【創(chuàng)新設(shè)計】高考生物一輪復(fù)習(xí) 教師用書 專題四生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 新人教版選修1
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1、 專題四 生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 最新考綱 1.植物的組織培養(yǎng) 2.蛋白質(zhì)的提取和分離 3.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用 4.從生物材料中提取某些特定的成分 考綱解讀 1.植物組織培養(yǎng)的基本過程及其在生產(chǎn)中的應(yīng)用 2.血紅蛋白的提取和分離的實驗原理和方法 3.PCR技術(shù)與生物體內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別 4.初步學(xué)會用水蒸氣蒸餾法和壓榨法提取植物芳香油 知識點一 植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 比一比:MS培養(yǎng)基與微生物培養(yǎng)基有何主要不同? 看一看:植物組織培養(yǎng)與花藥培養(yǎng)技術(shù)有何相同與不同? 知識點二 蛋白質(zhì)的提取和分離、PCR技術(shù) 思一思:用豬的血液與雞的血液提
2、取血紅蛋白哪個效果更好? 想一想:PCR與生物體內(nèi)DNA復(fù)制有何區(qū)別? 知識點三 植物有效成分的提取 議一議:水中蒸餾、水上蒸餾、水氣蒸餾的區(qū)別。 看一看:胡蘿卜素的最主要成分是什么?它有什么用途? 菊花莖與月季花藥組織培養(yǎng)的比較 菊花莖的組織培養(yǎng) 月季花藥組織培養(yǎng) 理論 依據(jù) 植物細(xì)胞的全能性 植物細(xì)胞的全能性 材料 選取 未開花植株莖上部新萌生的側(cè)枝 完全未開放的花蕾 光照 狀況 每日用日光燈照射12 h 開始不需要光照,幼小植株形成后需要光照 操作 流程 制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培 選材→材料消毒→接
3、種和培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育 影響 因素 選材、營養(yǎng)、激素、pH、溫度、光照等 基本 過程 脫分化、再分化 1.引物是指能夠與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對的一小段DNA或RNA。 2.DNA聚合酶只能特異地復(fù)制處于兩個引物之間的DNA序列,使這段固定長度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。 3.影響萃取的因素 (1)主要因素:萃取劑的性質(zhì)和使用量。 (2)次要因素:原料顆粒的大小、緊密程度、含水量、萃取的溫度和時間等條件。 4.萃取過程注意事項 (1)由于有機(jī)溶劑都是易燃物,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸,因此萃取過程中應(yīng)避免使用明火加熱,采用水浴加熱。 (2)為
4、防止加熱時有機(jī)溶劑揮發(fā),還要在加熱瓶口安裝回流冷凝裝置。 胡蘿卜萃取裝置 水蒸氣蒸餾裝置 自我校對: ①全能性 ②脫分化?、墼俜只、芊N類?、菽挲g?、尬⒘吭亍、呔S生素?、喔拾彼帷、釤熕帷∩L素 ?細(xì)胞分裂素 ?5.8 ?接種?移栽 ?全能性 ?四分體時期 ?單核期 ?雙核期 ?脫分化 ?胚狀體 愈傷組織 初花期 完全未開放 單核期(細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)的時期) 醋酸洋紅法 焙花青—鉻礬法 紅 藍(lán)黑 從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織 徹底去除花絲 愈傷組織 胚狀體 長出愈傷組織 分化培養(yǎng)基上 幼小植株分開 相對分子質(zhì)量的大小 進(jìn)入凝膠內(nèi)部 酸和堿 基本不變 電場 凝膠色譜操作
5、凝膠色譜柱的裝填 DNA模板 四種脫氧核苷酸、耐熱的DNA聚合酶 體外 復(fù)性 壓榨 萃取 水蒸氣 油層和水層 水中蒸餾 水上蒸餾 水氣蒸餾 有機(jī)溶劑 有機(jī)溶劑 水蒸氣蒸餾 漂洗 靜置 巖藻 微生物 干燥 萃取 濃縮 比一比:微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng),包括植物生長必需的大量元素和微量元素。 看一看:相同點:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。 不同點:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,需要先選擇時期適宜的花蕾,花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時更換培養(yǎng)基,花藥培養(yǎng)對培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。 思一思:用豬的血液;因為豬的紅細(xì)胞無細(xì)胞核和細(xì)胞器
6、,結(jié)構(gòu)簡單,血紅蛋白含量豐富,便于提取血紅蛋白。 想一想:①PCR不需要解旋酶,而生物體內(nèi)DNA復(fù)制時需要解旋酶; ②PCR需要耐熱的DNA聚合酶,而生物體內(nèi)DNA聚合酶在高溫時會變性; ③PCR一般需經(jīng)三十多次循環(huán),而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的控制。 議一議:(1)這三種方法的基本原理相同,但原料放置位置不同。 ①水中蒸餾:原料放在蒸餾容器的水中,水要完全浸沒原料。 ②水上蒸餾:容器中水的上方有篩板,原料放在篩板上,水量以沸騰時不浸濕原料為宜。 ③水氣蒸餾:蒸餾容器下方有一排氣孔,連接外源水蒸氣,上方有篩板,上面放原料。 (2)各自特點:水中蒸餾設(shè)備簡單、成本低、易操
7、作,而水上蒸餾和水氣蒸餾時間短,出油率高。 看一看:胡蘿卜素中β胡蘿卜素是最主要的成分,可以用來:①治療因缺乏維生素A而引起的疾病。②優(yōu)質(zhì)食用色素、飼料、飲料、食品的添加劑。③抗癌、治癌。 ,植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 一、植物組織培養(yǎng)的過程 1.菊花組織培養(yǎng)過程 菊花組織脫分化,F形成愈傷組織再分化,F長出叢芽―→生根移栽,F菊花植株。 2.月季的花藥培養(yǎng) 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素及成功的關(guān)鍵 1.影響因素 (1)內(nèi)部因素:材料的選取。 (2)外部因素:營養(yǎng)成分的種類及配比;植物激素的用量及使用順序;pH、溫度、光照等。 2.獲得成功的關(guān)鍵 (1)植物組織培養(yǎng)
8、所利用的植物材料體積小、抗逆性差,對培養(yǎng)條件要求較高。 (2)培養(yǎng)材料一旦被微生物污染,就會導(dǎo)致實驗失敗。原因是微生物增殖快,生長迅速,消耗養(yǎng)分多,并產(chǎn)生代謝廢物毒害培養(yǎng)材料。 (3)無菌技術(shù)主要包括對操作空間、實驗用具、實驗材料以及操作者的消毒滅菌。 提醒 一旦發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)物被污染,特別是真菌性污染,一定不要打開培養(yǎng)瓶。應(yīng)先將被污染的培養(yǎng)瓶統(tǒng)一放在高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,然后再打開培養(yǎng)瓶進(jìn)行清理。 三、植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用 生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,其作用及特點為: 1.在生長素存在的情況下,細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢。
9、 2.使用順序不同,結(jié)果不同,具體如下: 使用順序 實驗結(jié)果 先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素 細(xì)胞既分裂又分化 同時使用 分化頻率提高 3.用量比例不同,結(jié)果也不同 的比值 四、實驗操作中應(yīng)注意的幾個問題 1.材料的選?。壕栈ǖ慕M織培養(yǎng)實驗中,應(yīng)選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝;月季花藥的培養(yǎng)實驗中,應(yīng)選擇花粉發(fā)育過程中的單核靠邊期的花粉進(jìn)行培養(yǎng)。 2.外植體消毒:所用消毒劑為體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液,所使用的清洗液是無菌水。 3.培養(yǎng)過程:在初期,菊花的組織培養(yǎng)需光照,
10、月季花藥的培養(yǎng)不需光照,而在后期均需光照。 ★★ 本部分內(nèi)容與必修內(nèi)容細(xì)胞分化有密切關(guān)系,是高考命題的熱點,命題多考查植物組織培養(yǎng)基成分與作用、微型繁殖技術(shù)、脫病毒苗培養(yǎng)、名貴中藥材工廠化生產(chǎn)等具體實例,復(fù)習(xí)中應(yīng)多加關(guān)注。 【典例1】?(2011江蘇)下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述,正確的是( )。 A.愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 B.二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 C.用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 D.植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得 解析 愈傷組織細(xì)胞是一團(tuán)排列疏松而無規(guī)則、高度液泡化的呈
11、無定形狀態(tài)的、具分生能力的薄壁細(xì)胞,不具有特定的結(jié)構(gòu)和功能;二倍體的花粉中只含一個染色體組,將其培養(yǎng)得到的個體為單倍體,高度不育,而用秋水仙素處理后得到的植株才能穩(wěn)定遺傳;人工種子中包裹的是經(jīng)再分化形成的胚狀體、不定芽等,不可以是愈傷組織;用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選出所需要的突變體類型。 答案 D 【訓(xùn)練1】?下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中,錯誤的是( )。 A.培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓 B.培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素影響愈傷組織的生長和分化 C.離體器官或組織的細(xì)胞都必須通過脫分化才能形成愈傷組織 D.同一株綠色開花植物不同部分的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相
12、同 解析 綠色開花植物的細(xì)胞有兩種:體細(xì)胞和生殖細(xì)胞,這兩種細(xì)胞所含的核型(基因)是不同的,同一株綠色開花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因可能不相同。 答案 D ,多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 1.細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與體外DNA擴(kuò)增(PCR技術(shù))的比較 細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制 PCR 不同點 解旋 解旋酶,邊解旋邊復(fù)制 80~100 ℃高溫解旋,雙鏈完全分開 酶 解旋酶,DNA聚合酶,DNA連接酶 Taq DNA聚合酶 引物 RNA DNA或RNA 能量 ATP 不加 溫度 體內(nèi)溫和條件 高溫 子鏈合成 一條鏈連續(xù)(先導(dǎo)鏈),另一條鏈
13、不連續(xù),先合成片段,再由DNA連接酶連接(滯后鏈) 兩條子鏈均連續(xù)合成 相同點 ①提供DNA模板 ②四種脫氧核苷酸作原料 ③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端 2.PCR反應(yīng)的過程及結(jié)果 (1)PCR反應(yīng)過程: ①變性:當(dāng)溫度上升到90 ℃以上時,雙鏈DNA解聚為單鏈,如圖: ②復(fù)性:系統(tǒng)溫度下降至50 ℃左右時,兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合,如下圖: ③延伸:當(dāng)系統(tǒng)溫度上升至72 ℃左右,溶液中的四種脫氧核苷酸(A、T、G、C)在DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA鏈,如下圖: (2)結(jié)果: ①PCR一般要經(jīng)歷三十多次循
14、環(huán),每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。 ②兩引物之間的固定長度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。 提醒 DNA復(fù)制需要引物的原因:DNA聚合酶不能從5′端開始合成DNA,而只能從3′端延伸DNA鏈。 本知識點高考未曾單獨考,往往與基因工程等內(nèi)容綜合起來考查,復(fù)習(xí)中不容忽視。 【典例2】?多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷30多次下述循環(huán):95 ℃條件下使模板DNA變性、解鏈→55 ℃條件下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72 ℃條件下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述,不正確的是( )。 A.變性過程中破壞的是DNA
15、分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn) B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成的 C.延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、4種核糖核苷酸 D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,其所需要酶的最適溫度較高 解析 PCR一般要經(jīng)歷30多次循環(huán),每次循環(huán)可以分為變性、復(fù)性和延伸三步。從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng),并且由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈會與引物Ⅱ結(jié)合,進(jìn)行DNA的延伸。DNA變性(90~95 ℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA。復(fù)性(55~65 ℃):系統(tǒng)溫度降低,引物與DNA模板結(jié)合,形成局部雙鏈。延伸(70~7
16、5 ℃):在Taq酶(在72 ℃左右活性最高)的作用下,以dNTP(三磷酸脫氧核糖核苷酸的縮寫)為原料,從引物的5′端向3′端延伸,合成與模板鏈互補(bǔ)的DNA鏈。 答案 C 【訓(xùn)練2】?多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)??捎糜谶z傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測定等方面。回答以下問題: (1)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程中,引物的作用是__________,而且DNA復(fù)制的前提是__________。 (2)PCR利用了__________原理,可通過控制溫度來控制雙鏈的解旋與結(jié)合。 (3)PCR技術(shù)用到的酶是__________,與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制
17、時發(fā)揮相同作用的酶相比區(qū)別在于__________。 (4)下面表格是DNA體內(nèi)復(fù)制與PCR反應(yīng)的部分比較結(jié)果。通過比較分析,請推導(dǎo)出PCR反應(yīng)合成DNA子鏈時能量來源于______________。 原 料 ATP DNA體內(nèi)復(fù)制 四種脫氧核苷酸 需要 PCR反應(yīng) 脫氧胞苷三磷酸、脫氧腺苷三磷酸 脫氧胸苷三磷酸、脫氧鳥苷三磷酸 不需要 (5)假如PCR反應(yīng)所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,則經(jīng)過n次循環(huán),具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數(shù)的比值為__________。 解析 (1)DNA具有雙螺旋結(jié)構(gòu),復(fù)制時遵循堿基互補(bǔ)配對原則,所以打開氫鍵,
18、DNA聚合酶方可在引物的引導(dǎo)下從引物3′端開始連接脫氧核苷酸。(2)PCR技術(shù)就是模擬細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的一項技術(shù),只不過該技術(shù)中雙鏈的解旋與結(jié)合是通過溫度來控制的,原因在于DNA具有熱變性。(3)TaqDNA聚合酶具有耐高溫的特性。(4)DNA無論是體內(nèi)復(fù)制還是體外復(fù)制,子鏈合成過程中都要消耗能量,而PCR反應(yīng)不加入ATP供能,且加入的原料也不是四種脫氧核苷酸,可見PCR所用原料在水解成相應(yīng)脫氧核苷酸時,能釋放出等同于ATP水解的能量。(5)DNA復(fù)制n次產(chǎn)生2n個DNA,共有2n+1條脫氧核苷酸鏈,由于母鏈不具有放射性,所以具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數(shù)的比值為=。 答案 (1)使DNA
19、聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸 解開雙鏈(或打開氫鍵) (2)DNA的熱變性 (3)TaqDNA聚合酶 耐高溫 (4)所用原料水解產(chǎn)生相應(yīng)脫氧核苷酸時所釋放的能量 (5) ,血紅蛋白的提取和分離 1.方法及原理 方 法 原 理 凝膠色譜法 根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì) 電泳法 各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同 2.實驗操作程序 (1)樣品處理 ①紅細(xì)胞的洗滌:除去血漿蛋白等雜質(zhì),有利于后續(xù)步驟的分離純化; ②血紅蛋白的釋放:使紅細(xì)胞破裂,血紅蛋白釋放出來; ③分離血紅蛋白溶液:經(jīng)過離心使血紅蛋白和其他雜質(zhì)分離開來,便于下一步對血
20、紅蛋白的純化。 (2)粗分離 ①原理:透析袋能使小分子自由出入,而將大分子保留在袋內(nèi),透析可以除去樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。 ②過程:取1 mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有300 mL的物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液中(pH為7.0),透析12 h。 ③目的 ④圖示: ⑤注意:透析時間為12 h。透析袋是用硝酸纖維素制成,小分子可自由進(jìn)出,而大分子保留在袋內(nèi)。 (3)純化:一般采用凝膠色譜法對血紅蛋白進(jìn)行分離和純化。 (4)純度鑒定:一般用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳方法,來測定蛋白質(zhì)的分子量,即對血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定。 3.結(jié)果分析與評
21、價 項 目 分 析 血液樣品的處理 分層明顯→樣品處理完成 凝膠色譜柱的裝填 放一支與凝膠柱垂直的日光燈→直接檢查加入大分子有色物質(zhì)如藍(lán)色葡聚糖—2 000或紅色葡聚糖,若色帶均勻、狹窄、平整→裝填成功 血紅蛋白的分離 血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整,隨洗脫液緩慢流出→分離成功 提醒?、儆媚z色譜法分離和純化蛋白質(zhì),滴加樣品時,吸管管口貼著管壁環(huán)繞移動加樣,同時注意不要破壞凝膠面。 ②在蛋白質(zhì)分離過程中,應(yīng)仔細(xì)觀察紅色區(qū)帶在洗脫過程中的移動情況,如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動,說明色譜柱制作成功。 本考點高考命題較少涉及,為冷考點,復(fù)習(xí)時還應(yīng)熟悉血紅蛋白提取和分離
22、的程序和原理。 【典例3】?(2011廣東理綜,24)以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述,不正確的是( )。 A.洗滌紅細(xì)胞時,使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂 B.豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時雜蛋白較少 C.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 D.在凝膠色譜法分離過程中,血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動慢 解析 豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核,提純時雜蛋白較少,是提純血紅蛋白的理想材料。提純血紅蛋白分四步:紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液、透析,其中洗滌紅細(xì)胞時,要用生理鹽水反復(fù)洗滌,既要將紅細(xì)胞洗滌干凈,又要不破壞紅細(xì)胞,然后再用蒸餾水和甲苯使紅細(xì)
23、胞破裂,釋放出血紅蛋白。分離提純血紅蛋白時用凝膠色譜法,是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì),相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)移動速度較快;血紅蛋白的顏色可用于觀察紅色區(qū)帶的移動情況,并據(jù)此判斷分離效果。故D不正確。 答案 D 【訓(xùn)練3】?如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題。 (1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有________功能。 (2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A是________;乙裝置中,C溶液的作用是____________________________________________________
24、____________________。 (3)甲裝置用于________,目的是________________。用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫________,是根據(jù)________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。 (4)用乙裝置分離血紅蛋白時,待________時,用試管收集流出液,每5 mL收集一管,連續(xù)收集。 解析 本題易出錯的地方有:(2)小題中A是磷酸緩沖溶液,C也是磷酸緩沖溶液,它的作用一是保持血紅蛋白的結(jié)構(gòu)不被破壞,再一個是洗脫血紅蛋白,這是常常出錯的地方。透析是粗分離蛋白質(zhì)的方法,透析后得到的蛋白質(zhì)還要進(jìn)行純化和純度鑒定,在鑒定純度時常用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法
25、。 正確思路應(yīng)為:血紅蛋白在氧分壓高的地方與氧結(jié)合,在氧分壓低的地方與氧分離,起到運輸氧的作用。圖甲表示的是透析過程,將裝有血紅蛋白溶液的透析袋放入盛有300 mL的物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液中(pH為7.0)。透析的目的是去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。圖乙表示用凝膠色譜柱洗脫血紅蛋白的操作示意圖。凝膠實際上是一些微小的多孔球體,小球體內(nèi)部有許多貫穿的通道。相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,通過的路程較短,移動速度較快;相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)比較容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,通過的路程較長,移動速度較慢。因此,樣品中相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先流
26、出,相對分子質(zhì)量中等的分子后流出,相對分子質(zhì)量最小的分子最后流出,從而使相對分子質(zhì)量不同的各種分子得以分離。因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子可以獲得分離。這種分離血紅蛋白的方法叫凝膠色譜法。樣品的加入和洗脫的大致過程是:調(diào)整緩沖液面→滴加透析樣品→樣品滲入凝膠床→洗脫→收集。C溶液是磷酸緩沖液,其作用是洗脫血紅蛋白。待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時開始收集流出液。 答案 (1)運輸 (2)磷酸緩沖液 洗脫血紅蛋白 (3)透析(粗分離) 去除樣品中分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 凝膠色譜法 相對分子質(zhì)量的大小 (4)紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端 【訓(xùn)練4】?下列關(guān)于血紅蛋白分離中樣品處理及粗分離的描述,錯誤
27、的是( )。 A.紅細(xì)胞洗滌:此操作的目的是去除紅細(xì)胞內(nèi)的雜蛋白 B.血紅蛋白釋放:此操作需要將洗滌好的紅細(xì)胞放入蒸餾水中 C.分離血紅蛋白溶液:離心后紅色透明液體是血紅蛋白的水溶液 D.透析:此操作的目的是去除分子量較小的雜質(zhì) 解析 紅細(xì)胞洗滌的目的是去除血漿中的蛋白質(zhì)。 答案 A ,植物有效成分的提取 1.幾種物質(zhì)的提取方法、原理及步驟 提取物質(zhì) 提取方法 提取原理 步 驟 血紅蛋白 凝膠色 譜法、 電泳法 ①根據(jù)相對分子質(zhì)量的大??;②各種分子帶電性質(zhì)差異以及分子本身大小、形狀的不同 ①樣品處理②粗提取 ③純化 ④純度鑒定 玫瑰精油 水蒸
28、氣蒸餾法 利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來 ①水蒸氣蒸餾②分離油層 ③除水、過濾 橘皮精油 壓榨法 通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂 洗;②壓榨、過濾、靜置;③再次過濾 胡蘿卜素 萃取法 使提取物溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)后得到提取物 ①粉碎、干燥 ②萃取、過濾 ③濃縮 提醒 不同物質(zhì)的提取是根據(jù)其理化性質(zhì)的不同來進(jìn)行的,因此在提取物質(zhì)時,應(yīng)先確定該物質(zhì)的理化性質(zhì),然后再選擇適宜的提取方法進(jìn)行提取。 2.實驗流程設(shè)計 (1)玫瑰精油的提取實驗流程 鮮玫瑰花+清水(1∶4)→水蒸氣蒸餾→油水混合物分離油層除水玫瑰油。 (2)橘皮精油
29、的提取實驗流程 石灰水浸泡橘皮→漂洗→壓榨→過濾→靜置→再次過濾→橘皮油。 (3)胡蘿卜素的提取實驗流程 胡蘿卜→粉碎→干燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素。 提醒 水中蒸餾對于柑橘和檸檬等原料不適用。因為水中蒸餾會導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解。 3.用層析法鑒定時應(yīng)注意的問題 (1)選擇干凈的濾紙,為防止操作時濾紙的污染,應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙,可以戴手套進(jìn)行操作。 (2)點樣時應(yīng)注意點樣斑點不能太大(直徑應(yīng)小于0.5 cm),如果用吹風(fēng)機(jī)吹干,溫度不宜過高,否則斑點會變黃。 (3)將點好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時注意濾紙兩邊不能互相接觸,以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動
30、加快,使溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。 本部分內(nèi)容,部分省份高考不作要求,復(fù)習(xí)中多關(guān)注考試說明。 【典例4】?(2011海南)許多植物含有天然香料,如薄荷葉中含有薄荷油。現(xiàn)用薄荷葉提取薄荷油。 回答下列問題。 (1)薄荷油是揮發(fā)性物質(zhì)。提取薄荷油時應(yīng)選用________(鮮、干)薄荷葉作原料,其原因是________________________________________________________________________。 (2)用萃取法提取薄荷油時,采用的溶劑是________,原理是________________。 (3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時,在油水
31、混合物中加入氯化鈉的作用是________。常用于分離油層和水層的器皿是________。分離出的油層中加入無水硫酸鈉的作用是________,除去固體硫酸鈉的常用方法是________。 解析 本題考查植物芳香油的提取,同時考查識記和理解能力及解決實際問題的能力。(2)用萃取法提取薄荷油時,采用的溶劑是酒精,利用的原理是芳香油易溶于有機(jī)溶劑。(3)用水蒸氣蒸餾法提取薄荷油時,在油水混合物中加入氯化鈉,可以使薄荷油與水出現(xiàn)明顯的分層,然后用分液漏斗將這兩層分開。在分離出的油層中加入無水硫酸鈉,可以將其中的水分去除,放置過夜,再通過過濾除去固體硫酸鈉,就可以得到薄荷油。 答案 (1)鮮 薄荷
32、油是揮發(fā)性物質(zhì),鮮薄荷葉才含薄荷油 (2)酒精 薄荷油易溶于有機(jī)溶劑酒精中 (3)使油水混合物分層 分液漏斗 除水 過濾法 【訓(xùn)練5】?生物組織中有機(jī)物的提取方法有很多種。例如,凝膠色譜法、電泳法、蒸餾法、壓榨法和萃取法等,不同的有機(jī)物提取的方法各有不同。 (1)玫瑰精油稱為“液體黃金”,是世界香料工業(yè)不可取代的原料,提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加劑或化學(xué)原料,其提取方法主要是________。 (2)杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑,主要通過________法提取。 (3)萃取胡蘿卜素前,要將胡蘿卜徹底粉碎的主要目的是 _______________
33、_________________________________________________________。 (4)血紅蛋白的提取方法可以采用________,該方法主要是利用血紅蛋白的哪一特性將它與其他物質(zhì)分開的?____________________。 解析 (1)玫瑰精油不能含有任何化學(xué)原料,所以不能用萃取法,而其又具有揮發(fā)性較強(qiáng)等特點,適于水蒸氣蒸餾法。(2)杏仁油的提取原料為種子,一般用于食用應(yīng)采用壓榨法。(3)萃取法的萃取效率在原料相同時決定于萃取劑的性質(zhì)和使用量,還有接觸面積。(4)血紅蛋白分子大小與成熟紅細(xì)胞中其他成分相差較大。 答案 (1)水蒸氣蒸餾法 (2)
34、壓榨 (3)使原料顆粒變小,加大萃取效率 (4)凝膠色譜法 相對分子質(zhì)量的大小 1.(2010浙江理綜,6)將無根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無植物激素的培養(yǎng)基中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后,應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是( )。 解析 植物組織培養(yǎng)過程中,由外植體脫分化形成愈傷組織需要一定量的生長素和細(xì)胞分裂素,愈傷組織再分化形成根、芽的過程也需要一定濃度的生長素和細(xì)胞分裂素,且生長素和細(xì)胞分裂素的不同配比對形成根、芽的影響不同。本題中的無根幼苗本身就能夠產(chǎn)生一定量的生長素和細(xì)胞分裂素,能夠促使基部細(xì)胞脫分化、再分化出根來,所以會出現(xiàn)B項現(xiàn)象。 答案 B 2.(2010全國新課標(biāo),37)
35、下列是與芳香油提取相關(guān)的問題,請回答。 (1)玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取,其理由是玫瑰精油具有________________的性質(zhì)。蒸餾時收集的蒸餾液________(是、不是)純的玫瑰精油,原因是__________________________。 (2)當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時,蒸餾過程中,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和________。當(dāng)原料量等其他條件一定時,提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是___________。 (3)如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則精油提取量會____________________________________, 原因是___________
36、_____________________________________________________________。 (4)密封不嚴(yán)的瓶裝玫瑰精油保存時最好存放在溫度________的地方,目的是____________。 (5)某植物花中精油的相對含量隨花的不同生長發(fā)育時期的變化趨勢如圖所示。提取精油時采摘花的最合適時間為________天左右。 (6)從薄荷葉中提取薄荷油時________(能、不能)采用從玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是___________________________________________________________________
37、_____。 解析 (1)由玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定(耐一定程度高溫)、易揮發(fā)(水蒸氣可以將精油攜帶出來)、難溶于水(冷卻后油水會重新分層),所以玫瑰精油適合用水蒸氣蒸餾法提取。(2)當(dāng)水和原料量一定時,影響精油提取量的主要因素有蒸餾時間和蒸餾溫度,在一定的時間內(nèi)隨著蒸餾時間的延長提取量不斷增加,一定時間后不再增加。如果蒸餾溫度過高,提取量也會減少。(3)如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,部分精油會隨水蒸氣揮發(fā),則精油提取量會下降。(4)玫瑰精油具有揮發(fā)性,瓶裝精油時若密封不嚴(yán),需要低溫保存,以減少揮發(fā)。(5)分析圖示可知,在該植物花的蓓蕾期與開放期之間(即a時期)精油含量最高。(6)由于薄荷油與玫瑰
38、精油的化學(xué)性質(zhì)相似,易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,故可以用水蒸氣蒸餾法提取。 答案 (1)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定 不是 玫瑰精油隨水蒸氣一起蒸餾出來,所得到的是油水混合物 (2)蒸餾溫度 在一定的時間內(nèi)提取量隨蒸餾時間的延長而增加,一定時間后提取量不再增加 (3)下降 部分精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失 (4)較低 減少揮發(fā)(或防止揮發(fā)) (5)a (6)能 薄荷油與玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似 3.(2009海南)請回答下列與實驗室提取芳香油有關(guān)的問題。 (1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、________和________。 (2)芳香油溶解性的特點是不溶于________,
39、易溶于________,因此可用________作為提取劑來提取芳香油。 (3)橘子果實含有芳香油,通??捎胈_______作為材料提取芳香油,而且提取時往往選用新鮮的材料,理由是___________________________________________________________。 (4)對材料壓榨后可得到糊狀液體,為除去其中的固體物獲得乳狀液可采用的方法是________。 (5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時間后,芳香油將分布于液體的________層,原因是____________________________________________________
40、____________________。 加入氯化鈉的作用是____________________________________________________。 (6)從乳狀液中分離得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉,此試劑的作用是______________。 解析 本題主要考查植物有效成分的提取,旨在考查考生對植物芳香油提取的方法,所用試劑及其作用的掌握情況。(1)植物芳香油的提取可采用的方法有壓榨法、蒸餾法、萃取法。(2)芳香油溶解性的特點是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,因此可用有機(jī)溶劑作為提取劑來提取芳香油。(3)一般采用新鮮的橘子皮來提取橘皮精油,因為新鮮的含有芳香油多。(4)
41、除去液體中的固體常用方法是過濾。(5)芳香油密度比水小,且不溶于水,會浮在液體的表面。加入氯化鈉會增加水層密度,使油和水分層。(6)無水硫酸鈉的作用可以吸收芳香油中殘留的水分。 答案 (1)蒸餾法 萃取法 (2)水 有機(jī)溶劑 有機(jī)溶劑 (3)橘子皮 芳香油含量較高 (4)過濾法 (5)上 油層的密度比水層小 增加水層密度,使油和水分層 (6)吸收芳香油中殘留的水分 對于像我這樣愛好沉思的人來說,大學(xué)教育并不總是有益的。無論多好的東西強(qiáng)迫吃下去,總有一天會把胃口和肚子搞壞的。純真的好奇心的火花會漸漸地熄滅。 “神圣的求知欲”這株脆弱的幼苗,除了需要鼓勵之外,首先需要自由——沒有自
42、由,它將不可避免地會夭折。 自由行動和自我負(fù)責(zé)的教育,比起那種依賴訓(xùn)練、外界權(quán)威和追求名利的教育來,是多么的優(yōu)越呀! ——愛因斯坦 14 用心 愛心 專心
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