《高三生物 實驗專項突破31 DNA的粗提取與鑒定 新人教版 課件》由會員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《高三生物 實驗專項突破31 DNA的粗提取與鑒定 新人教版 課件(14頁珍藏版)》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。
1、 實驗原理 1. DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,其中在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時最低。 2. DNA不溶于酒精,但是細胞中的一些有機物如蛋白質(zhì)則溶于酒精,可以用酒精提純。 3. DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色,可用來鑒定DNA分子。 實驗流程 1. 做該實驗時,不能用豬血代替雞血,因為哺乳動物成熟的紅細胞中沒有細胞核,不能提取DNA。 2. 制備雞血細胞液時,要注意向雞血中加檸檬酸鈉,防止血液凝固。 3. 漲破細胞的方法:向血細胞中加入蒸餾水,血細胞溶液的濃度大于蒸餾水的濃度,從而使血細胞大量吸水而漲破。不能用生理鹽水,因為血細胞溶液的濃度與生理鹽水的濃度相當,
2、所以血細胞在生理鹽水中不能吸收水分。 4. 兩次加入蒸餾水,第一次是為了使血細胞吸水漲破;第二次是為了降低氯化鈉的濃度,有利于DNA的析出。 5. 兩次析出DNA的方法:第一次是加入蒸餾水,降低氯化鈉的濃度,促使DNA析出;第二次是加入冷酒精,因為DNA不溶于酒精溶液。 6. 鑒定DNA時要用兩支試管,其中不加DNA的試管起對照作用,該試管溶液不變色,另一支加有DNA的試管溶液變藍色。選材時注意選用細胞易破碎、DNA含量相對較高的生物組織;鑒定DNA的二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會影響鑒定效果。 2010江蘇卷某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,具體步驟如下: 材料處理:稱取新鮮的花菜
3、、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20、另一組置于20條件下保存24 h。 DNA粗提取: 第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。材料保存溫度花菜辣椒
4、蒜黃20 (注:“”越多表示藍色越深) 分析上述實驗過程,回答下列問題: (1)該探究性實驗的課題名稱是_。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少_。 (3)根據(jù)實驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1:與20相比,相同實驗材料在20條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:_。 針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是: _。 然后用體積分數(shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。 思路點撥:本題主要考查DNA粗提取的相關(guān)知識,意在考查考生的實驗與探究能力。如果DNA斷裂,就不容易被提取出來;溫度主要是通過影響酶的活性來影響生理過程。粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白質(zhì),可以通過氯仿的特殊功能來去除蛋白質(zhì),提高DNA純度。 答案:(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)等質(zhì)量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液