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課題3 血紅蛋白的提取和分離
一、選擇題
1、凝膠色譜分離法分離蛋白質(zhì)時(shí)，凝膠的種類較多，但其作用的共同點(diǎn)是 ( )
A、改變蛋白質(zhì)分子通過(guò)凝膠時(shí)的路徑
B、吸附一部分蛋白質(zhì)，從而影響蛋白質(zhì)分子的移動(dòng)速度
C、將酶或紐胞固定在凝膠中
D、與蛋白質(zhì)分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而影響其移動(dòng)速度
2、下列各項(xiàng)中，一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是 ( )
A、層析柱高 B、層析柱的直徑
C、緩沖溶液 D、樣品的分布
3、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中決定蛋白質(zhì)或多肽移動(dòng)速度的主要因素是 ( )
2、
A、蛋白質(zhì)分子所帶的電荷
B、蛋白質(zhì)分子的形狀
C、蛋白質(zhì)分子的相對(duì)分子質(zhì)量
D、緩沖溶液的pH
4、為了提取血紅蛋白，從學(xué)校附近的屠宰場(chǎng)索取新鮮的豬血，對(duì)豬血處理的正確操作是
A、要在采血容器中預(yù)先加人抗凝血?jiǎng)幟仕徕c
B、取血回來(lái)后，馬上進(jìn)行高速長(zhǎng)時(shí)問(wèn)離心
C、將離心后的血細(xì)胞加入清水緩慢攪拌
D、重復(fù)洗滌直到上清液呈紅色為止
5、下面說(shuō)法不正確的是 ( )
A、在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對(duì)溶液pH的影響，維持pH基本不變
B、緩沖溶液通常由1～2種緩沖劑溶解于水中配制而成
C、電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過(guò)程
3、D、透析袋能使大分子自由進(jìn)出，而將小分子保留在袋內(nèi)
6、蛋白質(zhì)的提取和分離分為哪幾步 ( )
A、樣品處理、凝膠色譜操作、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
B、樣品處理、凝膠色譜操作、純化
C、樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定
D、樣品處理、純化、粗分離、純度鑒定
7、洗滌紅細(xì)胞時(shí)，離心所采用的方法是
A、低速長(zhǎng)時(shí)間離心 B、低速短時(shí)間離心
C、高速長(zhǎng)時(shí)間離心 D、高速短時(shí)間離心
8、凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中使用的凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex G一75)，其中G、75的含義為 ( )
A、G表示凝膠的使用量，75表示加25 g水
4、B、G表示凝膠的交聯(lián)程度，75表示需加熱到75℃
C、G表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示每克凝膠膨脹時(shí)吸水7、5g
D、G表示凝膠的膨脹體積,75表示每克凝膠膨脹時(shí)體積可達(dá)75cm3
二、非選擇題
9、下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品的加入(圖I)和洗脫(圖Ⅱ)示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)在加樣示意圖中，正確的加樣順序是 。
(2)用吸管加樣時(shí)，應(yīng)注意正確操作，分別是① 。②貼著管壁加樣、③ 。(3)等樣品 。時(shí)，才加入緩沖液 。
待 接近色譜
5、柱底端時(shí)，用試管收集流出液，每 mL收集一管，連續(xù)收集。
10、PCR技術(shù)可擴(kuò)增DNA分子，電泳技術(shù)是將待測(cè)樣品放在光滑的凝膠薄膜上，并加上直流電場(chǎng)，可利用分子帶電荷不同分離和分析氨基酸和多核苷酸片段等有機(jī)物。這兩項(xiàng)技術(shù)綜合應(yīng)用于現(xiàn)代刑偵，可以獲得最可靠的證據(jù)。如圖是一次尋找嫌犯的測(cè)試結(jié)果：圖申是把遺跡中含有21個(gè)氨基酸的多肽進(jìn)行水解，將氨基酸混合物進(jìn)行電泳的結(jié)果；圖乙是通過(guò)提取罪犯B遺跡DNA和四位嫌犯的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，并采用特定限制酶處理后進(jìn)行電泳所得到的一組DNA指紋圖譜。
(1)在同一電場(chǎng)下，由于蛋白質(zhì)或DNA的 以及 、
6、 不同而產(chǎn)生不同的遷移方向或速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品的分離。
(2)在電泳過(guò)程中，帶電分子會(huì)向著 的電極移動(dòng)。
(3)由圖甲得知，多肽由 種氨基酸組成；由圖乙可知B最可能的對(duì)象是 。
11、(能力拔高題)測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量是研究蛋白質(zhì)的一項(xiàng)重要技術(shù)，常用凝膠(由多孔性網(wǎng)狀物質(zhì)構(gòu)成的顆粒，其孔能讓小分子物質(zhì)進(jìn)出)過(guò)濾法測(cè)定，即在一根垂直的玻璃柱中裝滿凝膠，然后在其上端加入蛋白質(zhì)混合液并用緩沖液進(jìn)行洗脫。根據(jù)各種蛋白質(zhì)洗脫的先后順序可以比較它們的相對(duì)分子質(zhì)量大小。利用下列材料,鑒定樣品液(含有A、B兩種相對(duì)分子質(zhì)量大小不同的蛋白質(zhì))中蛋白質(zhì)相對(duì)分
7、子質(zhì)量的大小。
材料用具:支架臺(tái)、符合要求的凝膠柱、吸管、緩沖液洗脫瓶、帶有開(kāi)關(guān)的玻璃導(dǎo)管、橡膠軟管、夾子、試管若干、足量的緩沖液等。
(1)實(shí)驗(yàn)步驟：
①加樣前先 。
②加樣： 。
③洗脫： 。
④收集并檢測(cè)它們洗脫的先后順序。
8、
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論： 。
(3)請(qǐng)用坐標(biāo)圖表示出不同蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量大小與洗脫液體積的關(guān)系：
12、(2008·山東高考)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白。這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。
(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的 、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的 不同而實(shí)現(xiàn)分離。
(2)可用金黃色葡萄球菌來(lái)檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性?？咕鷮?shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供 和
9、 。
(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的 ，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。
(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有 和 。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行 處理。
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專心---專注---專業(yè)
生物：《血紅蛋白的提取和分離》測(cè)試(共3頁(yè))
