生物人教版選修1檢測(cè):專題2 課題3 分解纖維素的微生物的分離 Word版含解析
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1、 課題3 分解纖維素的微生物的分離 題型一 纖維素及纖維素酶的相關(guān)知識(shí) 1.下列關(guān)于纖維素的敘述中,不正確的是( ) A.纖維素是由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物 B.纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,是因?yàn)檫@些微生物能產(chǎn)生纖維素酶 C.植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素 D.自然界中的各種生物均能把纖維素分解成葡萄糖,從而作為生物體的能量來(lái)源 答案 D 解析 纖維素是由葡萄糖聚合形成的多聚體,屬于高分子化合物,A正確;土壤中有些微生物能產(chǎn)生纖維素酶,將纖維素分解成葡萄糖供自身生命活動(dòng)需要,B正確;纖維素是植物細(xì)胞壁的主要組成成分,植物的根、莖、葉等器官都含有
2、大量的纖維素,C正確;自然界中只有能產(chǎn)生纖維素酶的生物才能把纖維素分解成葡萄糖,從而作為生物體的能量來(lái)源,D錯(cuò)誤。 2.下列關(guān)于纖維素的說法,不正確的是( ) A.纖維素是白色、無(wú)味的物質(zhì) B.纖維素是不具還原性的物質(zhì) C.纖維素可以發(fā)生水解反應(yīng),水解的最終產(chǎn)物是葡萄糖 D.纖維素可以在人體內(nèi)水解,轉(zhuǎn)化為葡萄糖經(jīng)過腸壁吸收進(jìn)入血液 答案 D 解析 纖維素為白色、無(wú)味的纖維狀結(jié)構(gòu)物質(zhì),屬于多糖,沒有還原性,其水解的最終產(chǎn)物是葡萄糖,A、B、C正確;人體不能消化水解纖維素,但食物中的膳食纖維具有刺激胃腸蠕動(dòng)、促進(jìn)消化液分泌的功能,被稱為第七營(yíng)養(yǎng)素,D錯(cuò)誤。 3.下列關(guān)于纖維素酶的說
3、法,錯(cuò)誤的是( ) A.纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種組分 B.纖維素酶最終可把纖維素分解成葡萄糖 C.纖維素酶可用于去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁 D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖 答案 D 解析 纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種組分,即C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶,A正確;纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖,B正確;植物細(xì)胞細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠,因此纖維素酶可用于去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,C正確;根據(jù)酶的專一性,葡萄糖苷酶只能將纖維二糖分解成葡萄糖,D錯(cuò)誤。 4.微生物體內(nèi)能夠使纖維素分解成纖維二糖的酶是( ) A.C1酶和CX酶 B.C1酶和葡萄糖苷酶 C.CX酶和葡
4、萄糖苷酶 D.C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶 答案 A 解析 纖維素酶屬于復(fù)合酶,至少包含C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三種組分,其中C1酶和CX酶可使纖維素分解成纖維二糖。 題型二 纖維素分解菌的篩選原理 5.纖維素分解菌的篩選原理是( ) A.剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物 B.剛果紅可以與水解后的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物 C.剛果紅可以與纖維素酶形成紅色復(fù)合物 D.剛果紅可以與纖維素分解菌結(jié)合形成紅色復(fù)合物 答案 A 解析 剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),A正確,B錯(cuò)誤;剛果紅也不與纖維素
5、酶或者纖維素分解菌結(jié)合形成紅色復(fù)合物,C、D錯(cuò)誤。 6.要將能分解纖維素的細(xì)菌從土壤中分離出來(lái),應(yīng)將它們接種在( ) A.加入指示劑的鑒別培養(yǎng)基上 B.含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上 C.只含纖維素粉而無(wú)其他碳源的選擇培養(yǎng)基上 D.含四大營(yíng)養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上 答案 C 解析 選擇纖維素分解菌的培養(yǎng)基中應(yīng)含有該種菌生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)條件,同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng),C正確。 題型三 纖維素分解菌的篩選實(shí)驗(yàn) 7.從土壤中分離獲得纖維素分解菌的步驟是( ) ①土壤取樣?、谔荻认♂尅、圻x擇培養(yǎng) ④涂布培養(yǎng) ⑤篩選菌株 A.①②③④⑤ B.①③②④⑤ C.①②④③⑤ D.①④②③
6、⑤ 答案 B 解析 從土壤中分離獲得纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程是土壤取樣→選擇培養(yǎng)(增大纖維素分解菌的濃度)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上(即涂布培養(yǎng))→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(即篩選菌株),即①③②④⑤,B正確。 8.使用液體選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌的目的是( ) ①用液體選擇培養(yǎng)基可獲得大量纖維素分解菌?、谟靡后w培養(yǎng)基便于稀釋涂布平板?、劾w維素分解菌只能在液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)?、苡靡后w培養(yǎng)基可鑒別纖維素分解菌 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 答案 A 解析 使用液體選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌,一方面可以獲得大量纖維素分解菌,另一方面便于稀釋涂布平板,①②正
7、確;纖維素分解菌也可以在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng),③錯(cuò)誤;鑒別纖維素分解菌使用的是固體培養(yǎng)基,④錯(cuò)誤。因此,正確的是①②,故選A。 9.下列對(duì)剛果紅染色法的敘述,不正確的是( ) A.可以先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng) B.可以在倒平板時(shí)就加入剛果紅 C.既可以先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),也可以在倒平板時(shí)就加入剛果紅 D.可以將剛果紅與培養(yǎng)基中的其他物質(zhì)混合后再滅菌倒平板 答案 D 解析 剛果紅染色法一般有兩種:一種是先培養(yǎng)微生物長(zhǎng)出菌落后,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng);一種是配制好培養(yǎng)基滅菌后,倒平板時(shí)加入滅菌處理的剛果紅,再接種微生物培養(yǎng),直至產(chǎn)生透明圈,A、B、C正
8、確,D錯(cuò)誤。 10.在加入剛果紅的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)透明圈,產(chǎn)生的透明圈是( ) A.剛果紅與纖維素形成的復(fù)合物 B.剛果紅與纖維二糖形成的復(fù)合物 C.纖維素分解后形成的葡萄糖導(dǎo)致的 D.以纖維素分解菌為中心形成的 答案 D 解析 剛果紅可以與纖維素結(jié)合形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅—纖維素復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。葡萄糖不會(huì)導(dǎo)致透明圈形成。 11.要測(cè)定纖維素酶的活性,常用的方法是( ) A.對(duì)纖維素進(jìn)行定量測(cè)定 B.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定 C.對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的纖維二糖進(jìn)行定量測(cè)定
9、 D.對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行定量測(cè)定 答案 B 解析 鑒別培養(yǎng)基上形成的透明圈中的菌落只是對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行的初步篩選,為確定得到的是纖維素分解菌,需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn),并且進(jìn)行纖維素酶的測(cè)定,測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。 12.反芻動(dòng)物能以富含纖維素的草料為食,是因?yàn)樗鼈冇刑厥獾钠鞴佟鑫?,瘤胃中生活著許多微生物,其中有一些微生物能分解纖維素,反芻動(dòng)物胃內(nèi)這些分解纖維素的微生物的代謝類型最可能是( ) A.自養(yǎng)需氧型 B.異養(yǎng)厭氧型 C.異養(yǎng)需氧型 D.自養(yǎng)厭氧型 答案 B 解析 反芻動(dòng)物的瘤胃中缺氧,其中分解纖維素的微生
10、物的代謝類型最可能是異養(yǎng)厭氧型,B正確。 13.回答下列有關(guān)纖維素分解菌的分離和鑒定實(shí)驗(yàn)的問題。 (1)將流程圖補(bǔ)充完整。 ①___________________?、赺____________________ ③________________________________________________________________ ④________________________________________________________________ (2)土壤取樣:采集土樣時(shí),應(yīng)選擇富含__________的環(huán)境。 (3)選擇培養(yǎng)的方法是稱取土樣20 g
11、,在無(wú)菌條件下加入裝有30 mL選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在________上,在一定溫度下振蕩培養(yǎng)1~2 d,直至培養(yǎng)液變________,選擇培養(yǎng)的目的是______________________________。 (4)為了確定分離到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行____________的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的發(fā)酵方法有________發(fā)酵和________發(fā)酵兩種。纖維素酶的測(cè)定方法是對(duì)纖維素酶分解濾紙等物質(zhì)中的纖維素后所產(chǎn)生的________進(jìn)行定量測(cè)定。 答案 (1)①選擇培養(yǎng)?、谔荻认♂尅、蹖悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上?、芴暨x產(chǎn)生透明圈的菌落 (2)纖維素
12、(3)搖床 混濁 增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物 (4)發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 液體 固體 葡萄糖 14.如圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工作流程,請(qǐng)回答相關(guān)問題: (1)自然界中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在________________的環(huán)境中。將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以________為唯一碳源,并加入________的培養(yǎng)基上,篩選周圍有________的菌落。 (2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括____________________________三個(gè)組分,提取的酶首先要檢測(cè)________,以便更好地將酶用于生產(chǎn)實(shí)踐。 (3
13、)在用稀釋涂布平板法對(duì)分離的纖維素分解菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí),用菌落數(shù)估算的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)少的原因是_____________________________。 (4)生產(chǎn)中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是________。為了確保⑤環(huán)節(jié)成功,后期的發(fā)酵裝置要保證________條件。 答案 (1)富含纖維素(其他答案合理也可,如落葉較多等) 纖維素 剛果紅 透明圈 (2)C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶 酶的活力(或活性) (3)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低 (4)酵母菌 密閉(或無(wú)氧) 解析 (1)自然界中①環(huán)節(jié)所需要的微生
14、物能產(chǎn)生纖維素酶,這樣的微生物大多分布在富含纖維素的環(huán)境中,可用纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得。為鑒定纖維素分解菌,可向培養(yǎng)基中加入剛果紅染料,剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解后,剛果紅—纖維素復(fù)合物就無(wú)法形成,若存在纖維素分解菌,菌落周圍會(huì)形成透明圈。 (2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶三個(gè)組分。提取的酶首先要檢測(cè)酶的活性。 (3)用稀釋涂布平板法對(duì)分離的纖維素分解菌數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)時(shí),當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,也就是每個(gè)菌落可能不止由一個(gè)細(xì)菌形成的,導(dǎo)致統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。 (4)酒精發(fā)酵常用的
15、菌種是酵母菌,酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乙醇和CO2,所以為了確保獲得產(chǎn)物乙醇,⑤環(huán)節(jié)要注意后期使發(fā)酵裝置密閉。 1.為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分如表所示)。下列關(guān)于培養(yǎng)基甲和乙能否用于分離和鑒別纖維素分解菌的說法,正確的是( ) 酵母膏 無(wú)機(jī)鹽 淀粉 纖維素粉 瓊脂 CR溶液 水 培養(yǎng)基甲 + + + + - + + 培養(yǎng)基乙 + + + - + + + 注:“+”表示有,“-”表示無(wú)。 A.培養(yǎng)基甲能,培養(yǎng)基乙不能 B.培養(yǎng)基甲不能,培養(yǎng)基乙能 C.培養(yǎng)基甲和乙都能 D.
16、培養(yǎng)基甲和乙都不能 答案 D 解析 利用以纖維素作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以篩選出分解纖維素的細(xì)菌;鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基為含有纖維素的固體培養(yǎng)基,且培養(yǎng)基中需加入剛果紅染料。 2.下列關(guān)于尿素分解菌和纖維素分解菌的分離與鑒定的敘述,錯(cuò)誤的是( ) A.分離尿素分解菌需要以尿素為唯一的氮源 B.尿素分解菌能產(chǎn)生脲酶,纖維素分解菌能產(chǎn)生纖維素酶 C.兩個(gè)過程中都需要梯度稀釋 D.剛果紅染色法也可以用于篩選尿素分解菌 答案 D 解析 分離尿素分解菌的培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源,A正確;尿素分解菌和纖維素分解菌分別產(chǎn)生脲酶和纖維素酶,B正確;由于樣品中目的菌的濃度較大,所以都要進(jìn)行梯
17、度稀釋,C正確;剛果紅染色法僅能用于纖維素分解菌的篩選,D錯(cuò)誤。 3.分離出的微生物還要進(jìn)行鑒定,而微生物的鑒定需要鑒別培養(yǎng)基,下列不是鑒別培養(yǎng)基的是( ) A.加入酚紅的培養(yǎng)基 B.加入剛果紅的培養(yǎng)基 C.加入伊紅和美藍(lán)的培養(yǎng)基 D.加入纖維素粉的培養(yǎng)基 答案 D 解析 鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)在培養(yǎng)基中加入一些指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,如酚紅、伊紅和美藍(lán)、剛果紅等,它們可與微生物的代謝產(chǎn)物或培養(yǎng)基中的成分發(fā)生特定的反應(yīng),從而鑒別目標(biāo)微生物,A、B、C正確;而纖維素粉沒有此種功能,由其配制而成的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基,D錯(cuò)誤。 4.下列關(guān)于分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)的敘述,
18、錯(cuò)誤的是( ) A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品直接涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 B.選擇培養(yǎng)這一步可省略,但培養(yǎng)出的纖維素分解菌較少 C.加入剛果紅可以在倒平板時(shí)和長(zhǎng)出菌落后進(jìn)行 D.鑒別纖維素分解菌的原理是纖維素分解后的產(chǎn)物不能和剛果紅形成紅色復(fù)合物 答案 A 解析 經(jīng)選擇培養(yǎng)后需要進(jìn)行梯度稀釋才可將稀釋液涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上,A錯(cuò)誤;選擇培養(yǎng)這一步可以省略,但培養(yǎng)出的纖維素分解菌較少,B正確;常用的剛果紅染色法有兩種:一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng);另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅,C正確;鑒別纖維素分解菌的原理是纖維素分解后的產(chǎn)物不能和剛果紅形成紅色復(fù)合物
19、,D正確。 5.下列關(guān)于纖維素分解菌分離實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是( ) A.分離分解纖維素的微生物時(shí)可把纖維素作為唯一氮源 B.該實(shí)驗(yàn)中選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基均為液體培養(yǎng)基 C.選擇培養(yǎng)的主要目的是增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物 D.用剛果紅染色法篩選纖維素分解菌時(shí)使用到的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基 答案 C 解析 分離分解纖維素的微生物時(shí)可把纖維素作為唯一碳源,A錯(cuò)誤;該實(shí)驗(yàn)中鑒別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,B錯(cuò)誤;選擇培養(yǎng)基可以允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制其他種類的微生物生長(zhǎng),在該實(shí)驗(yàn)中,選擇培養(yǎng)的主要目的是增加纖維素分解菌的濃度,C正確;用剛果紅染色法
20、篩選纖維素分解菌時(shí)使用到的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基,D錯(cuò)誤。 6.利用農(nóng)作物秸稈等纖維質(zhì)原料生產(chǎn)的乙醇,經(jīng)加工可制成燃料乙醇,從而減少了對(duì)石油資源的依賴,如圖為生產(chǎn)燃料乙醇的簡(jiǎn)要流程,據(jù)圖分析錯(cuò)誤的一項(xiàng)是( ) A.要得到微生物A,最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣 B.圖中②過程常用的微生物B是酵母菌 C.微生物A和微生物B可利用的碳源相同 D.可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用 答案 C 解析 根據(jù)圖解可知,微生物A的碳源是纖維素,故要想獲得微生物A,最好選擇富含纖維素的土壤采集土樣,A正確;圖中②過程表示生產(chǎn)乙醇的過程,常用的微生物是酵母菌,B正確;微生物A所用碳源為纖維素,
21、微生物B所用碳源為纖維素降解物,C錯(cuò)誤;微生物A之所以能利用纖維質(zhì)原料是因?yàn)槠浜欣w維素酶,故可用纖維素酶制劑代替微生物A起作用,D正確。 7.下列關(guān)于剛果紅染色法的說法,正確的是( ) A.先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),不需用氯化鈉溶液洗去浮色 B.倒平板時(shí)加入剛果紅,可在滅菌后按照每100 mL培養(yǎng)基加入1 mL的比例加入剛果紅溶液,混勻后倒平板 C.剛果紅染色后,纖維素分解菌菌落周圍出現(xiàn)紅色 D.倒平板時(shí)就加入剛果紅,長(zhǎng)期培養(yǎng),剛果紅有可能被其他微生物分解形成透明圈 答案 D 解析 先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng),需用氯化鈉溶液洗去浮色,若在倒平板時(shí)加入剛
22、果紅,則不需要用氯化鈉溶液洗去浮色,A錯(cuò)誤;倒平板時(shí)加入剛果紅,可配制質(zhì)量濃度為10 mg/mL剛果紅溶液,滅菌后按照每200 mL培養(yǎng)基加入1 mL的比例加入剛果紅溶液,混勻后倒平板,B錯(cuò)誤;在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,C錯(cuò)誤;倒平板時(shí)就加入剛果紅,因?yàn)橛行┪⑸锬芙到馍兀L(zhǎng)期培養(yǎng),剛果紅有可能被其他微生物分解形成透明圈,D正確。 8.原油中含有大量有害的、致癌的多環(huán)芳烴。土壤中有些細(xì)菌可以以原油中的多環(huán)芳烴為碳源,在培養(yǎng)基中形成分解圈
23、。為篩選出能高效降解原油的菌種,某小組同學(xué)設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。下列有關(guān)敘述不正確的是( ) A.應(yīng)配制被原油污染土壤的土壤稀釋液備用 B.配制以多環(huán)芳烴為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基 C.將土壤稀釋液滅菌后接種到選擇培養(yǎng)基上 D.在選擇培養(yǎng)基上能形成分解圈的為所需菌種 答案 C 解析 篩選能夠利用多環(huán)芳烴為碳源的菌種,則在被原油污染的土壤中應(yīng)該含有,所以配制來(lái)源于被原油污染的土壤稀釋液,A正確;配制選擇培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基與通用培養(yǎng)基成分的主要區(qū)別是以原油(多環(huán)芳烴)為唯一碳源,B正確;在無(wú)菌環(huán)境下,將土壤稀釋液接種到選擇培養(yǎng)基上,將土壤稀釋液滅菌后會(huì)殺死原有菌種,C錯(cuò)誤;題干有個(gè)信息“有些細(xì)菌可
24、以以原油中的多環(huán)芳烴為碳源,在培養(yǎng)基中形成分解圈”,所在選擇培養(yǎng)基上能形成分解圈的即為所需菌種,D正確。 9.如圖為纖維素分解菌培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)回答下列問題: 將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000 mL。 (1)根據(jù)圖中配方配制的培養(yǎng)基是________(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基,原因是________________。 (2)這個(gè)培養(yǎng)基通過______________________實(shí)現(xiàn)對(duì)纖維素分解菌的選擇作用,此外在培養(yǎng)過程中要將培養(yǎng)瓶放置在搖床上,其目的是_________________。 (3)據(jù)圖分析培養(yǎng)基的配方中添加了多種無(wú)機(jī)鹽成分,其作用包括_______
25、_________________________。 (4)若將此培養(yǎng)基配方改為纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基,還需要在配制培養(yǎng)基時(shí)添加的成分有________________。在選擇培養(yǎng)后,要將樣品接種在鑒別培養(yǎng)基上,請(qǐng)簡(jiǎn)述接種過程:________________________________________。 答案 (1)液體 沒有添加凝固劑 (2)以纖維素粉為唯一碳源 增加溶氧量,促進(jìn)菌體與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)充分接觸,利于菌體快速繁殖 (3)提供氮源,作為緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)酸堿平衡,提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) (4)剛果紅、瓊脂 在無(wú)菌操作條件下,取菌液進(jìn)行梯度稀釋后,將不同稀釋度的菌液分別用涂布器均勻涂布在
26、固體平板上 解析 (1)圖中配方內(nèi)不含瓊脂等凝固劑,按圖中配方配制的培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基。 (2)配方中的碳源只有纖維素粉,通過纖維素粉這一碳源對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行選擇;將培養(yǎng)瓶放置在搖床上培養(yǎng)可以增加培養(yǎng)基內(nèi)的溶氧量,同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,有利于菌體快速繁殖。 (3)培養(yǎng)基中添加的無(wú)機(jī)鹽的作用有:提供氮源,提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng),作為緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿平衡。 (4)若要將此培養(yǎng)基改為纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基,需要在制備培養(yǎng)基時(shí)添加剛果紅染液,并加入瓊脂制成固體培養(yǎng)基,接種后觀察透明圈的情況。接種過程如下:在無(wú)菌操作條件下,將菌液進(jìn)行梯度稀釋后,將不同稀釋度的菌液分別用涂布器均勻涂布在
27、培養(yǎng)基的表面。 10.纖維素酶是一種復(fù)合酶,能將纖維素分解為葡萄糖,剛果紅能夠和纖維素結(jié)合形成一種紅色的復(fù)合物,當(dāng)纖維素被分解時(shí),紅色物質(zhì)消失,形成透明圈,過程如圖甲所示。據(jù)此,某實(shí)驗(yàn)小組為了研究pH對(duì)纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶活性的影響,將纖維素分解菌分別接種在pH不同的剛果紅—纖維素培養(yǎng)基中,通過觀察出現(xiàn)透明圈的最早時(shí)間和24 h后透明圈直徑的大小來(lái)判斷纖維素酶活性的高低,實(shí)驗(yàn)流程如圖乙所示: 根據(jù)題意,回答下列問題: (1)實(shí)驗(yàn)流程中,選擇培養(yǎng)的目的是________________________。選擇培養(yǎng)基中應(yīng)該加入________作為唯一的碳源,另外還要加入的基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
28、有______________________________________。 (2)為了說明選擇培養(yǎng)基對(duì)纖維素分解菌起到了選擇的作用,應(yīng)怎樣設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)?__________________________________。 (3)根據(jù)流程圖可知,將纖維素分解菌接種到培養(yǎng)基上所用的方法為________________________。本實(shí)驗(yàn)中該接種方法所用的培養(yǎng)基從物理狀態(tài)看,屬于________培養(yǎng)基。 (4)該實(shí)驗(yàn)小組設(shè)置了pH分別為6、7、8的三組實(shí)驗(yàn)進(jìn)行觀察,得到了如下的實(shí)驗(yàn)結(jié)果: pH 出現(xiàn)透明圈的最早時(shí)間/h 24 h后透明圈的直徑/cm 6 6 4.42
29、 7 10 3.66 8 24 1.33 通過上述結(jié)果可知,該實(shí)驗(yàn)的自變量是______,因變量是________________,纖維素分解菌更適合在偏________(填“酸”“堿”或“中”)性環(huán)境下生長(zhǎng)。 答案 (1)增加纖維素分解菌的濃度 纖維素 氮源、水和無(wú)機(jī)鹽 (2)將培養(yǎng)基中纖維素改為葡萄糖,其他條件都相同 (3)稀釋涂布平板法 固體 (4)pH 出現(xiàn)透明圈的最早時(shí)間以及24 h后透明圈的直徑大小 酸 解析 (1)篩選纖維素分解菌要使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有:碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等,選擇培養(yǎng)的目的是富集纖維素分解菌,
30、增加纖維素分解菌的濃度。 (2)將培養(yǎng)基中的纖維素改為葡萄糖,其他條件與篩選纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基相同,這樣的培養(yǎng)基大多數(shù)微生物都可以生存,可以利用葡萄糖為碳源或能源,與選擇培養(yǎng)基對(duì)照即可說明選擇培養(yǎng)基對(duì)纖維素分解菌起到了選擇的作用。 (3)固體培養(yǎng)基上的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。根據(jù)流程圖可知,將纖維素分解菌接種到培養(yǎng)基上所用的是稀釋涂布平板法。 (4)據(jù)表分析:該實(shí)驗(yàn)的自變量是pH,因變量是出現(xiàn)透明圈的最早時(shí)間及24 h后透明圈直徑的大小,根據(jù)出現(xiàn)透明圈的時(shí)間和大小可以判斷纖維素分解菌更適合在偏酸性的環(huán)境中生存。 11.人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃,可用來(lái)發(fā)酵處理
31、秸稈,提高秸稈的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。為了增強(qiáng)發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對(duì)其降解纖維素能力進(jìn)行了研究。請(qǐng)回答下列問題: (1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項(xiàng)不需要的是________(填序號(hào))。 ①酒精燈 ②培養(yǎng)皿?、埏@微鏡?、軣o(wú)菌水 (2)在涂布平板時(shí),滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是__________________________________________。 (3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時(shí),若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是______________________________。 (4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物
32、,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩選到了幾株有透明降解圈的菌落(如圖)。 圖中降解圈大小與纖維素酶的______________有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是________(填圖中序號(hào))。 (5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵,測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果如圖所示,推測(cè)菌株________更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是__________________________________________________。 答案 (1)③ (2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌
33、體堆積,影響分離效果 (3)避免培養(yǎng)基污染棉塞 (4)量與活性 ① (5)J4 發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高 解析 (1)樣品稀釋需要無(wú)菌水,涂布平板需要培養(yǎng)皿,均需在酒精燈火焰附近操作,兩者都不需要顯微鏡,③符合題意。 (2)涂布平板時(shí)只能取少量菌懸液滴加到培養(yǎng)基表面,菌懸液量過多會(huì)導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果。 (3)分裝培養(yǎng)基時(shí),試管口若粘附有培養(yǎng)基,則需用酒精棉球擦凈,以免污染棉塞。 (4)當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅—纖維素紅色復(fù)合物無(wú)法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈(降解圈),降解圈越大,說明纖維素酶的量越多,活性越強(qiáng)。 (5)在較高溫度條件下,J4菌種的纖維素酶活性較高,且J4菌種在較低pH條件下纖維素酶活性較高。發(fā)酵過程中,人工瘤胃中的溫度升高、pH下降,故J4菌種更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。
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