生物人教版選修1檢測:專題5 課題1 DNA的粗提取與鑒定
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1、 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 課題1 DNA的粗提取與鑒定 題型一 DNA的粗提取與鑒定的實驗原理 1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是( ) A.根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異 B.根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性 C.根據(jù)各種大分子在細(xì)胞內(nèi)的功能 D.根據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細(xì)胞內(nèi)的位置 答案 A 解析 提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。就DNA分子的粗提取而言,就是利用了DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異進行分離的。 2.下列圖示中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的
2、是( ) 答案 C 解析 DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同。當(dāng)NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時,DNA的溶解度最低,而高于或低于0.14 mol/L時,隨NaCl溶液濃度的增加或降低,DNA的溶解度都逐漸升高。 3.下列有關(guān)DNA的特性的描述,錯誤的是( ) A.蛋白酶不能水解DNA,這體現(xiàn)了酶的專一性 B.大多數(shù)DNA不能忍受60~80 ℃的高溫 C.洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響 D.DNA不溶于酒精溶液 答案 B 解析 蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但對DNA沒有影響,這體現(xiàn)了酶的專一性,A正確;大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60~80 ℃的高溫,而DNA在
3、80 ℃以上才會變性,B錯誤;洗滌劑不會影響DNA,但能夠瓦解細(xì)胞膜,C正確;DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液,利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進一步分離,D正確。 4.DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)( ) A.磚紅色 B.橘黃色 C.紫色 D.藍色 答案 D 解析 DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)藍色,D正確。 題型二 DNA的粗提取與鑒定的實驗設(shè)計 5.下列不適宜作為DNA提取的實驗材料的是( ) A.雞血細(xì)胞 B.蛙的紅細(xì)胞 C.人的成熟紅細(xì)胞 D.菜花 答案 C 解析 雞血細(xì)胞、蛙的紅細(xì)胞、菜花細(xì)胞均含有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,即均含有較多
4、的DNA,因此適宜作為DNA提取的實驗材料,A、B、D不符合題意;人的成熟紅細(xì)胞不含細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,即不含DNA,因此不適宜作為DNA提取的實驗材料,C符合題意。 6.進行DNA粗提取時,若選擇的實驗材料為植物細(xì)胞,破碎細(xì)胞時要加入一定量的洗滌劑和食鹽。加入食鹽的目的是( ) A.利于DNA的溶解 B.分離DNA和蛋白質(zhì) C.溶解細(xì)胞膜 D.溶解蛋白質(zhì) 答案 A 解析 實驗材料是植物細(xì)胞時,需先加入洗滌劑和食鹽,洗滌劑的作用是瓦解細(xì)胞膜,食鹽的作用是溶解DNA。 7.在提取花椰菜的DNA時,加入洗滌劑的目的是( ) A.破壞細(xì)胞膜 B.破壞葉綠素 C.破壞細(xì)胞壁 D
5、.破壞DNA 答案 A 解析 在提取花椰菜的DNA時,加入洗滌劑的目的是瓦解細(xì)胞膜,從而釋放出DNA。 8.下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實驗相關(guān)操作中所選取的試劑,錯誤的是( ) 選項 相關(guān)操作 選用的試劑 A 破碎雞血細(xì)胞 蒸餾水 B 溶解核內(nèi)DNA 0.14 mol/L的NaCl溶液 C 提取雜質(zhì)較少的DNA 冷卻的95%酒精 D DNA的鑒定 現(xiàn)配的二苯胺試劑 答案 B 解析 在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,可使雞血細(xì)胞吸水漲破,A正確;2 mol/L的NaCl溶液能溶解較多的核內(nèi)DNA,但在0.14 mol/L的NaCl溶液中,DNA的溶解
6、度最低,B錯誤;DNA不溶于酒精,而某些蛋白質(zhì)能溶于酒精,故用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精能提取雜質(zhì)較少的DNA,C正確;在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑,D正確。 9.如圖所示為“DNA粗提取”實驗的相關(guān)操作步驟,其操作目的錯誤的是( ) A.①是洗滌雞血細(xì)胞,去除雞血細(xì)胞表面的雜質(zhì) B.④是稀釋NaCl溶液至0.14 mol/L,析出DNA C.③是選用2 mol/L NaCl溶液溶解黏稠物中的DNA D.②是純化DNA,去除溶于95%的酒精中的雜質(zhì) 答案 A 解析?、偈亲岆u血細(xì)胞與蒸餾水混合而使雞血細(xì)胞處于低滲的環(huán)境中,使細(xì)胞吸
7、水漲破,釋放出DNA。 10.在NaCl溶液中反復(fù)溶解、析出并過濾,就能除去DNA溶液中的雜質(zhì)的理由不包括( ) A.用高濃度鹽溶液溶解DNA,能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì) B.用低濃度鹽溶液使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì) C.反復(fù)操作就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì) D.反復(fù)操作就能夠使各種雜質(zhì)變性而沉淀析出 答案 D 解析 DNA在不同濃度之間反復(fù)溶解、析出過程中,并未使蛋白質(zhì)等雜質(zhì)變性。 11.為了純化提取的DNA,可直接在濾液中加入下列哪種物質(zhì),反應(yīng)10~15 min,以達到實驗?zāi)康? ) A.嫩肉粉 B.蒸餾水 C.2mol·L-1 NaCl溶
8、液 D.酒精 答案 A 解析 嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化蛋白質(zhì)水解,從而去除濾液中的部分雜質(zhì)。 12.在DNA粗提取的實驗中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用分別是( ) A.稀釋血液;沖洗樣品 B.使血細(xì)胞破裂;降低NaCl溶液濃度,使DNA析出 C.使血細(xì)胞破裂;增大DNA溶解量 D.使血細(xì)胞破裂;提取含雜質(zhì)較少的DNA 答案 B 解析 在DNA粗提取的實驗中,先后兩次向燒杯中加入蒸餾水:第一次向雞血中加入蒸餾水,目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破,釋放細(xì)胞核物質(zhì);第二次向2 mol·L-1的NaCl溶液中加入蒸餾水,目的是降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出。 13.利用
9、DNA和RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,可以從生物組織中提取DNA。下面是有關(guān)DNA提取鑒定實驗的有關(guān)問題。 (1)下圖是DNA在NaCl溶液中的溶解度曲線。 在NaCl溶液濃度低于0.14 mol/L時,DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而________;在0.14 mol/L時,DNA的溶解度________;當(dāng)NaCl溶液濃度繼續(xù)增加時,DNA溶解度又________。 (2)為了純化提取的DNA,需要將獲取的含DNA的濾液做進一步處理。下面是去除雜質(zhì)的三個方案: 方案一:在濾液中加入濃度為2 mol/L的NaCl溶液,過濾除去不溶的雜質(zhì),再調(diào)節(jié)NaC
10、l溶液濃度為0.14 mol/L,析出DNA。 方案二:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應(yīng)10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì)。 方案三:將濾液放在60~75 ℃的恒溫水浴箱中,保溫10~15 min。 三個方案所利用的原理分別是什么? ________________________________________________________________________________________________________________________________________ (3)將上述處理液過濾,加入與濾液體積相等的體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻
11、的酒精,攪拌后溶液中會出現(xiàn)白色絲狀物,這就是粗提取的DNA,將絲狀物放入試管,加入2 mol/L NaCl溶液5 mL,再加入4 mL二苯胺試劑,在________的條件下,DNA會被染成________色。如果將白色絲狀物置于載玻片上,滴加幾滴甲基綠染色液,DNA將呈現(xiàn)________色。 答案 (1)逐漸降低 最小 逐漸增大 (2)方案一:利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度的不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì);方案二:利用蛋白酶分解雜質(zhì)蛋白質(zhì),從而使DNA與蛋白質(zhì)分開;方案三:利用DNA與蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使蛋白質(zhì)變性與DNA分離。 (3)沸水浴 藍 綠
12、解析 (1)DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同。當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度低于0.14 mol·L-1時,DNA的溶解度隨NaCl溶液物質(zhì)的量濃度的增加而逐漸降低;NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol·L-1時,DNA的溶解度最??;當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度繼續(xù)增加時,DNA的溶解度又逐漸增大。 (2)方案一是通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì);方案二是利用嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì),而對DNA沒有影響,從而將DNA和蛋白質(zhì)分開;方案三是利用DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性的不同,從而使兩者分離。 (3)DNA在沸水浴條件下與二苯胺反應(yīng)呈藍色;甲基
13、綠可將DNA染成綠色。 14.下圖表示以雞血為實驗材料進行DNA的粗提取與鑒定的操作程序,請分析回答下列問題: (1)步驟一中,向雞血細(xì)胞液中加入________并攪拌,可使雞血細(xì)胞破裂。 (2)步驟二中,過濾后收集含有DNA的________。 (3)步驟三、四的操作原理是________________________________________; 步驟四中,通過向溶液中加入________調(diào)節(jié)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度至________mol/L時,DNA將會析出,過濾去除溶液中的雜質(zhì)。 (4)步驟七:向步驟六過濾后的________中加入等體積的冷卻的_______
14、_,靜置2~3 min,溶液中會出現(xiàn)________色絲狀物,這就是粗提取的DNA。 (5)步驟七:DNA遇________試劑,沸水浴5 min,冷卻后,溶液呈________色。 答案 (1)蒸餾水 (2)濾液 (3)DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同,通過控制NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì) 蒸餾水 0.14 (4)濾液 酒精 白 (5)二苯胺 藍 解析 破碎紅細(xì)胞應(yīng)該用蒸餾水,使之吸水漲破。DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在2 mol/L的NaCl溶液中DNA溶解,在0.14 mol/L的NaCl溶液中DNA析出。可通過加入蒸餾水將2 mol/L的NaCl溶液
15、稀釋為0.14 mol/L的NaCl溶液。DNA不溶于冷酒精溶液,在沸水浴的條件下,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍色。 1.下列有關(guān)DNA的粗提取與鑒定實驗的敘述,正確的是( ) A.取材:雞血細(xì)胞;原因:有細(xì)胞核,其他動物的血細(xì)胞都沒有細(xì)胞核 B.粗提?。翰煌瑵舛鹊腘aCl溶液;原因:DNA在其中的溶解度不同 C.提純:95%的冷酒精;原因:DNA溶于酒精,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精 D.鑒定:二苯胺試劑;原因:DNA溶液加入二苯胺試劑即呈藍色 答案 B 解析 除了哺乳動物成熟的紅細(xì)胞,其他動物紅細(xì)胞都有細(xì)胞核,A錯誤;DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同,根據(jù)此原理可以
16、對DNA進行粗提取,B正確;DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精,進而提純DNA,C錯誤;DNA溶液加入二苯胺試劑后沸水浴加熱呈藍色,D錯誤。 2.向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA和雜質(zhì)蛋白質(zhì)的溶解度變化情況分別是( ) A.減小、減小 B.增大、增大 C.先減小后增大、增大 D.減小、增大 答案 C 解析 由于DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,故向溶有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中不斷加入蒸餾水,在這個過程中DNA的溶解度先減小,0.14 mol/L時溶解度最小,然后增大;而蛋白質(zhì)在高
17、濃度的鹽溶液中會出現(xiàn)鹽析,隨濃度降低溶解度逐漸增大。 3.下列關(guān)于DNA對高溫的耐受性的說法,不正確的是( ) A.DNA對高溫的耐受性一般要比蛋白質(zhì)強 B.超過80 ℃后DNA將變性,即使恢復(fù)到常溫,生物活性也不能恢復(fù) C.不同生物的DNA的變性溫度不一定相同 D.深海熱泉附近生活的生物的DNA對高溫的耐受性更強,其DNA中鳥嘌呤所占的比例更高 答案 B 解析 DNA超過80 ℃變性,恢復(fù)到常溫,生物活性將恢復(fù)。 4.某同學(xué)用洋蔥進行DNA粗提取和鑒定實驗,操作錯誤的是( ) A.加入洗滌劑后用力進行快速、充分地研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入
18、酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱 答案 A 解析 加入洗滌劑后研磨動作要輕緩、柔和,否則會產(chǎn)生許多泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,A錯誤;蛋白酶能夠分解蛋白質(zhì),因此能起到純化DNA的目的,B正確;加入酒精后用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免加劇DNA分子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀,C正確;沸水浴條件下,DNA遇到二苯胺會被染成藍色,用作DNA的鑒定,D正確。 5.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中,對DNA提取量影響較小的是( ) A.使雞血細(xì)胞在蒸餾水中充分破裂,放出DNA等核物質(zhì) B.?dāng)嚢钑r要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動 C.在析出DNA黏稠物時
19、,要緩緩加入蒸餾水,直至黏稠物不再增多 D.要用冷酒精沉淀DNA,甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻 答案 B 解析 在DNA從細(xì)胞中釋放的操作中,首先加蒸餾水使雞血細(xì)胞吸水漲破,然后用玻璃棒沿一個方向攪拌,目的是加速細(xì)胞的破裂,這有利于DNA等核物質(zhì)的充分釋放,A不符合題意;攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪拌的目的是防止將絲狀的DNA攪碎,利于DNA絮狀物的挑出,但不影響DNA的提取量,B符合題意;在析出DNA黏稠物時,要緩緩加入蒸餾水,且到黏稠物不再增加,如果加蒸餾水過快,會導(dǎo)致DNA的再溶解,從而影響DNA的提取量,C不符合題意;預(yù)冷的酒精具有以下優(yōu)點:一是抑制核酸水解酶活性,防止DN
20、A降解;二是降低分子運動,易于形成沉淀析出;三是低溫有利于增加DNA分子柔韌性,減少斷裂,因此用冷酒精沉淀DNA甚至將混合液放入冰箱冷卻可以增加DNA的提取量,D不符合題意。 6.在DNA的粗提取和鑒定實驗中有三次過濾: ①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液; ②過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液; ③過濾溶解有DNA的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液。 以上三次過濾分別是為了獲得( ) A.含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 B.含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA、含DNA的濾液 C.含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA、紗布上的黏稠物
21、D.含較純DNA的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 答案 A 解析 過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液應(yīng)取濾液(其內(nèi)含有DNA,但DNA純度不高);過濾含黏稠物的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液應(yīng)取紗布上的黏稠物(其內(nèi)含析出的DNA);DNA易溶于物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液,故過濾該溶液時應(yīng)取其濾液(其內(nèi)含有DNA)。 7.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,發(fā)現(xiàn)DNA提取量不足。下列有關(guān)原因分析不正確的是( ) A.經(jīng)蒸餾水處理的雞血細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時間過短 B.溶解DNA時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達到2 mol/L C.DNA再溶解時,玻璃棒攪
22、拌方向是單向的 D.向2 mol/L的NaCl溶液中加入的蒸餾水太少 答案 C 解析 經(jīng)蒸餾水處理的雞血細(xì)胞用玻璃棒攪拌的時間過短,部分細(xì)胞還未破裂,這會造成DNA的提取量不足,A正確;NaCl溶液濃度在0.14~2 mol/L時,隨著NaCl溶液濃度的升高,DNA的溶解度增大,因此溶解DNA時所調(diào)制的NaCl溶液濃度未達到2 mol/L時,部分DNA還沒有溶解,這會造成DNA的提取量不足,B正確;DNA再溶解時,玻璃棒應(yīng)該沿著一個方向緩慢攪拌,是為了防止DNA分子的斷裂,而這不會造成DNA提取量不足,C錯誤;向2 mol/L的NaCl溶液中加入蒸餾水的目的是稀釋溶液,使DNA析出,若加
23、入蒸餾水的量太少,稀釋度不夠,這會造成DNA的提取量不足,D正確。 8.甲、乙兩圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗中涉及的兩個操作裝置圖。相關(guān)敘述正確的是( ) A.圖甲的燒杯和圖乙的試管中所用溶劑都為NaCl溶液,但兩者濃度不同 B.圖乙試管經(jīng)稍稍加熱后即可觀察到一支試管中的溶液明顯變藍,另一支試管中的溶液不變藍 C.圖甲操作需用玻璃棒迅速攪拌以使DNA析出,并纏繞在玻璃棒上 D.圖乙操作中所用的二苯胺試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用以達到較好的鑒定效果 答案 D 解析 圖甲燒杯中為酒精溶液,圖乙試管中為NaCl溶液,A錯誤;圖乙試管需要在沸水浴中加熱5 min,B錯誤;圖甲用玻璃棒沿一個方向
24、輕輕攪拌,卷起絲狀物,C錯誤;圖乙操作中所用的二苯胺試劑最好現(xiàn)配現(xiàn)用,否則二苯胺會變成淺藍色,D正確。 9.如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖,請分析回答有關(guān)問題: (1)正確的操作順序是______________(用字母和箭頭表示)。 (2)圖中C、E步驟都加入了蒸餾水,但其目的不同,分別是__________________和____________________。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須是經(jīng)過________的才能使用,該步驟的目的是____________________________。 (4)為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要
25、成分為DNA,可將其溶解后,滴加________試劑后沸水浴,如果出現(xiàn)________,則證明該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)由于雞血較難找到,某學(xué)生試圖用牛血代替,結(jié)果沒有成功,其原因最可能是______________________。 答案 (1)C→B→E→D→A (2)使雞血細(xì)胞吸水漲破,釋放出細(xì)胞核物質(zhì) 降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出 (3)充分預(yù)冷 提取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA (4)二苯胺 藍色 (5)牛成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器 解析 (1)DNA的粗提取與鑒定步驟是加入蒸餾水,破碎細(xì)胞→過濾,獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出
26、與鑒定。由此可知,正確的操作順序是C→B→E→D→A。 (2)C步驟加入蒸餾水的目的是使雞血細(xì)胞吸水漲破,釋放出細(xì)胞核物質(zhì);E步驟加入蒸餾水的目的是降低NaCl溶液的濃度,使DNA析出。 (3)圖中A步驟中所用酒精必須經(jīng)過充分冷卻才能使用,該步驟的目的是獲取含雜質(zhì)較少(或較純凈)的DNA。 (4)鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分,可將其溶解后,滴加二苯胺試劑,并進行沸水浴加熱,如果出現(xiàn)藍色,則該絲狀物的主要成分為DNA。 (5)牛是哺乳動物,哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器,因此用牛血代替雞血來進行該實驗不會取得成功。 10.某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究
27、活動,具體步驟如下。 材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,并分別置于20 ℃和-20 ℃條件下保存24 h。 DNA的粗提?。? 第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。 第三步:取6支試管,分別加入等量的物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA的檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5
28、 min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如表所示。 材料保存溫度 花菜 辣椒 蒜黃 20 ℃ ++ + +++ -20 ℃ +++ ++ ++++ 注:“+”越多表示藍色越深。 分析上述實驗過程,回答下列問題。 (1)該探究性實驗的課題名稱是______________________________。 (2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少________。 (3)根據(jù)實驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 ①結(jié)論1:與20 ℃相比,相同實驗材料在-20 ℃條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:_____________________________
29、_________________。 ②針對結(jié)論1,請給出合理的解釋:_______________________________。 (4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是__________________________________,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精使DNA析出。 答案 (1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響 (2)DNA分子的斷裂 (3)①等質(zhì)量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多?、诘蜏匾种?/p>
30、了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢 (4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液 解析 (1)從表格可以看出,該實驗有兩個自變量:材料和溫度,所以該探究性實驗的課題名稱為“探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響”。 (2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物,所以若攪拌速度快,易造成DNA分子的斷裂。 (3)本實驗的結(jié)論可從兩個方面來考慮:①相同材料在不同保存溫度下的結(jié)論;②不同材料在相同保存溫度下的結(jié)論。 (4)氯仿能使蛋白質(zhì)變性,而對DNA影響極小,所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合,又因氯仿密度大于水,所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部,DNA位于
31、上清液中。 11.真核生物細(xì)胞內(nèi),大量DNA和蛋白質(zhì)以及一些RNA等混雜在一起,難以分離。生物興趣小組的同學(xué)為了獲得純度相對較高的DNA展開了實驗探究。 (1)分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)理化性質(zhì)的不同而采取一定的方法,以下是從各種物質(zhì)之間________的差異角度開展研究: ①取雞血細(xì)胞懸液10 mL,加蒸餾水20 mL,同時用玻璃棒________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”),過濾,取濾液,轉(zhuǎn)移到塑料材質(zhì)的大燒杯中。 ②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液,用玻璃棒沿一個方向________(填“輕輕攪拌”或“快速攪拌”),同時不斷收集析出的物質(zhì)。下圖是根
32、據(jù)雞血中幾種物質(zhì)的析出情況繪制的曲線,請據(jù)圖分析: ③如果只收集纖維蛋白,可采取的措施是_____________________________。 ④先用飽和度40%的硫酸銨溶液析出絕大部分纖維蛋白和大部分球蛋白,再在飽和度約為________的硫酸銨溶液中析出DNA(既保證DNA提取量較大又避免其他雜質(zhì)過多),與此同時析出的物質(zhì)還有________。 (2)如果要進一步去掉其他雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,可采取的兩種辦法有:將DNA與球蛋白的混合物加入到________中,收集再次析出物;用________處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液。 答案 (1)溶解度 ①快速攪拌?、?/p>
33、輕輕攪拌 ③在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物?、?0% 球蛋白 (2)冷卻酒精 嫩肉粉 解析 (1)分析曲線圖可知,不同物質(zhì)在不同濃度的硫酸銨中的析出的相對量有所差別,即分離各種物質(zhì)的基本思路是根據(jù)DNA和其他物質(zhì)之間溶解度的差異開展研究: ①取雞血細(xì)胞懸液10 mL,加蒸餾水20 mL,此時可以用玻璃棒快速攪拌,以加速血細(xì)胞的破裂。 ②沿大燒杯內(nèi)壁持續(xù)、緩慢地加入飽和硫酸銨溶液,為了防止將DNA的絮狀物攪碎,此時應(yīng)用玻璃棒沿一個方向輕輕攪拌,同時不斷收集析出的物質(zhì)。 ③從圖中看出,纖維蛋白在硫酸銨濃度在20%之前已經(jīng)開始析出,說明溶解度開始減??;在濃度為30%時析出最快,說明此時的溶解度最低,并且超過30%后球蛋白也將逐漸析出,因此如果只收集纖維蛋白,可以在硫酸銨濃度達到30%之前收集析出物。 ④從圖中看出,DNA在飽和度約為50%的硫酸銨溶液中溶解度最小,與此同時析出的物質(zhì)還有球蛋白,只是球蛋白析出量較少。 (2)如果要進一步去掉其他雜質(zhì),盡可能提高獲得的DNA純度,可將DNA與球蛋白的混合物加入到冷卻酒精中,由于DNA不溶于酒精,而其他雜質(zhì)可溶于酒精,因此收集再次析出物;酶具有專一性,可以用嫩肉粉(含木瓜蛋白酶)處理溶有DNA與蛋白質(zhì)的溶液,此時蛋白質(zhì)可以水解,因此可以分離DNA和蛋白質(zhì)。
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