《生物化學實驗》教學大綱（06版）

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1、《生物化學實驗》教學大綱（06版） 一、課程基本信息 1. 課程中文名稱：生物化學實驗 2. 課程類別：必修 3. 適用專業(yè)：生物科學/園林 4. 課程地位：專業(yè)基礎課 5. 總學時：36學時 6. 總學分： 7. 先修課程：《無機及分析化學》和《有機化學》 二、課程目標 《生物化學實驗》是生物學科本科生的一門專業(yè)基礎課。在當今有了驚人發(fā)展的生物學科中，生物化學是最活躍的分支學科之一。促使生物化學迅速發(fā)展的重要因素之一是新技術的開發(fā)。隨著生物化學的實驗方法日趨專門化和復雜化，牽涉到生物化學實驗工作的領域也越來越多。生物化學實驗已經成為生物技術領域內最基本的實驗操作技能

2、。 通過本課程的學習使學生了解“生物大分子的分離和純化方法，糖、蛋白質、核酸及主要次生代謝產物的定性、定量和有關生物化學性質的分析技術，酶活性測定、動力學分析等”知識和技能，為專業(yè)課的學習和專業(yè)技能的培訓奠定良好的基礎，并通過嚴格的實驗要求和管理，誘導和培養(yǎng)學生將所學的知識和技能用于今后的社會實踐及創(chuàng)新的思維方法和動手能力，培養(yǎng)嚴謹?shù)?、實事求是作風和與人合作精神，使他們成為團結合作，務實、創(chuàng)新的專門人才。 三、課程內容 序號 實驗項目名稱 學時 實驗 性質 實驗 類型 主要設備 配置 1 血糖的斐林法測定 3 必開 設計 分光光度計 2 種子粗脂肪的提

3、取 3 選開 設計 索氏提取器 3 氨基酸分離——雙向層析法 3 必開 驗證 層析缸 4 樣品中總氮量的測定——微量凱氏定氮法 3 必開 設計 凱氏定氮蒸餾器 5 蛋白質的性質——蛋白質及氨基酸的呈色反應 3 選開 驗證 試管 6 蛋白質的性質——蛋白質的沉淀反應 3 選開 驗證 試管 7 血清蛋白質醋酸纖維薄膜電泳 3 必開 驗證 醋酸纖維薄膜、層析缸 8 酶的特性 3 必開 驗證 水浴、試管 9 植物組織中過氧化氫酶活力測定 3 選開 設計 酸式滴定管 10 底物濃度對酶促反應速度的影響——米氏

4、常數(shù)的測定 3 必開 驗證 堿式滴定管 11 酶的提取、分離、純化及其活力測定 3 選開 綜合 分光光度計 12 核酸濃度測定----紫外線（UV）吸收法 3 必開 設計 紫外分光光度計 13 核酸的增色效應 3 選開 設計 水浴、紫外分光光度計 14 氨基移換反應——血液中轉氨酶活力的測定 3 必開 設計 分光光度計 15 維生素C含量的測定 3 必開 設計 紫外分光光度計 16 實驗設計及操作考試 3 必開 綜合 實驗性質：必開/選開；實驗類型：驗證、設計、綜合、研究。 四、教學方法 進入本課程的學

5、生必需嚴格遵守實驗室規(guī)則和紀律，認真對待每一次實驗，做好實驗課前的預習，完成預習報告；仔細推敲、認真操作、細心觀察，真實記錄實驗結果并完成實驗報告。鼓勵學生對已有實驗提出質疑，按照自己的思路設計實驗或參與實驗教改，以活躍氣氛，啟迪思維。 將利用黑板和多媒體教學手段講解實驗的基本原理、方法及有關儀器的使用方法。 五、課程考核（黑體小四號） 考查 六、教材與參考書（黑體小四號） 1、教材： 王秀奇、秦淑媛等編 《基礎生物化學實驗》高等教育出版社，2003.6 2、主要參考書： （1）戴玉錦主編 《生物化學》（實驗部分）高等教育出版社，1992.10 （2）趙永芳主編 《生物化學技

6、術原理及應用》科學出版社，2002.7 七、其它 序號 實驗項目、實驗目的、實驗要求和實驗內容 1 實驗項目 血糖的斐林法測定 實驗目的 掌握Folin-Wu法測定血糖含量的原理和方法。 實驗要求 測定血糖含量 實驗內容 無蛋白血濾液的制備；血糖的測定 2 實驗項目 種子粗脂肪的提取 實驗目的 了解鑒別種子品質的指標及方法 實驗要求 掌握測定脂肪的含量的方法 實驗內容 用索氏提取瓶提取種子中的脂肪；計算含量 3 實驗項目 氨基酸分離——雙向層析法 實驗目的 掌握分配層析分離技術的原理。 實驗要求 用雙向層析法分析混合氨基酸樣品的成分。

7、實驗內容 以濾紙及其結合水作為固定相，以有機溶劑作為流動相，分離混合氨基酸樣品，并鑒定其成分。 4 實驗項目 樣品中總氮量的測定 實驗目的 掌握凱氏定氮儀的使用方法及凱氏定氮法測定樣品總氮量的原理。 實驗要求 以魚粉為樣品，用凱氏定氮法測定總氮量。 實驗內容 用魚粉作實驗樣品，濃H2SO4消化魚粉，將有機氮轉化成無機氮；用凱氏定氮儀測出該樣品中的總氮量。 5 實驗項目 蛋白質的性質——蛋白質及氨基酸的呈色反應 實驗目的 了解蛋白質和某些氨基酸的呈色反應原理 實驗要求 掌握幾種鑒定蛋白質和氨基酸的方法。 實驗內容 雙縮脲反應；茚三酮反應；黃色反應；考馬斯亮藍

8、反應 6 實驗項目 蛋白質的性質——蛋白質的沉淀反應 實驗目的 了解蛋白質變性與沉淀的關系 實驗要求 掌握沉淀蛋白質的幾種方法 實驗內容 蛋白質的鹽析；重金屬離子沉淀蛋白質；某些有機酸沉淀蛋白質；有機溶劑沉淀蛋白質；乙醇引起的變性與沉淀 7 實驗項目 血清蛋白質醋酸纖維薄膜電泳 實驗目的 學習醋酸纖維薄膜電泳的操作技術，了解電泳技術的基本原理 實驗要求 掌握測定人血清中各種蛋白質的相對含量的方法。 實驗內容 儀器與薄膜的準備；電泳；定量 8 實驗項目 酶的特性 實驗目的 了解酶的特性 實驗要求 了解影響酶活力的因素 實驗內容 酶的專一性；溫

9、度對酶活力的影響；PH對酶活力的影響；酶的活化及抑制 9 實驗項目 植物組織中過氧化氫酶活力測定 實驗目的 了解過氧化氫酶在生物體中的作用原理 實驗要求 掌握酶活力測定的方法 實驗內容 過氧化氫酶活力測定 10 實驗項目 底物濃度對酶促反應速度的影響——米氏常數(shù)的測定 實驗目的 了解底物濃度對酶促反應的影響。 實驗要求 掌握測定米氏常數(shù)Km的原理和方法。 實驗內容 酪蛋白在不同情況下反應速度 11 實驗項目 酶的提取、分離、純化及其活力測定 實驗目的 了解酶的制備過程以及如何保證酶活力 實驗要求 掌握酶制備每一步所需基本實驗技術，了解其原理。

10、 實驗內容 酶的提??；硫酸銨分級沉淀；蛋白質含量的測定；酶活性的測定 12 實驗項目 核酸濃度測定----紫外線（UV）吸收法 實驗目的 了解紫外線（UV）測定核酸濃度的原理；進一步熟悉紫外分光光度計的使用方法。 實驗要求 以RNA或DNA干粉為材料，測定核酸濃度 實驗內容 檢測樣品在260nm波長處的A值。 13 實驗項目 核酸的增色效應 實驗目的 驗證核酸的紫外吸收特性及增色效應 實驗要求 測出天然核酸及變性核酸的吸光值 實驗內容 使DNA變性，分別測天然DNA和變性DNA的吸光值 14 實驗項目 氨基移換反應——血液中轉氨酶活力的測定 實驗目

11、的 驗證氨基轉移反應——谷丙轉氨酶作用原理 實驗要求 掌握酶活力測定的方法。 實驗內容 標準曲線的繪制；酶活力的測定；計算酶活力 15 實驗項目 維生素C的定量測定 實驗目的 掌握樣品中VC的測定原理及方法。 實驗要求 用分光光度法測定樣品中VC的含量。 實驗內容 以桔皮作實驗樣品或以柑桔作實驗樣品，直接榨汁，離心后的清液，過濾后作樣品液。用分光光度法測定樣品液中VC的含量。 16 實驗項目 實驗設計及操作考試 實驗目的 作為學生本實驗課成績評定的依據(jù)。 實驗要求 數(shù)據(jù)準確度高，平行組數(shù)據(jù)之間相對平均偏差在1%以內。 實驗內容 完成指定實驗樣品指定實驗項目的測定。 2006年2月8日 6