油鏡及熒光顯微鏡的原理及使用方法

光學(xué)顯微鏡的使用方法光學(xué)顯微鏡的使用方法及注意事項及注意事項熒光顯微鏡的使用原理熒光顯微鏡的使用原理光學(xué)顯微鏡的使用方法光學(xué)顯微鏡注意事項熒光顯微鏡的使用原理123光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡（Optical Microscope，簡寫OM）是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。光學(xué)顯微鏡的使用方法低、高倍鏡觀察進一步放大的部分移到視野的中心光學(xué)顯微鏡的使用方法集光器上升到最高位置光圈開到最大光學(xué)顯微鏡的使用方法轉(zhuǎn)換油鏡時，從側(cè)面水平注視鏡頭與玻片的距離高倍鏡頭離開通光孔，在需觀察部位的玻片上滴加一滴香柏油光學(xué)顯微鏡的使用方法用左眼觀察目鏡，并慢慢轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)器至物象清晰為止。不出現(xiàn)物象 目標不理想加油區(qū)外加油區(qū)內(nèi)低倍高倍油鏡低倍油鏡油鏡使用完畢，先用擦鏡紙沾少許二甲苯將鏡頭上和標本上的香柏油擦去，然后再用干擦鏡紙擦干凈。光學(xué)顯微鏡注意事項1.持鏡時必須是右手握臂、左手托座的姿勢；2.水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺， 如果沾污應(yīng)立即擦凈；3.放置玻片標本時要對準通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡；4.不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞；5.使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)。熒光顯微鏡的使用原理什么是熒光？概念：物質(zhì)中的電子吸收光的能量由低能狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)楦吣軤顟B(tài)，再回到低能狀態(tài)時釋放出的光。即：物質(zhì)吸收短波光，發(fā)射出的長波光。自發(fā)性熒光分類誘發(fā)性熒光細胞內(nèi)的成分經(jīng)短波長照射后，可以發(fā)出熒光細胞內(nèi)的成分經(jīng)紫外線照射后不發(fā)熒光，但與熒光染料結(jié)合后可呈現(xiàn)一定顏色的熒光一般很微弱，如葉綠素。如吖啶橙，能使細胞內(nèi)的DNA呈綠色熒光；RNA呈紅色熒光。熒光顯微鏡熒光顯微鏡(Fluorescence microscope) 是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發(fā)出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進行定性和定量研究的工具之一。多采用200W的超高壓汞燈作光源。原理：電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。作用：它發(fā)射很強的紫外和藍紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。注意：超高壓汞燈也散發(fā)大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環(huán)境溫度不宜太高。汞燈光源激發(fā)濾板 紫外光紫外光激發(fā)濾板激發(fā)濾板紫紫 外藍光激發(fā)濾板外藍光激發(fā)濾板400nm紫外光紫藍光激發(fā)濾板紫藍光激發(fā)濾板400nm可見光可見光300-450nm光350-490nm光根據(jù)光源和熒光色素的特點，可選用以下三類激發(fā)濾板，根據(jù)光源和熒光色素的特點，可選用以下三類激發(fā)濾板，提供一定波長范圍的激發(fā)光。提供一定波長范圍的激發(fā)光。分光鏡分光鏡反射短波，透射長波。短波激發(fā)光在分光鏡處反射，由物鏡到熒光物質(zhì)，產(chǎn)生的長波長發(fā)射光經(jīng)物鏡返回，并透過分光鏡。壓制濾板壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)波壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)波長范圍的熒光。長范圍的熒光。紫外光紫外光壓制濾板壓制濾板紫紫 外藍光壓制濾板外藍光壓制濾板紫藍光壓制濾板紫藍光壓制濾板可見光紫外光510nm460nm 熒光顯微鏡的種類 落射式 透射式 熒光顯微鏡的主要部件熒光顯微鏡的主要部件 透射式 汞燈光源 激發(fā)濾版 暗場聚光鏡 壓制濾版 落射式 汞燈光源 激發(fā)濾版 分光鏡 壓制濾版300-490nm510nm520-560nm熒光顯微鏡的使用方法1打開燈源，超高壓汞燈要預(yù)熱幾分鐘才能達到最亮點。2落射式熒光顯微鏡需在光路的插槽中插入所要求的激發(fā)濾版分光鏡壓制濾板。 透射式熒光顯微鏡需在燈源與聚光器之間裝上所要求的激發(fā)濾版，在物鏡的后面裝上相應(yīng)的壓制濾板。 3用低倍鏡觀察，根據(jù)不同型號熒光顯微鏡的調(diào)節(jié)裝置，調(diào)整光源中心，使其位于整個照明光斑的中央。4放置標本片，調(diào)焦后即可觀察。熒光顯微鏡的使用方法注意事項：1.末裝濾光片不要用眼直接觀察，以免引起眼的損傷；2.用油鏡觀察標本時，必須用無熒光的特殊油鏡；3.高壓汞燈關(guān)閉后不能立即重新打開，需經(jīng)5分鐘后才能再啟動，否則會不穩(wěn)定，影響汞燈壽命。Thank You