實驗診斷 第二章 血液2

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1、L/O/G/O實驗診斷學(xué)診斷學(xué)教研室：南實驗樓診斷學(xué)教研室：南實驗樓235、239電話：電話：3616309診斷學(xué)診斷學(xué)2實驗室：南實驗樓實驗室：南實驗樓234、238診斷學(xué)診斷學(xué)2實驗共六次，每兩周一個內(nèi)容實驗共六次，每兩周一個內(nèi)容1.血液檢查血液檢查2.骨髓檢查（帶紅藍鉛筆）骨髓檢查（帶紅藍鉛筆）3.PT、APTT4.尿液檢查尿液檢查5.血糖檢查血糖檢查6.病例分析病例分析復(fù)習(xí)：復(fù)習(xí)：上次課的內(nèi)容：上次課的內(nèi)容：血液一般檢測（血液一般檢測（WBC+DC、Ret、PLT、ESR等）等）重點內(nèi)容：重點內(nèi)容：白細胞計數(shù)及白細胞分類的臨床意義白細胞計數(shù)及白細胞分類的臨床意義 血小板計數(shù)的臨床意義血

2、小板計數(shù)的臨床意義 紅細胞沉降率檢測的臨床意義紅細胞沉降率檢測的臨床意義病例分析病例分析患者男性，患者男性，4444歲。因頭暈、乏力、面色蒼白歲。因頭暈、乏力、面色蒼白3 3年，加年，加重重2 2周入院。周入院。體格檢查：全身皮膚蒼白，鞏膜輕度黃染，心肺無體格檢查：全身皮膚蒼白，鞏膜輕度黃染，心肺無異常，脾肋下異常，脾肋下2cm2cm。實驗室檢查：實驗室檢查：Hb 56g/LHb 56g/L，RBC 1.3RBC 1.310101212/L/L，WBC WBC 2.22.210109 9/L/L，PLT 32PLT 3210109 9/L/L，Ret 4%Ret 4%，血片可見，血片可見球形細

3、胞、點彩紅細胞、紅細胞碎片等。骨髓增球形細胞、點彩紅細胞、紅細胞碎片等。骨髓增生明顯活躍，紅系增生，以中、晚幼紅為主。尿生明顯活躍，紅系增生，以中、晚幼紅為主。尿RousRous試驗陽性，蔗糖溶血試驗陽性，試驗陽性，蔗糖溶血試驗陽性，HamHam試驗陽性。試驗陽性。問題：問題：患者顯示紅細胞破壞增加和紅細胞代償增生的依患者顯示紅細胞破壞增加和紅細胞代償增生的依據(jù)有哪些？據(jù)有哪些？初步診斷及主要診斷依據(jù)有哪些？初步診斷及主要診斷依據(jù)有哪些？分析：分析：紅細胞破壞增加和紅細胞代償增生的依據(jù)紅細胞破壞增加和紅細胞代償增生的依據(jù)包括：包括：RetRet顯著增高；血片可見球形細胞、顯著增高；血片可見球形

4、細胞、點彩紅細胞、紅細胞碎片；骨髓增生明顯點彩紅細胞、紅細胞碎片；骨髓增生明顯活躍，紅系增生顯著，以中、晚幼紅為主；活躍，紅系增生顯著，以中、晚幼紅為主；尿尿RousRous試驗陽性。試驗陽性。初步診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿。診斷初步診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿。診斷依據(jù)：蔗糖溶血試驗陽性，依據(jù)：蔗糖溶血試驗陽性，HamHam試驗陽性；試驗陽性；尿尿RousRous試驗陽性；有紅細胞破壞增加試驗陽性；有紅細胞破壞增加和貧血的證據(jù)。和貧血的證據(jù)。L/O/G/O第二節(jié)第二節(jié)溶血性貧血溶血性貧血的實驗室檢測的實驗室檢測(P260)(P260)溶血性貧血溶血性貧血(hemolytic anemia,HA

5、)指各種原因?qū)е轮父鞣N原因?qū)е翿BC生存時間縮短，破壞增多生存時間縮短，破壞增多或加速，而骨髓的造血功能不能補償其損失時所或加速，而骨髓的造血功能不能補償其損失時所引起的一類貧血。引起的一類貧血。分類分類 RBC本身缺陷所致本身缺陷所致 與遺傳因素有關(guān)與遺傳因素有關(guān) RBC外在因素所致外在因素所致 免疫、化學(xué)、物理、機械、感染等免疫、化學(xué)、物理、機械、感染等溶血性貧血的常用實驗室檢查一、溶血性貧血確診的實驗檢查一、溶血性貧血確診的實驗檢查（一）、（一）、RBC破壞增加的依據(jù)破壞增加的依據(jù)1 1.RBC生存縮短、破壞增加的證據(jù)生存縮短、破壞增加的證據(jù) RBC壽命測定：壽命測定：51Cr標(biāo)記測定標(biāo)

6、記測定RBC半衰期半衰期 RBC形態(tài)變化：形態(tài)變化：涂片染色鏡檢涂片染色鏡檢2.2.血漿游離血漿游離HbHb增高的檢驗增高的檢驗 血漿游離血紅蛋白血漿游離血紅蛋白（FHb）：血管內(nèi)溶血：血管內(nèi)溶血明顯增高明顯增高 血清結(jié)合珠蛋白血清結(jié)合珠蛋白（Hp）：血管內(nèi)外溶血均：血管內(nèi)外溶血均降低降低,血管內(nèi)溶血明顯血管內(nèi)溶血明顯 血漿高鐵血紅素清蛋白血漿高鐵血紅素清蛋白（MHA）：陽性主：陽性主要見于要見于嚴(yán)重嚴(yán)重的血管內(nèi)溶血的血管內(nèi)溶血 尿含鐵血黃素試驗（尿含鐵血黃素試驗（Rous試驗）：陽性主試驗）：陽性主要見于要見于慢性慢性血管內(nèi)溶血血管內(nèi)溶血尿含鐵血黃素試驗（尿含鐵血黃素試驗（Rous試驗）試驗

7、）【principle】:病理情況下（血管內(nèi)溶血時），血紅病理情況下（血管內(nèi)溶血時），血紅蛋白大部分隨尿排出，產(chǎn)生血紅蛋白尿。其中的蛋白大部分隨尿排出，產(chǎn)生血紅蛋白尿。其中的一部分血紅蛋白被腎小管上皮細胞吸收，并在細一部分血紅蛋白被腎小管上皮細胞吸收，并在細胞內(nèi)代謝成含鐵血黃素，當(dāng)這些細胞脫落至尿中，胞內(nèi)代謝成含鐵血黃素，當(dāng)這些細胞脫落至尿中，可用鐵染色法（普魯士藍）檢出?？捎描F染色法（普魯士藍）檢出?！緉ormal value】:正常人呈陰性。正常人呈陰性?！綜linical significance】:陽性：陽性：提示慢性血管內(nèi)溶血，主要見于陣發(fā)性提示慢性血管內(nèi)溶血，主要見于陣發(fā)性睡眠性血

8、紅蛋白尿（睡眠性血紅蛋白尿（PNHPNH）。）。尿含鐵血黃素試驗，圖中藍黑色塊狀物為染尿含鐵血黃素試驗，圖中藍黑色塊狀物為染色后的鐵色后的鐵 3.3.膽紅素代謝異常的檢驗?zāi)懠t素代謝異常的檢驗 血清非結(jié)合膽紅素增高血清非結(jié)合膽紅素增高 尿液尿膽原增加，尿膽紅素陰性尿液尿膽原增加，尿膽紅素陰性黃疸黃疸(jaundice)（二）、（二）、RBC代償性生成增加的依據(jù)代償性生成增加的依據(jù) 紅細胞膜缺陷的檢測紅細胞膜缺陷的檢測紅細胞酶缺陷的檢測紅細胞酶缺陷的檢測珠蛋白生成異常的檢測珠蛋白生成異常的檢測自身免疫性溶貧的檢測自身免疫性溶貧的檢測4123二、溶血性貧血常用的特殊檢查二、溶血性貧血常用的特殊檢查

9、紅細胞膜缺陷的檢測紅細胞膜缺陷的檢測紅細胞滲透脆性試驗紅細胞滲透脆性試驗酸化溶血試驗酸化溶血試驗溶血性貧血常用的特殊檢查紅細胞滲透脆性試驗紅細胞滲透脆性試驗（erythrocyte osmotic fragility test）【principle】:系測定紅細胞置于不同濃度的低滲鹽系測定紅細胞置于不同濃度的低滲鹽水中，從開始溶血到完全溶血的界限。水中，從開始溶血到完全溶血的界限。紅細胞溶解示意圖，左管紅細胞開始溶解，紅細胞溶解示意圖，左管紅細胞開始溶解，右管紅細胞完全溶解右管紅細胞完全溶解 【reference value】:開始溶血：開始溶血：0.42%0.46%(4.24.6g/L)Na

10、Cl溶液；溶液；完全溶血：完全溶血：0.28%0.34%(2.83.4g/L)NaCl溶液。溶液。【Clinical significance】:脆性增加：脆性增加：見于見于遺傳性球形細胞增多癥遺傳性球形細胞增多癥、遺傳性、遺傳性橢圓形細胞增多癥等。橢圓形細胞增多癥等。脆性減低：脆性減低：見于珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性見于珠蛋白生成障礙性貧血、缺鐵性貧血（貧血（低色素低色素性貧血）等。性貧血）等。 紅細胞紅細胞(R)(R)電鏡圖電鏡圖 紅細胞變形穿越脾紅細胞變形穿越脾血竇內(nèi)皮細胞血竇內(nèi)皮細胞(E)(E)間隙間隙巨噬細胞吞噬紅細胞掃描電鏡圖巨噬細胞吞噬紅細胞掃描電鏡圖Osmotic F酸化溶血

11、試驗（酸化溶血試驗（Ham試驗）試驗）(P265)【principle】:陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者的紅細胞膜有缺陷，對補體敏感性增高，患者的紅細胞膜有缺陷，對補體敏感性增高，在酸化的正常血清中，經(jīng)在酸化的正常血清中，經(jīng)37孵育，易破壞孵育，易破壞溶血。溶血。【normal value】:正常人為陰性。正常人為陰性?！綜linical significance】:陽性：主要見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿陽性：主要見于陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（癥（PNH），是），是PNH的的確診確診試驗。試驗。酸化溶血示意圖，左管上清紅色為溶血試驗陽性，酸化溶血示意圖，左管上清紅

12、色為溶血試驗陽性，右管上清無色為陰性右管上清無色為陰性 溶血性貧血常用的特殊檢查 紅細胞酶缺陷的檢測紅細胞酶缺陷的檢測(P262)高鐵血紅蛋白還原試驗高鐵血紅蛋白還原試驗【principle】:在有足量的在有足量的NADPH存在下，存在下，反應(yīng)液中的高鐵血紅蛋白能被高鐵血紅蛋反應(yīng)液中的高鐵血紅蛋白能被高鐵血紅蛋白還原酶還原成（亞鐵）血紅蛋白。當(dāng)白還原酶還原成（亞鐵）血紅蛋白。當(dāng)葡葡萄糖萄糖-6-磷酸脫氫酶（磷酸脫氫酶（G-6-PD）含量正常時，含量正常時，由由磷酸戊糖代謝途徑磷酸戊糖代謝途徑生成的生成的NADPH的數(shù)量的數(shù)量足以完成上述還原反應(yīng)。反之，則還原速足以完成上述還原反應(yīng)。反之，則還原

13、速度減慢，甚至不能還原。度減慢，甚至不能還原。高鐵血紅蛋白還原試驗高鐵血紅蛋白還原試驗v高鐵血紅蛋白試驗示意高鐵血紅蛋白試驗示意圖，右邊試管為圖，右邊試管為G-6-PD含量正常，左邊試管為含量正常，左邊試管為G-6-PD含量降低，高鐵含量降低，高鐵血紅蛋白不能被高鐵血血紅蛋白不能被高鐵血紅蛋白還原酶還原成（紅蛋白還原酶還原成（亞鐵）血紅蛋白，故呈亞鐵）血紅蛋白，故呈黑褐色黑褐色 【Clinical significance】:還原率降低：還原率降低：見于蠶豆病、藥物反應(yīng)（見于蠶豆病、藥物反應(yīng)（如伯氨喹啉、磺胺吡啶等如伯氨喹啉、磺胺吡啶等) 珠蛋白生成異常的檢測珠蛋白生成異常的檢測血紅蛋白電泳血

14、紅蛋白電泳溶血性貧血常用的特殊檢查【reference value】:瓊脂膠電泳：瓊脂膠電泳：HbA 95%，HbA2 1.63.5%，HbF 0.21.0%?！綜linical significance】:HbA2增高增高：主要見于主要見于輕型地中海貧血，亦可見輕型地中海貧血，亦可見于巨幼細胞性貧血，惡性貧血等。于巨幼細胞性貧血，惡性貧血等。HbA2降低：降低：缺鐵性貧血及鐵粒幼細胞貧血。缺鐵性貧血及鐵粒幼細胞貧血。 自身免疫性溶血性貧血（自身免疫性溶血性貧血（AIHA）檢測）檢測抗人球蛋白試驗抗人球蛋白試驗抗人球蛋白試驗（抗人球蛋白試驗（Coombs 試驗）試驗）【principle】:紅

15、細胞的膜電位使二個紅細胞紅細胞的膜電位使二個紅細胞間保持一定距離。不完全抗體（間保持一定距離。不完全抗體（IgG）無法）無法架接兩個鄰近的紅細胞而只能和一個紅細架接兩個鄰近的紅細胞而只能和一個紅細胞抗原相結(jié)合?？谷饲虻鞍卓贵w是完全抗胞抗原相結(jié)合。抗人球蛋白抗體是完全抗體，可與多個不完全抗體的體，可與多個不完全抗體的Fc段相結(jié)合，段相結(jié)合，導(dǎo)致紅細胞凝集現(xiàn)象，稱為抗人球蛋白試導(dǎo)致紅細胞凝集現(xiàn)象，稱為抗人球蛋白試驗陽性。直接抗人球蛋白試驗陽性說明病驗陽性。直接抗人球蛋白試驗陽性說明病人人紅細胞紅細胞表面上包被有不完全抗體。而間表面上包被有不完全抗體。而間接抗人球蛋白試驗陽性則說明病人接抗人球蛋白試

16、驗陽性則說明病人血清血清中中存在著不完全抗體。存在著不完全抗體。直接直接CoombsCoombs試驗試驗不完全抗體不完全抗體檢測檢測紅細胞紅細胞上抗體上抗體間接間接CoombsCoombs試驗試驗檢測檢測血清血清中的抗紅細胞抗體中的抗紅細胞抗體【Clinical significance】:直接直接Coombs試驗陽性試驗陽性：見于自身免疫性溶血性貧血、藥物免疫見于自身免疫性溶血性貧血、藥物免疫性溶血性貧血。性溶血性貧血。間接間接Coombs試驗陽性：試驗陽性：主要用于主要用于Rh或或ABO妊娠免疫性新生兒溶妊娠免疫性新生兒溶血病母體血清中不完全抗體的檢測。血病母體血清中不完全抗體的檢測。 患

17、者女，患者女，34歲。左上腹部腫塊，乏力、頭歲。左上腹部腫塊，乏力、頭暈暈2個月。查體：胸骨輕度壓痛，肝肋下個月。查體：胸骨輕度壓痛，肝肋下2.5cm，脾明顯腫大，肋下略過臍水平線。，脾明顯腫大，肋下略過臍水平線?；灒貉t蛋白化驗：血紅蛋白88g/L，紅細胞計數(shù)，紅細胞計數(shù)31012/L，白細胞計數(shù)，白細胞計數(shù)176109/L，分類，分類見中性粒細胞核左移，伴幼稚細胞，嗜酸、見中性粒細胞核左移，伴幼稚細胞，嗜酸、嗜堿性粒細胞也增高，血小板嗜堿性粒細胞也增高，血小板350109/L。如何進行下一步檢查？如何進行下一步檢查？L/O/G/O第三節(jié)第三節(jié)骨髓細胞學(xué)檢測骨髓細胞學(xué)檢測 骨髓細胞學(xué)檢查骨

18、髓細胞學(xué)檢查適應(yīng)證適應(yīng)證（1）外周血細胞數(shù)量及形態(tài)異常：）外周血細胞數(shù)量及形態(tài)異常：出現(xiàn)原始細胞，幼稚細胞等。出現(xiàn)原始細胞，幼稚細胞等。（2）不明原因的發(fā)熱，肝腫大，脾腫）不明原因的發(fā)熱，肝腫大，脾腫大，淋巴結(jié)腫大。大，淋巴結(jié)腫大。（3）診斷惡性疾病骨髓轉(zhuǎn)移。）診斷惡性疾病骨髓轉(zhuǎn)移。（4）治療監(jiān)測。）治療監(jiān)測。禁忌證禁忌證 嚴(yán)重出血傾向者如嚴(yán)重出血傾向者如血友病等。血友病等。骨髓細胞學(xué)檢查骨髓細胞學(xué)檢查骨髓細胞學(xué)檢查的內(nèi)容和方法骨髓細胞學(xué)檢查的內(nèi)容和方法低倍鏡檢查：低倍鏡檢查：觀察骨髓標(biāo)本的取材和涂片制作是否滿意。觀察骨髓標(biāo)本的取材和涂片制作是否滿意。判斷判斷骨髓增生程度骨髓增生程度。以有核細

19、胞的量來反映。一。以有核細胞的量來反映。一般低倍鏡觀察般低倍鏡觀察有核細胞有核細胞與與成熟紅細胞成熟紅細胞之間的比例。之間的比例。通常分為五級：增生極度活躍（通常分為五級：增生極度活躍（1：1）、明顯活）、明顯活躍（躍（1：10）、）、活躍（活躍（1：20）、減低（減低（1：50）、）、極度減低（極度減低（1：200）。觀察巨核細胞。觀察巨核細胞。注意有無注意有無異常細胞異常細胞。巨核細胞巨核細胞轉(zhuǎn)移癌細胞轉(zhuǎn)移癌細胞增生程度示意圖增生程度示意圖骨髓增生程度的臨床意義：骨髓增生程度的臨床意義：增生極度活躍：增生極度活躍：反映骨髓造血功能亢進，反映骨髓造血功能亢進，常見于白血病。常見于白血病。增生

20、明顯活躍：增生明顯活躍：反映骨髓造血功能旺盛，反映骨髓造血功能旺盛，見于各種增生性貧血，白血病、骨髓增殖見于各種增生性貧血，白血病、骨髓增殖性疾病等，以及正常兒童及青年的骨髓象。性疾病等，以及正常兒童及青年的骨髓象。骨髓增生程度的臨床意義骨髓增生程度的臨床意義 增生活躍：增生活躍：反映骨髓造血功能基本正常，反映骨髓造血功能基本正常，見于正常人骨髓象等。見于正常人骨髓象等。增生減低：增生減低：反映骨髓造血功能減低，見于反映骨髓造血功能減低，見于再障等。再障等。增生極度減低增生極度減低:反映骨髓造血功能衰竭，見反映骨髓造血功能衰竭，見再障（急性型）、骨髓壞死等。再障（急性型）、骨髓壞死等。油鏡檢查

21、內(nèi)容油鏡檢查內(nèi)容 有核細胞分類計數(shù)：連續(xù)分類計數(shù)有核細胞分類計數(shù)：連續(xù)分類計數(shù)200個或個或500個有核細胞，按細胞的不同系列和不同發(fā)育階段個有核細胞，按細胞的不同系列和不同發(fā)育階段分別計數(shù)，計算各階段細胞所占的百分比。再累分別計數(shù)，計算各階段細胞所占的百分比。再累計粒細胞系總數(shù)和幼紅細胞總數(shù)，計算計粒細胞系總數(shù)和幼紅細胞總數(shù)，計算粒紅比例粒紅比例（G:E），正常為，正常為24:1。觀察細胞形態(tài)：進行分類計數(shù)時，同時觀察形態(tài)觀察細胞形態(tài)：進行分類計數(shù)時，同時觀察形態(tài)是否正常，有無異常細胞，寄生蟲等。是否正常，有無異常細胞，寄生蟲等。骨髓檢查結(jié)果分析骨髓檢查結(jié)果分析1.增生程度：正常為增生活躍（

22、增生程度：正常為增生活躍（1:20）2.各系列細胞及發(fā)育階段的比例各系列細胞及發(fā)育階段的比例 粒粒 系系 ：5060%紅紅 系系 ：20%，粒，粒:紅為（紅為（24）:1 淋淋 巴巴 系：系：20%，以成熟淋巴細胞為主，以成熟淋巴細胞為主 單單 核核 系：系：5%，以成熟單核細胞為主，以成熟單核細胞為主 漿漿 細細 胞胞 系：系：2%，以成熟漿細胞為主，以成熟漿細胞為主 巨核細胞系：因參數(shù)不同而有較大波動巨核細胞系：因參數(shù)不同而有較大波動外周血象檢查外周血象檢查1)1)WBCWBC分類計數(shù)：注意有無形態(tài)異?；蛴字煞诸愑嫈?shù)：注意有無形態(tài)異常或幼稚細胞細胞2)2)成熟成熟RBCRBC有無形態(tài)異常有

23、無形態(tài)異常3)3)估計估計PLTPLT數(shù)量及其形態(tài)有無異常數(shù)量及其形態(tài)有無異常4)4)注意有無寄生蟲注意有無寄生蟲造血干細胞的分化及增殖示意圖骨 髓 系 干 細 胞淋 巴 系 干 細 胞全 能 干 細 胞T，B淋巴系祖細胞淋巴系祖細胞紅系，巨核系，嗜酸，嗜紅系，巨核系，嗜酸，嗜堿系，粒堿系，粒-單核系祖細胞單核系祖細胞向下分化向下分化向下分化向下分化血細胞發(fā)育過程中形態(tài)學(xué)變化的一般規(guī)律 細胞體積細胞體積:大大小，巨核細胞小小，巨核細胞小大大 核質(zhì)比例核質(zhì)比例:大大小，巨核細胞相反小，巨核細胞相反 細胞質(zhì)：細胞質(zhì)：量：量：少少多，淋巴細胞變化不明顯多，淋巴細胞變化不明顯 顏色：顏色：深藍深藍淺藍

24、，紅系逐漸變?yōu)榻奂t色淺藍，紅系逐漸變?yōu)榻奂t色 顆粒變化：顆粒變化：）無）無有有 ）非特異性顆粒）非特異性顆粒特異性顆粒特異性顆粒 細胞核：細胞核：大大小，巨核細胞相反小，巨核細胞相反 核形：核形：由圓形由圓形不規(guī)則形，粒系最后呈分葉不規(guī)則形，粒系最后呈分葉狀，淋巴細胞和漿細胞核形變化不大狀，淋巴細胞和漿細胞核形變化不大 核染色質(zhì)：核染色質(zhì)：細致疏松細致疏松粗糙密集粗糙密集濃集呈塊濃集呈塊狀狀 核膜：核膜：不明顯不明顯明顯明顯 核仁：核仁：有有無（無（核仁是原始細胞的重要標(biāo)志核仁是原始細胞的重要標(biāo)志） 血細胞的正常形態(tài)學(xué)特征血細胞的正常形態(tài)學(xué)特征 紅細胞系統(tǒng)紅細胞系統(tǒng)原紅細胞原紅細胞原原紅紅晚幼

25、紅細胞晚幼紅細胞 中幼紅細胞中幼紅細胞 原粒細胞原粒細胞早幼粒細胞早幼粒細胞 中幼粒細胞中幼粒細胞 粒細胞系統(tǒng)粒細胞系統(tǒng)晚幼粒細胞晚幼粒細胞 分葉核粒細胞分葉核粒細胞 桿狀核粒細胞桿狀核粒細胞 粒細胞系統(tǒng)粒細胞系統(tǒng)原淋巴細胞原淋巴細胞 幼淋巴細胞幼淋巴細胞 大淋巴細胞大淋巴細胞 小淋巴細胞小淋巴細胞 淋巴細胞系統(tǒng)淋巴細胞系統(tǒng)原單核細胞原單核細胞幼單核細胞幼單核細胞單核細胞單核細胞單核細胞系統(tǒng)單核細胞系統(tǒng)漿細胞系統(tǒng)漿細胞系統(tǒng)原漿細胞原漿細胞幼漿細胞幼漿細胞漿細胞漿細胞 巨核細胞系統(tǒng)巨核細胞系統(tǒng)顆粒型巨核細胞顆粒型巨核細胞 幼巨核細胞幼巨核細胞 原巨核細胞原巨核細胞 血小板血小板 巨核細胞裸核巨核

26、細胞裸核 產(chǎn)血小板型巨核細胞產(chǎn)血小板型巨核細胞 L/O/G/O 血細胞的細胞化學(xué)染色血細胞的細胞化學(xué)染色（P272） 【principle】:粒細胞和部分單核細胞粒細胞和部分單核細胞的溶酶體的溶酶體顆粒中含有顆粒中含有POX,POX能分解試劑中的底物能分解試劑中的底物H2O2，釋放新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化為藍釋放新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化為藍色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍黑色的顆粒，沉著于細胞質(zhì)中。黑色的顆粒，沉著于細胞質(zhì)中。1.過氧化物酶(POX)染色：【Clinical significance】:主要用于急性白血病類型的鑒別主要用于急性

27、白血病類型的鑒別:急性粒細胞白血病時，白血病細胞多呈急性粒細胞白血病時，白血病細胞多呈強陽性反應(yīng)；強陽性反應(yīng)；急性單核細胞白血病時急性單核細胞白血病時,呈弱陽性反應(yīng)呈弱陽性反應(yīng)或陰性反應(yīng)；或陰性反應(yīng)；急性淋巴細胞白血病呈陰性反應(yīng)。急性淋巴細胞白血病呈陰性反應(yīng)。2.中性粒細胞堿性磷酸酶(NAP)染色 【principle】:（偶氮偶聯(lián)法）偶氮偶聯(lián)法）血細胞中血細胞中的堿性磷酸酶在的堿性磷酸酶在pH為為9.49.6的條件的條件下將基質(zhì)中的下將基質(zhì)中的磷酸萘酚鈉水解，產(chǎn)生磷酸萘酚鈉水解，產(chǎn)生-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀，萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀，定位于細胞質(zhì)內(nèi)酶活性所在之處。定位于細胞質(zhì)內(nèi)

28、酶活性所在之處。 正常人的白細胞堿性磷酸酶于正常人的白細胞堿性磷酸酶于成熟成熟中性粒細中性粒細胞（分葉核及桿狀核）可見。胞（分葉核及桿狀核）可見。判斷標(biāo)準(zhǔn)及分級判斷標(biāo)準(zhǔn)及分級 計算積分值計算積分值 油鏡下計數(shù)油鏡下計數(shù)100個成熟中性粒個成熟中性粒細胞，分別記錄其分級情況，全部陽性反應(yīng)細胞，分別記錄其分級情況，全部陽性反應(yīng)之和，即為陽性率。將各種積分的百分率乘之和，即為陽性率。將各種積分的百分率乘以該積分數(shù)，然后相加，即為總積分值。以該積分數(shù)，然后相加，即為總積分值。NAP陽性率陽性率1040%，積分，積分4080。NAP染色判斷標(biāo)準(zhǔn)及分級 -0分分 胞質(zhì)中無陽性染色顆粒胞質(zhì)中無陽性染色顆粒+

29、1分分 胞質(zhì)中含少量顆?；驈浡\色胞質(zhì)中含少量顆粒或彌漫淺色+2分分 胞質(zhì)中含中等量顆?；驈浡钌|(zhì)中含中等量顆粒或彌漫深色 +3分分 胞質(zhì)中含較多顆?；驈浡^深色胞質(zhì)中含較多顆粒或彌漫較深色+4分分 胞質(zhì)充滿粗大顆?；驈浡钌|(zhì)充滿粗大顆?；驈浡钌?NAP用于下列疾病的鑒別診斷用于下列疾病的鑒別診斷 感染性疾病的鑒別：感染性疾病的鑒別：化膿菌感染化膿菌感染NAP 病毒性感染病毒性感染NAP 慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病 ，類白血病反應(yīng)，類白血病反應(yīng) PNH ，AA（再障）（再障）急性粒細胞白血病急性粒細胞白血病 ，急性淋巴細胞白血病，急性淋巴細胞白血病3.鐵染色：【principl

30、e】:骨髓內(nèi)的鐵蛋白及含鐵血黃素骨髓內(nèi)的鐵蛋白及含鐵血黃素（細胞外鐵）和幼紅細胞內(nèi)的鐵粒（細胞（細胞外鐵）和幼紅細胞內(nèi)的鐵粒（細胞內(nèi)鐵）在鹽酸環(huán)境下與亞鐵氰化鉀作用，內(nèi)鐵）在鹽酸環(huán)境下與亞鐵氰化鉀作用，生成亞鐵氰化鐵，在普魯士藍染色中，鐵生成亞鐵氰化鐵，在普魯士藍染色中，鐵可染成藍色顆粒，小珠及小塊。可染成藍色顆粒，小珠及小塊。 鐵染色示意圖，圖中藍色箭頭所指為細胞內(nèi)鐵，鐵染色示意圖，圖中藍色箭頭所指為細胞內(nèi)鐵，黑色箭頭所指為細胞外鐵黑色箭頭所指為細胞外鐵 +細胞外鐵分級示意圖細胞外鐵分級示意圖【reference value】:細胞外鐵：正常人細胞外鐵為細胞外鐵：正常人細胞外鐵為“”“”?！?/p>

31、”有少量鐵?；騼H見少量鐵小珠；有少量鐵?；騼H見少量鐵小珠；“”有多量鐵粒和鐵珠；有多量鐵粒和鐵珠；細胞內(nèi)鐵（鐵粒幼細胞）：陽性細胞（胞質(zhì)細胞內(nèi)鐵（鐵粒幼細胞）：陽性細胞（胞質(zhì)中有藍色顆粒者）的百分率為中有藍色顆粒者）的百分率為2090。無環(huán)狀鐵粒幼細胞。無環(huán)狀鐵粒幼細胞?！綜linical significance】:貧血的診斷和鑒別診斷貧血的診斷和鑒別診斷1.缺鐵性貧血缺鐵性貧血(IDA)：細胞外鐵消失，細胞內(nèi)鐵細胞外鐵消失，細胞內(nèi)鐵（鐵粒幼細胞）（鐵粒幼細胞）1515甚至陰性。甚至陰性。2.非缺鐵性貧血（珠蛋白生成障礙性貧血、溶非缺鐵性貧血（珠蛋白生成障礙性貧血、溶血性貧血、巨幼細胞性貧血等），細胞外鐵血性貧血、巨幼細胞性貧血等），細胞外鐵多增加。多增加。3.3.鐵粒幼細胞貧血：細胞外鐵增多，出現(xiàn)較多鐵粒幼細胞貧血：細胞外鐵增多，出現(xiàn)較多環(huán)狀鐵粒幼細胞。環(huán)狀鐵粒幼細胞。鐵粒幼細胞貧血細胞內(nèi)鐵百分率增多，形成環(huán)狀鐵粒幼鐵粒幼細胞貧血細胞內(nèi)鐵百分率增多，形成環(huán)狀鐵粒幼細胞細胞 血紅蛋白尿血紅蛋白尿游離游離血紅蛋白血紅蛋白氧化氧化高鐵血紅蛋白高鐵血紅蛋白珠蛋白珠蛋白高鐵血紅素高鐵血紅素+清蛋白清蛋白高鐵血紅素清蛋白高鐵血紅素清蛋白L/O/G/OThank You!