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(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )

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(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )

(江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 )1判斷下列敘述的正誤(1)用不同濃度的NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)()(2)提取DNA時,如果沒有雞血材料,可用豬血代替(×)(3)在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同(×)(4)洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度(×)(5)將制備的含有DNA的濾液加入6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,可以將DNA析出(×)(6)實(shí)驗(yàn)中兩次使用蒸餾水的目的不同()(7)在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,將絲狀物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色(×)2填空識記實(shí)驗(yàn)原理(1)粗提取原理:DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精。DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。溶解規(guī)律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液DNA 溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L逐漸降低的過程中,溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解DNA與雜質(zhì)對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同。DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。(2)鑒定原理: DNA二苯胺試劑藍(lán)色。3填空掌握操作流程4據(jù)圖回答操作的目的分別是什么 _,_,_,_。提示:是使雞血細(xì)胞吸水漲破釋放出核物質(zhì);是析出DNA,去除溶于酒精的雜質(zhì);是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中;是稀釋NaCl溶液使其濃度接近0.14 mol/L,去除溶于低濃度NaCl溶液的雜質(zhì)。題組練透·過考點(diǎn)1(2014·江蘇高考)下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)敘述,錯誤的是()A酵母和菜花均可作為提取DNA的材料BDNA既溶于2 mol/L NaCl溶液也溶于蒸餾水C向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,可見玻棒上有白色絮狀物DDNA溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)解析:選C原則上含DNA的生物材料都可用來提取DNA,只是選用DNA含量高的生物組織,成功的可能性更大;DNA在2 mol/L NaCl溶液和蒸餾水中溶解度都較大;向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水?dāng)嚢?,雞血細(xì)胞會吸水破裂,但在蒸餾水中不會析出DNA;DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱,待冷卻后溶液變藍(lán)。2(2015·江蘇高考,多選)下圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列敘述正確的是()A圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同B圖1中完成過濾之后保留濾液C圖2中完成過濾之后棄去濾液D在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)解析:選BCD圖1中加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破,圖2中加入蒸餾水的目的是調(diào)節(jié)鹽溶液的濃度,使DNA析出。圖1中含有DNA的核物質(zhì)位于濾液中,因此完成過濾后應(yīng)保留濾液。圖2中析出的DNA在紗布上,因此完成過濾后應(yīng)棄去濾液。嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化雜質(zhì)蛋白的分解。歸納拓展1DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中的三個注意點(diǎn)(1)本實(shí)驗(yàn)不能用哺乳動物成熟紅細(xì)胞作實(shí)驗(yàn)材料,原因是哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核。(2)因DNA容易被玻璃容器吸附,實(shí)驗(yàn)過程中最好使用塑料的燒杯和試管,減少提取過程中DNA的損失。(3)每次用玻璃棒攪拌時都要沿同一方向,防止打碎DNA分子。2DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的“2、3、4”(1)加蒸餾水2次:加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;加到含DNA的2 mol/L的NaCl溶液中,使NaCl溶液的濃度下降到0.14 mol/L,使DNA析出。(2)用紗布過濾3次:過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;濾取0.14 mol/L的NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);過濾溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。(3)用NaCl溶液4次:加2 mol/L的NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);用0.14 mol/L的NaCl溶液使DNA析出;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物;用2 mol/L的NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA。課堂鞏固練小試身手1(2013·江蘇高考)某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn),操作錯誤的是 ()A加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 解析:選A加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則會產(chǎn)生許多泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作;蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì),因此能起到純化DNA的目的;加入酒精和用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免引起DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀;DNA可與二苯胺試劑在沸水浴條件下作用顯藍(lán)色。2下列關(guān)于“DNA粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A酵母菌、菜花和豬的成熟紅細(xì)胞都可作為提取DNA的材料B在酒精溶液中,某些蛋白質(zhì)的溶解度比DNA大C在研磨植物細(xì)胞時加入洗滌劑是為了溶解DNAD在5060 的水浴中,DNA遇二苯胺試劑后即呈藍(lán)色解析:選B豬的成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器,不含DNA,不能作為提取DNA的材料;某些蛋白質(zhì)溶于酒精溶液,而DNA不溶;研磨植物細(xì)胞時加入洗滌劑是為了瓦解細(xì)胞膜;沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑呈藍(lán)色。3下面為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的一些重要操作示意圖,據(jù)圖回答下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的問題:(1)正確的操作順序是_。(2)上圖C、E步驟都加入蒸餾水,但其目的不同,分別是_和_。(3)上圖A步驟中所用酒精必須經(jīng)過_才能使用,該步驟的目的是_。(4)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可滴加_試劑,沸水浴,如果出現(xiàn)_,則該絲狀物的主要成分為DNA。解析:兩次加入蒸餾水的作用:第一次是使雞血細(xì)胞吸水漲破,DNA從細(xì)胞中釋放出來進(jìn)入濾液;第二次是使溶解于物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中的DNA析出,與雜質(zhì)分離。本題還涉及DNA的鑒定,DNA可在沸水浴條件下與二苯胺試劑作用,被染成藍(lán)色。答案:(1)CBEDA(2)加速血細(xì)胞的破裂降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出(3)充分冷卻提取含雜質(zhì)少的DNA(4)二苯胺藍(lán)色課下模擬練自我檢測一、選擇題1鑒定DNA的試劑是()A斐林試劑B蘇丹染液C雙縮脲試劑 D二苯胺試劑解析:選D鑒定DNA用的試劑是二苯胺,蘇丹染液用于鑒定脂肪,斐林試劑用于鑒定可溶性還原糖,雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)。2在提取DNA的過程中,最好使用塑料試管和燒杯,目的是()A不易破碎 B減少提取過程中DNA的損失C增加DNA的含量 D容易刷洗解析:選BDNA易被玻璃器皿吸附,使用塑料試管和燒杯,可以減少DNA的損失。3(2018·江蘇高考)關(guān)于還原糖、蛋白質(zhì)和DNA的鑒定實(shí)驗(yàn),下列敘述正確的是()A在甘蔗莖的組織樣液中加入雙縮脲試劑,溫水浴后液體由藍(lán)色變成磚紅色B在大豆種子勻漿液中加入斐林試劑,液體由藍(lán)色變成紫色C提取DNA時,在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑和食鹽,充分研磨,過濾并棄去濾液D將DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺試劑,沸水浴后液體由無色變成藍(lán)色解析:選D甘蔗莖的組織樣液中含有大量的蔗糖,蔗糖屬于非還原性糖,與斐林試劑在5065 的水浴加熱條件下不會產(chǎn)生磚紅色沉淀;大豆種子的勻漿液中含有大量的蛋白質(zhì),鑒定蛋白質(zhì)時應(yīng)使用雙縮脲試劑,雙縮脲試劑在常溫下能與蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng),生成紫色的絡(luò)合物;提取DNA時,植物細(xì)胞需要先用洗滌劑瓦解細(xì)胞膜,在切碎的洋蔥中加入適量的洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的研磨,過濾后收集濾液;在沸水浴條件下,DNA與二苯胺試劑反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色。4下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A取材:雞血細(xì)胞。原因:有細(xì)胞核,其他動物的血細(xì)胞都沒有細(xì)胞核B粗提取:不同濃度的NaCl溶液。原因:DNA在其中的溶解度不同C提純:95%的冷酒精。原因:DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精D鑒定:二苯胺試劑。原因:DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色解析:選B除了哺乳動物成熟的紅細(xì)胞,其他動物的血細(xì)胞都有細(xì)胞核。DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,從而粗提取DNA。DNA不溶于酒精,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,進(jìn)而提純DNA。DNA溶液加入二苯胺試劑后需沸水浴加熱才會呈藍(lán)色。5在DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,將獲得的含有DNA的黏稠物分別按下表處理3次,則DNA主要集中在標(biāo)號()操作黏稠物濾液2 mol·L1的NaCl溶液攪拌過濾0.14 mol·L1的NaCl溶液攪拌過濾95%的冷酒精攪拌過濾A. BC D解析:選BDNA在2 mol·L1的NaCl溶液中溶解度大,過濾后DNA存在于濾液中;DNA在0.14 mol·L1的NaCl溶液中溶解度低,攪拌過濾后存在于黏稠物中;DNA不溶于95%的冷酒精,攪拌過濾后存在于黏稠物中。6如圖是“DNA粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的兩個操作步驟示意圖,下列相關(guān)敘述正確的是()A圖1中溶液a是0.14 mol·L1的NaCl溶液B圖1所示操作的原理是DNA能溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶C圖2所示實(shí)驗(yàn)操作中有一處明顯錯誤,可能導(dǎo)致試管2中藍(lán)色變化不明顯D圖2試管1的作用是證明2 mol·L1 NaCl溶液遇二苯胺出現(xiàn)藍(lán)色解析:選C圖1中是將絲狀物溶解,溶液a是2 mol·L1的NaCl溶液;加入冷卻的酒精的目的是除雜,原理是DNA不溶于冷酒精,而雜質(zhì)蛋白能溶于酒精;圖2操作中的錯誤是試管2中未將DNA溶于2 mol·L1的NaCl溶液中,可能導(dǎo)致試管2藍(lán)色變化不明顯;圖2試管1的作用是證明2 mol·L1NaCl溶液遇二苯胺不會出現(xiàn)藍(lán)色。7(2019·南通二模)下列是“肝臟細(xì)胞DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)的兩個關(guān)鍵操作步驟,相關(guān)敘述錯誤的是()A步驟1中,加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定B步驟1中,冰浴處理的主要原理是低溫下DNA水解酶容易變性C步驟2中,異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀D步驟2中,離心后應(yīng)取上清液,因?yàn)镈NA在2mol·L1NaCl溶液中溶解度比較大解析:選B步驟1中,加入檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定;步驟1中,冰浴處理的主要原理是降低DNA的溶解度,使DNA析出;步驟2中,異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀;DNA在2 mol·L1的NaCl溶液中溶解度最大,因此加固體NaCl使溶液濃度達(dá)到2 mol·L1后再離心過濾取上清液。8(2019·淮陰、海門四校聯(lián)考)關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn),敘述正確的是()ADNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物BPCR的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性延伸復(fù)性三步C用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNAD用甲基綠吡羅紅將細(xì)胞染色,細(xì)胞質(zhì)呈綠色,細(xì)胞核呈紅色解析:選ADNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物;PCR的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性復(fù)性延伸三步;兔的成熟紅細(xì)胞中沒有DNA;用甲基綠吡羅紅試劑對人的口腔上皮細(xì)胞染色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色。9如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列有關(guān)敘述正確的是()ADNA在常溫下遇到二苯胺會被染成藍(lán)色B圖中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液使DNA析出CDNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較小D加入酒精后需用玻璃棒快速來回?cái)嚢杞馕觯哼xBDNA溶液加入二苯胺試劑,在沸水浴加熱的條件下會變藍(lán);在DNA濃鹽溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋鹽溶液,降低DNA的溶解度,使DNA析出;DNA在2 mol/L的鹽溶液中溶解度比較大;加入酒精后需用玻璃棒攪拌,動作要輕緩,以免加劇DNA分子斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。10若從植物細(xì)胞中提取DNA,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)效果不好,如看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定時不顯示顏色反應(yīng)等,其不可能的原因是()A植物細(xì)胞中DNA含量低B研磨不充分C過濾不充分 D95%冷酒精的量過少解析:選A研磨不充分、過濾不充分均會使細(xì)胞核內(nèi)的DNA釋放不完全,提取的DNA量變少;若用于沉淀DNA的酒精量過少,也會導(dǎo)致DNA的沉淀量變少。11“DNA粗提取”實(shí)驗(yàn)中,應(yīng)盡可能避免DNA斷裂和降解。下列相關(guān)操作正確的是()A以菜花為材料進(jìn)行研磨時,可以適當(dāng)加熱以促進(jìn)DNA溶解B向DNA溶液中迅速加入蒸餾水,使DNA快速析出C將絲狀物溶解到2 mol·L1NaCl溶液中后,加水析出D向DNA溶液中加入冷卻的酒精并沿同一方向緩慢攪拌解析:選D以菜花為材料進(jìn)行研磨時要加洗滌劑和食鹽,不能加熱,否則DNA水解酶活性會上升,會加速分解DNA;向DNA溶液中加蒸餾水要緩慢,使DNA充分析出;將絲狀物溶解到2 mol·L1 NaCl溶液中的目的是為了進(jìn)行鑒定,應(yīng)該加入二苯胺試劑,不是加水;向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向緩慢攪拌析出DNA,防止DNA斷裂。12(2019·鹽城模擬)下列有關(guān)利用新鮮的菜花進(jìn)行DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是()A向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌可釋放核DNAB加入洗滌劑和食鹽的作用分別是瓦解細(xì)胞膜和溶解DNAC利用DNA不溶于冷酒精的原理可進(jìn)一步提純DNAD含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在常溫下混合呈藍(lán)色解析:選BC菜花細(xì)胞為植物細(xì)胞,有細(xì)胞壁保護(hù),因此加蒸餾水不會吸水漲破。加入洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜,加入食鹽的作用是溶解DNA。DNA在冷酒精中的溶解度很低,蛋白質(zhì)在冷酒精中的溶解度較高,因此可以利用DNA不溶于冷酒精的原理進(jìn)一步提純DNA。含DNA的氯化鈉溶液與二苯胺在沸水浴下混合呈藍(lán)色。13(多選)如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中的一些操作過程。相關(guān)敘述正確的是()A實(shí)驗(yàn)過程中正確的操作順序是B實(shí)驗(yàn)步驟中加入蒸餾水直到溶液中有絲狀物析出為止C若改用植物材料需先用洗滌劑破壞細(xì)胞壁再吸水漲破D將粗提取的DNA溶解在2 mol/L的NaCl中加入二苯胺試劑加熱鑒定解析:選AD分析題圖,表示用95%的酒精對DNA進(jìn)行進(jìn)一步純化;表示破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液;表示去除濾液中的雜質(zhì),所以實(shí)驗(yàn)過程中正確的操作順序是;實(shí)驗(yàn)步驟中加入蒸餾水直到析出的絲狀物不再增加為止;若改用植物材料需研磨破壞細(xì)胞壁,同時加入洗滌劑瓦解細(xì)胞膜;可以將粗提取的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,然后加入二苯胺試劑進(jìn)行加熱鑒定。14(多選)研究人員比較了不同貯藏條件對棉葉DNA純度及提取率(提取率越高,獲得的DNA越多)的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下圖。下列有關(guān)敘述正確是()A提純DNA時可加入酒精去除不溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì)B新鮮棉葉提取的DNA純度最高,提取DNA的量也最多C木瓜蛋白酶和不同濃度的NaCl溶液均可用于提純DNAD用二苯胺試劑鑒定,顏色最深的是冷凍3 d處理后提取的DNA解析:選CD提純DNA時可加入酒精去除可溶的蛋白質(zhì)、酚類等物質(zhì);新鮮棉葉提取的DNA純度最高,冷凍3 d時提取DNA的量最多,二苯胺試劑鑒定顏色最深;木瓜蛋白酶可以去除蛋白質(zhì),不同濃度的NaCl溶液可去除與DNA溶解度不同的雜質(zhì)。二、非選擇題15(2019·無錫檢測)血液作為一種常見的臨床檢測材料,如何從血液中快速、高效地分離和提取基因組DNA,對于臨床血液檢驗(yàn)與分析非常重要,科研人員對比分析了超聲波處理法(方法A)、高鹽法(方法B)、改良高鹽法(方法C)等三種快速提取大鼠全血基因組DNA的方法,實(shí)驗(yàn)過程如圖,請分析回答:(1)多組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn),用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少,原因是_。(2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是_。三種實(shí)驗(yàn)方法所需時間均較短,主要在樣品處理和細(xì)胞破碎環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化,就三種方法而言,細(xì)胞破碎較理想的為_。(3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,分析原因是蛋白酶K的加入可能抑制了_的活性。(4)步驟中加入NaCl的目的是_,步驟中加入異丙醇的作用是_。(5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定,需向其中加入_,沸水浴加熱,_后變藍(lán)。解析:(1)因哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體,也就沒有DNA,因此用大鼠全血為實(shí)驗(yàn)材料提取的DNA含量總是很少。(2)常規(guī)細(xì)胞破碎方法是加入蒸餾水,使細(xì)胞吸水漲破。與方法A、B相比,方法C破碎細(xì)胞的效率高、成本低,是細(xì)胞破碎較理想的方法。(3)方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA,其原因可能是蛋白酶K的加入抑制了RNA酶的活性。(4)步驟中加入NaCl的目的是溶解DNA,步驟中加入異丙醇的作用是使DNA析出。(5)得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定,需向其中加入二苯胺,沸水浴加熱,冷卻后變藍(lán)。答案:(1)哺乳動物紅細(xì)胞中無細(xì)胞核和線粒體(2)加入蒸餾水,使細(xì)胞吸水漲破方法C(3)RNA酶(4)溶解DNA使DNA析出(5)二苯胺冷卻16(2019·南通考前卷)CTAB法和SDS法是提取DNA的常用方法,CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分,SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性,提高DNA在提取液中的溶解度;SDS能破壞膜結(jié)構(gòu),使蛋白質(zhì)變性;EDTA能螯合Mg2、Mn2,抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法,比較了兩種提取DNA的方法,主要操作如下:實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果如下(表中OD260反映溶液中核酸的濃度,OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上,純DNA溶液的OD260/OD280為1.800,純RNA溶液的OD260/OD280為2.000)。CTABSDSOD260OD280OD260/OD280OD260OD280OD260/OD2800.0330.0181.8330.0060.0051.200請回答下列問題:(1)與常溫下研磨相比,液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_;CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是_。(2)氯仿異戊醇密度均大于水且不溶于水,DNA不溶于氯仿異戊醇,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿異戊醇,實(shí)驗(yàn)過程中加入氯仿異戊醇離心后,應(yīng)取_加異丙醇(異丙醇與水互溶)并離心進(jìn)行純化,利用異丙醇溶液純化DNA的原理是_。(3)兩種方法中,_法提取的DNA較多,其可能原因是_。(4)兩種方法中,_法提取的DNA純度較低,其含有的主要雜質(zhì)是_。解析:(1)液氮溫度低,在液氮中研磨,DNA酶活性低,可以降低DNA的分解,使研磨更充分;EDTA能螯合Mg2、Mn2,抑制DNA酶的活性,減少DNA水解,提高DNA的完整性和總量。(2)氯仿異戊醇密度均大于水且不溶于水,DNA不溶于氯仿異戊醇,離心后,氯仿異戊醇位于試管的底部,DNA溶于上清液中,所以離心后應(yīng)取上清液;含DNA的上清液中加異丙醇離心后取的是沉淀物,說明DNA不溶于異丙醇,而雜質(zhì)能溶于異丙醇。(3)從表中數(shù)據(jù)可知,CTAB法提取的DNA的OD260是0.033,而SDS法提取的DNA的OD260是0.006,0.0330.006,所以CTAB法提取的DNA較多,根據(jù)CTAB和SDS兩種試劑作用的區(qū)別,可知CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度,從而可提取出更多的DNA。(4)從表中數(shù)據(jù)可知,CTAB法提取的DNA的OD260/OD280是1.833,而SDS法提取的DNA的OD260/OD280是1.200,與1.833相比,1.200偏離1.800更多,所以SDS法提取的DNA純度較低,純RNA溶液的OD260/OD280為2.000,比純DNA溶液的OD260/OD280大,而1.200比1.800小,所以主要雜質(zhì)不是RNA,而是蛋白質(zhì)。答案:(1)研磨充分,低溫抑制酶活性,降低DNA的分解減少DNA水解,提高DNA的完整性和總量(2)上清液DNA不溶于異丙醇,而雜質(zhì)能溶于異丙醇(3)CTABCTAB提高了DNA在提取液中的溶解度,從而能提取出更多的DNA(4)SDS蛋白質(zhì)

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本文((江蘇專版)2022年高考生物一輪復(fù)習(xí) 第4講 DNA的粗提取與鑒定講義(含解析)(選修1 ))為本站會員(xt****7)主動上傳,裝配圖網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對上載內(nèi)容本身不做任何修改或編輯。 若此文所含內(nèi)容侵犯了您的版權(quán)或隱私,請立即通知裝配圖網(wǎng)(點(diǎn)擊聯(lián)系客服),我們立即給予刪除!

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