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1、xjtuxjtuxjtu第十四章 醫(yī)院環(huán)境微生物xjtuxjtuxjtu概述F一 概念F醫(yī)院感染:是指病人在入院時(shí)不存在、也不處于潛伏期而在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染，同時(shí)也包括在醫(yī)院內(nèi)感染而出院后才發(fā)病的病人。F二 對(duì)象：住院病人、醫(yī)護(hù)人員、門診病人、陪護(hù)人員、探視人員。xjtuxjtuxjtuF三、醫(yī)院感染情況醫(yī)院感染情況F據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)告，全球每年有140萬(wàn)名患者在住院期間發(fā)生醫(yī)院感染。F我國(guó)醫(yī)院感染事故也屢見報(bào)道，感染的病原多種，以各種途徑傳播。xjtuxjtuxjtuF四、醫(yī)院感染案例醫(yī)院感染案例F案例案例1 1991年11月，某縣醫(yī)院發(fā)生新生兒鼠傷寒的暴發(fā)流行，55名嬰兒發(fā)病，2
2、3名嬰兒死亡。在對(duì)感染原因的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，該院衛(wèi)生設(shè)施條件差，產(chǎn)科消毒、隔離制度不嚴(yán)，在對(duì)產(chǎn)房、嬰兒室的56件物品進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)其中的26件物品，包括嬰兒被褥、尿布、奶瓶等都培養(yǎng)有鼠傷寒沙門菌生長(zhǎng)。xjtuxjtuxjtuF案例案例2 1992年9月，某市醫(yī)院發(fā)生志賀痢疾桿菌C群13型暴發(fā)流行，26名新生兒感染，10名新生兒死亡。感染源系志賀氏痢疾桿菌攜帶者的產(chǎn)婦，通過接觸傳染給其嬰兒。因該院新生兒室無(wú)配奶間，配奶、換尿布、打包操作均在不足兩平方米的操作臺(tái)上進(jìn)行，通過污染的牛奶在新生兒之間傳播。xjtuxjtuxjtuF案例案例3 1993年9月10月期間，沈陽(yáng)市某婦嬰保健院共接生了244
3、名嬰兒，其中49名于出生后318天先后出現(xiàn)發(fā)燒、拒乳、黃疸及心、肝、腎多臟器受損癥狀，并有15名重癥患兒死于DIC及多器官功能衰竭。此次暴發(fā)感染源系兩名已攜帶柯薩奇B族病毒的產(chǎn)婦，其所產(chǎn)兩名嬰兒被感染，后在嬰兒室內(nèi)引起了交叉感染。xjtuxjtuxjtuF案例案例4 1999年，上海某醫(yī)院多個(gè)病區(qū)約一周內(nèi)先后有10名患者、護(hù)士和醫(yī)生出現(xiàn)全身皮膚瘙癢和皮損，診斷為疥瘡（疥螨）。F案例案例5 2001年，上海某醫(yī)院兒科心臟術(shù)后發(fā)生18例肺炎克雷伯菌血液感染。xjtuxjtuxjtuF案例案例6 1998年深圳市某醫(yī)院集體感染事件暴發(fā)流行，系由于手術(shù)器械滅菌使用的戊二醛濃度偏低，造成術(shù)后切口膿腫分枝
4、桿菌感染。F案例案例7 2009年3月，天津市某保健院發(fā)生新生兒醫(yī)院感染事件醫(yī)院感染事件，6例重癥感染患兒中有5例患兒死亡。其中，3例患兒診斷為新生兒敗血癥，血培養(yǎng)結(jié)果均為陰溝腸桿菌陽(yáng)性。xjtuxjtuxjtuF案案例例8 2008年12月2009年1月間，在山西某職工醫(yī)院進(jìn)行血液透析的47名患者中有 20名患者丙肝抗體陽(yáng)性。調(diào)查表明，對(duì)丙肝抗體陽(yáng)性患者不能實(shí)施專機(jī)血液透析和專區(qū)處理血液透析器，對(duì)反復(fù)用血液透析器消毒處理方法不規(guī)范，存在交叉感染的安全隱患。xjtuxjtuxjtuF案例案例9 2008年8月9月，發(fā)生在西安交大某醫(yī)院的新生兒集體感染事件，死亡的8名患兒都是早產(chǎn)兒或體重不足2.
5、5kg的低體重兒。對(duì)部分醫(yī)務(wù)人員手、病房物體表面、新生兒使用的奶瓶和奶嘴、新生兒暖箱注水口等進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)有金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯桿菌污染且這些病原菌為多重耐藥性菌株。xjtuxjtuxjtuF五、醫(yī)院感染微生物的類別變化F1 在青霉素和磺胺藥問世前，醫(yī)院感染的微生物大多數(shù)是由A型鏈球菌引起。F2 19401950年間青霉素、磺胺藥使用后，則以金黃色葡萄球菌為主。F3 20世紀(jì)70年代臨床開始使用頭孢類和氨基糖甙類抗生素，引起醫(yī)院感染的革蘭氏陰性桿菌上升，特別是銅綠假單胞菌和腸桿菌科細(xì)菌。xjtuxjtuxjtuF4 隨著對(duì)革蘭氏陰性桿菌有效藥物的研制生產(chǎn)、介入性診療技術(shù)和免疫抑制劑等的使
6、用，70年代末80年代初革蘭氏陽(yáng)性球菌又一次成為重要的醫(yī)院感染微生物。F5 在1990年一1996年間，3種主要革蘭氏陽(yáng)性球菌如金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌（表皮、人、溶血、頭、華納葡萄球菌）、腸球菌約占院內(nèi)感染的34，四種主要革蘭氏陰性桿菌如銅綠假單胞菌、大腸桿菌、腸桿菌屬細(xì)菌、肺炎克雷伯氏菌約占院內(nèi)感染的32。xjtuxjtuxjtu一 醫(yī)院環(huán)境的生境特征F1.醫(yī)院是病人集中的場(chǎng)所，也就是各種病原微生物聚集的地方，是最大的醫(yī)源性感染源。F2.醫(yī)院病人多為易感人群 F現(xiàn)代社會(huì)和醫(yī)學(xué)的發(fā)展造就了一大批免疫力低下的人群：xjtuxjtuxjtuF（1）器官移植學(xué)的重大突破（免疫抑制劑的使用
7、）F（2）特殊病原體和新的病原體的感染仍沒有很好的治療措施，仍在迅速的傳播F（3）腫瘤、血液及一些代謝性疾病的病人不斷增加（放、化療后引起骨髓抑制、中性粒細(xì)胞下降，95%有菌血癥）F（4）社會(huì)趨向老齡化（2011,13.26%）xjtuxjtuxjtuF3.侵入性診治措施（插管、穿刺、透析）的應(yīng)用 F感染機(jī)會(huì)增多F4.抗生素的大量使用及不合理應(yīng)用 F使細(xì)菌的耐藥性增加，多重耐藥菌株在流行xjtuxjtuxjtuF5.激素的應(yīng)用F6.消毒滅菌措施效果不達(dá)標(biāo)F滅菌不徹底、不合格F7.醫(yī)院內(nèi)病原種類多、密度大、構(gòu)成復(fù)雜xjtuxjtuxjtu二 醫(yī)院內(nèi)感染病原體特點(diǎn)F1.正常菌群或條件致病菌感染F原
8、因：抗菌藥物濫用、侵襲性診療。F常見：銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、大腸埃希菌、不動(dòng)桿菌、凝固酶陰性葡萄球菌等。xjtuxjtuxjtuF2.耐藥菌株多見，呈交叉或多重耐藥或泛耐藥F原因：耐藥基因突變、質(zhì)粒轉(zhuǎn)移F交叉耐藥F多重耐藥F泛耐藥xjtuxjtuxjtuF醫(yī)院內(nèi)常見耐藥菌株有:耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）、耐萬(wàn)古霉素的腸球菌、痢疾志賀菌和綠膿桿菌等；F白假絲酵母菌；F耐藥病毒株：HBV、HIV、流感病毒、人巨細(xì)胞病毒等。xjtuxjtuxjtuF3.非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌和真菌感染呈上升 趨勢(shì)F原因：非發(fā)酵革蘭陰性菌分離率低；真菌感染危險(xiǎn)因素F 假單胞菌屬、不動(dòng)桿菌屬、產(chǎn)堿桿菌屬、莫
9、拉菌屬、黃桿菌屬等；白假絲酵母菌、新型隱球菌、霉菌、卡氏肺孢子菌等。F4.病原體抵抗力較強(qiáng)F原因：對(duì)消毒劑的選擇壓力xjtuxjtuxjtu三 醫(yī)院感染的來(lái)源醫(yī)院感染的來(lái)源 F醫(yī)院感染的感染源多為內(nèi)源性即從自身獲得的感染，少數(shù)為外源性感染。F1.病原從自身獲得：微生物來(lái)自病人自身，也稱內(nèi)源性感染。內(nèi)源性感染的微生物常常是人體固有的正常菌群。F侵襲性操作、廣譜抗生素、免疫抑制劑、激素、化療藥物、創(chuàng)傷等。xjtuxjtuxjtuF2病原從他人獲得：微生物感染來(lái)源于醫(yī)院病人、醫(yī)務(wù)人員。病人間、病人與醫(yī)務(wù)人員間通過接觸而感染，其中經(jīng)手傳播的作用很大。F高危科室醫(yī)護(hù)人員、兒童，多重耐藥不動(dòng)桿菌和MRSA
10、的患者或攜帶者。xjtuxjtuxjtuF3病原從醫(yī)院環(huán)境獲得：由于接觸污染的環(huán)境而獲得感染，稱環(huán)境感染。F患者血液、體液、分泌物、排泄物污染空氣、水、醫(yī)療用具、儀器設(shè)備等。xjtuxjtuxjtu四 醫(yī)院內(nèi)感染的感染途徑F醫(yī)院感染途徑多數(shù)是通過接觸感染，主要是通過侵入性檢查和治療引起 F（一）醫(yī)院內(nèi)感染的主要感染部位：肺部感染，尿路感染，手術(shù)傷口感染，胃腸道感染。xjtuxjtuxjtuF（二）不同感染部位的傳播途徑F1.肺部感染F（1）病人口咽部微生物吸入F（2）含細(xì)菌氣溶膠的吸入F（3）其它部位感染的血源性播散xjtuxjtuxjtuF2.尿路感染 多為G-，以內(nèi)源性的腸道桿菌和外源性的
11、洋蔥假單胞菌多見，細(xì)菌主要經(jīng)導(dǎo)尿管等器械進(jìn)入（導(dǎo)尿管消毒不徹底，皮膚消毒不徹底、醫(yī)務(wù)人員手不清潔、導(dǎo)尿管留置時(shí)間長(zhǎng)）。xjtuxjtuxjtuF3.手術(shù)傷口感染 金黃色葡萄球菌、G-桿菌、綠膿桿菌，多通過醫(yī)務(wù)人員手、敷料、消毒液、醫(yī)療器械、空氣感染。F4.胃腸道感染 沙門菌、志賀菌、致病性大腸桿菌、耶爾森菌、輪狀病毒等。xjtuxjtuxjtuF5.血管內(nèi)感染 包括靜脈插管引起的感染和由輸液劑引起的感染。F靜脈插管：金黃色葡萄球菌F輸液劑：G-桿菌，克雷伯菌、腸桿菌屬及沙雷菌屬，HIV,HBV,HCVxjtuxjtuxjtu五 醫(yī)院內(nèi)感染的診斷原則F1.對(duì)有明確潛伏期的感染性疾病，自入院的第1
12、天起，超過平均潛伏期后發(fā)生的感染為醫(yī)院感染，潛伏期不明確者，一般認(rèn)為入院后48h發(fā)生的感染為醫(yī)院感染。xjtuxjtuxjtuF2.病人出院后發(fā)生的感染，認(rèn)定與住院有直接關(guān)系者。F3.慢性感染性疾病在醫(yī)院急性發(fā)作，若發(fā)現(xiàn)新的病原體，為醫(yī)院感染。xjtuxjtuxjtu六 醫(yī)院內(nèi)感染常見病原微生物F(一)、細(xì)菌F1.葡萄球菌F(1)金黃色葡萄球菌 引起的感染疾病有癤、癰、膿包病、燒傷感染、咽炎、扁桃體炎、肺炎、骨髓炎、敗血癥等。FMRSA:在醫(yī)院嬰兒室、重癥監(jiān)護(hù)病房及燒傷病房等常引起嚴(yán)重感染，且為多重耐藥.xjtuxjtuxjtuF(2)凝固酶陰性的葡萄球菌(CNS)：F這類葡萄球包括表皮葡萄球
13、菌、腐生葡萄球菌、人葡萄球菌、頭葡萄球菌、溶血葡萄球菌。引起的感染疾病有菌血癥、敗血癥、皮膚感染、尿路感染、心內(nèi)膜炎、呼吸道感染等。F與侵襲性操作相關(guān)，新生兒與侵襲性操作相關(guān)，新生兒ICUICU及免疫力低及免疫力低下患者人群易于感染的病原下患者人群易于感染的病原xjtuxjtuxjtuF2 克雷伯菌屬：為革蘭氏陰性小桿菌。該菌廣泛存在于自然界的水和土壤中，也是人和動(dòng)物腸道及上呼吸道的正常菌群。FICU最常見的條件致病菌，可引起肺炎、尿道感染、菌血癥等。易感因素為糖尿病、腫瘤患者、抗生素應(yīng)用、全身麻醉、年老體弱、嬰幼兒。xjtuxjtuxjtuF3.大腸埃希菌：普通大腸桿菌在有些情況下可成為條件
14、致病菌，在醫(yī)院感染中占重要地位，尤其在尿道系統(tǒng)院內(nèi)感染中，大腸桿菌占第一位。可引起尿路感染、腹瀉、菌血癥等。F4.沙雷菌屬 來(lái)源于腸道，可引起尿路感染、肺炎、創(chuàng)傷感染、腦膜炎、敗血癥等。xjtuxjtuxjtuF5.綠膿桿菌：在醫(yī)院環(huán)境廣泛存在，尤其是潮濕的環(huán)境。醫(yī)療用器械如霧化器、氧氣濕化瓶、墻式氧氣吸人器連接口也經(jīng)常會(huì)污染該菌，甚至蒸餾水、季銨鹽類、洗必泰等消毒液中也存在銅綠假單胞菌污染。在正常人腸道、呼吸道均可存在銅綠假單胞菌，常引起燒傷感染、肺炎、尿路感染、傷口感染、敗血癥等。F分布潮濕環(huán)境、抵抗力強(qiáng)、致病力強(qiáng)，生物被膜感染上升，且廣泛耐藥。是指細(xì)菌粘附于接觸表面，分泌多糖基質(zhì)、纖維蛋
15、白、脂質(zhì)蛋白等，將其自身包繞其中而形成的大量細(xì)菌聚集膜樣物。xjtuxjtuxjtuF6.不動(dòng)桿菌屬 寄居于人皮膚、黏膜、鼻咽腔、胃腸道、泌尿道，可引起肺炎、傷口感染、敗血癥等。F鮑曼不動(dòng)桿菌（鮑曼不動(dòng)桿菌（發(fā)病率，耐藥率上升，發(fā)病率，耐藥率上升，有有資料報(bào)道從資料報(bào)道從19991999年年-2008-2008年，鮑曼不動(dòng)桿菌年，鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)亞胺培南（新型對(duì)亞胺培南（新型-內(nèi)酰胺類抗生素內(nèi)酰胺類抗生素）的）的耐藥率從耐藥率從10.0%10.0%上升為上升為47.9%47.9%。xjtuxjtuxjtuF7.嗜麥芽寡養(yǎng)（窄食）單胞菌，分離率在非嗜麥芽寡養(yǎng)（窄食）單胞菌，分離率在非發(fā)酵菌中僅次于
16、銅綠假單胞菌和鮑曼氏不發(fā)酵菌中僅次于銅綠假單胞菌和鮑曼氏不動(dòng)桿菌，對(duì)多種抗生素耐藥，主要引起肺動(dòng)桿菌，對(duì)多種抗生素耐藥，主要引起肺部感染。部感染。F8.結(jié)核桿菌xjtuxjtuxjtuF9.非典型分枝桿菌非典型分枝桿菌l龜型分枝桿菌和膿腫分枝桿菌（龜型分枝桿菌和膿腫分枝桿菌（肺部慢性感染，外傷肺部慢性感染，外傷感染、中耳炎、皮膚軟組織感染，特別是術(shù)后易繼發(fā)感染、中耳炎、皮膚軟組織感染，特別是術(shù)后易繼發(fā)感染。感染。）l鳥復(fù)合分枝桿菌鳥復(fù)合分枝桿菌 （MACMAC）:肺部慢性感染肺部慢性感染l偶發(fā)分枝桿菌（偶發(fā)分枝桿菌（為復(fù)合菌群，可導(dǎo)致人的局部感染和為復(fù)合菌群，可導(dǎo)致人的局部感染和肺部病變，對(duì)常
17、規(guī)抗結(jié)核藥物均耐受肺部病變，對(duì)常規(guī)抗結(jié)核藥物均耐受）l恥垢分枝桿菌恥垢分枝桿菌:術(shù)后傷口感染術(shù)后傷口感染xjtuxjtuxjtuF10.副傷寒沙門菌、鼠傷寒沙門菌：動(dòng)物和人的腸道，常引起傷寒F鼠傷寒沙門氏菌是近年來(lái)引起醫(yī)院感染常見病原體，尤其是嬰兒室和兒科病房更為多見，甚至造成該菌的院內(nèi)感染暴發(fā)流行。F11.溶血性鏈球菌：A群鏈球菌xjtuxjtuxjtuF12.厭氧菌：擬桿菌屬、消化鏈球菌屬、產(chǎn)氣莢膜梭菌F抵抗力下降下引起感染：F造成機(jī)體抵抗力下降的全身性疾病F局部組織缺血、缺氧、感染F女性盆腔手術(shù)、胃腸手術(shù)或外傷xjtuxjtuxjtuF(二)、病毒F1.HAV 糞口途徑，食物和飲水F2.
18、HBV 輸血傳播、體液傳播、母嬰傳播、消化道傳播、接觸傳播F3.HCV 輸血傳播、體液傳播、母嬰傳播xjtuxjtuxjtuF4.輪狀病毒 糞口途徑，6歲2歲的嬰幼兒多發(fā)F5.柯薩奇病毒 糞口途徑，新生兒F6.人類免疫缺陷病毒 性傳播、輸血傳播、母嬰傳播F7.鼻病毒、流感病毒、帶狀皰疹病毒、水痘病毒等。xjtuxjtuxjtuF(三)、真菌F白色念珠菌（外陰炎、陰道炎）：國(guó)內(nèi)外報(bào)道，白色念珠菌尿發(fā)生率可高達(dá)50%。F霉菌霉菌：以肺部曲霉菌病最為多見。毛霉感染多繼發(fā)于糖尿病或其他慢性消耗性疾病。l卡氏肺胞菌：卡氏肺胞菌：先天性獲得性免疫缺陷及免疫抑制患者易感，可致肺部感染，耐藥。F新型隱球菌：肺
19、炎、膿腫等。l(四)、原蟲F卡氏肺囊蟲xjtuxjtuxjtu七 醫(yī)院環(huán)境微生物的分布及衛(wèi)生學(xué)意義F1.空氣F醫(yī)院特有的致病菌:F細(xì)菌類F病毒類F真菌類F主要分布于候診室、門診廳、病房、手術(shù)室等。xjtuxjtuxjtuF2.手：門把手、電話筒、自來(lái)水龍頭、化驗(yàn)單F3.醫(yī)療用品及環(huán)境F（1）醫(yī)療器械F（2）醫(yī)藥用品F（3）手術(shù)環(huán)境：手術(shù)室空氣污染、手術(shù)者手的污染、手術(shù)器械、敷料的污染xjtuxjtuxjtuF4.周圍環(huán)境：日常生活用品，如門把手、地板、電話柄、床單、被褥、坐便器、水龍頭開關(guān)等F5.水和食品xjtuxjtuxjtu八、醫(yī)院環(huán)境微生物檢驗(yàn)醫(yī)院環(huán)境微生物檢驗(yàn)及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(一一)醫(yī)院環(huán)境
20、微生物常規(guī)監(jiān)測(cè)醫(yī)院環(huán)境微生物常規(guī)監(jiān)測(cè)l醫(yī)院環(huán)境消毒滅菌及其效果評(píng)價(jià)醫(yī)院環(huán)境消毒滅菌及其效果評(píng)價(jià)壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)紫外線消毒效果紫外線消毒效果醫(yī)療器械滅菌效果監(jiān)測(cè)醫(yī)療器械滅菌效果監(jiān)測(cè)l醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)（空氣、物體表面、手）醫(yī)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測(cè)（空氣、物體表面、手）l各類醫(yī)療用品消毒、滅菌后監(jiān)測(cè)各類醫(yī)療用品消毒、滅菌后監(jiān)測(cè)l使用中消毒劑和無(wú)菌器械保存液檢測(cè)使用中消毒劑和無(wú)菌器械保存液檢測(cè)xjtuxjtuxjtuF（一）醫(yī)院環(huán)境微生物的檢測(cè)F1 空氣F（1）醫(yī)院空氣微生物采樣F 自然沉降法或氣流撞擊法F（2）醫(yī)院空氣微生物評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)F菌落總數(shù)為700-1800cfu/m3，則
21、存在空氣污染的可能。手術(shù)室內(nèi)要求菌落總數(shù)35cfu/m3。xjtuxjtuxjtuF2.物體表面細(xì)菌污染的檢測(cè)F物體表面受污染不均勻，血液、膿汁、污物直接沾染到物體表面，則受污染嚴(yán)重。因此，一件物體需采集數(shù)份標(biāo)本，才能真實(shí)地反映污染情況。F物體表面微生物的檢測(cè)方法：涂抹法xjtuxjtuxjtuF對(duì)桌、椅、地、墻、門、金屬、玻璃等物體表面，用內(nèi)徑為5cm5cm的滅菌規(guī)格板放于物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)橫、豎往返各涂5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣14個(gè)規(guī)格板面積，剪去手接觸棉拭部分，將棉拭子放入裝有l(wèi)0 ml采樣液的試管內(nèi)。對(duì)于有凹面或小型物體，則采用棉拭子直接涂抹物體方
22、法采樣，采樣后將每個(gè)采樣管振蕩約l min，10倍遞次稀釋，對(duì)每個(gè)稀釋度分別取l ml轉(zhuǎn)入滅菌平皿內(nèi)（2個(gè)平行樣），以平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)。xjtuxjtuxjtuF菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法（257頁(yè)）F物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)計(jì)算公式：)2cm采樣面積（采樣液稀釋倍數(shù)平皿上菌落平均數(shù)xjtuxjtuxjtuF3 醫(yī)務(wù)人員手細(xì)菌污染的檢測(cè)：F檢測(cè)方法：采樣時(shí)，用浸濕滅菌生理鹽水的棉拭子，在左、右手的每個(gè)掌側(cè)面來(lái)回涂抹各兩次(一只手涂擦面積約30cm2)，然后將棉拭子放入l0ml無(wú)菌生理鹽水管內(nèi)，搖勻后作10倍遞次稀釋。每個(gè)稀釋度分別取1ml放入滅菌平皿內(nèi)（平行作兩塊平板），用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂傾注培養(yǎng)。xjtuxj
23、tuxjtuF4 醫(yī)療用品：涂抹法F被采面積100cm2者，取100cm2F5 使用中消毒劑與無(wú)菌器械保存液F測(cè)定使用的消毒液要加相應(yīng)的中和劑以中和被檢消毒液的殘效作用。xjtuxjtuxjtuF（二）醫(yī)院感染微生物檢測(cè)（二）醫(yī)院感染微生物檢測(cè)1.1.常見醫(yī)院感染部位的微生物學(xué)檢驗(yàn)常見醫(yī)院感染部位的微生物學(xué)檢驗(yàn)l臨床微生物樣本采集臨床微生物樣本采集采集方法：采集方法：對(duì)感染病例應(yīng)在抗菌藥物使用前及時(shí)采集標(biāo)本，已用抗菌藥物者需停藥24-72小時(shí)后采樣；混有正常菌群的標(biāo)本，不宜置于肉湯培養(yǎng)基中送檢；采集足夠量的標(biāo)本；嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作。xjtuxjtuxjtuF判定不符合要求的標(biāo)本：判定不符合要求的
24、標(biāo)本：F運(yùn)送培養(yǎng)基不合適，如厭氧的按需氧標(biāo)本運(yùn)送；運(yùn)送時(shí)間過長(zhǎng)；標(biāo)本容器標(biāo)志不清，未貼或貼錯(cuò)標(biāo)簽；有明顯被污染的標(biāo)本，拭子上標(biāo)本已干；與標(biāo)本不符合，如痰標(biāo)本主要是唾液成分；標(biāo)本使用了固定劑或防腐劑；標(biāo)本量不夠。xjtuxjtuxjtul病原體分離培養(yǎng)鑒定病原體分離培養(yǎng)鑒定l病原體藥物敏感性試驗(yàn)病原體藥物敏感性試驗(yàn)l定性指標(biāo)：耐藥定性指標(biāo)：耐藥(R)(R)、中度敏感、中度敏感(I)(I)和敏感和敏感(S);(S);l定量指標(biāo)：定量指標(biāo)：MIC MBCMIC MBCxjtuxjtuxjtu抗菌藥物敏感性試驗(yàn)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)F定性（紙片瓊脂擴(kuò)散法定性（紙片瓊脂擴(kuò)散法,即即Kirby-BauerKi
25、rby-Bauer法）法）純化菌落：在血平板、麥康凱等分離純化出單個(gè)菌落純化菌落：在血平板、麥康凱等分離純化出單個(gè)菌落菌液制備：挑取數(shù)個(gè)菌落，用生理鹽水將菌液濃度調(diào)菌液制備：挑取數(shù)個(gè)菌落，用生理鹽水將菌液濃度調(diào)整至整至0.50.5麥?zhǔn)蠁挝唬準(zhǔn)蠁挝唬?.05.010107 75.05.010108 8cfu/mlcfu/ml）；）；涂布涂布MHMH（Mueller-Hinton agar plate）平板：用棉簽沾）平板：用棉簽沾取稀釋好的菌液均勻涂布取稀釋好的菌液均勻涂布3 3次，平板內(nèi)緣再涂抹一次次，平板內(nèi)緣再涂抹一次，即涂滿平板；，即涂滿平板；貼含藥紙片：用無(wú)鑷子將藥片緊貼于瓊脂表面，紙
26、片貼含藥紙片：用無(wú)鑷子將藥片緊貼于瓊脂表面，紙片中心間中心間 24mm24mm，距內(nèi)緣，距內(nèi)緣 15mm15mm；培養(yǎng)培養(yǎng)181824h24h，根據(jù)抑菌圈直徑作出敏感、耐藥、中，根據(jù)抑菌圈直徑作出敏感、耐藥、中介。介。F定量（定量（MICMIC、MBCMBC）手工或儀器分析手工或儀器分析xjtuxjtuxjtu大腸桿菌在麥康凱麥康凱平板上為紅色菌落血平板主要培養(yǎng)鏈球菌等需氧菌xjtuxjtuxjtu以肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)以肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為例準(zhǔn)為例肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)肺炎鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)xjtuxjtuxjtuF2.2.醫(yī)院感染暴發(fā)時(shí)的微生物學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)院
27、感染暴發(fā)時(shí)的微生物學(xué)檢驗(yàn)l樣本采集種類樣本采集種類臨床樣本臨床樣本環(huán)境樣本（手、空氣、物體表面）環(huán)境樣本（手、空氣、物體表面）l病原體分離鑒定病原體分離鑒定l病原體同源性檢測(cè)病原體同源性檢測(cè)xjtuxjtuxjtu病原體分型方法病原體分型方法F表型分型法（血清學(xué)、噬菌體等分型）表型分型法（血清學(xué)、噬菌體等分型）F分子分型法（質(zhì)粒圖譜分析方法）分子分型法（質(zhì)粒圖譜分析方法）臨床分離株及質(zhì)控株臨床分離株及質(zhì)控株質(zhì)粒提取過程（具體見實(shí)驗(yàn)六部分）質(zhì)粒提取過程（具體見實(shí)驗(yàn)六部分）質(zhì)粒提取物電泳質(zhì)粒提取物電泳質(zhì)粒酶切電泳圖譜分析質(zhì)粒酶切電泳圖譜分析xjtuxjtuxjtuF例例2 1996年在解放軍某醫(yī)院
28、外科病區(qū)，從年在解放軍某醫(yī)院外科病區(qū)，從6名患者名患者的血液、大靜脈插管、腹腔引流液中分離出的血液、大靜脈插管、腹腔引流液中分離出14株株綠膿假單胞菌，血清型分型皆屬同型。用單引物綠膿假單胞菌，血清型分型皆屬同型。用單引物PCR指紋圖譜分型方法，指紋圖譜完全相同，判指紋圖譜分型方法，指紋圖譜完全相同，判定此次醫(yī)院感染由綠膿假單胞菌引起。定此次醫(yī)院感染由綠膿假單胞菌引起。xjtuxjtuxjtu嬰兒室腸道致病菌監(jiān)測(cè)流程嬰兒室腸道致病菌監(jiān)測(cè)流程采樣時(shí)間：一月一次采樣時(shí)間：一月一次采樣面積采樣面積 100cm100cm2 2涂抹采樣：將涂抹后拭子置于乳糖膽鹽采樣管涂抹采樣：將涂抹后拭子置于乳糖膽鹽采
29、樣管中。中。增菌培養(yǎng)：乳糖膽鹽采樣管增菌培養(yǎng)：乳糖膽鹽采樣管37 37，培養(yǎng)，培養(yǎng)181824h24h。轉(zhuǎn)種：渾濁的接種轉(zhuǎn)種：渾濁的接種SSSS或伊紅美藍(lán)平板或伊紅美藍(lán)平板結(jié)果判定：不得檢出腸道致病菌結(jié)果判定：不得檢出腸道致病菌xjtuxjtuxjtu血液透析水和透析液染菌量監(jiān)測(cè)流程血液透析水和透析液染菌量監(jiān)測(cè)流程樣本采集：透析用水在進(jìn)入透析機(jī)位置收樣本采集：透析用水在進(jìn)入透析機(jī)位置收集；透析液在進(jìn)入透析器位置收集。集；透析液在進(jìn)入透析器位置收集。樣本接種、培養(yǎng)、菌落計(jì)數(shù)方法同上。樣本接種、培養(yǎng)、菌落計(jì)數(shù)方法同上。標(biāo)準(zhǔn)：菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)：菌落總數(shù)200cfu/ml，并不得檢出，并不得檢出致病微生物
30、。致病微生物。xjtuxjtuxjtuF（二）醫(yī)院環(huán)境微生物衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)F1.各類環(huán)境空氣、物體表面、醫(yī)務(wù)人員手的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：xjtuxjtuxjtuxjtuxjtuxjtuF2 致病性微生物限定標(biāo)準(zhǔn)：F不得檢出乙型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情況下進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè)。F母嬰同室、早產(chǎn)兒室、嬰兒室、新生兒及兒科病房的物體表面和醫(yī)護(hù)人員手上，不得檢出沙門氏菌。xjtuxjtuxjtuF3醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)F(1)進(jìn)入人體無(wú)菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫(yī)療用品必須無(wú)菌。F(2)接觸粘膜的醫(yī)療用品F細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)20cfug(或100cm2),致病性微生物不得檢出。F(3
31、)接觸皮膚的醫(yī)療用品F細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)200cfu g(或100cm2)，致病性微生物不得檢出。xjtuxjtuxjtuF3.使用中消毒劑與無(wú)菌器械保存液衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)F(1)使用中消毒劑 F細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)100cfum1；致病性微生物不得檢出。F(2)無(wú)菌器械保存液F必須無(wú)菌。xjtuxjtuxjtu九醫(yī)院污水消毒處理F（一）醫(yī)院污水消毒前的預(yù)處理F機(jī)械處理法和生物處理法F加氯消毒F病區(qū)廁所按每床位每日投放含有效氯的漂白粉kg，分次投放。xjtuxjtuxjtuF（二）醫(yī)院污水的消毒F加氯消毒F（）液氯消毒法F經(jīng)一級(jí)處理的污水，加氯mg/L經(jīng)二級(jí)處理的污水，加氯mg/LF（）次氯酸鈉消毒法F（）漂白
32、粉F其他方法：臭氧、二氧化氯xjtuxjtuxjtuF（三）醫(yī)院污水的排放標(biāo)準(zhǔn)xjtuxjtuxjtu十 醫(yī)院感染的預(yù)防醫(yī)院感染的預(yù)防 F醫(yī)院感染預(yù)防主要有管理和技術(shù)兩個(gè)層面措施 F(一)管理(1985年美國(guó)疾病控制中心報(bào)告)F有組織的醫(yī)院范圍監(jiān)控機(jī)構(gòu)；一位有能力的流行病學(xué)專家；每250張床位有一個(gè)執(zhí)業(yè)醫(yī)師負(fù)責(zé)醫(yī)院內(nèi)感染控制；重視抗感染研究。xjtuxjtuxjtuF監(jiān)控機(jī)構(gòu)有專職感染監(jiān)控人員、微生物學(xué)專家、流行病學(xué)家參加，臨床科室要有感染管理小組，組成一個(gè)決策一執(zhí)行一反饋一效果評(píng)估的醫(yī)院感染管理體系，定期向醫(yī)院有關(guān)部門報(bào)告醫(yī)院感染情況，如病房菌種分離情況、抗菌藥物耐藥性統(tǒng)計(jì)表、不同抗菌藥物對(duì)
33、細(xì)菌最低抑菌濃度(MIC)變化統(tǒng)計(jì)、醫(yī)院重點(diǎn)科室環(huán)境監(jiān)測(cè)等。xjtuxjtuxjtuF(二)技術(shù)方面 F要有嚴(yán)格的消毒滅菌制度。如一切醫(yī)療用品要可靠消毒滅菌防止再污染。醫(yī)務(wù)人員要做好洗手和手消毒。對(duì)醫(yī)院重點(diǎn)科室，如手術(shù)室、中心供應(yīng)室、重癥監(jiān)護(hù)室、新生兒室等定期進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)(空氣、物體表面、醫(yī)務(wù)人員手的微生物檢測(cè))，研究新的消毒滅菌技術(shù)。xjtuxjtuxjtu醫(yī)院環(huán)境微生物的研究發(fā)展前景問題醫(yī)院環(huán)境微生物的研究發(fā)展前景問題醫(yī)院感染微生物快速檢測(cè)及分型研究醫(yī)院感染微生物快速檢測(cè)及分型研究侵入診療器械消毒滅菌技術(shù)研究侵入診療器械消毒滅菌技術(shù)研究臨床分離菌株對(duì)抗生素和消毒劑的耐藥臨床分離菌株對(duì)抗生素和消毒劑的耐藥機(jī)制研究機(jī)制研究
醫(yī)院環(huán)境微生物【醫(yī)藥薈萃】
