高中生物 專(zhuān)題2 動(dòng)物細(xì)胞的融合與單克隆抗體課件 新人教版必修3.ppt
1970年,有兩位科學(xué)家 做了一個(gè)著名的實(shí)驗(yàn): 人鼠細(xì)胞融合的實(shí)驗(yàn), 以證明細(xì)胞膜上的蛋白 質(zhì)分子是運(yùn)動(dòng)的。,人鼠細(xì)胞是怎樣實(shí)現(xiàn)融合的?動(dòng)物細(xì)胞融合有什么實(shí)踐意義呢?,w,w,動(dòng)物細(xì)胞融合與 單克隆抗體,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,有些細(xì)胞的融合是正常的生命活動(dòng)。如精子與卵細(xì)胞的結(jié)合。,思考2:細(xì)胞融合過(guò)程中使用的病毒不滅活行嗎?,不滅活的病毒會(huì)感染細(xì)胞,而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。,思考1:為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑?,一、動(dòng)物細(xì)胞融合,P52:生物資料卡,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程:閱讀書(shū)本圖2-23,w,2、誘導(dǎo)融合的因素 生物法:滅活的病毒誘導(dǎo)融合.(常用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合)。 化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)融合. 物理法:電激融合,病毒顆粒黏 附細(xì)胞表面,細(xì)胞膜連接,細(xì)胞膜被 病毒顆粒穿通,細(xì)胞融合、形成雜種細(xì)胞,一、動(dòng)物細(xì)胞融合(細(xì)胞雜交) (P52),1.概念:,指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。,2.結(jié)果:,形成含有2或多個(gè)細(xì)胞遺傳物質(zhì)的單核雜交細(xì)胞,3.融合原理:,細(xì)胞膜的流動(dòng)性,4.誘導(dǎo)方式,物理法:離心、振動(dòng)、電激,化學(xué)法:聚乙二醇(PEG),生物法:滅活的病毒,5.意義:,突破有性雜交局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 廣泛應(yīng)用多個(gè)領(lǐng)域 重要用途:制備單克隆抗體,w,二、單克隆抗體,回憶1:什么是抗體?,回憶2:抗體是怎么產(chǎn)生的?是主要分布在哪里?,回憶3:抗體有什么作用?,主要分布在:血清,凝聚或殺死相應(yīng)的病原體,抗體是機(jī)體受抗原刺激后產(chǎn)生的、并能與該抗原發(fā) 生特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。,二、單克隆抗體,閱讀書(shū)本圖p5253回答以下問(wèn)題,1、獲得抗體的傳統(tǒng)方法是怎么樣的?這種方法有什么缺點(diǎn)?,方法:把某種抗原反復(fù)注射到動(dòng)物體內(nèi),然后從動(dòng)物血清中分離出所需的抗體。,缺點(diǎn): 產(chǎn)量低,純度低,特異性差。,每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強(qiáng)的抗體。 如果利用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖(克?。纬杉?xì)胞群,這樣的細(xì)胞群就有可能產(chǎn)生出化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體單克隆抗體。,問(wèn)題: 怎樣獲得化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體呢?,光純還不行,還要大量.怎么辦? 但,有問(wèn)題: 想想看,什么細(xì)胞能無(wú)限繁殖呢? 怎么獲得能產(chǎn)生抗體又能無(wú)限增殖的細(xì)胞呢?,用單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(克隆)就可以產(chǎn)生大量抗體了.,B淋巴細(xì)胞是不能無(wú)限繁殖的.怎么辦?,癌細(xì)胞. 但它不能產(chǎn)生抗體.,癌細(xì)胞能無(wú)限繁殖,但不能產(chǎn)生抗體.B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生抗體,但不能大量繁殖.將兩個(gè)細(xì)胞融合即可得到既能產(chǎn)生抗體又能無(wú)限增值的細(xì)胞,w,如何誘導(dǎo)融合?,用滅活的病毒或加入聚乙二醇(PEG),如何得到B淋巴細(xì)胞?,制備單克隆抗體的過(guò)程P53,圖2-24,注射特定的抗原蛋白,細(xì)胞兩兩融合后,有哪些類(lèi)型?,B-B B-瘤(雜交瘤細(xì)胞) 瘤-瘤,(4)第二次刷選的結(jié)果(目的)是什么?,能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,(3)如何將雜交瘤細(xì)胞(B-瘤)刷選出來(lái)?,制備單克隆抗體的過(guò)程P53,圖2-24,選擇培養(yǎng)基選出雜交瘤細(xì)胞,(5)如何得到大量的單克隆抗體?,體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng),單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):,特異性強(qiáng)、靈敏度高,雜交瘤細(xì)胞(B-瘤細(xì)胞),足量單一類(lèi)型 雜交瘤細(xì)胞,單克隆抗體制備流程圖,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):,純度高,特異性強(qiáng),靈敏度高,產(chǎn)量大,選擇性培養(yǎng)基,注射特定 抗原蛋白,圖中B為_(kāi)過(guò)程, 常用_作為誘導(dǎo)劑 ,該細(xì)胞繼承_的遺傳特性,既能_,又能_ 。,1.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的抗體實(shí)驗(yàn)方案,該實(shí)驗(yàn)方案的 目是 ;,A是從小鼠的脾臟中取得_ ,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生 ;,制備單克隆抗體,B淋巴細(xì)胞,專(zhuān)一抗體,細(xì)胞融合,滅活病毒,雙親細(xì)胞,分泌專(zhuān)一抗體,無(wú)限增殖,4、單抗隆抗體的應(yīng)用,作為診斷試劑,定位診斷腫瘤、心血管畸形等疾病,用于體外診斷人類(lèi)和動(dòng)植物疾病及病原鑒定,純度高、特異性強(qiáng),具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。,用于治療疾病和運(yùn)載藥物,利用同位素標(biāo)記單抗,在特定組織成像,制成生物導(dǎo)彈,將藥物定向帶到癌細(xì)胞所在的位置,在原位殺死癌細(xì)胞,療效高、副作用小。,單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn): 特異性強(qiáng),靈敏度高,并可以大量制備。,w,動(dòng)物細(xì)胞融合,單克隆 抗體制備,過(guò)程:,原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性,意義:突破有性雜交局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能,應(yīng)用:主要用于制備單克隆抗體,制備過(guò)程:,特點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,產(chǎn)量大,應(yīng)用:用作診斷試劑,治療疾病和運(yùn)載藥物,小結(jié):,1只能使動(dòng)物細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)方法( ) APEG B滅活的病毒 C電刺激 D離心 2、“生物導(dǎo)彈”是指 ( ) A.單克隆抗體 B.雜交瘤細(xì)胞 C.產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞 D.在單抗上連接抗癌藥物,B,練習(xí),D,3. 單克隆抗體制備過(guò)程中,骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞 誘導(dǎo)融合后,要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞,在 這種培養(yǎng)基上不能存活增殖的細(xì)胞是( ) 淋巴細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 B淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 A B C D,C,5.下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法,設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案,制備單克隆抗體,不能,沒(méi)有注射抗原,無(wú)法獲得產(chǎn)生單一抗體的B淋巴細(xì)胞。,(1)該實(shí)驗(yàn)方案的目的是:,(2)該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎?為什么?,(3)A是從小鼠的脾臟中取得_ 該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_ 。,(4).圖中B為_(kāi)過(guò)程,常用_誘導(dǎo),該細(xì)胞繼承雙親細(xì)胞的遺傳特性,既能_ _,又能_。,B淋巴細(xì)胞,抗體,細(xì)胞融合,滅活的病毒,分泌專(zhuān)一抗體,迅速大量增殖,