生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》

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1、實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)（1）一蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng) 《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》 教學(xué)方案 湖南文理學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院學(xué)院 生化與分子生物學(xué)教研組 授課題目：蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)（1———蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)（3W7 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求: 1、了解蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位及主要連接方式。 2、了解某些蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)原理。 3、學(xué)習(xí)幾種常見的鑒定蛋白質(zhì)和氨基酸的方法。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配： 1、實(shí)驗(yàn)原理講解： 12 分鐘 雙縮月尿反應(yīng)的原理 前二酮反應(yīng)的原理 黃色反應(yīng)的原理 坂

2、口反應(yīng)的原理 考馬斯亮藍(lán)反應(yīng)的原埋 2、實(shí)驗(yàn)試劑與器材 2 分鐘 3、實(shí)驗(yàn)步驟講解： 10 分鐘 4、總結(jié)。 2 分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)： 1、雙縮月尿反應(yīng)的原理。 2、蛋白質(zhì)、氨基酸與水合苛三酮的顯色反應(yīng)。 教學(xué)方法： 采用啟發(fā)式教學(xué)，結(jié)合理論，對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行分析并給于適當(dāng)示范。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體…等）采用板書等手段進(jìn)行教學(xué)。 使用的教材及參考資料： 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義。 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年。 思考題： 1、如果蛋白質(zhì)水解后雙縮月尿反應(yīng)呈陰性時(shí)，可以對(duì)水解反應(yīng)

3、程度作出什么樣的推論? 2、苛三酮反應(yīng)的陽(yáng)性結(jié)果為何顏色？能否用苛三酮反應(yīng)可靠鑒定蛋白質(zhì)的存在？ 3、考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理是什么？ 4、如何正確使用分光光度計(jì)？ 5、測(cè)定蛋白質(zhì)含量還有哪些方法，測(cè)定原理有哪些不同？ 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 1、結(jié)合理論內(nèi)容講述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)（2）一蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定和沉淀反應(yīng) 授課題目：蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)（2———蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定和沉淀反應(yīng)（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)

4、、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求: 1、了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)。 2、學(xué)習(xí)測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的一種方法。 3、加深對(duì)蛋白質(zhì)膠體溶液穩(wěn)定因素的認(rèn)識(shí)。 4、了解沉淀蛋白質(zhì)的幾種方法及其實(shí)用意義。 5、了解蛋白質(zhì)變性與沉淀的關(guān)系。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配: 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：10分鐘 蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的概念 測(cè)蛋白質(zhì)溶解度最低時(shí)的溶液pH值為其等電點(diǎn) 穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素 蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)的類型 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：10分鐘 蛋白質(zhì)的鹽析 重金屬離子沉淀蛋白質(zhì) 某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì) 有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì) 乙醇引起的變性與沉淀 3、總

5、結(jié)。2分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn): 1、穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素。 2、蛋白質(zhì)變性與沉淀的關(guān)系。 教學(xué)方法: 采用啟發(fā)式教學(xué)，結(jié)合理論，對(duì)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行分析并給于適當(dāng)示范。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體…等）: 板書，PPT 使用的教材及參考資料： 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年 思考題： 1、穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水膠體顆粒的因素有哪些？ 2、蛋白質(zhì)變性與沉淀的關(guān)系。 3、解釋蛋白質(zhì)兩性反應(yīng)中顏色及沉淀變化的原因。 4、該方法測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的原理是什么？ 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題

6、、改進(jìn)措施等） 1、結(jié)合理論內(nèi)容講述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，培養(yǎng)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的思考。 實(shí)驗(yàn)三牛乳中蛋白質(zhì)的提取與鑒定 授課題目：牛乳中蛋白質(zhì)的提取與鑒定（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 1、學(xué)習(xí)從牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：8分鐘 蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)pH溶液中溶解度降底。根據(jù)這個(gè)原理，將牛乳的pH調(diào)整至4.8,即酪蛋白的等電點(diǎn)時(shí)，酪蛋白即沉淀出來。用乙醇除去酪蛋白沉淀中不溶于水的脂肪，得到純的酪蛋白 所得酪蛋白的定性鑒定 2、實(shí)驗(yàn)條件及步

7、驟講解：7分鐘 酪蛋白的制備 酪蛋白的性質(zhì)鑒定 乳清中可凝固性蛋白質(zhì)的鑒定教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)：酪蛋白的制備。 教學(xué)方法： 1、結(jié)合理論實(shí)際，深入淺出。 2、實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體？?等） 板書，PPT。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年 思考題： 1、牛乳中制備酪蛋白的原理和方法。 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在問題、改進(jìn)措施等） 1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行講述，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)

8、的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)四氨基酸的分離鑒定一一紙層析法 授課題目：氨基酸的分離鑒定一一紙層析法（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 通過氨基酸的分離，學(xué)習(xí)紙層析法的基本原理及操作方法。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理的說明10分鐘 紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法 層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成 物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值（比移）來表示 在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù)。Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)、層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān)。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 1、擴(kuò)展劑

9、的制備。 2、氨基酸樣品的點(diǎn)樣。 教學(xué)方法 理論與實(shí)際相結(jié)合，深入淺出，培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)課程知識(shí)。實(shí)驗(yàn)過程中向?qū)W生提 出問題，讓學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中觀察思考，提高學(xué)生的分析問題，解決問題的能力。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體一等） 板書，PPTT,示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年 思考題： 1、何謂Rf值？影響Rf值的主要因素是什么？ 2、層析缸中平衡溶劑的作用是什么？ 3、濾紙為什么要在層析缸中預(yù)先懸空密封飽和30min? 4、展開時(shí)為什么要調(diào)節(jié)濾紙使溶劑前沿線平行于點(diǎn)樣

10、線？ 5、實(shí)驗(yàn)結(jié)果為什么有時(shí)會(huì)產(chǎn)生拖尾、相鄰氨基酸分不開等異常現(xiàn)象？本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 在實(shí)驗(yàn)中向?qū)W生提問題，可增強(qiáng)學(xué)生的好奇心，對(duì)于理解實(shí)驗(yàn)原理很有幫助。 實(shí)驗(yàn)五酶的特性（設(shè)計(jì)型實(shí)驗(yàn)） 授課題目：酶的特性（設(shè)計(jì)型實(shí)驗(yàn)）（6學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 1、加深對(duì)酶的性質(zhì)的認(rèn)識(shí)：本實(shí)驗(yàn)由溫度對(duì)酶活力的影響；PH對(duì)酶活力的影響；酶的激活 劑及抑制；酶的專一性4組實(shí)驗(yàn)組成。 2、學(xué)會(huì)設(shè)計(jì)并實(shí)施影響酶催化活性因素的實(shí)驗(yàn)方案。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：10分鐘 酶的催化作用

11、受溫度的影響。在最適溫度下，酶的反應(yīng)速度最高。大多數(shù)動(dòng)物酶的最適溫度為37-40C,植物酶的最適溫度為50-60C 酶的活力受環(huán)境pH的影響極為顯著。不同酶的最適pH值不同 酶的活性受活化劑或抑制劑的影響 酶具有高度的專一性，淀粉和蔗糖無還原性 2、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案講解：5分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 1、影響酶催化活性的因素。 2、實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)及原理方法選擇。 教學(xué)方法：結(jié)合理論實(shí)際，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體？？等） 多媒體，板書，畫圖，示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀

12、奇主編，第二版，2003年 思考題： 1、實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)及選擇的原理和依據(jù) 2、進(jìn)行設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)與體會(huì) 3、什么是酶的最適溫度及其應(yīng)用意義？ 4、什么是酶反應(yīng)的最適pH?對(duì)酶活性有什么影響？ 5、什么是酶的活化劑？ 6、什么是酶的抑制劑？與變性劑有何區(qū)別？ 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 1、學(xué)生實(shí)驗(yàn)結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行自行設(shè)計(jì)，講述實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，效果較好。 2、學(xué)生自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，探討影響酶催化活性的因素，培養(yǎng)學(xué)生分析和解決實(shí)際問題的 能力，提高學(xué)生的主動(dòng)性和創(chuàng)造性，得到能力的培養(yǎng)。 實(shí)驗(yàn)六酵母核糖核酸的分離及組分鑒定 授課題目：酵母

13、核糖核酸的分離及組分鑒定（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)專業(yè) 授課教師：教學(xué)目標(biāo)及基本要求： 了解核酸的組分，并掌握鑒定核酸組分的方法。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配： 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：10分鐘 酵母核酸中RN蛤量較多。RNA可溶于堿性溶液，在堿提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此即得到RNA勺粗制品。核糖核酸含有核糖、喋吟堿、喀咤堿和磷酸各組分。加硫酸煮沸可使其水解，從水解液中可以測(cè)出上述組分的存在。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 3、總結(jié)2分鐘教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)： 核酸組分鑒定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 教學(xué)方法： 理論結(jié)合實(shí)踐，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給予示教。 教學(xué)手段：

14、 板書，PPTT,示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年思考題： 1、如何得到高產(chǎn)量RNA的粗制品？ 2、現(xiàn)有三瓶未知溶液，已知它們分別為蛋白質(zhì)、糖和RNA采用什么試劑和方法鑒定？（自 行設(shè)計(jì)簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)）本單元教學(xué)總結(jié)： 對(duì)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)預(yù)習(xí)、實(shí)驗(yàn)紀(jì)律、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)整理等環(huán)節(jié)進(jìn)行督導(dǎo)，使學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，提高實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)七紫外分光光度法測(cè)定核酸的含量 授課題目：紫外分光光度法測(cè)定核酸的含量（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要

15、求 1、了解紫外分光光度計(jì)的基本原理和使用方法。 2、學(xué)習(xí)用紫外分光光度法測(cè)定核酸含量的原理和操作方法。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：10分鐘 核酸、核甘酸及其衍生物都具有共軻雙鍵系統(tǒng)，能吸收紫外光。RN用口DNA勺紫外吸 收高山|在A260nm波長(zhǎng)處。一般在A260波長(zhǎng)下，每mL含lugRNA^液的光吸收值為0.020。故測(cè)定未知濃度RNA或DNA^y夜A260nm波長(zhǎng)的光吸收值即可計(jì)算出其中核酸的含量。此法 操作簡(jiǎn)便。若樣品內(nèi)混雜有大量的核甘酸或蛋白質(zhì)等能吸收紫外光的物質(zhì)，則測(cè)定誤差較大，故應(yīng)設(shè)法預(yù)除去。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 紫外分光光度計(jì)的使用教學(xué)重

16、點(diǎn)及難點(diǎn) 1、核酸的制備 2、紫外分光光度計(jì)的使用教學(xué)方法： 理論結(jié)合實(shí)踐，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給予示教。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體？?等）板書，PPT,示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年思考題或作業(yè)： 1、紫外分光光度計(jì)的使用方法和操作要點(diǎn)？ 2、若樣品中含有蛋白質(zhì)和核甘酸等雜質(zhì)，如何排除干擾? 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 1、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)八維生素C的定量測(cè)定 授課題目

17、：維生素C的定量測(cè)定（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 1、學(xué)習(xí)維生素C定量測(cè)定法的原理和方法。 2、進(jìn)一步熟悉、掌握微量商定法的基本操作技術(shù)。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：8分鐘 測(cè)定維生素C（抗壞血酸）的化學(xué)方法，一般是根據(jù)它的還原性。本實(shí)驗(yàn)即利用維生素 C的這一性質(zhì)，使其與2,6-二氯酚靛酚作用。2,6-二氯酚靛酚鈉鹽的水溶液呈藍(lán)色，在酸性 環(huán)境中為玫瑰色，當(dāng)其被還原時(shí)，則脫色。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 1、含維生素C的樣品提取液的制備 2、熟練掌握滴定操作教學(xué)方法 理論結(jié)合實(shí)踐，深入淺

18、出。實(shí)驗(yàn)操作過程給予示教。 教學(xué)手段（幻燈、多媒體等）板書，PP1示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年思考題： 試述本實(shí)驗(yàn)介紹的2,6-二氯酚靛酚滴定法的優(yōu)缺點(diǎn)。 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在問題、改進(jìn)措施等） 1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行講述，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)九血糖的定量測(cè)定一GOD-PA法 授課題目：血糖的定量測(cè)定一GOD-PA法（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目

19、標(biāo)及基本要求 學(xué)習(xí)用GOD-PA法測(cè)定血糖含量。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：8分鐘 動(dòng)物血液中的糖主要是葡萄糖，正常情況下，其含量較恒定。健康家兔的血糖水平 為80-120mg/dL。GOD-PA法，即過氧化物酶-抗過氧化物酶法是近幾年臨床血糖定量測(cè)定 普遍采用的方法。該法測(cè)定血糖依據(jù)的酶反應(yīng)為： 葡萄糖+O2+h2o—曾暨￡_GOD2t葡萄糖酸+H2O2 2H2。2+4-氨基安替比林十酚一爐X暨人心t醍亞胺+4H2。 醍亞胺在A480nm~A550nm波長(zhǎng)有最大吸收，所產(chǎn)生顏色的深淺與血清中葡萄糖的量成 正比。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn)

20、： 樣品中葡萄糖濃度的計(jì)算方法。 教學(xué)方法： 1、結(jié)合理論實(shí)際，深入淺出。 2、實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教。 教學(xué)手段（掛圖、幻燈、多媒體？?等）板書，PPT,示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年 思考題： 1、制取樣品時(shí)應(yīng)主要什么？ 2、體液血糖測(cè)定有哪些方法 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在問題、改進(jìn)措施等） 1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行講述，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)十DNA的瓊脂糖凝膠電泳 授課

21、題目：DNA勺瓊脂糖凝膠電泳（3學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科、農(nóng)學(xué)、動(dòng)科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 1、了解瓊脂糖凝膠電泳的原理和使用范圍。 2、了解瓊脂糖凝膠電泳的操作技術(shù)。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：10分鐘 DNA片斷瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質(zhì)的電泳原理基本相同，DNA分子在高于其 等電點(diǎn)的pH溶液中帶負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA分子在電場(chǎng)中通過介質(zhì)而泳動(dòng)， 除電荷效應(yīng)外，凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng)，與分子大小及構(gòu)想有關(guān)。對(duì)于線形DNA分子， 其電場(chǎng)中的遷移率與其分子量的對(duì)數(shù)值成反比。 在凝膠中加入少量澳化乙錠，其分子可插入DNA的堿基之間

22、，形成一種光絡(luò)合物，在254~365nm波長(zhǎng)紫外光照射下，呈現(xiàn)桔紅色的熒光，因此可對(duì)分離的DNA進(jìn)行檢測(cè)。 電泳時(shí)以澳酚藍(lán)及二甲苯氟（藍(lán)）作為雙色電泳指示劑。其目的有：①增大樣品密度，確保DNA均勻進(jìn)入樣品孔內(nèi)；②使樣品呈現(xiàn)顏色，了解樣品泳動(dòng)情況，使操作更為便利；③以0.5XTBE做電泳液時(shí)澳酚藍(lán)的泳動(dòng)率約與長(zhǎng)300bp的雙鏈DNA相同，二甲苯氟（藍(lán)） 則與4kb的DNA相同。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 瓊脂糖凝膠的制備樣品配制與加樣電泳 觀察和拍照 3、凝膠成像系統(tǒng)的使用2分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 1、利用電泳方法分離核酸的原理。 2、如何使用電泳儀和水平式電泳槽。 3、凝膠

23、的制備和加樣操作。 教學(xué)方法 結(jié)合理論實(shí)際，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給于示教和個(gè)別指導(dǎo)。 教學(xué)手段（多媒體、錄像等） PPT,錄像，示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年思考題： 1、DNA在電場(chǎng)中的遷移率取決于哪些因素？ 2、瓊脂糖凝膠有哪些注意事項(xiàng)？ 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 首先讓學(xué)生觀看錄像，要求學(xué)生注意電泳技術(shù)的基本原理和基本操作。在此基礎(chǔ)上，學(xué)生進(jìn) 入實(shí)驗(yàn)操作階段。 實(shí)驗(yàn)十一蛋白質(zhì)的透析 授課題目：蛋白質(zhì)的透析（3學(xué)時(shí)） 授課

24、對(duì)象：生科專業(yè) 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 學(xué)習(xí)透析的基本原理和操作教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、實(shí)驗(yàn)原理講解：3分鐘 蛋白質(zhì)是大分子物質(zhì)，它不能透過透析膜而小分子物質(zhì)可以自由透過。在分離提純蛋白質(zhì)的過程中，常利用透析的方法使蛋白質(zhì)與其中夾雜的小分子物質(zhì)分開。 2、實(shí)驗(yàn)操作講解：5分鐘 用蛋白質(zhì)溶液作雙縮月尿反應(yīng)向火棉膠制成的透析管中裝人10~15mL蛋白質(zhì)溶液并放在盛有蒸儲(chǔ)水的燒杯中檢查氯離子的存在。做雙縮月尿反應(yīng)，檢查是否有蛋白質(zhì)存在。不斷更換燒杯中的蒸儲(chǔ)水以加速透析過程。 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 火棉膠制成透析管 教學(xué)方法 理論結(jié)合實(shí)踐，深入淺出。實(shí)驗(yàn)操作過程給予示教。

25、 教學(xué)手段（幻燈、多媒體等）板書，示教。 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年思考題： 蛋白質(zhì)透析的操作要點(diǎn)及主要事項(xiàng)。 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在問題、改進(jìn)措施等） 1、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容結(jié)合理論內(nèi)容進(jìn)行講述，效果較好。 2、強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。 實(shí)驗(yàn)十二SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離細(xì)菌蛋白質(zhì) 授課題目：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離細(xì)菌蛋白質(zhì)（12學(xué)時(shí)） 授課對(duì)象：生科 授課教師： 教學(xué)目標(biāo)及基本要求 1、掌握不連續(xù)聚丙烯酰

26、胺凝膠電泳的原理和實(shí)驗(yàn)方法。 2、能夠熟練使用電泳儀和垂直板式電泳槽進(jìn)行凝膠電泳操作。 教學(xué)內(nèi)容提要及時(shí)間分配 1、凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的原理。5分鐘 2、聚丙烯酰胺凝膠電泳的組成成份。3分鐘 3、影響電泳分離效果的因素。2分鐘 4、實(shí)驗(yàn)條件及步驟。10分鐘 5、儀器的使用方法。4分鐘 6、具體實(shí)驗(yàn)過程包括：凝膠貯液和工作液的配制、電泳裝置的安裝、制分離膠和濃縮膠、 樣品的制備、加樣、電泳、取膠、染色、固定、背景脫色。3分鐘 7、評(píng)價(jià)并總結(jié)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1分鐘 教學(xué)重點(diǎn)及難點(diǎn) 1、利用電泳方法分離蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子物質(zhì)的原理。 2、如何使用電泳儀和垂直板式電泳槽。 3

27、、分離膠和濃縮膠的制備及灌膠和加樣的操作。 教學(xué)方法 首先讓學(xué)生觀看錄像，要求學(xué)生注意電泳技術(shù)的基本原理和基本操作。在此基礎(chǔ)上，學(xué)生進(jìn) 入實(shí)驗(yàn)操作階段。 教學(xué)手段（多媒體、錄像等） 多媒體、錄像，示教 使用的教材及參考資料 1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，自編講義 2、基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，高等教育出版社，王秀奇主編，第二版，2003年 思考題: 1、電泳后上下槽緩沖液可否混合后再使用？為什么？ 2、上樣緩沖液中加入甘油的作用是什么？ 3、貯液配制及貯存應(yīng)注意什么？ 4、過硫酸俊、TEMED和考馬斯亮藍(lán)在實(shí)驗(yàn)中有什么作用？ 本單元教學(xué)總結(jié)（教學(xué)的主要經(jīng)驗(yàn)、效果、存在的問題、改進(jìn)措施等） 1、分離膠和濃縮膠的制備過程不要與皮膚接觸，管膠過程緩慢不能產(chǎn)生氣泡。 2、電泳儀應(yīng)從低壓電流逐步到高壓電，以免直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 3、此實(shí)驗(yàn)過程中需要凝膠過程，所以最好選擇于室溫達(dá)到25°C的季節(jié)進(jìn)行。強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)基 本操作規(guī)范，讓學(xué)生養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣，具有扎實(shí)的實(shí)驗(yàn)技能。