高中生物 純化大腸桿菌課件 蘇教版選修1.ppt

鞏固練習(xí),1、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)者的雙手、空氣所采用的滅菌、消毒方法依次是( ) 化學(xué)消毒 灼燒滅菌 干熱滅菌 紫外線滅菌 高壓蒸汽滅菌 巴氏消毒法 A B C D,2、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 ( ) 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具、培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌 接種純種細(xì)菌 適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) 防止外來(lái)雜菌的入侵,鞏固練習(xí),3、下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答：,（1）物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。依用 途劃分，則屬于_培養(yǎng)基。 根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同化作用的類型 是 _。（異養(yǎng)型/自養(yǎng)型）,固體,選擇,異養(yǎng)型,實(shí)驗(yàn)操作：純化大腸桿菌,純化大腸桿菌,1、本實(shí)驗(yàn)所用的培養(yǎng)基是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,2、本實(shí)驗(yàn)可分成配制培養(yǎng)基和純化大腸桿菌兩個(gè)階段。,（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,1.計(jì)算：,根據(jù)配方比例，計(jì)算配制100mL培養(yǎng)基的用量,2.稱量：,3.溶化：,將各成分加水溶解并定容至100mL。,4.滅菌：,培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿,5.倒平板：,思考3：在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中，動(dòng)作要迅速，原因是什么？,（一）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,防止牛肉膏吸收空氣中的水分,思考4：溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？,防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作,在火焰旁右手拿 _，左手 _.,錐形瓶,拔出棉塞,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作,錐形瓶的瓶口 _。,迅速通過(guò)火焰,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作,左手將培養(yǎng)皿 _,右手 _, 立刻蓋上皿蓋。,打開(kāi)一條縫隙,將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,5.倒平板,待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作,待平板冷卻凝固后，將平板 _。,倒過(guò)來(lái)放置,5.倒平板,思考5：錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是什么？,消滅瓶口雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基。,思考6：倒平板的目的是什么？,防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。,思考7：若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？,不能，空氣中的雜菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)的培養(yǎng)基。,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,用帶有微生物的接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面通過(guò)連續(xù)劃線而純化分離微生物的一種方法。,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,5.將菌種試管口再次通過(guò)火焰 后塞上棉塞,二、純化大腸桿菌,1.平板劃線法,7.灼燒接種環(huán)，冷 卻后從第一區(qū)劃線 末端開(kāi)始向第二區(qū) 域內(nèi)劃線。重復(fù)上 述過(guò)程，完成三、 四、五區(qū)域內(nèi)劃線。 注意不要將第五區(qū) 的劃線與第一區(qū)劃 線相連。,8.將平板倒置 放在培養(yǎng)箱中 培養(yǎng),思考8：取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？,二、純化大腸桿菌,消滅接種環(huán)上的微生物。,為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)？,消滅接種環(huán)上的殘留菌種。,取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是？,防止高溫殺死菌種,最后灼燒接種環(huán)的目的是？,防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者,在第1次劃線后都從上次劃線末端開(kāi)始的目的是？,獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落,