《生化實(shí)驗(yàn)二--果蔬中總糖及還原糖含量的測(cè)定【課資運(yùn)用】》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《生化實(shí)驗(yàn)二--果蔬中總糖及還原糖含量的測(cè)定【課資運(yùn)用】（21頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、1發(fā)現(xiàn)技巧綜合實(shí)驗(yàn)一：果蔬成分的生化分析果蔬成分的生化分析實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 果蔬中維生素果蔬中維生素C的定量測(cè)定（的定量測(cè)定（4學(xué)時(shí)）學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 果蔬中總糖及還原糖含量的測(cè)定（果蔬中總糖及還原糖含量的測(cè)定（4學(xué)時(shí)）學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)三實(shí)驗(yàn)三 果蔬中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定（果蔬中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定（4學(xué)時(shí)）學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 果蔬中過氧化物酶分析（果蔬中過氧化物酶分析（12學(xué)時(shí)）學(xué)時(shí)）2發(fā)現(xiàn)技巧實(shí)驗(yàn)材料：實(shí)驗(yàn)材料：冬棗柚子冬棗柚子14組組梨（梨（2個(gè)品種）個(gè)品種）58組組盤菜蘿卜盤菜蘿卜 912組組3發(fā)現(xiàn)技巧4發(fā)現(xiàn)技巧 掌握總糖和還原糖含量的測(cè)定方法。掌握總糖和還原糖含量的測(cè)定方法。學(xué)習(xí)分光光度計(jì)的原理和操
2、作方法。學(xué)習(xí)分光光度計(jì)的原理和操作方法。5發(fā)現(xiàn)技巧 總糖是指樣品中的還原單糖及在本實(shí)總糖是指樣品中的還原單糖及在本實(shí)驗(yàn)條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽驗(yàn)條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。糖和可部分水解成葡萄糖的淀粉。6發(fā)現(xiàn)技巧 多糖為非還原糖，可用酸將沒有還原性的多糖為非還原糖，可用酸將沒有還原性的多糖和寡糖徹底水解成具有還原性的單糖，再多糖和寡糖徹底水解成具有還原性的單糖，再利用還原糖的性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，這樣就可分別求利用還原糖的性質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，這樣就可分別求出總糖和還原糖的含量。出總糖和還原糖的含量。蒽酮比色法是一個(gè)快速而簡(jiǎn)便的定糖方法。蒽酮比色法是一個(gè)快速而簡(jiǎn)便
3、的定糖方法。其原理：糖類在較高溫度下可被硫酸脫水成糠其原理：糖類在較高溫度下可被硫酸脫水成糠醛或糠醛衍生物，再與蒽酮縮合成藍(lán)色化合物，醛或糠醛衍生物，再與蒽酮縮合成藍(lán)色化合物，在在620nm處有最大吸收。處有最大吸收。7發(fā)現(xiàn)技巧1、植物材料、植物材料2、吸管（、吸管（1.0mL2、5.0mL2、0.1mL2、0.2mL2、0.5mL2）3、試管（、試管（1.5cm15cm7）4、分光光度計(jì)、分光光度計(jì)5、水浴鍋、電爐、水浴鍋、電爐6、電子分析天平、電子分析天平7、容量瓶（、容量瓶（100mL1）、玻璃漏斗）、玻璃漏斗8、量筒、研缽、三角燒瓶、量筒、研缽、三角燒瓶8發(fā)現(xiàn)技巧1、蒽酮試劑：、蒽酮試
4、劑：取取2g蒽酮溶于蒽酮溶于1000mL體積分?jǐn)?shù)為體積分?jǐn)?shù)為80%的硫酸中，當(dāng)日配制使用。的硫酸中，當(dāng)日配制使用。2、標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液、標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液（0.1mg/mL）：稱取）：稱取100mg葡萄糖，溶于蒸餾水并稀釋至葡萄糖，溶于蒸餾水并稀釋至1000mL（可加幾（可加幾滴甲苯作防腐劑）。滴甲苯作防腐劑）。3、6mol/L HCl溶液溶液4、20%NaOH溶液：溶液：稱取稱取20g NaOH固體，溶于固體，溶于蒸餾水并稀釋至蒸餾水并稀釋至100mL。9發(fā)現(xiàn)技巧1、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取潔凈試管取潔凈試管6支，按下表進(jìn)行操作：支，按下表進(jìn)行操作：012345標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶
5、液標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液/mL00.10.20.30.40.5蒸餾水蒸餾水1.00.90.80.70.60.5置冰水浴中置冰水浴中5min蒽酮試劑蒽酮試劑4.04.04.04.04.04.0煮沸煮沸10，冷卻后室溫放置，冷卻后室溫放置10，在，在620nm處比色處比色A620nm步驟步驟管號(hào)管號(hào)10發(fā)現(xiàn)技巧 以吸光度為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)液濃度以吸光度為縱坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)液濃度（mg/mL）為橫坐標(biāo)做圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。）為橫坐標(biāo)做圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線。11發(fā)現(xiàn)技巧2、樣品中還原糖的提取和測(cè)定、樣品中還原糖的提取和測(cè)定 冬棗、柚子、梨：取濾液冬棗、柚子、梨：取濾液1mL100mL 盤菜、蘿卜：取濾液盤菜、蘿卜：取濾液10mL
6、100mL12發(fā)現(xiàn)技巧 吸取吸取1mL濾液置于試管中，浸于冰浴濾液置于試管中，浸于冰浴中冷卻，再加入中冷卻，再加入4mL蒽酮試劑，沸水浴中蒽酮試劑，沸水浴中煮沸煮沸10min，取出冷卻后比色，其他條件，取出冷卻后比色，其他條件與做標(biāo)準(zhǔn)曲線相同。測(cè)得的吸光度值由標(biāo)與做標(biāo)準(zhǔn)曲線相同。測(cè)得的吸光度值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查算出樣品液的糖含量。準(zhǔn)曲線查算出樣品液的糖含量。13發(fā)現(xiàn)技巧3、樣品中總糖的提取、水解和測(cè)定、樣品中總糖的提取、水解和測(cè)定 14發(fā)現(xiàn)技巧 冬棗、柚子、梨：取濾液冬棗、柚子、梨：取濾液5mL用蒸餾用蒸餾水定容至水定容至100mL。盤菜、蘿卜：取濾液盤菜、蘿卜：取濾液10mL用蒸餾水用蒸餾水定容至
7、定容至100mL。取總糖水解液取總糖水解液1mL同上法進(jìn)行還原糖同上法進(jìn)行還原糖測(cè)定。測(cè)定。15發(fā)現(xiàn)技巧 按照下列公式分別計(jì)算果蔬中還原糖按照下列公式分別計(jì)算果蔬中還原糖和總糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（和總糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（w）。）。W（還原糖還原糖）100%C1V1mW（總糖總糖）0.9100%C2V2m 乘乘0.9是為了從測(cè)定出的總糖水解成的單糖中扣除是為了從測(cè)定出的總糖水解成的單糖中扣除水解時(shí)所消耗的水量。水解時(shí)所消耗的水量。16發(fā)現(xiàn)技巧式中：式中：W（還原糖還原糖）：）：還原糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（還原糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）W（總糖總糖）：）：總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）C1：還原糖的質(zhì)量濃度（：還原糖的質(zhì)量濃度（mg/mL）C2：水解后還原糖的質(zhì)量濃度（水解后還原糖的質(zhì)量濃度（mg/mL）V1：樣品中還原糖提取液的體積（：樣品中還原糖提取液的體積（mL）V2：樣品中總糖提取液的體積（：樣品中總糖提取液的體積（mL）m：樣品質(zhì)量：樣品質(zhì)量17發(fā)現(xiàn)技巧18發(fā)現(xiàn)技巧19發(fā)現(xiàn)技巧20發(fā)現(xiàn)技巧21發(fā)現(xiàn)技巧
生化實(shí)驗(yàn)二--果蔬中總糖及還原糖含量的測(cè)定【課資運(yùn)用】
