《臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白測(cè)定、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉測(cè)定》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白測(cè)定、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉測(cè)定（52頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、1234實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 血紅蛋白測(cè)定、網(wǎng)織紅血紅蛋白測(cè)定、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉 測(cè)定測(cè)定 血紅蛋白測(cè)定血紅蛋白測(cè)定 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 紅細(xì)胞沉降率紅細(xì)胞沉降率，血細(xì)胞比容測(cè)定血細(xì)胞比容測(cè)定 紅細(xì)胞形態(tài)，嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)，嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞主要內(nèi)容主要內(nèi)容氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法氰化高鐵血紅蛋白測(cè)定法(HiCN)RBC被破壞被破壞Hb文齊液文齊液K3 Fe(CN)6Fe2+Fe3+HiCN+CN540nmSHb除外除外原理：原理：Hb測(cè)定流程：測(cè)定流程：5ml 轉(zhuǎn)化液轉(zhuǎn)化液20ul 全血全血混勻混勻/靜置靜置5min540nm比色比色器材：末梢血或靜脈血，器材：末梢血或
2、靜脈血，5ml5ml移液管，分光光度計(jì)移液管，分光光度計(jì)試劑：試劑：HiCNHiCN轉(zhuǎn)化液（文齊液），蒸餾水轉(zhuǎn)化液（文齊液），蒸餾水上清液上清液洗洗3次次A：為為540nm處測(cè)定的標(biāo)本吸光度處測(cè)定的標(biāo)本吸光度64 458：血紅蛋白平均分子量：血紅蛋白平均分子量44 000：血紅蛋白毫摩爾消光系數(shù)：血紅蛋白毫摩爾消光系數(shù)64458=251367.744000AAHb(g/L)Hb(g/L) 報(bào)告方式：報(bào)告方式：XXg/L 注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：轉(zhuǎn)化液中的轉(zhuǎn)化液中的KCNKCN有劇毒，不能與酸性液體混合有劇毒，不能與酸性液體混合高白細(xì)胞、高球蛋白血癥致試液渾，高白細(xì)胞、高球蛋白血癥致試液渾，不能測(cè)定
3、不能測(cè)定SHbSHbHbCOHbCO反應(yīng)慢反應(yīng)慢( (加大試劑中加大試劑中K K3 3FeFe（CNCN）6 6含量）含量）廢液處理：每升廢液加次氯酸鈉廢液處理：每升廢液加次氯酸鈉40ml,40ml,充分振搖混充分振搖混勻，敞開(kāi)容器，置室溫勻，敞開(kāi)容器，置室溫3h3h以上以上質(zhì)量控制：質(zhì)量控制：血標(biāo)本、方法、器材、采血部位血標(biāo)本、方法、器材、采血部位參考值：參考值：成年：男性成年：男性120120160g /L160g /L女性：女性：110110150g/L150g/L新生兒：新生兒：170170200g/L200g/L老年（老年（7070歲以上）：男性：歲以上）：男性：94.294.212
4、2.2g/L122.2g/L 女性：女性：86.586.5111.8g/L111.8g/L臨床意義：臨床意義：與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似，但與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似，但對(duì)貧血程度判斷的對(duì)貧血程度判斷的 準(zhǔn)確性優(yōu)于準(zhǔn)確性優(yōu)于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)概念：概念： 介于晚幼紅細(xì)胞到完全成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡細(xì)介于晚幼紅細(xì)胞到完全成熟紅細(xì)胞之間的過(guò)渡細(xì)胞，其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)核糖核酸（胞，其胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)核糖核酸（RNA），），經(jīng)堿性染料煌焦油藍(lán)，亞甲藍(lán)等活體染色后，嗜堿性經(jīng)堿性染料煌焦油藍(lán)，亞甲藍(lán)等活體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)色或紫色點(diǎn)狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而得名。物質(zhì)凝聚成藍(lán)色或紫色點(diǎn)
5、狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)而得名。網(wǎng)織紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞reticulocyte ,Ret 計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)RetRet形態(tài)特點(diǎn)和分型形態(tài)特點(diǎn)和分型較成熟紅細(xì)胞稍大，直徑較成熟紅細(xì)胞稍大，直徑8.08.09.5 um9.5 um絲球型，外周血中無(wú)絲球型，外周血中無(wú)破網(wǎng)型，外周血少見(jiàn)破網(wǎng)型，外周血少見(jiàn)網(wǎng)型，外周血極少見(jiàn)網(wǎng)型，外周血極少見(jiàn)點(diǎn)粒型，外周血多見(jiàn)點(diǎn)粒型，外周血多見(jiàn)檢測(cè)原理：檢測(cè)原理：1.普通光學(xué)顯微鏡法：普通光學(xué)顯微鏡法： 核蛋白體、核蛋白體、RNA + 煌焦油藍(lán)煌焦油藍(lán) 活體染色活體染色 紅細(xì)胞中的紅細(xì)胞中的藍(lán)色網(wǎng)狀、顆粒狀藍(lán)色網(wǎng)狀、顆粒狀 2.血液分析儀法：熒光染色用流式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)血液分析儀法：熒光染色用流
6、式細(xì)胞術(shù)計(jì)數(shù)手工計(jì)數(shù)法：手工計(jì)數(shù)法：米勒窺盤(pán)法（米勒窺盤(pán)法（Miller methodMiller method）B31A將將MillerMiller窺盤(pán)放在顯微鏡窺盤(pán)放在顯微鏡目鏡中目鏡中, ,通過(guò)窺盤(pán)中大小通過(guò)窺盤(pán)中大小方格間的方格間的9 9比比1 1比例關(guān)系計(jì)比例關(guān)系計(jì)算算RBCRBC數(shù)和網(wǎng)織數(shù)和網(wǎng)織RBCRBC。方法評(píng)價(jià)：方法評(píng)價(jià)：水分易蒸發(fā)，故不易涂片；水分易蒸發(fā)，故不易涂片；染色時(shí)間短，結(jié)果偏低。染色時(shí)間短，結(jié)果偏低。玻片法：玻片法：試管法：試管法：器材：器材：顯微鏡一套、試管、玻璃棒、推玻片、玻片顯微鏡一套、試管、玻璃棒、推玻片、玻片試劑：試劑： 10g/L煌焦油藍(lán)（煌焦油藍(lán)（b
7、rilliant cresyl blue) 2滴煌焦油藍(lán)滴煌焦油藍(lán)2滴全血滴全血混勻混勻/靜置靜置15-20min油鏡油鏡兼顧邊緣和尾部兼顧邊緣和尾部Ret絕對(duì)值（Ret/L)=RBC數(shù)/L Ret百分?jǐn)?shù)1000=100% 1000計(jì)數(shù)個(gè)RBC中的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)計(jì)算：計(jì)算：Miller 窺盤(pán)窺盤(pán)=100%9大方格B內(nèi)的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)小方格A內(nèi)RBC數(shù)質(zhì)量控制：質(zhì)量控制： 染料選擇：染料選擇： 新亞甲藍(lán)：新亞甲藍(lán)：WHOWHO推薦，染色好推薦，染色好 煌焦油藍(lán)：染料易附著煌焦油藍(lán)：染料易附著RBCRBC，受變性珠蛋白小體、，受變性珠蛋白小體、 HbH HbH包涵體影響
8、包涵體影響 正確辨認(rèn)正確辨認(rèn)RetRet：凡含凡含2 2個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的RBCRBC RetRet計(jì)數(shù)方法：計(jì)數(shù)方法： Miller Miller窺盤(pán)：縮小分布誤差，降低勞動(dòng)強(qiáng)度窺盤(pán)：縮小分布誤差，降低勞動(dòng)強(qiáng)度 RBCRBC計(jì)數(shù)量：計(jì)數(shù)量： Ret Ret越越多多，所需計(jì)數(shù)的，所需計(jì)數(shù)的RBCRBC越越少少 報(bào)告方式：報(bào)告方式：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)：網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)：X.X%網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)：網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)：XX109/L參考區(qū)間：參考區(qū)間：1.Ret1.Ret百分?jǐn)?shù)：百分?jǐn)?shù)： 成人和兒童成人和兒童: 0.5%: 0.5%1.5%1.5% 新生兒新生兒: 2.0%: 2.0%6.
9、0%6.0%2.Ret2.Ret絕對(duì)數(shù)：成人和兒童絕對(duì)數(shù)：成人和兒童 (24(2484)84)10109 9/L/L 24紅細(xì)胞沉降率，血細(xì)胞比容測(cè)定紅細(xì)胞沉降率，血細(xì)胞比容測(cè)定魏氏法魏氏法 Westergren原理原理: 將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于特制血沉管將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于特制血沉管中，直立于特制血沉架上，中，直立于特制血沉架上，1h后讀取紅細(xì)胞下沉后讀取紅細(xì)胞下沉后血漿的高度。后血漿的高度。器材：器材：Westergren血沉管、血沉架、吸管、試管血沉管、血沉架、吸管、試管標(biāo)本：標(biāo)本：109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝全血枸櫞酸鈉抗凝全血紅細(xì)胞沉降率紅細(xì)胞沉降率 ESR操作：
10、操作： 抗凝劑抗凝劑0.4ml+血血1.6ml（1：4） 吸入血沉管至吸入血沉管至0刻度刻度 直立血沉管直立血沉管 1h結(jié)果觀察結(jié)果觀察混勻混勻601min，RBC界面上界面上1mm處的透明血漿層處的透明血漿層全自動(dòng)血沉分析法全自動(dòng)血沉分析法原理：原理： 將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于特制血沉管中，直將一定量的枸櫞酸鈉抗凝全血置于特制血沉管中，直立于儀器中，立于儀器中，紅外線自動(dòng)檢測(cè)血液的不同液面高度，換算成紅外線自動(dòng)檢測(cè)血液的不同液面高度，換算成與魏氏法相關(guān)的值，可選擇與魏氏法相關(guān)的值，可選擇30min30min或或60min60min檢測(cè)時(shí)間檢測(cè)時(shí)間, , 讀取儀讀取儀器上的數(shù)據(jù)。器上的數(shù)
11、據(jù)。器材：器材：靜脈采血一套，靜脈采血一套，血沉儀、血沉管、吸管、試管血沉儀、血沉管、吸管、試管 ，標(biāo)本：標(biāo)本：109mmol/L109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝全血枸櫞酸鈉抗凝全血 操作：操作： 抗凝劑抗凝劑0.4ml+血血1.6ml（1：4） 倒入血沉管至刻度處倒入血沉管至刻度處 直立血沉管于儀器中直立血沉管于儀器中 0.5h結(jié)果觀察結(jié)果觀察混勻混勻質(zhì)量保證：質(zhì)量保證：魏氏法注意事項(xiàng)魏氏法注意事項(xiàng): : 抗凝劑，血沉管，溫度，時(shí)間，讀數(shù)抗凝劑，血沉管，溫度，時(shí)間，讀數(shù)自動(dòng)血沉儀：穩(wěn)定的全血質(zhì)控品自動(dòng)血沉儀：穩(wěn)定的全血質(zhì)控品影響因素：血漿，紅細(xì)胞，感染，藥物等影響因素：血漿，紅細(xì)胞，感染，藥物
12、等參考范圍：男性參考范圍：男性0 0 15mm/h 15mm/h，女性，女性0 0 20mm/h 20mm/h報(bào)告方式報(bào)告方式: XX : XX mm/hmm/h血細(xì)胞比容（血細(xì)胞比容（hematocrit,HCT）溫氏法原理：溫氏法原理： 將定量的抗凝血液在一定的速度和時(shí)間離心后，將定量的抗凝血液在一定的速度和時(shí)間離心后，血液中的各種不同成分互相分離，計(jì)算壓實(shí)紅細(xì)胞血液中的各種不同成分互相分離，計(jì)算壓實(shí)紅細(xì)胞占全血的比值。占全血的比值。器材：溫氏管，離心機(jī)器材：溫氏管，離心機(jī)標(biāo)本：標(biāo)本：EDTA-K2或肝素或肝素抗凝全血抗凝全血溫氏法：溫氏法：血細(xì)胞比容結(jié)果讀數(shù)：血細(xì)胞比容結(jié)果讀數(shù)：33紅細(xì)
13、胞形態(tài)，嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞紅細(xì)胞形態(tài)，嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞正常形態(tài)紅細(xì)胞：正常形態(tài)紅細(xì)胞：雙凹圓盤(pán)形雙凹圓盤(pán)形大小均一，大小均一，7.2um7.2um淺染區(qū)為直徑淺染區(qū)為直徑1/31/3小紅細(xì)胞小紅細(xì)胞：直徑：直徑6um10um10um巨紅細(xì)胞巨紅細(xì)胞：直徑：直徑15um15um紅細(xì)胞大小不均：紅細(xì)胞大小不均：直徑相差一倍以上直徑相差一倍以上紅細(xì)胞大小不均紅細(xì)胞大小不均anisocytosis球形紅細(xì)胞球形紅細(xì)胞spherocytes形似小球形似小球直徑直徑6um2.6um2.6um淡染區(qū)消失淡染區(qū)消失口形紅細(xì)胞口形紅細(xì)胞Stomatocyte (Mouth Cell)淡染區(qū)扁平淡染區(qū)扁平形如魚(yú)口形形如
14、魚(yú)口形少量增多：肝硬化、輕型地貧、血型不合輸血、鉛中毒、傳單、惡性腫瘤及酒精中毒等 遺傳口形紅細(xì)胞增多癥10%鐮形紅細(xì)胞鐮形紅細(xì)胞Drepanocyte Drepanocyte 形如鐮刀形如鐮刀鐮狀細(xì)胞性貧血鐮狀細(xì)胞性貧血 靶形紅細(xì)胞靶形紅細(xì)胞 target cell形如射擊之靶。形如射擊之靶。比正常紅細(xì)胞薄比正常紅細(xì)胞薄珠蛋白生成障礙性貧血珠蛋白生成障礙性貧血棘形紅細(xì)胞棘形紅細(xì)胞紅細(xì)胞表面針尖突起，間距不規(guī)則，突起長(zhǎng)寬不紅細(xì)胞表面針尖突起，間距不規(guī)則，突起長(zhǎng)寬不一，尾端略圓一，尾端略圓吸收不良反應(yīng)、肝病、脾切除后、吸收不良反應(yīng)、肝病、脾切除后、PKPK缺乏性貧血、缺乏性貧血、先天性缺乏先天性
15、缺乏-脂蛋白血癥脂蛋白血癥 ，酒精中毒性肝病，尿，酒精中毒性肝病，尿毒癥毒癥皺縮皺縮RBCRBC棘形棘形RBCRBC淚滴形紅細(xì)胞淚滴形紅細(xì)胞骨髓纖維化骨髓纖維化鋸齒狀紅細(xì)胞鋸齒狀紅細(xì)胞 細(xì)胞周邊呈鋸齒狀，突起均勻排列，細(xì)胞周邊呈鋸齒狀，突起均勻排列，大小一致，外端較尖大小一致，外端較尖尿毒癥尿毒癥裂裂紅紅細(xì)細(xì)胞胞盔盔形形紅紅細(xì)細(xì)胞胞緡錢(qián)紅細(xì)胞緡錢(qián)紅細(xì)胞Rouleaux Formation 異常高分子蛋白異常高分子蛋白見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥以及免疫球蛋白增蛋白血癥以及免疫球蛋白增多癥多癥紅細(xì)胞自凝紅細(xì)胞自凝red cell agglutination高色素紅細(xì)胞高色
16、素紅細(xì)胞生理淺染區(qū)消失，胞體大生理淺染區(qū)消失，胞體大低色素紅細(xì)胞低色素紅細(xì)胞低色素紅細(xì)胞低色素紅細(xì)胞hypochromic erythrocyte淺染區(qū)擴(kuò)大淺染區(qū)擴(kuò)大嗜多色性紅細(xì)胞嗜多色性紅細(xì)胞未完全成熟紅細(xì)胞，胞體較大未完全成熟紅細(xì)胞，胞體較大內(nèi)含嗜堿性物質(zhì)內(nèi)含嗜堿性物質(zhì)RNA提示骨髓造紅細(xì)胞功能活躍提示骨髓造紅細(xì)胞功能活躍 見(jiàn)于增生性貧血見(jiàn)于增生性貧血，溶貧溶貧豪焦豪焦小體小體Howell-Jolly Bodies 核殘余物核殘余物見(jiàn)于巨幼貧見(jiàn)于巨幼貧脾切除脾切除，無(wú)脾癥無(wú)脾癥卡波氏環(huán)卡波氏環(huán)Cabot ringCabot ring 淡紫紅色環(huán)形或淡紫紅色環(huán)形或8 8字形字形 環(huán)狀物環(huán)狀物
17、 核的殘余和豪周氏小核的殘余和豪周氏小 體變種體變種退變細(xì)胞中凝集和變性退變細(xì)胞中凝集和變性 的蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì) 見(jiàn)于鉛中毒、溶貧、白見(jiàn)于鉛中毒、溶貧、白 血病、惡性瘧疾等。血病、惡性瘧疾等。有核有核RBCRBC 提示紅細(xì)胞成熟紊亂，是嚴(yán)重疾病的提示紅細(xì)胞成熟紊亂，是嚴(yán)重疾病的反應(yīng)反應(yīng) 各種溶貧、巨幼貧、紅細(xì)胞酶缺乏性各種溶貧、巨幼貧、紅細(xì)胞酶缺乏性貧血、貧血、Hb病以及極度貧血病以及極度貧血 急慢性白血病、急慢性白血病、骨髓增生異常綜合征骨髓增生異常綜合征、骨髓纖維化以及其他一些骨髓增殖性疾骨髓纖維化以及其他一些骨髓增殖性疾病和真紅、血小板增多癥。病和真紅、血小板增多癥。 晚期腫瘤反應(yīng)及臨床危象反應(yīng)晚期腫瘤反應(yīng)及臨床危象反應(yīng) 瑞氏染色瑞氏染色，成熟紅細(xì)胞或幼紅細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍(lán)色點(diǎn)狀物，成熟紅細(xì)胞或幼紅細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)形態(tài)不一的藍(lán)色點(diǎn)狀物，即核糖核酸（即核糖核酸（RNA），屬于未完全成熟紅細(xì)胞，其顆粒大小不一、多少不等。），屬于未完全成熟紅細(xì)胞，其顆粒大小不一、多少不等。 多見(jiàn)于重金屬中毒，常作為鉛中毒診斷篩選指標(biāo)。多見(jiàn)于重金屬中毒，常作為鉛中毒診斷篩選指標(biāo)。嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞嗜堿點(diǎn)彩紅細(xì)胞未完全成熟紅細(xì)胞未完全成熟紅細(xì)胞正常人偶見(jiàn)正常人偶見(jiàn)增多見(jiàn)于鉛，增多見(jiàn)于鉛，鉍鉍，汞中毒汞中毒
臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)學(xué)：實(shí)驗(yàn)二血紅蛋白測(cè)定、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血沉測(cè)定
