)將肝臟切成小薄片，有利于肝臟細胞透過濾紙從培養(yǎng)液中吸收營養(yǎng)物質(zhì)。同時有利于與外界進行氣體交換和自身代謝廢物的排出。(2)組織培養(yǎng)時5 %CO2有維持培養(yǎng)液pH的功能。(3)皮膚克隆就是皮膚細胞進行有絲分裂增殖，其遺傳物質(zhì)沒有改變，培養(yǎng)的細胞來源最好是患者本人的健康皮膚，以防移植后發(fā)生排斥現(xiàn)象。14如圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖，請據(jù)圖回答：(1)動物細胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是()A細胞分化 B細胞增殖C細胞全能性 D細胞膜流動性(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是_，然后用_酶處理，這是為了使細胞分散開來。這樣做的目的是_。(3)培養(yǎng)首先在B瓶中進行。在此瓶中培養(yǎng)一段時間后，有許多細胞衰老死亡，到這時的培養(yǎng)稱為_。(4)為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用_處理，然后配制成_，再分裝。(5)在C瓶中正常培養(yǎng)細胞的過程稱為_。答案(1)B(2)剪碎組織胰蛋白使細胞與培養(yǎng)液充分接觸(3)原代培養(yǎng)(4)胰蛋白酶細胞懸浮液 (5)傳代培養(yǎng)解析(1)動物細胞培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細胞增殖。(2)在進行培養(yǎng)時應(yīng)盡量使細胞分散，便于與培養(yǎng)液充分接觸進行物質(zhì)交換，使其分散需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(3)培養(yǎng)的過程分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩大階段。當(dāng)培養(yǎng)到第10代左右，出現(xiàn)許多細胞衰老死亡現(xiàn)象，這時為原代培養(yǎng)。(4)用胰蛋白酶處理使細胞從玻璃瓶壁上脫離下來，配制成細胞懸浮液繼續(xù)培養(yǎng)。(5)在C瓶中的培養(yǎng)屬于傳代培養(yǎng)。15(2017臺州中學(xué)高二期中節(jié)選)下圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞增殖情況的變化曲線(圖中B、E兩點表示經(jīng)篩選后繼續(xù)培養(yǎng))，請據(jù)圖回答下列問題：(1)OB段的培養(yǎng)稱為_培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了_現(xiàn)象，需要用_酶處理使組織細胞分散開來，分裝到多個卡氏瓶中進行_培養(yǎng)。(2)上述動物細胞培養(yǎng)過程中有很多重要的現(xiàn)象，下列敘述中，正確的是_。AE點以后的細胞大多數(shù)具有二倍體核型B培養(yǎng)過程中某些細胞癌變后能在合適條件下逆轉(zhuǎn)為正常細胞C由B點后篩選出多個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆D未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細胞系細胞具有相同的性狀(3)動物細胞培養(yǎng)一般放在_培養(yǎng)箱中，提高培養(yǎng)成功率還可在培養(yǎng)基中添加一些物質(zhì)或細胞，加入滋養(yǎng)細胞的目的是_。答案(1)原代接觸抑制胰蛋白傳代(2)B(3)CO2恒溫支持生長解析(1)動物細胞10代以內(nèi)的培養(yǎng)都可以稱為原代培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中由于存在接觸抑制，會出現(xiàn)增殖停止現(xiàn)象，此時需要用胰蛋白酶處理使細胞分散開來，進行傳代培養(yǎng)。(2)E點以后的細胞可以無限增殖，大多數(shù)具有異倍體核型，A錯誤；癌細胞在適宜的條件下可以逆轉(zhuǎn)為正常細胞，B正確；由B點后篩選出1個祖細胞培養(yǎng)形成的細胞群為一個克隆，C錯誤；未經(jīng)克隆化的細胞系具有異質(zhì)性，D錯誤。(3)動物細胞培養(yǎng)一般放在CO2恒溫培養(yǎng)箱中，為提高培養(yǎng)成功率，培養(yǎng)基中還需加入滋養(yǎng)細胞以支持生長。自助加餐16動物細胞體外培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。從該圖提供的信息獲得的結(jié)論，不正確的是()A正常細胞與癌細胞的增殖速率相同B有無血清對正常細胞培養(yǎng)的影響不同C培養(yǎng)基中補充血清有助于正常細胞的培養(yǎng)D培養(yǎng)基中是否補充血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大答案A解析動物細胞培養(yǎng)時通常要在培養(yǎng)基中加入血清。從圖示中可以看出，癌細胞與正常細胞的增殖速率不同。有血清時正常細胞增殖快，而有無血清對癌細胞的培養(yǎng)影響不大。17下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的敘述中，不正確的是()A用于培養(yǎng)的細胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織 B將所取的組織先用胰蛋白酶等進行處理使其分散成單個細胞C在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，制成懸浮液D動物細胞培養(yǎng)只能傳50代左右，所培養(yǎng)的細胞就會全部衰老死亡答案D解析動物細胞培養(yǎng)的過程是：先制備培養(yǎng)液，然后取動物細胞，用于培養(yǎng)的細胞大都來自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織。將組織取出后，用胰蛋白酶等處理使組織分散成單個細胞，將單個細胞配制成一定濃度的細胞懸浮液，再將懸浮液放入培養(yǎng)瓶中在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長，細胞的數(shù)目越來越多，需定期用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來，再配制成懸浮液，分到培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。動物細胞培養(yǎng)50代可發(fā)生癌變，癌細胞會無限增殖。