海參皂苷的消化吸收特性的研究.ppt

海參皂苷的消化吸收特性的研究,負 責(zé) 人：宋姍姍 組 員：王夢飛、朱詩怡、于鵬凱 所在院系：食品科學(xué)與工程學(xué)院 專業(yè)年級：食品科學(xué)與工程10級 指導(dǎo)教師：王玉明 實驗時間：2012年4月至2013年4月,實驗?zāi)康?研究海參皂苷的消化吸收特性，為深入研究海參皂苷的藥理活性機制及新型相關(guān)功能性保健食品研發(fā)提供支持。 通過該實驗，熟悉了解一些基本的實驗技能和實驗儀器的使用。,實驗支撐條件,本實驗以食品科學(xué)與工程學(xué)院人類健康實驗室為依托，該實驗室近年在海參加工和活性物質(zhì)研究方面具有豐富的經(jīng)驗和雄厚的前期基礎(chǔ)。 人類健康實驗室具備本實驗所需以下儀器：動物實驗設(shè)備（飼養(yǎng)室、鋼絲籠），高效液相色譜-質(zhì)譜（HPLC-MS/MS），基本的生化學(xué)試劑和有機溶劑。 王玉明教授對海參的營養(yǎng)與活性、海參營養(yǎng)保持技術(shù)有深入的研究，具有較強的科研教學(xué)經(jīng)驗。,實驗內(nèi)容,1、海參粗皂苷的提取根據(jù)海參皂苷的化學(xué)性質(zhì)，利用乙醇浸提法提取海參干粉中總皂苷，并進一步經(jīng)過水飽和正丁醇萃取和大孔樹脂純化后得到總海參皂苷。 2、海參皂苷溶液的配制 將1800mg海參總皂苷溶解于36ml生理鹽水中，配成溶液，備用。,實驗內(nèi)容,3、動物實驗 3.1高劑量皂苷單體EA灌胃大鼠實驗,實驗內(nèi)容,3、動物實驗 3.2低劑量皂苷單體EA灌胃大鼠實驗,實驗內(nèi)容,4、血清皂苷單體EA液質(zhì)檢測方法的確定 4.1血清樣本的前處理（反相C18固相萃取柱萃取法）,實驗內(nèi)容,4.1血清樣本的前處理（反相C18固相萃取柱萃取法）,實驗內(nèi)容,4.2實驗確定皂苷單體HPLC-MS/MS檢測分析條件 液相色譜條件：Zorbax SB-C18色譜柱（4.6mm250mm, 5m）； 流速：1.0mL/min；進樣量：20l；柱溫：30； 流動相：A：乙腈，B：0.1 %磷酸水溶液； 梯度模式：時間梯度：053035min 濃度梯度：30%30%50%30% 溶劑A 質(zhì)譜條件：電噴霧離子化，負離子模式檢測；進入質(zhì)譜流動相分流至0.5mL/min；細管電壓3. 0 kV；錐孔電壓35 V；離子源溫度80；干燥氣溫度150；質(zhì)量掃描范圍m/ z 2002000；霧化氣（N2）流速15 L/h；干燥氣（N2）流速11.0 L/h； EA單體MRM模式檢測m/z=591.4。,實驗結(jié)果,1、高劑量皂苷單體EA消化吸收曲線 實驗初步確定高劑量及低劑量皂苷單體EA的消化吸收曲線，如下：,實驗結(jié)果,2、低劑量皂苷單體EA消化吸收曲線,實驗結(jié)果,3、血清皂苷單體EA的液質(zhì)分析方法回收率檢驗 取空白血清，加入一定濃度的標準品，使血清中EA的濃度分別為0.6g/mL、10g/mL、20g/mL，用測定樣品的方法對標準品進行檢測，測定方法回收率為89.4%，95.7%，92.4%，證明該分析方法準確性良好。,