細胞生物08臨醫(yī)《醫(yī)學(xué)細胞生物學(xué)》教案

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1、教 案1 姓名_齊冰_ 2008～2009學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/3/9節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 緒論 細胞的分子基礎(chǔ)和基本概念 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 使學(xué)生了解細胞生物學(xué)的概念、發(fā)展、成就和作用；掌握細胞生物學(xué)研究方法和學(xué)習(xí)方法；激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)細胞生物學(xué)的興趣。了解細胞的化學(xué)和分子組成；掌握核苷酸的組成，掌握核酸的結(jié)構(gòu)特點，掌握蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點，糖類的組成，了解原核細胞與真核細胞的結(jié)構(gòu)特點，掌握原核細胞與真核細胞的區(qū)別 重　　點 激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)細胞生物學(xué)的興趣；掌握細胞生物學(xué)的學(xué)習(xí)方法

2、，核苷酸的組成核酸的結(jié)構(gòu)特點，原核細胞與真核細胞的區(qū)別 難　　點 核苷酸的組成， DNA的結(jié)構(gòu)特點，蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特點，真核細胞的結(jié)構(gòu) 自學(xué)內(nèi)容 細胞生物學(xué)技術(shù)，核酶，細胞的形成與進化 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 細胞學(xué)和生物化學(xué)的相關(guān)知識 教 學(xué) 法 談話法、討論式、講述法教學(xué)法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 自我介紹及教材、課程介紹 一、細胞及細胞生物學(xué)的概念： 1. 細胞 2. 細胞學(xué)說 3. 細胞生物學(xué)的發(fā)展簡史 4. 細胞生物學(xué)的分支學(xué)科 5. 細胞生物學(xué)與醫(yī)學(xué)科學(xué)，細胞生物學(xué)研究動態(tài)與醫(yī)學(xué)的進展 二、細胞生物學(xué)的學(xué)習(xí)方法 三、細胞生物學(xué)

3、的研究方法 第三章 細胞的分子基礎(chǔ)和基本概念 引 言 第一節(jié) 細胞的化學(xué)與分子組成 無機物：水、無機鹽 有機物：核酸、蛋白質(zhì)、脂肪、糖類 一、核酸： 1. 核酸的化學(xué)組成： ① 組成單位：核苷酸 ② 核苷酸的組成：堿基的種類、A、T、G、C、U 核糖的種類、核糖、脫氧核糖、 磷酸 10分鐘 10分鐘 10分鐘 5分鐘 15分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） ③ 核苷酸連接的化學(xué)鍵：磷酸二酯鍵 從3，5-磷酸二酯鍵來理解核酸的方向性。 ④DNA與RNA在化學(xué)組成上的異同

4、 戊糖 堿基 2、DNA的結(jié)構(gòu)與功能 1． DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型： （1）由兩條相互平行方向相反的多核苷酸鏈構(gòu)成； （2）兩條鏈間的堿基遵循堿基互補配對原則配對，A＝T、G≡C （3）堿基的排列順序蘊含著遺傳信息。 2． DNA的功能： （1）儲存遺傳信息 （2）復(fù)制 （3）轉(zhuǎn)錄 原位雜交技術(shù) （1） 原位雜交技術(shù)的原理 （2） 熒光原位雜交的原理 聚合酶鏈反應(yīng)（PCR） （1） PCR的原理 （2） TaqDNA聚合酶的作用特點 （3） 引物合成的主要原則 ⑷PCR的應(yīng)用 3． RNA的結(jié)構(gòu)與功能： 1． tRNA 2． mRN

5、A 3． rRNA 4． snRNA 4．核酶的概念 核酶的發(fā)現(xiàn)打破了傳統(tǒng)上酶是蛋白質(zhì)的定論，具有重要的意義 核酶與基因治療的關(guān)系。 二、 蛋白質(zhì) 1、 蛋白質(zhì)的化學(xué)組成： 1． 組成單位：AA 2． 肽鍵 2、 蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu) 1． 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)：AA的排列順序；是蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)。 2． 蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)、四級結(jié)構(gòu)： 二級結(jié)構(gòu)強調(diào)的是主鏈上電負性差異大的原子間的電性吸引力—氫鍵。 三級結(jié)構(gòu)強調(diào)的是側(cè)鏈間原子間的作用，就氫鍵而言，和二級結(jié)構(gòu)由本質(zhì)的區(qū)別，另外和二級結(jié)構(gòu)不同的是離子鍵、疏水鍵等。 5分鐘 10分

6、鐘 5分鐘 15分鐘 5分鐘 10分鐘 20分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） （重點強調(diào)）只有具有三級或三級以上的空間結(jié)構(gòu)，才表現(xiàn)出相應(yīng)的生物學(xué)活性 3、 蛋白質(zhì)折疊的分子機制 4、 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系 5酶（簡介） 三、糖類 1、 糖的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)與分類 2．復(fù)合糖在細胞中的分布與功能 第三節(jié) 原核細胞與真核細胞 一、原核細胞 原核細胞的結(jié)構(gòu)特點 二二、真核細胞 1、真核細胞的基本結(jié)構(gòu)：生物膜結(jié)構(gòu)、細胞骨架結(jié)構(gòu)、胞質(zhì)溶膠、細胞核

7、 2、真核細胞的形態(tài)與大小 三、原核細胞與真核細胞的比較 1、細胞結(jié)構(gòu) 2、基因組 3、轉(zhuǎn)錄與翻譯 小 結(jié) 5分鐘 5分鐘 15分鐘 5分鐘 教 案2 姓名_齊冰_ 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/3/15 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 第四章 細胞膜及物質(zhì)的跨膜運輸（一） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解生物膜的化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)，掌握流動鑲嵌模型的主要內(nèi)容 重 點 流動

8、鑲嵌模型的主要內(nèi)容 難 點 生物膜的特性 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 多媒體課件課件 相關(guān)學(xué)科知識 生物化學(xué)的相關(guān)知識 教 學(xué) 法 講述法、圖表法、談話法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課，導(dǎo)入新課 第四章 生物膜的化學(xué)組成 細胞膜、內(nèi)膜系統(tǒng)、生物膜、單位膜 一、 生物膜的化學(xué)組成： 1． 膜脂：膜脂的特點――雙親性 （重點強調(diào)膜脂的兼性分子的特點與膜形成的關(guān)系） 膜脂的類型： 磷脂、 膽固醇、膽固醇的板層狀結(jié)構(gòu)可有效的阻止磷脂分子尾部碳氫鏈的相互聚集，從而降低膜的流動性；抑制了膜因溫度的變化而引起的相變，防止低溫使膜流動性的突然降低。 糖脂

9、2． 膜蛋白 類型：內(nèi)在膜蛋白、外在膜蛋白 重點介紹其特點及其與膜的結(jié)合方式 3． 膜糖類：存在特點 5分鐘 10分鐘 15分鐘 20分鐘 20分鐘 5分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 二、 生物膜的特性 1、 生物膜的流動性： 膜脂的流動性：運動方式 影響因素 膜蛋白的流動性：方式 人鼠細胞融合實驗：膜蛋白流動的區(qū)域性—以小腸上皮細胞的物質(zhì)吸收的載體蛋白分布為例說明 2、 生物膜的不對稱性 三、 生物膜的分子結(jié)構(gòu)模型――流動鑲嵌模型 1、 磷脂雙分子層構(gòu)

10、成膜的基本結(jié)構(gòu)骨架 2、 蛋白質(zhì)以不同的方式與膜結(jié)合 3、 膜的流動性 4、 膜的不對稱性 四、 其它模型 小 結(jié) 15分鐘 5分鐘 10分鐘 10分鐘 10分鐘 15分鐘 5分鐘 5分鐘 教 案3 姓名_齊冰_ 2006～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007.3.22節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞膜和物質(zhì)運輸（二） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解小分子物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞剑莆漳さ鞍捉閷?dǎo)的跨膜運輸，了解大分子和顆粒物質(zhì)的跨膜運輸

11、方式、掌握受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用的過程， 重　　點 掌握膜蛋白介導(dǎo)的跨膜運輸，受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用 難　　點 掌握膜蛋白介導(dǎo)的跨膜運輸，受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生物化學(xué)的相關(guān)知識 教 學(xué) 法 講述法、談話法、圖表法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課、導(dǎo)入新課 一、 膜的選擇通透性和單純擴散 1． 膜的選擇通透性 2． 單純擴散：物質(zhì)及影響因素 二、 膜蛋白介導(dǎo)的跨膜運輸 載體、通道 1． 載體蛋白介導(dǎo)的運輸： 1． 葡萄糖載體蛋白： 2． Na－K－ATP酶 3． Ca泵 4． H＋－ATP 酶 5

12、． 協(xié)同運輸概念及類型 2． 通道蛋白介導(dǎo)的運輸： 1． 通道蛋白的特性： 2． 通道蛋白的種類： 三、 總結(jié)小分子物質(zhì)的跨膜運輸方式及特點 5分鐘 15分鐘 5分鐘 10分鐘 15分鐘 5分鐘 5分鐘 15分鐘 10分鐘 15分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 第三節(jié) 大分子和顆粒物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運 一、 內(nèi)吞作用 1． 吞噬作用 2． 吞飲作用 3． 受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用： 二、 外吐作用： 1． 外吐作用的過程 2．分泌作用的類型 三、 質(zhì)膜循環(huán) 四、 質(zhì)膜的運動――進一步理解膜的流動性 小 結(jié) 10

13、分鐘 20分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 教 案4 姓名_齊冰_ 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/3/29 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞核與遺傳物質(zhì)的流向（一） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解核的結(jié)構(gòu)，掌握核孔復(fù)合體的物質(zhì)轉(zhuǎn)運功能了解染色質(zhì)的化學(xué)組成和種類, 了解染色體的形態(tài)特征，掌握功能染色質(zhì)的三個必須序列,掌握常染色質(zhì)和異染色質(zhì)的區(qū)別，掌握染色質(zhì)的包裝模型，掌握染色體的基本形態(tài)結(jié)構(gòu)，了解基因組和核型的概念，了解核基質(zhì)的化學(xué)組成和功

14、能，掌握核仁的形態(tài)結(jié)構(gòu)及功能，了解核仁周期 重　　點 核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)及運輸功能，常染色質(zhì)和異染色質(zhì)的區(qū)別，染色質(zhì)的包裝模型，染色體的形態(tài)特征核仁的，形態(tài)結(jié)構(gòu)及核仁周期 難　　點 核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)及運輸功能，染色質(zhì)的包裝模型，核仁的形態(tài)結(jié)構(gòu) 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生物化學(xué)的相關(guān)知識 教 學(xué) 法 講述法,談話法,圖表法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課,導(dǎo)入新課. 第五章 細胞核及遺傳信息的流向 細胞核緒論:核出現(xiàn)的意義,核的數(shù)量,形態(tài) 核被膜 一、 外核膜 二、 內(nèi)核膜 三、 核間隙 四、 核孔 1． 核孔的結(jié)構(gòu)

15、2． 核孔的功能：物質(zhì)運輸 自由擴散，主動運輸――核定位信號 五、 核纖層 第一節(jié) 染色質(zhì)和染色體 一、 染色質(zhì)的化學(xué)組成及種類 1． 染色質(zhì)的化學(xué)組成 ①． DNA，三個必須序列復(fù)制源、著絲粒、端粒 ②． RNA ③． 蛋白質(zhì)：組蛋白和非組蛋白 2． 染色質(zhì)的種類 ①． 常染色質(zhì) ②． 異染色質(zhì)：兼性異染色質(zhì)，結(jié)構(gòu)異染色質(zhì) 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 20分鐘 10分鐘 20分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 二、 染色質(zhì)的包裝 多級螺旋模型 ①． 一級結(jié)構(gòu)：核小體鏈――核小體結(jié)構(gòu)

16、 ②． 二級結(jié)構(gòu)：螺線管 ③． 三級結(jié)構(gòu)：超螺線管 ④． 四級結(jié)構(gòu)：染色單體 2． 袢環(huán)模型 ①． 袢環(huán)：螺線管由縱軸伸出又返回 ②． 微帶：由18個袢環(huán)組成形成的平面 ③． 染色單體： 三、染色體 1．染色體的形態(tài)特征： ① 染色單體 ② 著絲粒與主縊痕，動粒，染色體根據(jù)著絲粒的位置可分為4類 ③ 次縊痕核隨體：核仁組織區(qū) ④ 端粒： 2． 基因組與核型 第三節(jié) 核基質(zhì) 一、 核基質(zhì)的形態(tài)結(jié)構(gòu)核化學(xué)組成 二、 核基質(zhì)的功能： 第四節(jié) 核仁 一、 核仁的形態(tài)結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成： 1． 纖維中心 2． 致密纖維成分： 3． 顆粒成分： 二、 核仁的功能：

17、――核糖體亞單位的裝配場所 三、 核仁周期： 小 結(jié) 15分鐘 15分鐘 10分鐘 5分鐘 20分鐘 10分鐘 5分鐘 教 案5（實驗教案1） 姓名 齊冰 　 2006～2007學(xué)年第二 學(xué)期 時間_07/4/5_節(jié)次_1-3 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 基因組DNA的提取 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握基因組DNA提取的原理及方法 重　　點 DNA提取的方法 難　　點 自學(xué)內(nèi)容 無

18、使用教具 離心機等實驗器材 相關(guān)學(xué)科知識 細胞生物學(xué) 教 學(xué) 法 演示法、談話法等 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 一、人類外周血基因組DNA提?。? （一） 原理： 1、 對外周血淋巴細胞內(nèi)DNA進行提取，首先要消化掉細胞膜和核膜，然后將與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)分離并沉淀。 2、 傳統(tǒng)的TLS法提取DNA是通過TLS（是一種強的表面活性劑）處理淋巴細胞，迅速溶解細胞膜和核膜并使DNA和蛋白質(zhì)分離，但此法操作繁瑣且費時，現(xiàn)一般用試劑盒進行DNA進行提取。 3、 試劑盒的原理應(yīng)與TLS法相似， （二） 方法與步驟： 1、 離心管中加入溶液Ⅰ500μl，新鮮血液100μl ，立即

19、振蕩。 2、 室溫放置10分鐘，12000r離心5分鐘。吸去離心管中的液體（注意不要將沉淀帶出，） 3、 離心管中加入溶液Ⅱ1ml，輕柔顛倒，室溫12000r離心2分鐘，去處上清。 4、 離心管中加入溶液Ⅲ500μl，輕微振蕩10s，充分混合。 5、 室溫12000r離心5分鐘，將上清移至新的離心管中。 6、 在心離心管中加入等體積異丙醇500μl，上下顛倒數(shù)次，直至出現(xiàn)白色絲狀DNA。 7、 結(jié)果觀察 （三） 實驗注意事項 1、著重強調(diào)離心機使用時的注意事項，如：離心時需要配平，平衡后要對稱放入； 2、高速離心機和低速離心機的區(qū)別； 3、離心時離心管的擺放方向（耳朵朝外）

20、要一致， 4、講解移液槍的正確用法。 10分鐘 5分鐘 10分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） （四）報告要求： 實驗?zāi)康?、原理、方法和步驟、實驗結(jié)果、結(jié)果分析。 結(jié)果分析： 1、 是否達到預(yù)期效果？為什么？ 2、 每一步試劑的作用？ 二、學(xué)生實驗 125分鐘 教 案6 姓名_齊冰_ 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/4/12節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次

21、 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞核與遺傳信息流向（二） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握原核細胞基因的結(jié)構(gòu)特點及乳糖操縱子的調(diào)控，掌握真核細胞基因結(jié)構(gòu)特點，了解遺傳的中心法則，了解基因轉(zhuǎn)錄的基本過程，掌握轉(zhuǎn)錄的概念，掌握hnRNA的加工的三個步驟，掌握密碼子的特點及擺動假說，了解真核細胞基因表達調(diào)控的途徑 重　　點 乳糖操縱子的調(diào)控，真核細胞基因結(jié)構(gòu)，HnRNA的加工步驟，擺動假說 難　　點 乳糖操縱子的調(diào)控，真核細胞基因結(jié)構(gòu)，擺動假說 自學(xué)內(nèi)容 真核細胞tRNA及5sRNA的轉(zhuǎn)錄后加工 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生物化學(xué) 教 學(xué) 法

22、講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課，導(dǎo)入新課。 第五節(jié)基因與基因轉(zhuǎn)錄 一、 遺傳的中心法則： 二、 基因與基因轉(zhuǎn)錄： 基因的概念： 1． 原核細胞的基因結(jié)構(gòu): 特點：非翻譯區(qū)少，串聯(lián)排列，無內(nèi)含子，單一拷貝，多順反子 例：大腸桿菌乳糖操縱子：結(jié)構(gòu)及調(diào)控 2． 真核細胞的基因結(jié)構(gòu)： 重復(fù)順序多，單順反子，斷裂基因 ① 重復(fù)序列：單一序列；中度重復(fù)序列；高度重復(fù)序列 ② 多基因家族 ③ 結(jié)構(gòu)基因特點：斷裂基因概念 內(nèi)含子，外顯子，啟動子，增強子，終止子 第五節(jié) 基因與基因轉(zhuǎn)錄 3． 原核細胞的基因轉(zhuǎn)錄： ①． 轉(zhuǎn)錄概念 ②． 轉(zhuǎn)錄因子 ③． 轉(zhuǎn)錄過程

23、 4． 真核細胞的基因轉(zhuǎn)錄： hnRNA的轉(zhuǎn)錄后加工－戴帽，加尾，剪接 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 20分鐘 15分鐘 10分鐘 20分鐘 15分鐘 15分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 第六節(jié) 遺傳信息的翻譯 一、 遺傳密碼與mRNA 密碼子，遺傳密碼 密碼子的特點：通用性，簡并性，閱讀框架的無間隔性 二、 反密碼子與tRNA 三、 反密碼子與密碼子的相互作用 擺動假說 四、核糖體與遺傳信息的翻譯 第七節(jié) 真核細胞基因表達的調(diào)控 一、 基因表達的調(diào)節(jié)途徑 二、 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)機

24、制： 順式作用元件 反式作用因子 第八節(jié)細胞核與疾病 小結(jié) 10分鐘 10分鐘 10分鐘 5分鐘 教案7（實驗教案2） 姓名_齊冰_ 2006 ～2007 學(xué)年第 二學(xué)期 時間07/4/19 節(jié)次_1-3 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞有絲分裂、 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握細胞的有絲分裂過程，初步掌握細胞有絲分裂臨時壓片方法、 重 點 細胞分裂各時期的的特點 難 點 細胞分裂各時期圖像的尋找 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 顯微鏡

25、等試驗器材 相關(guān)學(xué)科知識 細胞生物學(xué) 教 學(xué) 法 示教 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 （一）實驗?zāi)康? 1、掌握植物細胞有絲分裂的過程及特點 2、初步掌握植物細胞有絲分裂臨時壓片的方法 （二）實驗原理 1、 講解洋蔥根尖的形態(tài)及生長點部位的細胞的特點。 2、 鹽酸—醋酸地衣紅對染色質(zhì)特異染色。 3、 圖示既說明洋蔥根尖細胞有絲分裂特點: 間期：由細胞核，且核內(nèi)著色均勻，沒有纖維狀的染色體出現(xiàn)。 前期：核膜核仁消失、染色體出現(xiàn) 中期：染色體排列在細胞中央的赤道板。著絲粒在中央、臂在兩側(cè)。 染色體形態(tài)清楚，數(shù)目清晰。 后期：染色單體分離，并向兩極分開，染

26、色體形態(tài)清晰，向極移動時著絲粒在前，臂在后。 末期：染色體解旋，在兩極各形成一團染色體，核膜核仁出現(xiàn)，植物細胞在細胞中央出現(xiàn)細胞板。 子細胞：其大小與其他間期細胞有明顯的區(qū)別，且剛分裂形成的兩個子細胞大小一致并列存在。 （三）實驗方法： 直接取新鮮洋蔥根尖，放入表面皿，加入鹽酸—醋酸地衣紅染液，將燒杯于酒精燈上微微加熱，當(dāng)產(chǎn)生霧氣時，即離開火焰（避免煮沸或燒干），不斷震搖，如此斷續(xù)加熱2—3次，使標本加速固定、軟化和染色，然后在表面皿內(nèi)漂洗，輕輕取根尖于載玻片上，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上方兩層吸水紙，用鉛筆頭或橡皮對準標本叩打（不要挪動標本），使細胞和染色體分散開，鏡下觀察。

27、10分鐘 15分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） （四）注意事項： 1、未染色根尖的顏色及染色后根尖的顏色，讓學(xué)生識別根尖的位置很重要，關(guān)系到壓片時是否合適。 2、結(jié)合課本知識講明細胞有絲分裂各期的特點。 3、加熱時，表面皿應(yīng)在火焰上方2—3厘米左右。 4、壓片時力量要合適，既要防止用力太大將蓋玻片敲碎，又要避免用力太小不能使生長點細胞呈單層。 5、鏡下觀察時，應(yīng)指導(dǎo)學(xué)生現(xiàn)在低倍鏡下找到方形的生長點細胞所在的區(qū)域，這樣利于找到處于分裂狀態(tài)的細胞。 （五）實驗報告 1、格式：實驗題目、實驗?zāi)康模? 2、繪制前、中、后、末四個時期

28、細胞及染色體形態(tài)圖 3、繪圖要求： ① 按著鏡下實際觀察到的各期染色體形態(tài)進行繪圖； ② 一律用鉛筆 ③ 繪染色體可以圖描 （六）實驗報告批改及評分標準 1、書寫及繪圖是否認真。根據(jù)認真程度扣分范圍5—10分 2、實驗報告是否規(guī)范。 （1） 實驗標題、試驗?zāi)康?，落一項?分。 （2） 所繪分裂期各期圖，期別標識錯誤，一項扣10分。 （3） 所繪染色體不是鏡下看到的實際形態(tài)，而是自己杜撰或簡單抄書，每期圖扣5分。 學(xué)生實驗： 5分鐘 120分鐘 教 案8 姓名_齊冰_

29、 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/4/26 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 第六章細胞骨架 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解細胞骨架的定義、細胞骨架的種類；掌握微絲組裝的動態(tài)調(diào)節(jié)，了解微絲的功能了解微管、中間纖維的組成、形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能和組裝，掌握微管組裝的的動態(tài)調(diào)節(jié) 重　　點 微絲組裝的動態(tài)調(diào)節(jié) 難　　點 微絲組裝的動態(tài)調(diào)節(jié) 自學(xué)內(nèi)容 微絲結(jié)合蛋白，微絲功能中的作用機制 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生理學(xué)相關(guān)知識 教 學(xué) 法 對比法、舉例法、講述法 講

30、授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課，導(dǎo)入新課。 第六章 細胞骨架 細胞骨架的定義，及類型 第一節(jié)微絲 一、 微絲的組成： 1． 微絲的基本組成單位：肌動蛋白 2． 肌動蛋白的存在方式： 二、 微絲的結(jié)構(gòu)： 三、 微絲的組裝 四、 微絲組裝的動態(tài)調(diào)節(jié) 非穩(wěn)態(tài)動力學(xué)模型 五、 微絲結(jié)合蛋白及其功能（自學(xué)） 六、 微絲的功能： 1． 維持細胞形態(tài) 2． 參與肌肉收縮 5分鐘 5分鐘 20分鐘 20分鐘 20分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 3． 參與細胞分裂 4． 參與

31、細胞運動 5． 參與細胞內(nèi)物質(zhì)運輸 6． 參與細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 第二節(jié) 微管 一、 微管的化學(xué)組成： 微管蛋白，αβ 二、 微管的形態(tài)結(jié)構(gòu)： 存在形式：單管、二聯(lián)管、三聯(lián)管 三、 微管結(jié)合蛋白（自學(xué)） 四、 微管的組裝 五、 微管組裝動態(tài)調(diào)節(jié)――非穩(wěn)態(tài)動力學(xué)模型 六、 微管的功能 1． 維持細胞形態(tài) 2． 構(gòu)成纖毛、鞭毛和中心粒等細胞運動器官，參與細胞運動 3． 維持細胞器的位置，參與細胞器的位移 4． 參與細胞內(nèi)的物質(zhì)運輸 5． 參與染色體的運動，調(diào)節(jié)細胞分裂 6． 參與細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 第三節(jié) 中間纖維 一、 中間纖維的化學(xué)組成 二、

32、中間纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu) 三、 中間纖維的組裝 四、 中間纖維組裝的動態(tài)調(diào)節(jié) 五、 中間纖維結(jié)合蛋白及其功能（自學(xué)） 六、 中間纖維的功能 第四節(jié) 細胞骨架與疾病 小 結(jié) 15分鐘 15分鐘 20分鐘 15分鐘 10分鐘 5分鐘 教 案9 姓名齊冰_2006 ～2007學(xué)年第二學(xué)期 時間2007/5/3（第8周補課）節(jié)1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 線粒體與細胞的能量轉(zhuǎn)換 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌

33、握線粒體的半自主性、細胞呼吸及特點、細胞能量轉(zhuǎn)化的三個步驟、氧化磷酸化、底物水平磷酸化、呼吸鏈。了解能量轉(zhuǎn)化的過程，及線粒體與醫(yī)學(xué)關(guān)系。 重　　點 線粒體的半自主性、細胞的能量轉(zhuǎn)換 難　　點 細胞的能量轉(zhuǎn)換 自學(xué)內(nèi)容 核編碼蛋白的線粒體轉(zhuǎn)運、ATP的合成 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生物化學(xué)糖酵解、三羧酸循環(huán)等 教 學(xué) 法 講述法、比較法、 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課――細胞骨架-導(dǎo)入新課 ――第七章 線 粒 體 與 能 量 轉(zhuǎn) 換 一、 線粒體的生物學(xué)特征： （一）線粒體的結(jié)構(gòu)：外膜；內(nèi)膜――膜間腔，基粒；基質(zhì)（重點講解線粒體內(nèi)膜的高度不

34、通透性及線粒體的基粒） 線粒體的化學(xué)組成 （二）線粒體基因組――線粒體的半自主性。（細胞內(nèi)的第二套遺傳系統(tǒng)，受核基因的控制，絕大多數(shù)蛋白由核基因編碼） （三）核編碼的線粒體轉(zhuǎn)運（框架――前體蛋白在線粒體外去折疊，多肽鏈穿越線粒體膜，多肽鏈在線粒體基質(zhì)內(nèi)重新折疊） 二、 細胞呼吸與能量分子 細胞呼吸 細胞呼吸的特點（1.本質(zhì)是線粒體中進行的一系列由酶系所催化的氧化還原反應(yīng)，2所產(chǎn)生的能量儲存在ATP中，3分步進行，能量逐步釋放，4恒溫恒壓條件5需要有水參與。） 細胞能量轉(zhuǎn)換分子――－ATP 5分鐘 20分鐘 20分鐘 5分鐘 20分鐘

35、 10分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 三、 細胞的能量轉(zhuǎn)換 以糖的氧化為例：糖酵解――細胞質(zhì)基質(zhì) 三羧酸循環(huán)――線粒體基質(zhì) 電子傳遞和氧化磷酸化――－線粒體內(nèi)膜 底物水平磷酸化。 呼吸鏈：復(fù)合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，CoQ，CytC 呼吸鏈三個主要的能量釋放部位： 氧化磷酸化偶聯(lián)機制――化學(xué)滲透偶聯(lián)假說 四、 能量轉(zhuǎn)換與醫(yī)學(xué)的關(guān)系 小 結(jié) 10分鐘 10分鐘 5分鐘 20分鐘 10分鐘 10分鐘 5分鐘 教 案10 姓名_齊冰_

36、 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/5/10 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 內(nèi)膜系統(tǒng)（一） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握內(nèi)膜系統(tǒng)的概念，掌握核糖體的活性位點，掌握核糖體的存在形式，掌握粗面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)特點，核糖體在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的附著機制。蛋白質(zhì)在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的糖基化， 重　　點 內(nèi)膜系統(tǒng)，核糖體的活性位點。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的分泌蛋白合成功能 難　　點 核糖體的活性位點，信號假說 自學(xué)內(nèi)容 蛋白質(zhì)的合成過程，蛋白質(zhì)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)向高爾基復(fù)合體的運輸， 使用教具 多媒體課件 相關(guān)

37、學(xué)科知識 生物化學(xué)相關(guān)知識――蛋白質(zhì)合成 教 學(xué) 法 講述法、比較法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 一、 內(nèi)膜系統(tǒng)緒論 內(nèi)膜系統(tǒng)的概念 內(nèi)膜系統(tǒng)的功能 二、 核糖體 1、核糖體的化學(xué)組成 a) 真核細胞核糖體的化學(xué)組成 i. 完整核糖體為80s ii. 大亞基60s，rRNA組成為28s、5.8s和5s iii. 小亞基40s，rRNA組成為18s b) 原核細胞核糖體的化學(xué)組成 i. 完整核糖體為70s ii. 大亞基50s，rRNA組成為23s和5s iii. 小亞基30s，rRNA組成為16s 2、核糖體的存在狀態(tài) a) 從位置和功能上看： i

38、. 游離核糖體及合成蛋白的種類 ii. 附著核糖體及合成蛋白的種類 b) 從形態(tài)上看 i. 大小亞基分離狀態(tài) ii. 完整核糖體狀態(tài) iii. 多聚核糖體狀態(tài) 15分鐘 10分鐘s 10分鐘s 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 3、核糖體上與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的活性部位 a) 小亞基上mRNA結(jié)合部位，小亞基上，與mRAN結(jié)合 b) A位點：大亞基上，氨酰tRNA的結(jié)合部位 c) P位點：大亞基上，肽酰tRNA的結(jié)合部位 d) 轉(zhuǎn)肽酶活性部位，催化肽鍵形成的酶所在的部位 e) GTP酶活性部

39、位，為移位提供能量的部位 f) E位點：多肽鏈轉(zhuǎn)運通道 4、核糖體上蛋白質(zhì)的合成 a) 起始—起始復(fù)合物的形成 b) 肽鏈延伸 c) 肽鏈合成終止 三、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （一）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)與類型 粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （二）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的化學(xué)組成 標志酶：葡萄糖－6－磷酸酶，電子傳遞體系 （三）內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能 ∮、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能 1、 分泌蛋白的合成 信號假說， ①、 信號肽引導(dǎo)核糖體到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜 相關(guān)結(jié)構(gòu)：信號肽，信號密碼，SRP，SRP受體，核糖體結(jié)合蛋白， 核糖體的附著機制： i 信號肽在胞質(zhì)游離狀態(tài)的核糖體上合成 ii 信號肽與SRP的結(jié)合，SRP與核糖體A

40、為結(jié)合 iii SRP與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的SRP受體結(jié)合 iv 核糖體大亞基與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的核糖體結(jié)合蛋白結(jié)合，SRP釋放，肽鏈繼續(xù)合成 ② 新生肽鏈到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的跨膜轉(zhuǎn)運 協(xié)同翻譯運轉(zhuǎn)（重點講） 翻譯后運轉(zhuǎn) ③ 蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的折疊 分子伴侶 折疊機制 ④ 蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的糖基化 N－連接的糖基化：N－乙酰葡萄糖胺，甘露糖，葡萄糖，天冬酰胺 糖基轉(zhuǎn)移酶 ⑤ 蛋白質(zhì)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體的運輸（自學(xué)） 小 結(jié) 15分鐘 15分鐘 10分鐘 5分鐘 10分鐘 20分鐘

41、5分鐘 5分鐘 20分鐘 5分鐘 5分鐘 教 案11（實驗教案3） 姓名 齊冰 　 2006～2007學(xué)年第 二學(xué)期 時間 07/5/17_ 節(jié)次1-3 課程名稱 細胞生物學(xué)實驗 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞骨架的顯示 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握組織化學(xué)法顯示以微絲為主的細胞骨架纖維的原理和步驟。 重　　點 細胞骨架的顯示 難　　點 細胞骨架的顯示 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 試驗器材 相關(guān)學(xué)科知識 細胞生物學(xué) 教 學(xué) 法 示教 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 （一）原理

42、： 洋蔥鱗莖表皮細胞經(jīng)一定濃度的tritonX-100處理時，可破壞細胞壁及細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，而細胞骨架系統(tǒng)的蛋白質(zhì)被保留下來，經(jīng)固定和染色后能在光鏡下觀察到細胞骨架的結(jié)構(gòu)。 （二）方法與步驟： 1、 取洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細胞于6mM的PBS中浸泡10分鐘。（磷酸緩沖液的作用：為 tritonX-100的處理提供緩沖環(huán)境） 2、 去處PBS，tritonX-10037℃處理20分鐘。（tritonX-100的作用：破壞細胞壁及細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)，而細胞骨架系統(tǒng)的蛋白質(zhì)被保留下來） 3、 吸去tritonX-100，加M-緩沖液沖洗。（M-緩沖液沖洗的作用：①對 tritonX-100的清洗；②

43、為下一步戊二醛的固定提供緩沖環(huán)境） 4、 吸去M-緩沖液，加戊二醛固定10分鐘。（戊二醛固定的作用：使大分子交聯(lián)在一起，經(jīng)過處理后，不致使細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)發(fā)生大的變形，以最大限度的保證細胞正常生理狀況下的形態(tài)及結(jié)構(gòu)） 5、 吸去戊二醛，加PBS沖洗。（磷酸緩沖液的作用：①對烏二醛的清洗；②為考馬斯亮藍的染色提供緩沖環(huán)境） 6、 吸去PBS，加考馬斯亮藍染色15~30分鐘。（考馬斯亮藍的作用：考馬斯亮藍不是特異的對細胞骨架進行染色，但由于經(jīng) tritonX-100處理已消化掉骨架蛋白質(zhì)外的蛋白質(zhì)，所以經(jīng)考馬斯亮藍染色的即為細胞骨架） 實驗報告要求： 學(xué)生實驗 5分鐘

44、 10分鐘 5分鐘 130分鐘 教 案12 姓名_齊冰_ 2006 ～2007學(xué)年第 二 學(xué)期 時間2007/5/24 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 內(nèi)膜系統(tǒng)（二） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握高爾基復(fù)合體的結(jié)構(gòu)分區(qū)和功能，掌握溶酶體的結(jié)構(gòu)及特點，初級溶酶體、次級溶酶體、自嗜性溶酶體、異嗜性溶酶體的概念及來源，溶酶體的功能、溶酶體與疾病的關(guān)系 重　　點 高爾基體的功能，溶酶體的功能、溶酶體與疾病的關(guān)系 難　　點 高爾基復(fù)合體與溶酶體的形成，

45、溶酶體與疾病的關(guān)系 自學(xué)內(nèi)容 過氧化物酶體 使用教具 多媒體課件 相關(guān)學(xué)科知識 生理學(xué)、醫(yī)學(xué) 教 學(xué) 法 講述法、討論法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 復(fù)習(xí)舊課――內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，導(dǎo)入新課 一、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能 2、 膜整合蛋白的嵌插機制（經(jīng)提示后自學(xué)） 3、 蛋白質(zhì)合成的質(zhì)量控制――UPR非折疊蛋白應(yīng)答（經(jīng)提示后自學(xué)） 4、 粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與膜脂的合成 （二）滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能： 1、 固醇類激素的合成和脂類代謝 2、 糖原的合成與分解 3、 肝細胞解毒作用 4、 肌細胞內(nèi)特化的滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) 一、 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的病理變化 高爾基復(fù)合體 一、 高爾基復(fù)合體的形態(tài)結(jié)構(gòu) 順面高

46、爾基網(wǎng)絡(luò)CGN，扁平囊區(qū)，反面高爾基網(wǎng)絡(luò)TGN 二、 高爾基復(fù)合體的分布特征 1、胰腺細胞等分布再接近細胞核的細胞一極 2、肝細胞等則沿膽小管分布至細胞邊緣 3、其他細胞呈分散狀 三、 高爾基復(fù)合體的化學(xué)組成 特征酶――糖基轉(zhuǎn)移酶 四、 高爾基復(fù)合體的功能 5分鐘 10分鐘 5分鐘 15分鐘 5分鐘 10分鐘 10分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） （一） 分泌蛋白的加工和修飾 1. 糖蛋白的合成和修飾：N－連接的糖基化的修飾。O－連接的糖基化――糖鏈與AA的－OH基團相連。 2.

47、蛋白質(zhì)的加工改造：胰島素的加工 （二） 高爾基復(fù)合體與蛋白質(zhì)的分選和運輸 受體 挽救受體 （三） 高爾基復(fù)合體與溶酶體的形成 M-6-P的形成是關(guān)鍵，――TGN處的分選信號，在高爾基復(fù)合體內(nèi)運輸時保護M不被水解。磷酸轉(zhuǎn)移酶的識別位點――信號斑。 （四） 高爾基復(fù)合體與細胞內(nèi)膜的交通 五、 高爾基復(fù)合體的病理變化 溶酶體 一、 溶酶體的形態(tài)特點 由一層單位膜包圍的內(nèi)含多種酸性水解酶的細胞器 二、 溶酶體的化學(xué)組成 a) 含有核酸酶、蛋白酶、糖苷酶、脂酶、磷酸酶和硫酸酶六大類。 b) 其最適pH為5.0 c) 膜上有質(zhì)子泵

48、三、 溶酶體的類型――自噬性溶酶體、異噬性溶酶體、殘余小體 四、 溶酶體的功能 a) 對細胞內(nèi)物質(zhì)的消化 i. 細胞自身物質(zhì)的消化 ii. 細胞吞噬物質(zhì)的消化 b) 對細胞外物質(zhì)的消化 頂體反應(yīng)—精子細胞的頂體是由溶酶體特化而來的 c) 溶酶體的姿容作用于器官發(fā)育 兩棲動物蝌蚪變態(tài)時的尾部吸收與溶酶體的自溶作用 D）溶酶體與激素分泌的調(diào)節(jié) 五、 溶酶體與疾病 a) 先天性溶酶體病 糖原沉積病，脂質(zhì)沉積病，粘多糖沉積病 b) 溶酶體與矽肺 i. 矽肺的發(fā)病機制 ii. 矽肺的治療 c) 溶酶體與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎 d) 溶酶體與腫瘤 第五節(jié) 過氧化物酶體（經(jīng)提示

49、后自學(xué)） 小結(jié) 15分鐘 5分鐘 20分鐘 5分鐘 5分鐘 20分鐘 15分鐘 5分鐘 教 案13（實驗教案4） 姓名_齊冰_ 　 2006～2007 學(xué)年第二學(xué)期 時間 07/5/31 節(jié)次1-3 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 細胞組分的分離和鑒定 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解通過細胞勻漿和差速離心的方法分級分離細胞組分的原理及過程；熟悉離心機、勻漿器的使用方法 重　　點

50、細胞組分分離的原理和方法 難　　點 不同離心機的使用 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 顯微鏡、離心機、勻漿器 相關(guān)學(xué)科知識 生物技術(shù) 教 學(xué) 法 講授法、示教 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 一、實驗原理： 細胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)的比重和大小不同，在同一離心場內(nèi)的沉降速率不同，據(jù)此可用不同的轉(zhuǎn)速將細胞內(nèi)各種碎片和細胞起分級分離。利用細胞核與線粒體在一定介質(zhì)中的沉降速度的差異，可采取分級差速離心的方法，將細胞核與線粒體逐級分離出來。 二、方法與步驟： (一) 血涂片的制作方法： 1． 采血針眼處擠出綠豆大小血滴，用清潔玻片面的一端輕輕接觸血滴，使血滴附于玻片面上，注意勿觸及皮膚，否

51、則血在玻片上就不能成滴。 2．另取邊緣平滑的玻片作為推片：以推片的一端放在血清的前方，逐漸后移，接觸血滴并待血滴沿推片邊緣均勻展開，然后將推片與玻片保持 30 － 45 度角，輕輕用力，均勻而迅速地將推片沿玻片表面推至玻片另一端，形成頭體尾明顯的舌形血膜。立即將玻片搖動，使其快速干燥，忌熱力干燥。 （二）低速離心分離細胞核 1．小鼠處死，取肝臟，剪成小塊，迅速放置于預(yù)冷的生理鹽水中洗凈； 2．濾紙吸去肝組織表面的溶液，稱取肝組織1g加入8ml預(yù)冷的蔗糖溶液，勻漿器 5分鐘 25分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 中勻漿。八層紗布過濾，棄去濾渣

52、，濾液---1800rpm離心10分鐘，上清制作涂片①，其余上清冰水中待用。沉淀加冷的蔗糖溶液重懸，1800rpm離心10分鐘 ，上清制作涂片②，沉淀重懸，制作涂片③。 3． 涂片1-3，晾干，95%乙醇固定5’，甲基綠-哌羅寧染色20分鐘，水洗，丙酮分化2-3s，鏡檢。 （三）高速離心分離線粒體： 將冰水中的上清13,000rpm離心10分鐘，棄去上清，沉淀重懸，13,000rpm離心10分鐘，沉淀重懸。取兩張玻片滴加中性紅-詹姆斯綠B，分別加一滴上清④、重懸液⑤，染色2-3分鐘，加蓋片，鏡檢。 三、實驗報告要求： 寫出實驗題目、原理、分離操作程序流程圖解，描述各種涂片顯微鏡下觀察

53、到的結(jié)果。 四、學(xué)生實驗 120分鐘 教 案14 姓名 齊冰 2006～ 2007 學(xué)年第 二 學(xué)期 時間_07/6/7_ 節(jié)次1-3節(jié) 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2008臨床醫(yī)學(xué)本科1-2班 授課內(nèi)容 第九章 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（一） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握受體、配體的概念，受體的基本類型及各自的結(jié)構(gòu)特點。G蛋白的概念及共同特征，G蛋白的作用機制 重　　點 受體、配體的概念，受體的基本類型、G蛋白的概念及作用機制 難　　點 G蛋白的作用過程 自學(xué)內(nèi)容 G蛋白的類型 使用教

54、具 多媒體課件、卡通、flash 相關(guān)學(xué)科知識 生理學(xué)、分子生物學(xué) 教 學(xué) 法 案例引入式教學(xué)法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（可加附頁） 復(fù)習(xí)舊課，導(dǎo)入新課 一、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念及過程 1、 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念 2、 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程 ① 信號分子即第一信使 ② 細胞表面或內(nèi)部的受體 ③ 受體將第一信使在胞內(nèi)轉(zhuǎn)換為第二信使 ④ 胞內(nèi)的信號途徑，產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)。 二、受體 1、 受體的概念 2、 配體的概念 3、 配體的種類 ① 脂溶性的 ② 水溶性的 4、 受體的類型 （1） 酪氨酸激酶受體 ① 概念 ② 作用 ③ 此類受體的配體 （2

55、） 配體閘門離子通道 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 5分鐘 20分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） ① 乙酰膽堿受體的結(jié)構(gòu) ② 作用特點 （3） G蛋白耦聯(lián)受體 ① 共同結(jié)構(gòu)特征 ② 作用特點 三、G蛋白 1、 G蛋白的概念 2、 G蛋白的共同特征 ① 由α、β、γ等三種不同的亞基構(gòu)成異聚體 ② 具有結(jié)合GTP或GDP的能力，并具有GTP酶的活性 ③ 其本身的構(gòu)象改變可進一步激活效應(yīng)器酶，實現(xiàn)胞內(nèi)信號傳遞 3、 G蛋白的類型和分子組成 （1） 類型 （2） 種類 4、 G蛋白的作用機制 ①

56、 配體與相應(yīng)受體結(jié)合，受體蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，與G蛋白的α亞基結(jié)合，使α亞基與GTP結(jié)合 ② GTP-α亞基構(gòu)象改變，與βγ亞基分離；GTP-α亞基與受體分離，此為G蛋白的活性狀態(tài)； ③ GTP-α亞基激活效應(yīng)器蛋白 ④ GTP-α亞基一旦與效應(yīng)器蛋白結(jié)合激活其GTP水解酶活性水解GTP形成GDP-α亞基，并與效應(yīng)器蛋白分離； ⑤ GDP-α亞基又與βγ亞基結(jié)合恢復(fù)到靜息狀態(tài)下的G蛋白。 5、 βγ亞基對G蛋白活性的調(diào)節(jié) 5分鐘 10分鐘 5分鐘 20分鐘 10分鐘 教 案15（實驗教案5

57、） 姓名_齊冰_ 　 2006～2007 學(xué)年第二學(xué)期 時間 07/6/14 節(jié)次1-3 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2006臨床醫(yī)學(xué)本科5-8班 授課內(nèi)容 染色體制備與分析 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 了解人體外周血淋巴細胞短期培養(yǎng)的原理及方法、初步掌握人外周血淋巴細胞染色體的制備技術(shù)、 重　　點 人外周血淋巴細胞染色體的制備 難　　點 人外周血淋巴細胞染色體的制備 自學(xué)內(nèi)容 無 使用教具 顯微鏡等試驗器材 相關(guān)學(xué)科知識 細胞生物學(xué) 教 學(xué) 法 示教 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配 外周血淋巴細胞染色體的制備： 一、 實驗?zāi)康模?

58、 1、 了解人外周血淋巴細胞短期培養(yǎng)的原理及方法； 2、 初步掌握人外周血淋巴細胞染色體制備的技術(shù) 二、 實驗原理： 1、 細胞增殖類型： （1） 周期性細胞：即連續(xù)分裂的細胞。如：胚胎細胞、干細胞、腫瘤細胞等； （2） 暫時不增殖細胞：細胞停留在G1期，條件合適又會進入細胞周期進行增殖，又稱G0細胞。如肝細胞、腎細胞等實體細胞。 （3） 終端分化細胞：永久失去增殖能力。如表皮角化細胞、肌肉細胞、成熟紅細胞等。 2、 在外周血淋巴細胞中以小淋巴細胞為主，屬于第二種增殖類型，即G0細胞。 3、 PHA：植物血凝激素，可刺激淋巴細胞轉(zhuǎn)化成淋巴母細胞重新進入細胞周期進行有絲分裂。

59、4、 培養(yǎng)條件： （1） 培養(yǎng)液：模擬機體內(nèi)細胞的營養(yǎng)環(huán)境； （2） 小牛血清：為細胞生長、增殖提供生長因子； （3） 培養(yǎng)溫度：37℃。 （4） pH：中性。 5分鐘 20分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（附頁） 5、 培養(yǎng)時間：體外培養(yǎng)72小時左右時，大多是細胞處于第二個細胞周期分裂期的中期。 6．秋水仙素：有絲分裂阻斷劑，可影響微管的聚合與解聚，不能使有絲分裂中期染色體分開而使有絲分裂中止。 三、方法與步驟： a) 用品處理及采血、接種、培養(yǎng)均在實驗前完成。 2．實驗前3~4h加秋水仙素，使終濃度為0.05ug/ml，繼續(xù)培養(yǎng)4h 3．終止培養(yǎng)，取

60、培養(yǎng)物1000r/分鐘8~10分鐘,棄去上清液。 4．低滲處理：在沉淀中加入37℃的0.075mol/ml的KCl8ml，37℃20分鐘 （低滲的作用：①使細胞吸水膨大，經(jīng)過處理后，在滴片時細胞破碎，染色體散開；②是染色體吸水膨大，利于觀察） 5．固定：加固定液1ml，混勻，離心1000r/分鐘8~10分鐘,棄上清，在沉淀中再加固定液6ml，靜置15分鐘，離心，1000r/分鐘8~10分鐘，棄上清。 （固定的作用：使大分子交聯(lián)在一起，經(jīng)過處理后，不致使細胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)發(fā)生大的變形，以最大限度的保證細胞正常生理狀況下的形態(tài)及結(jié)構(gòu)） 6．制片：沉淀中加固定液0.2-0.4ml，取冰溫玻片35

61、cm高處滴片， 7．染色：giemsa染色8分鐘，觀察。 四、強調(diào)的注意事項 1、見《實驗指導(dǎo)》P66頁 2、離心之前一定注意平衡，而且平衡后的兩管要對稱放入離心機。 3、讓學(xué)生練習(xí)細胞懸液制備時吸管的吹吸方法。 4、染色時一定記住有細胞的一面朝上，必要時做標識。 5、觀察時，有細胞的一面一定朝上，如果在低倍鏡下能看到細胞，切換到高倍鏡后找不到細胞，第一個要考慮到是載玻片放反了。 五、實驗報告格式 1、實驗標題、實驗?zāi)康?、原理、方法和步驟、實驗結(jié)果、結(jié)果分析 2、要求： （1）原理不能照抄實驗指導(dǎo)，根據(jù)老師講的寫。 （2）實驗結(jié)果描述：由無分裂項？如果有，分散如何？如果

62、分散好，應(yīng)描述染色體的數(shù)目、形態(tài)和顏色。 （3）結(jié)果分析：是否達到預(yù)期效果？為什么？ 學(xué)生實驗 10分鐘 5分鐘 5分鐘 150分鐘 教 案16 姓名 齊冰 2006～ 2007 學(xué)年第 二 學(xué)期 時間07/06/21 節(jié)次1-3 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 2006臨床醫(yī)學(xué)本科5-8班 授課內(nèi)容 第九章 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)（二） 學(xué)時數(shù) 3 教學(xué)目的 掌握腺苷酸環(huán)化酶的作用及cAMP信號傳導(dǎo)機制，霍亂與G蛋白異常

63、，級聯(lián)反應(yīng)。熟悉鳥苷酸環(huán)化酶與cGMP、一氧化氮信號、甘油二脂、三磷酸肌醇、Ca2+的信號體系。 重　　點 腺苷酸環(huán)化酶的作用及cAMP信號傳導(dǎo)機制、霍亂與G蛋白異常 難　　點 腺苷酸環(huán)化酶的作用及cAMP信號傳導(dǎo)機制，霍亂與G蛋白異常 自學(xué)內(nèi)容 腺苷酸環(huán)化酶的類型及分子特點。 使用教具 多媒體課件、卡通、flash 相關(guān)學(xué)科知識 生理學(xué)、分子生物學(xué) 教 學(xué) 法 案例引入式教學(xué)法 講授內(nèi)容綱要、要求及時間分配（可加附頁） 第三節(jié) 第二信使與蛋白激酶 一、腺苷酸環(huán)化酶與cAMP 1、 腺苷酸環(huán)化酶 （1） 腺苷酸環(huán)化酶的結(jié)構(gòu)特點 （2） 腺苷酸環(huán)化酶的種類

64、（3） 腺苷酸環(huán)化酶的作用 2、 cAMP信號傳導(dǎo)通路 （1） 第二信使的概念 （2） cAMP ① cAMP的分子結(jié)構(gòu) ② cAMP的形成 （3） PKA：依賴于cAMP的蛋白激酶 ① 構(gòu)成：2個調(diào)節(jié)亞基，結(jié)合cAMP的部分 ② 作用：2個催化亞基，當(dāng)cAMP結(jié)合調(diào)節(jié)亞基后，和調(diào)節(jié)亞基分離，使核內(nèi)CREB蛋白磷酸化 （4） cAMP信號傳導(dǎo)通路（重點） AC催化ATP→cAMP→PKA→催化亞基→使核內(nèi)CREB蛋白磷酸化→DNA上的CRE區(qū)→靶基因表達 10分鐘 15分鐘 10分鐘 講授內(nèi)容綱要、要求及時

65、間分配（附頁） 二、鳥苷酸環(huán)化酶與cGMP 1、 鳥苷酸環(huán)化酶(GC)的種類 （1） 膜結(jié)合型 （2） 可溶型 2、 GC催化GTP形成cGMP cGMP信號傳導(dǎo)通路 三、一氧化氮（NO）信號 1、 NO合酶 2、 NO合酶催化下列底物，并產(chǎn)生NO （1） 乙酰膽堿⑵谷氨酸⑶組氨⑷P物質(zhì)⑸Bradykinin等神經(jīng)遞質(zhì) 3、 一氧化氮（NO）信號傳導(dǎo)通路 四、DAG、IP3和Ca2＋信號系統(tǒng) （一） 磷脂酶C的活化機制 1、 活化磷脂酶C的第一信使 （1）神經(jīng)遞質(zhì)⑵多肽激素⑶生長因子⑷α1腎上腺素⑸5-羥色氨 2、 磷脂酶C的催化底物—PIP2 （二）DAG激

66、活蛋白激酶C （三）IP3動員內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)Ca2＋釋放 五、蛋白激酶使底物蛋白磷酸化 1、底物蛋白磷酸化 2、級聯(lián)反應(yīng) （1） 級聯(lián)反應(yīng)的概念 （2） 級聯(lián)反應(yīng)的意義 3、 種信號途徑與細胞效應(yīng) 第四節(jié) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與醫(yī)學(xué)的關(guān)系 一、受體的缺陷 1、重癥肌無力 2、重癥肌無力與受體缺陷 二、G蛋白功能異常 1、霍亂與霍亂弧菌 2、霍亂發(fā)病機制 小 結(jié) 5分鐘 20分鐘 10分鐘 10分鐘 15分鐘 5分鐘 教案17（實驗6） 姓名_齊冰_ 2006 ～ 2007 學(xué)年第 一 學(xué)期 時間_10月16日 節(jié)次__5-8__ 課程名稱 細胞生物學(xué) 授課專業(yè)及層次 05級生物技術(shù)本科1-2班 授課內(nèi)容 實驗一 細胞膜的通透性 實驗二 細胞吞噬 學(xué)時數(shù) 4 教學(xué)目的 了解細胞膜的通透性和細胞的吞噬活動；訓(xùn)練學(xué)生觀察細胞膜生理活動的能力和掌握小鼠進行腹腔注射和處死的方法 重　　點 單核細