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1、《 生物化學(xué)實驗 》課程實驗教學(xué)大綱
一、課程代碼：08100094 課程名稱：生物化學(xué)實驗
二、實驗類別：專業(yè)基礎(chǔ)實驗 課程學(xué)分：2
三、實驗總學(xué)時：33 開課學(xué)期： 2011-2012學(xué)年第一學(xué)期
四、應(yīng)開實驗個數(shù)： 11 必開實驗個數(shù)：11
五、面向?qū)W科專業(yè)：生物科學(xué)
六、實驗成績評定方法：考核（實際操作占20％、實驗報告占50％、技能考核占30％）
七、實驗成績占課程總成績比例：100%
八、實驗教材或自編指導(dǎo)書：生物化學(xué)實驗 科學(xué)出版社
九、實驗室名稱：生物化學(xué)實驗室
2、
（一）課程簡介：
生物化學(xué)實驗課程是生命科學(xué)教學(xué)中重要的基礎(chǔ)課，主要圍繞生物體的組成成分如：蛋白質(zhì)，核酸，酶等生物大分子的基本性質(zhì)等方面入手，幫助學(xué)生掌握生物化學(xué)的基本實驗方法和技能，包括層析、比色、電泳、生化物質(zhì)的分離、制備、分析和鑒定及實驗方法、操作技術(shù)和一些基本儀器的原理和使用，培養(yǎng)學(xué)生基本實驗技能，提高綜合分析問題的能力。
（二）實驗?zāi)康暮鸵螅?
通過本課程的教學(xué)使學(xué)生了解和掌握現(xiàn)代生物科學(xué)研究對本課程的需求，了解生物化學(xué)技術(shù)的基本原理、方法和技能，包括生物物質(zhì)的性質(zhì)鑒定、含量測定、生化分離技術(shù)的分離原理（包括鹽析、等電點分離技術(shù)、電泳技術(shù)、色譜技術(shù)等）。通過學(xué)生的獨
3、立實驗設(shè)計和實踐，訓(xùn)練學(xué)生分析問題和解決問題的能力及實際動手能力，同時培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新思維及對生命科學(xué)探索的興趣和愛好。
要求學(xué)生課前預(yù)習(xí)，寫好預(yù)習(xí)報告，實驗過程中仔細(xì)觀察，認(rèn)真記錄，課后做實驗報告。
（三）實驗項目列表：
實驗編號
實驗項目名稱
實驗類型
實驗學(xué)時
要求
實驗一
生物化學(xué)實驗基本知識
蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
綜合性
3
必開
實驗二
蛋白質(zhì)等電點測定和沉淀反應(yīng)
設(shè)計性
3
必開
實驗三
紙層析法分離鑒定氨基酸
綜合性
3
必開
實驗四
醋酸纖維薄膜電泳分離血清蛋白
綜合性
3
必開
實驗五
蛋白質(zhì)的定量測定（紫外分光
4、法）
綜合性
3
必開
實驗六
總氮量的測定-微量凱氏定氮法
綜合性
3
必開
實驗七
酵母RNA的分離及組分鑒定
綜合性
3
必開
實驗八
菜花中核酸的分離和鑒定
設(shè)計性
3
必開
實驗九
唾液淀粉酶的性質(zhì)
綜合性
3
必開
實驗十
小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較
設(shè)計性
3
必開
實驗十一
維生素C的提取及定量測定
綜合性
3
必開
實驗一 生物化學(xué)實驗基本知識
蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
1 了解實驗室規(guī)則和常用生化儀器名稱，掌握實驗記錄
5、與實驗報告的寫法以及實驗室一些基本知識，掌握緩沖溶液的配制方法，初步掌握一些儀器的正確操作。
2 掌握鑒定蛋白質(zhì)的原理和方法。
（三）實驗內(nèi)容：
蛋白質(zhì)和氨基酸與一些顯色劑反應(yīng)呈現(xiàn)一定的顏色反應(yīng)。
（四）要 求：
通過實驗了解蛋白質(zhì)的一些顏色反應(yīng)，掌握鑒定蛋白質(zhì)的方法。
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗二 蛋白質(zhì)等電點測定和沉淀反應(yīng)
學(xué)時：3
（一）實驗類型：設(shè)計性
（二）實驗?zāi)康模?
1 熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)。
2 進一步掌握蛋白質(zhì)的有關(guān)性質(zhì)
3 了解蛋白質(zhì)的
6、兩性解離性質(zhì)。
4 學(xué)習(xí)測定蛋白質(zhì)等電點的一種方法。
（三）實驗內(nèi)容：
蛋白質(zhì)的沉淀和變性，蛋白質(zhì)的等電點的測定
（四）要 求：
了解各種沉淀試劑使蛋白質(zhì)沉淀的實質(zhì)和區(qū)分可逆的鹽析沉淀及不可逆的沉淀作用。掌握測定蛋白質(zhì)等電點的方法。
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗三 紙層析法分離鑒定氨基酸
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
了解并掌握氨基酸紙層析的原理和方法
（三）實驗內(nèi)容：
以濾紙為支持物，樣品在不同溶劑系統(tǒng)中分配系數(shù)不同，將各種氨基酸分離，并用茚三酮染色，分
7、析計算移動速率，鑒定氨基酸的種類。
（四）要 求：
掌握氨基酸紙層析的實驗原理，并鑒定混合液中的氨基酸組分。
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗四 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
掌握醋酸纖維薄膜電泳法分離蛋白質(zhì)的原理和方法，了解電泳技術(shù)的一般原理
（三）實驗內(nèi)容：
以醋酸纖維薄膜為支持物進行電泳，血清中各種蛋白質(zhì)在電場中移動速率不同，可利用電泳法將它們分離。
（四）要 求：
掌握電泳分離血清蛋白質(zhì)的方法
（五）每組人數(shù)：
8、1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗五 蛋白質(zhì)的定量測定（紫外吸收法）
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
了解紫外吸收法測定蛋白質(zhì)濃度的原理
熟悉紫外分光光度計的使用
（三）實驗內(nèi)容：
本實驗根據(jù)蛋白質(zhì)組成中芳香族的氨基酸在紫外光280nm波長處有最大吸收峰，一定濃度范圍內(nèi)其濃度與吸光度成正比，用紫外分光光度計通過比色法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，測定溶液中蛋白質(zhì)的濃度。
（四）要 求：
掌握蛋白質(zhì)的定量測定的方法，掌握紫外分光光度計的使用方法
（五）每組人數(shù)：4人
（六）主要儀器設(shè)備及
9、配套數(shù)：T6紫外可見分光光度計 2套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗六 總氮量的測定-微量凱氏定氮法
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
掌握凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法
學(xué)會使用凱氏定氮儀
（三）實驗內(nèi)容：
用凱氏定氮法測定樣品中蛋白氮的含量，并進一步求得樣品中蛋白質(zhì)的含量。
（四）要 求：
掌握凱氏定氮儀的使用方法，學(xué)會測定蛋白質(zhì)含量的一種方法。
（五）每組人數(shù)：4人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：凱氏定氮儀 6套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗七 酵母RNA的分離及組分鑒定
學(xué)時： 3
（一）實驗類
10、型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
了解核酸的組分，并掌握鑒定核酸和測定RNA含量的方法
（三）實驗內(nèi)容：
酵母核酸中RNA含量較多，在堿提取液中加入酸性乙醇溶液可以使核糖核酸沉淀，得到RNA粗制品，繼而用苔黑酚法測定RNA 的含量
（四）要 求：
掌握稀堿法提取酵母RNA 的方法，掌握用苔黑酚法測定RNA含量的方法。
（五）每組人數(shù)：4人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：TDZ5-WS臺式離心機 2套
T6紫外分光光度計 2套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗八 菜花中核酸的分離和鑒定
學(xué)時： 3
（
11、一）實驗類型：設(shè)計性
（二）實驗?zāi)康模?
學(xué)習(xí)和掌握從菜花中分離核酸的原理和操作技術(shù)
（三）實驗內(nèi)容：
用冰冷的稀三氯醋酸和稀高氯酸溶液在低溫下抽提菜花勻漿，以除去酸溶性小分子，再用有機溶劑抽提去掉脂溶性物質(zhì)，最后用濃鹽溶液和高氯酸分別提取DNA和RNA，再進行定性和定量測定。
（四）要 求：
自行設(shè)計實驗并掌握從組織中分離核酸的方法，并能進行定性定量測定。
（五）每組人數(shù)：4人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：TDZ5-WS臺式離心機 2臺
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗九 唾液淀粉酶的性質(zhì)
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
了解溫
12、度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響
學(xué)習(xí)測定酶的最適溫度、最適pH的方法
（三）實驗內(nèi)容：
本實驗以唾液淀粉酶對淀粉及蔗糖的催化作用,觀察酶的專一性.以淀粉及蔗糖的酶水解產(chǎn)物與Benedict試劑的顏色反應(yīng)觀察淀粉酶,蔗糖酶的專一性.由于有些物質(zhì)可作為激活劑，能提高酶活性，有些物質(zhì)可作為抑制劑，能降低酶活性，也能影響淀粉被水解的程度。因此，通過與碘產(chǎn)生的顏色反應(yīng)判斷淀粉被水解的程度，了解激活劑和抑制劑對酶促作用的影響。
（四）要 求：
掌握酶的專一性，及溫度、pH、激活劑及抑制劑對酶活力的影響
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25
13、套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗十 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較
學(xué)時：3
（一）實驗類型：設(shè)計性
（二）實驗?zāi)康模?
學(xué)習(xí)測定淀粉酶活力的方法
了解小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的變化
（三）實驗內(nèi)容：
小麥發(fā)芽→酶液提取→酶活力測定→酶活力計算
（四）要 求：
自行設(shè)計實驗測定小麥萌發(fā)前后淀粉酶的活力
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
實驗十一 維生素C的提取及定量測定
學(xué)時：3
（一）實驗類型：綜合性
（二）實驗?zāi)康模?
掌握2,6-二氯酚靛酚法測定維生素C的原理和方法
（三）實驗內(nèi)容：
從新鮮果蔬中提取維生素C，通過2,6-二氯酚靛酚法滴定法結(jié)合公式計算維生素C 的含量。?
（四）要 求：
掌握提取維生素C的方法及其鑒定其含量的方法
（五）每組人數(shù)：1人
（六）主要儀器設(shè)備及配套數(shù)：常規(guī)儀器 25套
（七）所屬實驗室：生物化學(xué)實驗室
《-生物化學(xué)實驗-》課程實驗教學(xué)大綱
